STAT4基因多态性与类风湿性关节炎相关性研究

目的:了解信号转导和转录激活因子4(STAT4)基因单核苷酸多态性(SNP)在贵州人群中的分布,探讨STAT4基因SNP位点rs7574865与类风湿性关节炎(RA)的关系.方法:采用酚-氯仿法提取100例RA患者和100例健康对照外周血基因组DNA,运用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测STAT4基因rs7574865单核苷酸多态性.结果:STAT4 rs7574865位点存在GG、GT、TT3种基因型,其在RA组和对照组中的基因型频率分别为29.0％、52.0％、19.0％及35.0％、53.0％、12.0％;G和T等位基因在RA组和对照组中基因频率分别为55.0％、45.0％及61.5％、38.5％.与对照组相比,RA组3种基因型及等位基因频率差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:STAT4rs7574865可能与贵州人群RA的遗传易感性无关.     

TBX5 基因靶序列单核苷酸多态性 与先天性心脏病的关系

目的 探讨TBX5 基因3'' 非翻译区靶序列SNPs 与先天性心脏病（CHD）遗传易感性的关系, 为CHD 的分子机制研究提供线索。方法 利用HaploView 软件筛选TBX5 基因3'' 非翻译区功能性单核苷酸 多态性（SNP）,并应用高分辨率熔解曲线检测TBX5 基因3'' 非翻译区SNP。采用病例对照研究分析SNP 位 点与CHD 的关联。结果 HaploView 软件筛选出TBX5 基因3'' 非翻译区有意义的标签SNP rs883079,高分 辨率熔解曲线法成功检测该SNP位点（rs883079）的G/G、G/A及A/A 3种基因型。TBX5 基因rs883079（ G>A） 位点等位基因或基因型分布频率比较,差异有统计学意义（P <0.05）;与CHD 易感性关联,A 是CHD 的危 险等位基因,A/A 为CHD 的危险基因型（P <0.05）。结论 TBX5 基因rs883079 位点SNP 与CHD 有关系, rs883079（G>A）携带突变纯合子基因型A/A 个体患CHD 的危险性升高。     

系统性红斑狼疮患者信号转导及转录激活因子4基因单核苷酸多态性与其mRNA表达水平的相关性研究

目的探讨系统性红斑狼疮中信号转导和转录激活因子4(STAT4)基因rs7574865位点单核苷酸多态性(SNP)与其mRNA表达水平之间的相关性。方法以TaqMan MGB探针法在163例SLE患者中对STAT4基因rs7574865位点的SNP进行分型,用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应法检测以上患者外周血单个核细胞(PBMC)中STAT4 mRNA表达水平,并分析两者之间的关系。结果 SLE患者中G等位基因频率为49.7%,T等位基因频率为50.3%,G/G型纯合子患者的比例为22.7%,G/T型杂合子患者的比例为65.0%,T/T型纯合子患者的比例为12.3%。具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著高于具有G/G型或T/T型的SLE患者(P<0.05)。结论 STAT4 rs7574865位点SNP与STAT4 mRNA表达水平具有相关性,具有G/T型的SLE患者的STAT4 mRNA表达水平显著增高。     

胃癌组织中p27蛋白表达及预后的研究

目的 :研究p2 7蛋白在胃癌组织的表达情况及其与胃癌生物学行为、预后的关系。方法 :免疫组化SP法检测胃癌组织中p2 7蛋白的表达。结果 :胃癌组织中 2 7蛋白的表达阳性率为 36 8% ,无脉管侵犯病例p2 7表达高于有脉管侵犯病例 ,二者差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;p2 7低表达、有脉管侵犯、肿瘤直径≥ 4cm这 3种因素与胃癌的不良预后有关。结论 :p2 7蛋白表达为判断胃癌组织恶性程度及预后的有价值指标之一。     

