人胚肝低密度脂蛋白受体的提纯和鉴别

报道了用两步法快速分离人胚肝低密度脂蛋白受体的方法。肝细胞膜用非离子型去污剂TritonX-100溶解后,经DE52纤维素离子交换层析和LDL偶联的Sepharose 4B亲和层析,将受体纯化了500倍。纯化后的低密度脂蛋白受体具有完整细胞和粗制细胞膜上受体的所有特征:(1)能与~(125)I-LDL高亲和性结合,并呈现明显的剂量效应;(2)与LDL的结合需要Ca~(2+),EDTA可阻断其结合;(3)能与抗LDL受体的单克隆抗体相互作用;(4)分子量为130kd。     

家兔肝低密度脂蛋白受体的提取和初步纯化

为了研究肝细胞LDL受体在细胞摄取、降解血浆LDL过程中的作用,我们从家兔肝脏提取并初步纯化了LDL受体。肝匀浆经离心分别除去细胞核、线粒体和溶酶体后,100000g离心获得质膜,在4℃、pH6和Ca~(2+)存在下加Triton X-100提取膜受体,再经DEAE纤维素柱层析初步纯化,用酶联免疫受体分析法检测LDL与受体结合活性。结果表明,提取和初步纯化的得率分别为29.7％和4.3％;纯化倍数分别为1.9和8.9倍。在提取、纯化受体的操作过程中,作者特别强调预先除去溶酶体的重要性。本文还比较了不同处理方法所得膜沉淀物的稳定性。     

兔肝LDL受体对LDL的结合特性研究

为了研究兔低密度脂蛋白（ＬＤＬ）受体的生化特性，从家兔肝细胞膜分离得到ＬＤＬ受体，用酶联免疫受体分析技术检测ＬＤＬ与制备物的结合活性，通过Ａ４９０－ＬＤＬ定量转换标准曲线对制备物结合的ＬＤＬ进行定量。实验表明兔肝受体制备物对ＬＤＬ具有特异性结合的活性；与ＬＤＬ的结合在２ｈ内达到最大值；随着ＬＤＬ浓度的增加，与受体制备物结合的量也逐渐增加，当ＬＤＬ浓度达到５０μｇ／ｍｌ时结合反应趋向饱和。饱和曲线分     

离子交换层析法分离纯化人肝醇脱氢酶

实验样品取自健康青年死后4～6小时的肝脏,置二倍体的 pH7.6磷酸盐缓冲液(PBS),0℃下匀浆、离心。上清液通过DEAE-Cellulose 柱,用 pH7.6 PBS 及 NaCl     

山莨菪碱对低密度脂蛋白受体再循环的影响

目的：观察山莨菪碱对低密度脂蛋白受体再循环的影响。     

山莨菪碱对低密度脂蛋白受体再循环的影响

目的：观察山莨菪碱对低密度脂蛋白受体再循环的影响。方法：应用抗免低密度脂蛋白受体（LDL－R）单克隆抗体，以细胞ELISA法测定成纤维细胞LDL－R，并观察蛋白合成受抑制时山莨菪碱对LDL受体的影响。结果：细胞生长汇合成单层时加入亚胺环己酮．受体无明显减少，加入山莨菪碱则细胞表面受体增加；细胞生长呈不全汇合状态时，亚胺环己酮使受体减少，但山莨菪碱对受体数无明显影响。结论：山莨菪碱具有促进生长汇合的成纤维细胞LDL－R再循环的作用。     

大鼠肝星状细胞LDL、HDL受体的测定

研究大鼠肝星状细胞ＬＤＬ、ＨＤＬ受体。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠ＨＳＣ,应用＾１２３Ｉ－ＬＤＬ和＾１２５Ｉ－ＨＤＬ３配体进行放射性配基结合实验测定ＨＳＣＬＤＬ、ＨＤＬ受体。     

