Taqman技术检测儿童HBV DNA载量的临床应用

目的：研究儿童HBV DNA及血清学标志物与乙肝病毒复制的关系,探讨其应用于儿童乙型肝炎患者的临床价值。方法：对190例儿童乙型肝炎患者血清分别采用Taqman技术测定HBV DNA,ELISA法（酶免疫吸附法）检测血清标志物,速率法检测丙氨酸转氨酶（ALT）,综合分析并评价其相互关系及临床联合检测的价值。结果：190例患儿HBsAg＋、HBeAg＋、抗HBc＋阳性组125例,HBV DNA检出125例,检出率100%;ALT增高35例,占28%。HBsAg＋、抗HBe＋、抗HBc＋阳性组55例,HBV DNA检出15例,检出率27.3%;ALT增高10例,占18%。HBsAg＋、抗HBc＋阳性组10例,HBV DNA检出1例,检出率10%。结论：抗HBe阳性组复制水平相对较低,与成人无显著差异,HBVDNA载量与ALT水平高低无相关性,乙肝病毒含量的高低与肝功能受损程度不呈正相关。     

乙型肝炎病毒血清学标志物与乙肝DNA相关性探讨

目的探讨乙肝病毒DNA（HBV-DNA）病毒载量与各型乙型肝炎血清标志物之间的关系。方法运用酶联免疫吸附测定法、荧光定量聚合酶链反应（PCR）技术对857例各型乙型肝炎患者进行HBV-DNA含量及血清学标志物检测（两对半）。结果血清学检测乙肝表面抗原（HBaAg）＋乙肝病毒e抗原（HBeAg）＋乙肝病毒核心抗体（抗HBc）阳性（大三阳）患者HBV-DNA阳性率明显高于其他类型（阳性率97．9％）,且其病毒载量显著高于其他组。HBsAg＋乙肝病毒e抗体（HBeAb）＋抗HBc阳性（小三阳）阳性检出率也较高（阳性率51．3％）其病毒载量高于其他组。结论HBV-DNA与HBeAg的存在明显正相关。在临床工作中,不仅要应用乙肝血清标志物来判断HBV是否在体内复制,更要结合PCR检测技术来测定HBV-DNA含量。     

荧光定量PCR检测HBV-DNA与血清HBV标志物关系探讨

目的:探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBV-DNA与血清HBV标志物(HBV-M)之间的关系。方法:对801例患者采用FQ-PCR法测HBV-DNA含量,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV-M。结果:HBV-DNA在各种模式的HBV标志物中均可检出。HBsAg+、HBeAg+、抗HBc+组患者血清中HBV-DNA检出率为97.6%,且多处在高拷贝HBV-DNA;HBsAg+、抗HBe+、抗HBc+组患者血清HBV-DNA检出率为47.12%,多数是低拷贝HBV-DNA;另发现抗HBs+组阳性率为13.33%;全阴组中阳性率为11.11%。不同HBV-M患者血清HBV-DNA的检出率差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.001)。结论:FQ-PCR法检测HBV-DNA对乙型肝炎的诊断、传染性的判断有临床实用意义,可反映HBV真实感染的各种复制状态,对于乙肝的临床诊断、治疗方案的选择和预后具有重要的指导意义。     

PCR定量检测HBV—DNA与HBV标志物关系探讨

目的探讨PCR定量检测HBV-DNA拷贝数与乙肝病毒标志物常见模式的关系。方法对疑似乙型肝炎病毒患者428例采用实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA含量,酶联免疫吸附试验检测HBV-M。结果 92例HBsAg、HBeAg、抗HBc标志物均阳性的患者中,HBV-DNA定量拷贝数〉1.0&#215;103/ml者有85例,平均拷贝数为1.42&#215;107/ml;在12例HBsAg、HBeAg标志物阳性的标本中,HBVDNA阳性11例,平均拷贝数4.42&#215;106/ml;在99例HBsAg、抗HBe、抗HBc标志物均阳性的标本中,HBV-DNA阳性者为39例,平均拷贝数为9.89&#215;105/ml;而在207例HBV-M标志物全阴性的标本中,仍有4例检出HBV-DNA〉1.0&#215;103/ml,平均拷贝数为9.54&#215;103/ml。结论 在各种HBV标志物模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平最高,而血清中未检出HBV-M者并不能排除HBV感染。     

乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA含量的相关性研究

目的探讨乙型肝炎患者血清标志物与HBV-DNA定量检测之间的关系及其临床意义。方法选择258例经我院确诊的乙肝患者,采用酶联免疫吸附试验法检测患者体内血清标志物,采用荧光定量聚合酶链反应检测HBV-DNA含量,比较血清标志物与HBV-DNA检测量之间的关系。结果 HBsAg+/HBeAg+组与HBsAg+/HBeAg+/抗-HBc+组HBV-DNA阳性检出率与含量最高;HBsAg+/抗-HBe+/抗-HBc+、HBsAg+/HBc+、抗-HBs+/抗HBe+/抗-HBc+、抗-HBe+/抗-HBc+、抗-HBs+5种感染模式下HBV-DNA阳性检测率分别为62.96%、52.94%、37.50%、27.27%、4.35%。结论乙肝患者血清HBV-DNA阳性率与血清标志物存在相关性;同时进行血清标志物的检测与HBV-DNA定量检测能较准确直接地反应病毒复制程度及传染强度,对于早期诊断、治疗及预后判断具有指导意义。     

联合检测血清标志物、ALT和HBV-DNA对乙型肝炎患者诊疗的临床意义

目的 通过联合检测乙型肝炎血清标志物、ALT和HBV-DNA,分析三者之间的相关性.方法 分别采用ELISA、实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和IFCC双试剂酶法对682例乙型肝炎患者HBV血清标志物(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)、HBV-DNA载量和ALT水平进行测定.结果 682例乙型肝炎患者中,有373例检测出HBV-DNA阳性,阳性率为54.69%;以模式Ⅰ组(HBsAg+HBeAg+HBcAb阳性)和模式Ⅱ组(HBsAg+HBeAg阳性)HBV-DNA阳性率和平均载量为最高,且明显高于模式Ⅲ(HBsAg+HBcAb阳性)、模式Ⅳ组(HBsAg+HBeAb+HBcAb阳性)和模式Ⅴ组(HBcAb阳性)(P＜0.05);模式Ⅰ组ALT阳性率、平均含量明显高于其它组(P＜0.01).在HBV-DNA阳性患者中,HBV-DNA载量与ALT水平呈正相关.结论 HBV-DNA载量与血清标志物以及ALT水平之间存在着一定的关系,但三者反映的是疾病的不同方面.在HBV感染的诊疗过程中,联合检测血清标志物、HBV-DNA载量和ALT水平,在判断病情转归、抗病毒疗效观察等方面具有重要意义.     

乙肝病毒DNA定量与免疫学标志物检测的比较和分析

目的探讨乙肝病毒免疫学标志物常见模式与HBVDNA拷贝数之间的关系。方法对509例血清标本进行乙肝病毒免疫学标志物和HBVDNA荧光定量(FQ-PCR)测定。结果在111例HBsAg、HBeAg、抗HBc均阳性的标本中,检出HBVDNA阳性者有100例,平均拷贝数为2.85×107/ml;在145例HBsAg、抗HBe、抗HBc均阳性的标本中,HBVDNA阳性者为68例,平均拷贝数为8.21×106/ml;在11例HBsAg、HBcAg阳性的标本中,HBVDNA阳性10例,平均拷贝数8.57×106/ml;而在211例HBV-M全阴性的标本中,仍有4例检出HBVDNA阳性,平均拷贝数为7.85×103/ml。结论在各种HBV-M模式中,以HBeAg阳性者的病毒复制水平最高,而血清中未检出HBV-M者并不能排除HBV感染。     

HBV-DNA检测在HBV不同血清学指标组合的应用

目的:ELISA方法检测HBV感染标志物,观察不同血清学指标组合的HBV-DNA阳性情况.方法:回顾分析2006-2008年我院就诊乙肝患者778例,用荧光定量聚台酶链反应和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测其血清的HBV-DNA和HBV血清标志物(HBV-M).结果:1组(HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性)、2组(HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性)、3组(HBsAg阳性)的患者HBV-DNA的阳性率分别为96.7%、54.2%、18.8%,其拷贝数分别为1.62×108/ml,1.12×106/ml,7.61×104/ml.结论:荧光定量PCR对乙型肝炎早期诊断、传染性的判断及疗效观察具有临床实用及指导意义.     

