基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值

目的探讨基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值。方法收集手术中送检的甲状腺良性病变组织、乳头状癌组织各30例,采用直接免疫组化染色法、石蜡切片免疫组化染色法检测CK19、Galectin-3的表达,对比两种染色法的时间、质量、阳性率及诊断准确率。结果直接免疫组化染色法耗时15 min,石蜡切片免疫组化染色法耗时280 min,前者大幅缩短了时间。两种染色结果显示,CK19、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中的阳性率基本一致,直接免疫组化法的质量稍差。在诊断甲状腺前哨淋巴结转移癌中,冷冻切片的直接免疫组化染色法正确诊断率为100%,单纯HE染色正确诊断率为60.00%,诊断准确性显著提高。结论基于冷冻切片的直接免疫组化染色法较石蜡切片免疫组化染色法大幅缩短了染色时间,染色质量近似,阳性率一致,在判断甲状腺不典型病变性质及甲状腺前哨淋巴结转移癌中具有重要价值。     

不同组织冷冻切片的体会

随着医疗技术的发展,各临床科室对术中冷冻的要求也随之提高,除常规的明确病变性质外,保乳手术切缘、宫颈癌前病变锥切手术、甲状腺清扫淋巴结、手术断端等,都需要通过冷冻切片的快速诊断确定手术范围及治疗方案.这就要求我们技术人员在较短的时间内根据不同组织制出高质量的切片.由于组织不同对冷冻的时间、温度、切片厚度、染色等要求也不同,我们通过多年的经验,总结出一些提高冷冻切片质量、缩短冷冻制片时间的可行方法,现报告如下.     

术中冷冻切片快速免疫组化染色及其应用

随着免疫组化技术的不断改进和标准化试剂盒的出现使免疫组化染色的质量不断提高 ,染色时间大大地缩短 ,同时也使术中冷冻切片的快速免疫组化染色成为可能。笔者尝试用标记的葡聚糖聚合物法 (labeleddextranpolymer,LDP)对 4 4例术中冷冻组织样本进行快速免疫组化染色 ,旨在探讨术中冷冻样本快速免疫组化染色在冷冻组织的快速病理诊断中的作用及其可操作性和实用性。1　材料与方法1.1　材料　收集四川大学华西医院病理科 2 0 0 2年 2～ 3月部分术中冷冻切片快速诊断的组织标本 ,包括 16个解剖部位共 4 4例病变组织。其中乳腺 13例 ,腹腔或…     

前列腺肉瘤的病理诊断、治疗和预后

目的：探讨前列腺肉瘤诊断、治疗及预后诸因素。方法：对４ 例前列腺肉瘤进行随访,并再次进行常规切片ＨＥ 染色和采用ＬＳＡＢ法对ｖｉｍｅｎｔｉｎ、ＣＫ、ａｃｔｉｎ（ＨＨＦ３５）、ｄｅｓｍｉｎ、ｍｙｏｇｌｏｂｉｎ、Ｓ１００ 、ＣＤ３４ 、α１ＡＴ、α１ＡＣＴ、ｌｙｓｏｚｙｍｅ、ＰＳＡ 和ＰＡＰ等１２ 种抗体进行标记观察。结果：平滑肌肉瘤１ 例,随访７ 年至今健在;ＭＦＨ１ 例,死于并发呼吸系感染;腺泡状横纹肌肉瘤１ 例,生存不到２ 年;多形性横纹肌肉瘤１ 例,生存２ 年５ 个月。免疫组化在诊断和鉴别诊断上有重大意义。结论：ＨＥ 染色结合免疫组化染色可确诊该瘤。其预后与多种因素有关,中老年人的预后相对较好。联合根治性手术、放疗和化疗效果较好。     

冷冻切片快速免疫组化检测癌微小转移灶

在日常的术中快速病理诊断工作中,当淋巴结仅有小巢或单个癌细胞发生转移时,不容易与组织细胞等相区别。通常可加作组织化学如网状纤维和爱先蓝等染色,但这些方法既费时,灵敏度和特异性又都不高。为此,介绍一种在冷冻切片上利用微波炉进行免疫组化染色快速检测癌微小转移灶的方法。1　材料与方法1.1　材料　所有的免疫组化试剂均购自福州迈新公司,且都是即用型(便于操作和节省时间)。使用微波炉时均选在低火档。1.2　染色方法　(1)在低温冷冻切片机上作常规冰冻切片;(2)固定:在固定液(95%乙醇和乙醚按1∶1的体积比混合而成)中浸泡1ｍｉｎ;(3…     

