香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞黏附分子及基质金属蛋白酶表达的影响

目的：研究香青兰总黄酮对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）黏附分子及基质金属蛋白酶（MMPs）表达的影响。方法：采用贴壁法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,以AngⅡ为诱导剂,建立VSMC细胞增殖的模型,分别应用10^-7 mol·L^-1AngⅡ以及AngⅡ+不同浓度香青兰总黄酮组（25,50,100 μg·mL^-1）作用24 h,并设空白对照组进行比较。采用免疫组化法检测细胞中细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管间黏附分子（VCAM-1）的表达水平。RT-PCR方法检测细胞MMP-2、MMP-9的mRNA表达水平。结果：与对照组比较,AngⅡ组能显著刺激大鼠VSMC细胞内ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,香青兰总黄酮不同剂量组联合AngⅡ可在一定程度上抑制AngⅡ诱导的VSMC细胞内ICAM-1、VCAM-1、MMP-2、MMP-9的表达,且呈现一定的剂量依赖关系趋势。结论：香青兰总黄酮具有抑制AngⅡ诱导VSMC黏附分子及基质金属蛋白酶表达的作用。     

血管紧张素转化酶和血管紧张素Ⅱ对低氧促培养的肺内小动脉平滑肌细胞增殖作用的影响

目的：研究局部血管紧张素转化酶及血管紧张素Ⅱ和低氧促进肺动脉平滑肌细胞增殖作用之间的关系。方法：分离培养肺内小动脉平滑肌细胞,测定[^3H]thymidine掺入和细胞计数作为细胞增殖的指标。结果：低氧显著促进培养的肺内小动脉平滑肌细胞增殖,其[^3H]thymidine掺入和细胞计数分别增加166．6％（P＜0．01）和52．0％（P＜0．01）。captopril和losartan预处理可显著抑制低氧对肺内小动脉平滑肌细胞增殖的促进作用,[^3H]thymidine掺入分别被抑制51．3％（P＜0．01）和49．8％（P＜0．01）,细胞计数分别被抑制22．2％（P＜0．01）和17．％（P＜0．01）。而PD－123319基本无明显作用。结论：肺内小动脉平滑肌细胞局部血管紧张素转化酶的过度表达及血管紧张素Ⅱ在低氧促平滑肌细胞增殖中发挥重要作用。     

药物对血管紧张素Ⅱ致平滑肌细胞凋亡的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ在不同浓度和不同作用时间下,对血管平滑肌细胞凋亡的作用及卡托普利和氯沙坦对其影响。方法:采用流式细胞技术测定了在血管紧张素Ⅱ不同浓度和不同作用时间下,血管平滑肌细胞凋亡率的变化和卡托普利、氯沙坦及二者舍用对其影响。结果:血管紧张素Ⅱ中低剂量对血管平滑肌细胞凋亡无明显作用,大剂量有诱导凋亡的作用;单用氯沙坦对细胞凋亡无明显作用,卡托普利有一定的作用,二者合用时明显增加凋亡率。结论:血管紧张素Ⅱ具有促进血管平滑肌细胞凋亡作用,大剂量作用尤为明显;合用卡托普利和氯沙坦可明显增加平滑肌细胞的凋亡作用。     

滇丹参对血管狭窄和金属基质蛋白酶的影响

目的 探讨滇丹参对高血脂兔腹主动脉球囊损伤后血管狭窄的影响，及其与基质金属蛋白酶、血管内膜中层平滑肌细胞增生的关系。方法 25只日本大耳兔随机分为正常对照组、球囊损伤组与滇丹参组。正常对照组不予任何方式处理。另两组行腹主动脉球囊损伤术，其中滇丹参组给予静脉注射滇丹参注射液（238mg·kg^-1·d^-1）2周，观察各组血管组织中基质金属蛋白酶表达情况的变化以及血管损伤处血管狭窄、血管内膜中层平滑肌细胞增生的情况。结果 应用滇丹参2周后滇丹参组血管组织中基质金属蛋白酶表达减少，血管损伤处血管内膜、外膜增生减轻，新生内膜面积减少，管腔面积增加。结论 滇丹参可以抑制血管组织中基质金属蛋白酶的表达，抑制血管内膜中膜平滑肌细胞增殖，抑制球囊损伤后兔腹主动脉血管的狭窄。     

基质金属蛋白酶-2和-9在口腔癌中的表达

口腔癌是头颈部常见恶性肿瘤，其发病率近年来有逐渐增加的趋势，口腔癌恶性程度高多呈浸润性生长，且易发生转移。基质金属蛋白酶（matrix etalloproteinases，MMPs）是一类以锌为辅助因子的蛋白酶家族，在体内主要降解构成细胞外基质的主要成分的胶原、层连接蛋白以及黏蛋白等物质，在肿瘤浸润和转移中起重要作用。本实验通过免疫组化S-P染色法对口腔癌及癌旁组织进行MMP-2和MMP-9的检测，研究MMP-2和MMP-9对口腔癌的浸润、转移的影响。     