乙肝不同血清学模式HBV-DNA定量检测及其与Pre-S1关系的研究

目的检测乙型肝炎不同血清学标志物模式患者HBV-DNA含量,并与前S1抗原进行比较分析。方法收集391例乙型肝炎病毒血清标志物阳性血清,用ELISA方法检测前S1抗原、运用荧光定量PCR方法定量检测HBV-DNA。结果HB-sAg、HBeAg、抗-HBc阳性组HBV-DNA检出率为96.5%(3.8×108copies/ml),而前S1抗原检出率为93.0%;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性组HBV-DNA检出率为44.3%(4.5×106copies/ml),前S1抗原检出率为71.9%;HBsAg、抗-HBc阳性组HBV-DNA检出率为61.7%(4.9×105copies/ml),前S1抗原检出率为72.3%。以HBV-DNA阳性为对照,HBeAg和前S1抗原检出率分别为47.8%、80.4%。结论HBsAg、HBeAg、抗-HBc阳性者存在病毒高复制,HBeAg转阴者也存在病毒复制,HBV-DNA与HBeAg及前S1抗原相关性较好但差异性显著,对于乙型肝炎患者在常规血清学标志物检测的基础上,对HBV-DNA数量进行动态观测有助于临床诊断、疗效观察及预后判断。     

替比夫定阻断高病毒载量乙肝携带孕妇母婴传播20例的疗效观察

目的通过观察替比夫定阻断高病毒载量乙肝携带孕妇母婴垂直传播效果,探讨妊娠期抗病毒治疗对乙型肝炎母婴传播的阻断意义和疗效.方法2011年10月至2012年4月,我院门诊检查HBsAg阳性孕妇测定其血清HBV-DNA含量均在106拷贝/ml以上的病例20例,随机分为两组,实验组12例于妊娠28周至分娩期间一直服用替比夫定600mg,1次/天,对照组8例不用药物干预.观察所有孕妇孕期和分娩前HBV-DNA含量、HBV血清标志物情况.检测分娩后新生儿脐血中HBV-DNA含量、HBV标志物情况.结果20例乙肝病毒携带的孕妇中,实验组11例未检出HBV-DNA(<5×102拷贝/ml),1例HBV-DNA降至103拷贝/ml,对照组8例检出HBV-DNA仍维持在106拷贝/ml以上,所有新生儿均发育正常,实验组12例新生儿脐血中HBV-DNA<5×102拷贝/ml,HBsAg呈阴性.对照组仅1例新生儿脐血中HBV-DNA<5×102拷贝/ml,HBsAg呈阴性.结论替比夫定可以显著降低HBV-DNA载量,降低新生儿宫内感染几率,对阻断母婴HBV垂直传播有效.     

乙肝病毒Pre-S1检测在乙型肝炎患者临床诊断中的应用

目的:探讨乙肝病毒前S1(Pre-S1)蛋白对乙型肝炎患者的诊断价值和意义。方法:采集198例乙型肝炎患者的血液样品,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中前S1蛋白(Pre-S1)和HBV血清标志物,用荧光定量PCR(FQ-PCR)法检测血清样品中HBV-DNA,并进行比较,当HBV-DNA>5×102拷贝/ml时诊断为阳性。结果:按照不同乙型肝炎病毒血清标志物(HBV-M)模式,患者分为A组(HBs Ag、HBe Ag和HBc Ab(+)模式)53例,B组(HBs Ag、HBe Ab和HBc Ab(+)模式)78例和C组(HBs Ag和HBc Ab(+)模式)44例,组间Pre-S1和HBV-DNA的阳性检出率无显著差异(P>0.05);Pre-S1和HBV-DNA的阳性检出率在不同乙肝病毒血清标志物(HBV-M)模式中无显著差异(P>0.05);Pre-S1和HBV-DNA的阳性符合率显著高于HBe Ag与HBV-DNA的符合率,组间差异有统计学意义(P<0.05);PreS1和HBV-DNA在HBe Ag阴性患者血清中仍可检出。结论:乙肝病毒前S1蛋白(Pre-S1)可以作为HBV感染与复制的一项新的检查指标,有助于对乙型肝炎的临床诊断。     

乙肝病毒标志物与肝脏4种酶的关系

目的 探讨乙肝病毒标志物与肝脏4种酶的关系.方法 对105例乙型病毒肝炎患者进行血清HBsAg、抗HBs、HBeAg、抗HBe、抗HBc以及ALT、AST、GGT、LDH检测,观察乙肝病毒标志物不同阳性结果 对肝脏4种酶的影响.结果 (1)Ⅰ组4种酶异常率明显大于Ⅱ组.(2)HBsAg、HBeAg、抗HBc同时阳性血清ALT异常者明显大于单一HBsAg阳性者.结论 乙肝病毒标志物的不同阳性结果 对肝脏4种酶有明显的影响.     