冷冻切片的快速黑色素染色法

在恶性黑色素瘤的冷冻切片中 ,仅靠形态学诊断非常困难 ,Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色有一定帮助 ,对冷冻切片上黑色素形成不明显 ,黑色素颗粒细小、散在或棕色颗粒难与含铁血黄素相鉴别时尤为有用〔1〕,但常规的Ｍａｓｓｏｎ Ｆｏｎｔａｎａ染色需要时间长 (12ｈ)不能用于快速冷冻切片的诊断。我院采用一种快速黑色素染色法 ,全部过程仅需 11ｍｉｎ ,取得了满意效果。1　材料与方法1.1　氨银液的配制　取 5 %硝酸银水溶液 40ｍｌ,逐滴加入浓氨水至产生棕黑色沉淀 ,再继续缓慢地逐滴加入浓氨水 ,边加边震荡 ,当沉淀几乎接近溶解 ,仅有少…     

一种富含脂肪的淋巴结组织冷冻切片制作方法及体会

<正>术中快速冷冻切片诊断需要在组织离体30 min内发出病理诊断报告，淋巴结组织是手术室常见的术中快速冷冻切片标本，手术医师根据病理医师的诊断报告明确淋巴结组织是否发生了肿瘤转移，进而指导后续手术。因此，淋巴结组织冷冻切片质量的优良与否直接影响病理诊断的准确率和手术方案的选择。其中富含脂肪的淋巴结组织冷冻切片制作尤为棘手，因其组织成分特殊，同时含有脂肪组织和淋巴结组织，而这两种组织对于冷冻切片温度的选择又截然不同，给冷冻切片制作带来一定的困难。     

介绍一种FAAPT冷冻切片快速固定液

手术中冷冻切片的病理诊断是根据冷冻切片组织学形态来进行 ,以确定病变组织的良恶性为目的〔1〕。制作冷冻切片包括制片、固定、染色三个环节 ,在冷冻切片中固定液的选择是不可忽视的一个因素。我们在工作中经反复试验在众多固定液中选择ＦＡＡ液 (福尔马林 -醋酸 -乙醇 ) ,经改良配成一种适合于冷冻切片的ＦＡＡＰＴ(福尔马林 -醋酸 -乙醇 -苦味酸 -ＴｒｉｔｏｎＸ - 10 0 )快速固定液。该液具有固定速度快、渗透力强、ＨＥ染色鲜艳、组织结构清晰等优点。1　材料与方法1 1　ＦＡＡＰＴ固定液的配制　福尔马林 15ｍｌ,醋酸 3ｍｌ,95 %乙醇…     

建立优化的术中快速免疫组化检测体系

术中快速病理诊断是辅助临床医师在术中明确肿瘤良恶性、决定手术方式的重要手段,病理切片经HE染色在镜下观察细胞形态、组织学特征,并进行快速诊断。由于HE染色切片因其自身局限性、制片过程中造成假象等可能导致误诊,难以确诊疑难病例,有较大的医疗风险。术中对冷冻切片进行快速免疫组化染色,可提高术中快速病理诊断的准确性。     

介绍一种术中冷冻行快速免疫组化法

<正>免疫快速组化染色主要用于对不同组织来源肿瘤的鉴别诊断,术中冷冻病理检查可确定肿瘤性质、确定淋巴结是否有转移等。由于术中冷冻技术的局限性,以及某些肿瘤细胞HE染色形态上的相似性,导致单靠术中冷冻组织HE染色明确诊断困难较大,易漏诊、误诊,造成患者的二次手术或医疗事故等。作者采用加热、吹打抗体来加速抗原抗体结合     

印片代冷冻切片472例病理定性诊断分析

基层医院病理科在未开展冷冻切片时,如何配合临床进行手术中快速病理诊断,是目前急需解决的问题。我科自1988年以来应用手术中活体标本做快速印片细胞学定性,为临床提供良、恶性诊断,供确定手术范围做主要参考。其定性准确率在95%以上。在目前缺乏冷冻切片设备的病理科应用是可行的。对已开展冷冻切片的科室可作为协助诊断,纠正部分冷冻切片可能出现的失误。1　材料与方法1.1　材料　标本均选自何贤纪念医院(二级甲等综合性医院、妇幼保健院)病理科1988年11月至1999年11月,快速印片代替冷冻切片,有常规石蜡切片诊断做对照的病例472例。其中…     

两种快速脱黑色素的方法

某些含有黑色素的肿瘤,由于肿瘤细胞中含有大量的黑色素,在冷冻切片染色中,大量色素遮盖了肿瘤的组织结构,无法正确做出诊断,必须进行脱色素处理。传统的脱黑色素疗法,耗时长（2～3h）,易脱片,不适宜冷冻切片的诊断。我科采用快速脱黑色素法,不仅能够在1—8min内脱掉组织中的黑色素而且能够满足诊断要求,避免了因术中诊断不明确而造成的患者的二次手术,并且该方法适用于石蜡切片、免疫组化切片快速的脱色素。     