胃癌中Piwil1基因启动子区rs28416520位点单核苷酸多态性及其临床意义

目的 分析Piwil1基因启动子区域的单核苷酸多态性（SNP）和胃癌的相关性。方法 利用实时定量PCR检测3例胃癌患者肿瘤组织中Piwil1 mRNA的表达,并通过肿瘤转录组测序数据库分析胃癌组织中Piwil1 mRNA的表达水平。采用PCR克隆出Piwil1基因启动子区的序列,直接测序法测定24例胃癌患者和29例健康对照者的基因多态性,并使用SnapGene软件对测序结果进行分析。结果 对Cancer RNA-Seq Nexus数据库查询结果和3例胃癌患者肿瘤组织和癌旁组织的实时定量PCR检测结果进行分析,发现胃癌组织中Piwil1基因表达量较癌旁组织高。检测到Piwil1基因启动子两个CpG区域的7个SNP位点,发现仅有一个SNP位点和胃癌有相关性。CpG 67区域rs28416520位点基因型GG、GA、AA在胃癌组中的频率分别为79.2%、16.7%、4.1%,在健康对照组中分别为37.9%、55.2%、6.9%,胃癌组GG基因型频率显著高于对照组（OR=0.144,95%CI：0.045~0564,χ2=9.071,P<0.01）。胃癌组rs28416520等位基因G的频率显著高于对照组（87.5% vs 65.5%;OR=0.271,95%CI：0.099~0.766, χ2=6.856,P<0.01）。其它6个SNP位点在胃癌组和正常组之间没有显著差异。结论 Piwil1基因启动子 CpG 67区域rs28416520位点基因型GG和等位基因G与胃癌发病风险升高相关,且Piwil1基因在胃癌肿瘤组织中表达升高。     

新乡地区支气管哮喘患儿发病风险与相关核转录因子等位基因间相关性探讨

目的 探讨新乡地区支气管哮喘患儿发病风险与相关核转录因子等位基因间相关性。方法 本次研究纳入河南省新乡市第二人民医院2018年1月至2020年1月收治的小儿支气管哮喘患儿260例和体检健康儿童290例,采用SSP-PCR法检测核转录因子STAT3基因单核苷酸多态性（SNP）,分析两组基因型和等位基因分布差异。结果 支气管哮喘组rs2293152位点CC基因型比例高于体检健康组（P<0.05）;支气管哮喘组rs2293152C/G位点C等位基因比例高于体检健康组（P<0.05）;C等位基因儿童发生支气管哮喘风险为G等位基因的1.57倍（■=1.57, 95%CI:1.07～2.33）。两组rs957970位点基因型和等位基因比例比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 本地区小儿支气管哮喘发病与STAT3基因rs2293152C/G位点有关,其中C等位基因可能为常见易感基因。     

信号转导和转录激活因子4基因多态性与类风湿关节炎发病的相关性

目的探讨信号转导和转录激活因子4（STAT4）基因多态性与类风湿关节炎发病的相关性。方法以聚合酶链反应连接酶检测反应（PCR-LDR）法对139例RA患者和139名正常对照组进行STAT4基因rs7574865位点的SNP分型,比较各基因型及等位基因频率在正常人群和RA患者中的差异。结果 RA组STAT4 rs7574865各基因型分布频率与正常对照组有明显差异（P〈0.05）,T型和G型等位基因频率在RA组与正常对照组比较有显著差异（P〈0.01,OR1.658,95%可信区间为1.154～2.383）。结论 STAT4 rs7574865位点GT/TT基因型与RA发病具有相关性,STAT4基因rs7574865位点T等位基因为RA患者的易感基因。     

豫南地区2型糖尿病患者脂联素基因45位点多态性分布

目的:建立一种快速检测脂联素基因单核苷酸多态性(SNP)的方法,并分析脂联素基因SNP 45位点与2型糖尿病的相关性.方法:河南豫南地区人群2型糖尿病患者(病例组)168例,正常人(对照组)150例.取2组研究对象的外周血,采用实时荧光PCR快速检测法检测脂联素基因45位点SNP.随机选择20例患者血样,基因测序法检测脂联素基因45位点SNP,并与实时荧光PCR快速检测法结果进行比较.结果:20例患者2种方法检测结果完全一致.病例组45位点基因型TT、GT、GG分布频率分别为11.9%,56.0%和32.1%,正常组中分别为45.3%,40.0%和14.7%;病例组G等位基因分布频率(60.1%)高于正常组(34.7%).2组3种基因型及2种等位基因分布差异有统计学意义(P均＜0.05).结论:实时荧光PCR方法是一种高效快速分析脂联素基因多态性的方法.脂联素基因45位点GG多态型与河南地区2型糖尿病有关.     