乙型肝炎患者血清中HBVDNA载量与肝功能改变的相关性研究

目的 探讨乙型肝炎患血清中乙肝病毒标志物与HBVDNA载量的关系，以及MBVDNA载量与肝功能改变的关系；方法 对460名HBV血清标志物阳性患进行了HBVDNA定量检测，采用罗氏公司Lightcycler荧光定量PCR法；HBV血清病毒标志物检测应用ELISA法。结果 HBsAg( )抗HBeAg( )抗HBc( )组患HBVDNA复制率为98．8％；HBeAg( )抗HBe( )抗HBc( )组复制率为48．6％；抗HBs( )抗HBe( )抗HBc( )组复制率21．4％；抗HBs( )抗HBc( )组复制率为8．3％抗HBe( )抗HBc( )组复制率为23．5％。29名血清ALT明显增高的乙肝患，其血清中HBVDNA载量与血清ALT的增高程度无明显相关性。结论 HBV感染的不同血清标志物产生形式，均可能有不同程度的HBVDNA复制。而乙肝患血清中ALT升高的程度与病毒复制程度无明显相关性。     

乙型肝炎患者血清乙型肝炎病毒-DNA与常用血清标志物的相关性分析

目的: 评估乙型肝炎(乙肝)患者血清乙肝病毒DNA(HBV-DNA)载量与血清免疫和生化标志物之间的关系。方法: 收集214例乙肝患者血清, 分别用荧光定量PCR法、化学发光法和速率法检测血清中的HBV-DNA、乙肝病毒表面抗原(HBsAg)、乙肝病毒e抗原(HBeAg)和丙氨酸氨基转移酶(ALT), 分析各标志物之间的关系。结果: 214例中, HBV-DNA阳性率为57.48%;HBeAg阳性率为28.04%。HBV-DNA载量与HBsAg和ALT水平均无相关关系(P>0.05), 但与HBeAg水平密切相关(P<0.01), HBV-DNA阳性组的HBeAg和ALT水平均明显高于HBV-DNA阴性组(P<0.01)。结论: HBV-DNA载量与HBeAg水平呈正相关关系, 与HBsAg和ALT水平无相关性, HBsAg水平作为HBV-DNA的替代方法仍需进一步验证。     

乙型肝炎病毒载量与血清免疫标志物及ALT的关系

目的探讨不同乙肝病毒（HBV）载量与其血清标志物模式及ALT的关系。方法采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）、酶联免疫吸附试验（ELISA）和速率法分别检测患者血清HBV-DNA载量、血清学标志及谷氨酸丙氨酸转移酶（ALT）活性。结果在605例患者样本中共检测出9种血清模式,HBeAg阳性模式,即HBsAg（＋）,HBeAg（＋）,抗HBc（＋）模式与HBsAg（＋）,HBeAg（＋）模式,其HBV-DNA阳性率分别为96.2%和100.0%,病毒平均含量106.53copies/mL,明显高于HBeAg阴性模式（P〈0.01）。HBV-DNA水平与ALT异常存在相关。结论 HBeAg阳性模式HBV载量显著高于HBeAg阴性模式,HBV载量越高,ALT异常的比例越大。     

前S1蛋白与乙肝两对半各模式的相关性及其临床意义

目的 探讨PreS1与乙肝两对半(HBV免疫标志物)的相互关系、评价其临床义.方法 我们采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法对247例携带乙型肝炎病毒不同标志物的急慢性乙型肝炎患者PreS1与HBV血清标志物进行比较.结果 乙肝病毒表面抗原(HBsAg)乙肝病毒e抗原(HBeAg)乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性组PreS1的阳性率为87.1%,HBsAg和HBeAg阳性组PreS1的阳性率为77.7%,HBsAg抗HBe抗HBc阳性组中PreS1阳性率为52.8%,说明部分HBeAg阴性患者仍有病毒复制.结论 前S1蛋白在HBV感染早期就可检出,它能敏感地反映乙型肝炎病毒的复制情况,有助于乙型肝炎的诊断.     

前S1蛋白与HBV血清标志物检测结果对比分析与临床意义

目的 对乙肝前S1抗原与HBV血清标志物的对比分析,进而对乙肝病毒前S1抗原临床意义的探讨.方法 采用酶联免疫吸附试验ELISA法,严格按说明书操作,对乙肝病毒血清标志物和乙肝病毒前S1抗原测定,并与HBV-DNA做对比分析.结果 对HBV血清标志物不同组合模式进行分析发现,乙型肝炎表面抗原(HBsAg)乙肝病毒e抗原(HBeAg)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)阳性的模式中,乙肝病毒前S1抗原检出率高,与HBVDNA符合率也高,分别为86%与88%,HBsAg抗HBe抗HBc阳性的模式中与前S1抗原和HBV-DNA符合率分别为39%和41%,HBSAg抗HBC阳性组中与前S1抗原和HBVDNA符合率分别为26%和28%.结论 前S1抗原较HBV血清标志物更为敏感,尤其可反映HBeAg阴性的乙型肝炎患者是否有病毒复制,可作为一种新的HBV血清标志物和监测指标.     