肾穿刺组织荧光加苏木精染色效果观察

在肾脏病理诊断中 ,确定免疫复合物在肾组织中的沉积是很重要的。肾穿组织切片荧光染色后 ,肉眼和普通光镜下是无色的 ,不易观察组织结构 ,加染苏木后 ,则易行光镜观察 ,对荧光无影响。1　材料和方法　　我们取 10例新鲜肾穿组织 ,切 0 5ｃｍ进行冷冻切片 ,切片厚 3μｍ ,采用武汉博士德生物工程有限公司试剂分两组同时行ＩｇＡ、ＩｇＧ、ＩｇＭ及Ｃ3ｃ荧光染色 ,37℃染色 30ｍｉｎ后行ＰＢＳ洗 3ｍｉｎ× 3次 ,蒸馏水洗。第一组直接缓冲甘油封片 ,第二组浅染苏木精 1ｍｉｎ ,水洗 ,缓冲甘油封片。在荧光镜下分别观察两组切片 ,发现两组切…     

乔本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌

乔本甲状腺炎合并甲状腺乳头状癌王家耀廖松林程秀英王维屏邹烨一、材料与方法１９８５～１９９５年期间山东省立医院原病理诊断为乔本甲状腺炎（Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ′ｓｔｈｙｒｏｉｄｉｔｉｓ，ＨＴ）或甲状腺癌的手术切除标本１９８例，标本经常规切片，ＨＥ染色，光镜...     

病理组织漂烘仪在快速冷冻切片染色中的应用

正快速冷冻切片技术对手术中的快速病理诊断有很重要的意义,在病理科的日常工作中具有非常重要的地位,快速冷冻切片染色质量的优劣直接影响病理诊断的准确率~([1])。作者在日常工作中,将病理组织漂烘仪应用到快速冷冻切片染色技术中,收到了较好的效果,现介绍如下。1材料与方法1.1材料徕卡CM1900冷冻切片机,常州华利病理组织漂烘仪,苏木精(百博生物公司),1%盐酸水溶液,0.5%氨     

恶性黑色素瘤中细胞角蛋白的表达

一、材料和方法１材料：收集本院恶性黑色素瘤（下称恶黑）标本１２例,其中皮肤原发恶黑９例,淋巴结内转移性恶黑３例。无色素性恶黑２例。组织用４％甲醛液固定,石蜡包埋,切片均作ＨＥ染色和细胞角蛋白、波形蛋白、ＨＭＢ４５、Ｓ１００染色。２方法：免疫组化...     

加温对冷冻切片染色的作用

冷冻切片病理诊断已成为手术过程中确定肿瘤性质、指导临床医师决定手术方案的一种可靠手段。但是，冷冻切片HE染色细胞着色不佳，不清晰，严重影响了诊断准确性。许多病理工作者都在研究解决该问题的办法，如改良固定液、用二甲苯脱脂等，但效果仍不很理想。我们反复试验，在冷冻切片后多步骤用加温的方法做HE染色，并与不     

冷冻切片流程中的常见问题及优化措施

<正>冷冻切片技术是临床病理学诊断中常用的一种技术方法,其主要原理是在低温环境下使组织在较短时间内达到适合的硬度,随后进行快速切片、染色完成制片工作,进而于显微镜下观察切片对肿瘤性质进行判定,为临床医师在手术中确立手术方案提供强有力的支撑^[1]。冷冻切片质量直接影响了术中病理医师快速诊断的速度及准确率,因此,在短时间内完成一张优质的冷冻切片非常重要。     

固定液对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是借助低温冷冻将手术切除的组织块快速冷冻达到一定硬度进行切片的一种方法。高质量的冷冻切片对确保术中病理诊断的准确性、科学性具有极其重要的作用,从而降低术中诊断的风险。固定是冷冻切片的关键,本文选取几种常用的固定液,通过HE染色后观察各自固定效果对染色结果的影响,从而筛选出一种最佳的固定液。     

真空负压LSAB免疫组化法在相关抗原检测中的应用

同时用常规ＬＳＡＢ和真空负压ＬＳＡＢ法对ＥＴ 1(内皮素 1)抗原的表达进行对照研究。方法 :①制片 :线栓法建立大鼠局部脑缺血模型。于缺血后 12ｈ、1ｄ、3ｄ、7ｄ及 14ｄ灌注取脑、液氮冷冻及冷冻切片 ,片厚 16微米。每个时间点切片2 0张 ,冷丙酮固定 ,分常规法和真空负压法 2组进行ＬＳＡＢ染色。②真空负压ＬＳＡＢ法 :脑切片 0 0 1ｍｏｌ/ＬＰＢＳ冲洗 5ｍｉｎ 3次 ,加入 10 %正常羊封闭血清后 ,将切片放入真空负压干燥冷冻机内 ,持续抽气直至负压达 6 6 6 6ｋＰａ(5 0 0ｍｍＨｇ)后 ,持续 5ｍｉｎ ;切片ＰＢＳ冲洗后 ,加入兔抗人Ｅ…