环氧化酶-2单核苷酸多态性与结直肠癌生物学行为的相关性研究

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)基因启动子区-1195G>A单核苷酸多态性与结直肠癌病理参数以及与COX-2表达的关系.方法:对118例结直肠癌血标本,应用SYBR GREEN PCR溶解曲线方法进行COX-2启动子区-1195G>A基因型分析.结果:含有A等位基因的GA或AA基因型相对于GG基因型,淋巴结转移以及肿瘤分期差异显著(p=0.007及P=0.010).GA、AA基因型COX-2阳性率相对于GG基因型OR分别为3.01(95%CI 1.07～8.46,P=0.036)、2.79(95%CI 1.17～6.64,P=0.020).结论:COX-2-1195G>A多态性与淋巴结转移、肿瘤分期以及COX-2表达密切相关,该位点含A等位基因提示淋巴结转移、肿瘤分期晚高风险,COX-2免疫组化阳性率高.     

STAT3在胃癌组织中的表达及临床意义

目的检测信号传导及转录活化因子STAT3在胃癌组织中的表达情况,并探讨其表达与胃癌组织分化程度的关系.方法采用免疫组织化学二步法检测40例胃癌组织和40例正常胃组织STAT3蛋白的表达.结果 STAT3阳性信号主要位于细胞浆中.STAT3在胃癌组织中的表达明显高于在正常胃组织中的表达(P＜0.01),STAT3的表达在不同组织分化程度的胃癌组织中有显著差异(P＜0.01),低分化胃癌组STAT3的表达明显高于高-中分化胃癌组.结论 STAT3在胃癌组织中,尤其是低分化胃癌组织中的表达明显增高,JAK/STAT信号传导途径可能在胃癌的发生、发展中起重要的作用.     

胃癌组织中STAT3的表达及意义

目的探讨胃癌组织中STAT3的表达与临床病理特征之间的关系。方法采用免疫组织化学SABC法检测40例胃癌的癌灶中心组织及其癌旁正常组织中STAT3的表达情况。结果STAT3在胃癌组织中的表达明显高于在正常胃组织中的表达,STAT3的表达水平与胃癌浸润深度、有无淋巴结转移和TNM分期相关。结论STAT3过表达可能在胃癌的发生、发展过程中发挥重要作用。     

RNA干扰沉默STAT3基因对胃癌细胞侵袭力的影响

目的观察瞬时转染信号传导与转录激活因子3（STAT3）小干扰RNA（siRNA）后对人胃癌细胞SGC-7901侵袭力的影响,探讨干扰STAT3后降低胃癌细胞侵袭力的机制。方法以人胃癌细胞系SGC-7901为研究对象,培养瞬时转染特异性siRNA的SGC-7901细胞系,通过RT-PCR、免疫细胞化学、Transwell体外侵袭实验等检测该siRNA对SGC-7901细胞STAT3及MMP-9基因表达和对细胞侵袭转移能力的影响。结果STAT3 siRNA转染SGC-7901细胞48 h后,STAT3 mRNA水平下降了73.04%,MMP-9 mRNA水平下降了57.2%;Transwell体外侵袭实验显示,STAT3 siRNA组能显著抑制SGC-7901的侵袭力（P〈0.01）。结论应用siRNA技术能有效抑制SGC-7901STAT3基因的表达,进而可能通过抑制MMP-9基因的表达,降低细胞的侵袭力,为以STAT3为靶向的胃癌基因治疗提供了新的思路和方法。     

COX-2基因单核苷酸多态性rs3218625与胃癌的关联研究

目的：探讨环氧化酶2（COX-2）基因单核苷酸多态性（SNP）rs3218625 G〉A与胃癌的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法在253例胃癌患者和243例正常对照中进行基因分型,并用非条件性Logistic回归分析SNP rs3218625与胃癌发病风险的关系。结果：SNP rs3218625与胃癌关联,AG基因型携带者胃癌的发病风险增高（OR=2.463,95%CI=1.027~5.910）。结论：SNP rs3218625可能在胃癌的发病中起到一定作用。     

TPEF和STAT1在大肠癌中的表达及其意义

目的：探讨含表皮生长因子和卵泡抑素结构域的跨膜蛋白（TPEF）、信号转导子和转录激活子1（STATI）在大肠癌中的表达水平及其意义。方法：采用SYBR GreenI荧光定量RT—PCR技术对50例大肠癌组织和相应正常大肠黏膜组织中的TPEFmRNA及STAT1 mRNA的表达进行检测,并分析其表达情况与临床病理资料的相关性。结果：癌组织中TPEFmRNA及STAT1 mRNA的相对表达水平明显低于相应正常组织（P〈0．05）;肿瘤TNM分期中T3／T4癌组织表达水平明显低于TI／T2癌组织（P〈0．05）;合并淋巴结转移的组织中表达水平亦低于无淋巴结转移者（P〈0．05）;TPEFmRNA与STAT1mRNA的表达水平呈正相关（r癌组织=0．537,r正常组织=0．851,P〈0．001）。结论：TPEF、STAT1基因在大肠癌组织中低表达,与大肠癌的转移相关,可作为大肠癌恶性潜能的检测指标之一。     