肝癌组织中基质金属蛋白酶2、基质金属蛋白酶9和血管内皮生长因子的表达及临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶2（ MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）和血管内皮生长因子（VEGF）在肝癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测80例肝癌组织中MMP-2、MMP-9和VEGF表达情况,并以30例正常肝组织作为对照.结果 肝癌组织中MMP-2、MMP-9和VEGF表达均显著高于正常肝组织（x2=8.752,7.951,6.812,均P＜0.05）.肝癌患者中Ⅲ～Ⅳ期、淋巴结转移患者的MMP-2、MMP-9和VEGF阳性表达率分别高于Ⅰ～Ⅱ期和无淋巴结转移患者（x2 =6.124,5.262,5.834,5.653,5.932,6.785,均P＜0.05）.结论 肝癌组织中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达水平明显升高,它们在肝癌的浸润转移中起到了重要的作用,可作为反映肝癌进展的生物学指标.     

银杏内酯对血管紧张素Ⅱ依赖性血管平滑肌细胞增殖的作用

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对培养牛主动脉血管平滑肌细胞(VSM C)增殖的作用及银杏内酯对其增殖的影响.方法采用组织块贴壁法培养牛主动脉VSMC ,以3H-TdR掺入法和流式细胞仪分别测定VSMC的DNA合成量及细胞周期中各期细胞构成比.结果 AngⅡ(0.1μmol/L)作用24h 使3H-TdR掺入量比对照组增加34%;S期和G2/M期细胞增多,细胞增殖指数由35.15%增至45.03%.与AngⅡ组相比,AngⅡ加银杏内酯B(G -B,0.1～10μmol/L)组、AngⅡ加G-B和银杏内酯A(G-A)的混合物(G-AB,0.1～10μmol/L)组的3H-TdR掺入量减少;S期细胞构成比和细胞增殖指数减少.结论 AngⅡ对VSMC有促增殖作用 ,可被G-B和G-AB所拮抗.     

匹伐他汀对人主动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶9表达的影响

目的 观察匹伐他汀对入主动脉肿瘤坏死因子( TNF-α)刺激血管平滑肌细胞(VSMCs)基质金属蛋白酶9(M MP-9)表达的影响.方法 研究对象:血管平滑肌细胞取自择期开放手术腹主动脉瘤标本,经洗涤、剪切、消化、离心后培养,实验使用第三代细胞.实验分4组,除对照组外,各组分别加入不同浓度TNF-α(1×103、10×103和100×103 ng/L),孵育24h后,测定MMP-9蛋白和mRNA表达,实验重复3次.实验分为6组,各组均加入TNF-α( 100×103 ng/L),干预组分别加入不同浓度匹伐他汀(0.1 ×103、1×103、10×103、100×103和500×103 ng/L),共同孵育24h,测定各组MMP-9 mRNA和蛋白质表达,实验重复3次.免疫组织化学鉴定为VSMCs.通过蛋白质印迹法检测TNF-α对MMP-9蛋白表达的影响、反转录多聚酶链反应观察TNF-α对MMP-9 mRNA表达的影响以及不同浓度匹伐他汀的干预作用.结果 与对照组比较,不同浓度TNF-α(1×103、10×103和100×103 ng/L)分别使VSMCs、MMP-9蛋白表达约增加71％、113％和116％,mRNA表达分别约增加27％、42％和80％.TNF-α呈剂量依赖方式刺激VSMCs MMP-9 mRNA和蛋白表达,差异有统计学意义(P＜0.01)；与对照组相比,不同浓度的匹伐他汀(0.1×103、1 ×103、10×103、100×103和500×103 ng/L)分别使TNF-α( 100 ng/L)刺激VSMCs MMP-9蛋白表达降低10.0％、10.3％、22.1％、28.9％和36.7％,高浓度的拮抗作用显示出统计学差异(P＜0.01)；对mRNA表达也显现相似的效果,匹伐他汀各组mRNA分别减少26％、29％、32％、37％46％(P＜0.01).结论 MMP-9在动脉粥样硬化区域过度表达、活性增强,降解细胞外基质、破坏弹力纤维,可加重临床病情；局部TNF-α可刺激MMP-9分布增加有关.匹伐他汀具有抑制TNF-α上调MMP-9表达的作用,有利于延缓动脉粥样硬化进展、稳定斑块,减少以动脉硬化为基础的急性心血管事件的发生.     