HBV-DNA检出率与乙肝免疫学标志物(两对半)相关性评价

目的:评价NBV-DNA检出率与乙肝免疫学标志物相关性,为乙肝临床诊断和治疗作出正确的判断和评价。方法:用多聚酶链反应检测HBV-DNA,和ELISA方法检测乙肝标志物。结果:PCR和ELISA方法检测我院住院与门诊各类型肝炎病人206例,其中慢迁肝61例,慢活肝55例,肝硬化28例,HBsAg携带者62例,发现HBsAg 、HBeAg 、抗—HBc 、HBV-DNA100％阳性,HBsAg 、抗—HB 、抗—HBc 、HBV-DNA54％阳性,HBsAg /抗—HBc 79.1％HBV-DNA阳性,抗—HBs 、抗—HBe 、抗—HBc 26％HBV-HNA阳性。结论:HBV-DNA与HBeAg有很好相关性,是HBV复制和具有传染性的指标,对于HBeAg(-)/抗—HBe( )者有54％检出HBV-DNA,说明仍有病毒复制和传染性。此外,HBsAg(-)/抗—HBs( )、抗—HBC 有13.3％检出HBV-DNA,因此,临床诊断和治疗评价乙肝预后时,仅根据免疫学指标很难准确诊断和判断,应结合HBV-DNA和各种免疫标志物综合分析,才能作出正确的判断和准确的评价。     

乙型肝炎HBV-DNA检出阳性率及病毒复制水平与乙型肝炎两对半模式间的关系分析

探讨并分析乙型肝炎HBV-DNA检出阳性率及病毒复制水平与乙型肝炎两对半模式间的关系。方法使用荧光定量PCR法对200例乙肝患者进行标记检测,并将其HBV血清标志物用时间分辨免疫荧光分析法检测,并将检测结果进行分析。结果经HBV-DNA荧光定量法检测有126例HBV-DNA定量为阳性,阳性检出率为60.6%,最高的是HBsAg、HBeAg、抗HBc标志物阳性的HBV-DNA检验率,HBsAg、抗HBc少点,抗HBc最低。乙型肝炎“两对半”血清标志物检验结果：阳性标记物HBsAg、HbeAg、抗-HBc 92.4%;HBsAg、抗-HBe、抗-HBc 62.5%;HBsAg、抗-HBc 66.7%;抗-HBs、抗-HBe、抗-HBc21.0%;抗-HBc 13.4%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 HBV-DNA的检测是反映病毒是否复制的指标,与乙型肝炎两对半模式检测联合,可以提高检测效果,有助于临床判断及治疗。     

乙肝患者血浆HBVDNA水平与乙肝五项指标关系分析

目的探讨乙型肝炎病毒核酸（HBV-DNA）水平与乙型肝炎免疫标志物五项指标之间的关系。方法回顾性分析来我院就诊的267例乙型肝炎患者的HBV-DNA含量与乙型肝炎免疫标记物（乙肝五项）的表达关系。患者血浆标本中HBV-DNA含量的检测采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）,根据含量高低分为四个等级（小于103/ml、103-105/ml、105-107/ml、大于107/ml）;乙肝五项指标（HBsAg、抗HBsAb、HBeAg、抗HBeAb、抗HBcIgM）的检测采用酶联免疫法,按照阳性、阴性统计。结果乙肝患者血浆中HBV-DNA检出率为61.8%,HB-sAg、抗-HBsAb、HBeAg、抗-HBeAb、抗-HBcIgM的检出率分别为98.50%、1.12%、42.70%、40.45%、96.25%。在HBV-DNA含量不同的患者中,乙肝五项的检出率也不相同,随着HBV-DNA含量的升高,HBsAg、抗-HBcIgM的检出率变化不大,而HBeAg的检出率逐渐升高,抗-HBeAb检出率逐渐降低。结论血浆中HBVDNA含量与乙型肝炎免疫标志物之间存在密切的关系,随着HBV-DNA水平的升高,乙型肝炎免疫标志物出现不同的表达,这对临床医生更准确地判断患者病情及指导抗病毒药物的应用具有重要价值。