白血病抑制因子通过JAK1/STAT3信号通路调控非小细胞肺癌细胞活性

目的：探讨白血病抑制因子（LIF）对非小细胞肺癌（NSCLC）的潜在作用及其机制。方法：采用免疫组织化学法、荧光定量PCR法、Western blot法检测LIF在NSCLC患者癌旁组织和肿瘤组织中的表达情况;采用CCK-8法和Transwell小室法检测LIF对肿瘤细胞A549细胞的增殖和侵袭作用的影响;Western blot检测JAK1/STAT3信号通路蛋白表达情况。结果：LIF在NSCLC的癌组织中的表达显著高于癌旁组织（P ＜0.01）,经LIF共孵育后,肿瘤细胞的增殖和侵袭能力均明显增强（P ＜0.05）;Western blot显示肿瘤细胞中JAK1、STAT3 磷酸化水平明显提高（P ＜0.05）。结论：LIF在NSCLC中表达增加,可能通过JAK1/STAT3信号通路介导LIF的增加,并增强肿瘤细胞的增殖和侵袭能力。     

MRFQ SYBR Green I-PCR结合融解曲线快速检测产ESBLs菌耐药基因

目的 探讨SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法快速检测常见超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）耐药基因的可行性。方法选取经测序验证携带有tern、shy、ctx—m-1组、ctx-m-9组耐药基因的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作为阳性菌株,建立细菌耐药基因SYBRGreen1实时荧光定量多重PCR检测体系,这四种耐药基因的扩增产物片段长度和融解温度（Tm值）都不同,可通过结合融解曲线分析加以区别。用此体系检测110株大肠埃希菌和94株肺炎克雷伯菌,根据特异性Tm值的有无和差别判断是否携带有耐药基因及携带耐药基因型别。结果与耐药表型、琼脂糖电泳、测序结果对照。结果经SYBRGreenⅠ实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析,分别有47株（42．7％）大肠埃希菌和34株（36．2％）肺炎克雷伯菌携带有这四种常见的ESBLs耐药基因,与表型确证实验和电泳结果比较达到100％的一致性;根据Tm值的不同,对耐药基因进行鉴别,携带单个耐药基因菌株的检测与电泳结果和测序结果比较达到100％的一致性;对携带多个耐药基因菌株的检测不能达到较好的分辨性。结论SYBRGreenI实时荧光定量多重PCR结合融解曲线分析方法可以快速筛查常见超广谱β-内酰胺酶（EsBI曲耐药基因,对携带单个耐药基因的细菌的基因型能进行准确鉴定。这对指导临床医生合理使用抗生素进行临床治疗和对耐药细菌的流行病学监测具有重要价值。     

胃癌组织中Twist、STAT3和E-cad的表达及其临床意义

目的:观察扭曲蛋白(Twist)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、上皮钙黏素(E-cad)在胃癌组织及癌旁组织中的表达,探讨三者与胃癌临床病理参数之间的相关性及三者的表达对判断胃癌预后的意义。方法:采用免疫组织化学方法链霉亲和素-生物素复合物(SABC)法检测手术切除胃癌组织及癌旁组织标本中的Twist、STAT3、E-cad表达,分析其与胃癌患者年龄、性别、肿瘤的组织学类型、转移及TNM分期等参数的关系。结果:在胃癌组织中Twist、STAT3、E-cad的阳性率分别为57.3%、64.7%、12.0%,癌旁组织中的阳性率分别为17.3%、10.8%和68.0%,差异均有统计学意义(P0.01)。Twist的表达在肿瘤远处转移、淋巴结转移、TNM分期和浸润深度间差异均有统计学意义(P0.05~P0.01);STAT3的表达在肿瘤淋巴结转移、浸润深度及TNM分期间差异均有统计学意义(P0.05~P0.01)。Twist、STAT3表达与E-cad表达均呈明显负相关关系(P0.01)。结论:胃癌组织中Twist、SATA3表达与肿瘤的生物学特征均有一定关系,SATA3的激活可能会增强Twist、E-cad的表达,检测Twist、STAT3、E-cad对预测肿瘤侵袭转移、判断预后具有一定价值。