多不饱和脂肪酸对金黄地鼠血脂和肝LDL受体的影响

研究了多不饱和脂肪酸对金黄地鼠血脂和肝LDL受体的影响,以探讨多不饱和脂肪酸降低血清脂质的机制。将雄性金黄地鼠30只随机分为对照组和多不饱和脂肪酸组,前者喂基础饲料加0.12%胆固醇,后者再加喂20%的玉米油,5周后测血脂和肝脏LDL受体。结果表明,与对照组相比,多不饱和脂肪酸组血清TC,TG,LDL-C,VLDL-C均明显下降,而HDL-C则明显升高。体外实验发现,多不饱和脂肪酸组金黄地鼠肝匀浆与~(125)I-LDL特异结合位点显著高于对照组,而~(125)I-LDL与两组动物肝匀浆结合的亲和力无明显差别,提示多不饱和脂肪酸降低血脂与肝LDL受体增加密切相关。     

大鼠肝实质及非实质细胞VLDL和HDL受体的研究

Saturable high-affinity VLDL and HDL receptor on parenchymal cells (PC), and non-parenchymal cells (NPC) freshly isolated from rat liver were studied. The VLDL- and HDL-receptor could mediate liver PC and NPC to bind, uptake, and degrade 125I-labeled human VLDL and apoE-deficient HDL3, and the activities of these two receptors (expressed as ng/mg cell protein) on NPC were about 10- and 4-fold higher than those on PC, respectively. VLDL receptor on NPC with kd 15.0-34.2 micrograms/ml and Bmax 2170-2607 ng/mg cell protein could be inhibited by EDTA, and down-regulated by cell cholesterol content. HDL receptor on NPC with kd 10.1-17.7 micrograms/ml and Bmax 1004-2738 ng/mg cell protein could not be inhibited by EDTA, but could be up-regulated by cell cholesterol content. Competitive inhibition assay showed that VLDL receptor could not only bind VLDL and LDL, but also bind HDL3 to some extent. Unlabeled purified apolipoprotein CIII-1, but apoAI, CI, CII, could effectively inhibit 125I-labeled VLDL binding to NPC. These results suggest that liver NPC may be more active than PC in clearing VLDL and HDL from circulation, and apolipoprotein CIII play an important inhibitory role in these receptor-mediated processes.     

肝X受体对人胚肺成纤维细胞的活力影响

目的：：探讨肝?受体对人胜肺成汗维细胞的活力影响。方法：培养人胜肺成汗维细胞,分为对照组与肝?受体组,成汗维细胞生长因子组,成汗维生长因子混合肝?受体激动剂组,选取第4-6代的人胜肺成汗维细胞,分别加入鱗酸缓冲盆溶液(PBS),不同剂量的肝?受体,不同剂量的成汗维细胞生长因子共同醇育24 h,48 h,72h,分别测定细胞活力。受不同剂量肝?受体激动剂和成汗维生长因子干预的人胜肺成汗维细胞通过酶联免疫吸附试验（ELISA）测定肢原蛋白含量。结论：肝?受体激动剂对人胜肺成汗维细胞的活力无明益增值作用,不影响人胜肺成汗维细胞的肢原合成能力,但是却能够抑制成汗维细胞因子对人胜肺成汗维细胞的增值作用与肢原合成能力。     

人血小板低密度脂蛋白受体的探讨

用~(125)Ⅰ标记(Iodogen法)低密度脂蛋白(~(125)Ⅰ-LDL),其比放射性为(1.94-1.0)×10~4Bq/μg,标记率为98.44±0.9％。~(125)Ⅰ-LDL与洗涤法分离的血小板结合,37°C下孵育60 min,结合达到平衡,不需二价阳离子存在。未标记的LDL可抑制~(125)Ⅰ-LDL与血小板的结合,而纤维蛋白原,白蛋白等无此作用。每个血小板约可结合3504±735个LDL分子,具有饱和性,解离常数Kd值为(4 5±2.1)×10~(-9) mol/L。高密度脂蛋白能抑制结合。结果提示血小板有LDL特异性受体,LDL有可能通过受体介导影响血小板功能。