血管紧张素Ⅱ对平滑肌细胞产生一氧化氮和三磷酸肌醇活性的影响

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和胰岛素对人脐动脉平滑肌细胞产生一氧化氮(NO)、超氧阴离子(O2-)、三磷酸肌醇(IP3)活性的影响。方法不同浓度的AngⅡ和胰岛素加入体外培养的人脐动脉平滑肌细胞,分别测定细胞培养液中一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,NO、环鸟苷酸(cGMP)和O2-浓度,3H标记肌醇-逐步洗脱法测定IP3活性。结果胰岛素(10、100、1000mU/L)使平滑肌细胞NOS活性升高,NO、cGMP产生增加,对SOD活性和O2-水平无影响,对IP3活性无明显影响;0.1、0.5nmol/LAngⅡ对NOS活性、NO和cGMP产生无明显影响,1nmol/LAngⅡ使NOS活性下降(P<0.05),NO、cGMP产生减少(P<0.05或<0.01),0.1、0.5、1nmol/LAngⅡ使SOD活性下降(P<0.05或<0.01),O2-水平升高(P<0.01),使IP3活性升高(P<0.05);胰岛素10mU/L AngⅡ0.1nmol/L、胰岛素100mU/L AngⅡ0.5nmol/L、胰岛素1000mU/L AngⅡ1nmol/L使NOS活性下降(P<0.01),NO和cGMP产生减少(P<0.01),SOD活性下降(P<0.01),O2-水平升高(P<0.01),使IP3活性升高(P<0.05);0.1nmol/LAngⅡ 1μmol/L氯沙坦、0.5nmol/LAngⅡ 5μmol/L氯沙坦、1nmol/LAngⅡ 10μmol/L氯沙坦可以改善AngⅡ引起的NOS、SOD活性下降,NO、cGMP产生减少,O2-水平升高,以及AngⅡ引起的IP3活性升高,但与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论胰岛素使平滑肌细胞NO产生增加,对IP3活性无影响。高浓度AngⅡ使NO产生减少,O2-水平升高,使IP3,活性升高,可以被氯沙坦阻断,胰岛素和AngⅡ同时存在时平滑肌细胞NO产生减少,O2-水平升高,可以使IP3活性升高。     

雌激素促血管壁平滑肌细胞增殖效应及其对血管紧张素Ⅱ释放的影响

雌激素促血管壁平滑肌细胞增殖效应及其对血管紧张素Ⅱ释放的影响张子沪李国红（南京铁道医学院心血管病研究室，南京２１０００９）中国图书分类号Ｒ９７７．１２；Ｒ５４４．１高血压流行病学调查表明雌激素类药物是继发性高血压常见的病因之一，机制可能与雌激素促肝脏...     

间硝苯地平对血管紧张素Ⅱ促进血管平滑肌细胞增殖和蛋白质合成的影响

以培养血管平滑肌细胞(vascularsmcothmusclecell,VSMC)为模型,观察了间硝苯地平(m-nifedipine,m-Nif)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ANGⅡ)促进VSMC增殖和蛋白质合成的影响。结果表明,m-Nif抑制ANGⅡ(100nmol·L^-1)引起VSMC[³H]thymidine和[³H]leucine参入,并呈剂量依赖性。m-Nif(2×10^-6mol·L^-1)可抑制ANGⅡ对VSMC的刺激、DNA及蛋白质合成速率,分别降低了46%,58%,53%。提示m-Nif可抑制ANGⅡ对VSMC增殖和蛋白合成的促进作用。     

间硝苯地平对血管紧张素Ⅱ促进血管平滑肌细胞增殖和蛋白质合成的影响

以培养血管平滑肌细胞（ｖａｓｃｕｌａｒｓｍｃｏｔｈｍｕｓｃｌｅｃｅｌｌ，ＶＳＭＣ）为模型，观察了间硝苯地平（ｍ－ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ，ｍ－Ｎｉｆ）对血管紧张素Ⅱ（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ，ＡＮＧⅡ）促进ＶＳＭＣ增殖和蛋白质合成的影响。结果表明，ｍ－Ｎｉｆ抑制ＡＮＧⅡ（１００ｎｍｏｌ·Ｌ￣（－１））引起ＶＳＭＣ［￣３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ和［￣３Ｈ］ｌｅｕｃｉｎｅ参入，并呈剂量依赖性。ｍ－Ｎｉｆ（２×１０￣（－６）ｍｏｌ·Ｌ￣（－１））可抑制ＡＮＧⅡ对ＶＳＭＣ的刺激、ＤＮＡ及蛋白质合成速率，分别降低了４６％，５８％，５３％。提示ｍ－Ｎｉｆ可抑制ＡＮＧⅡ对ＶＳＭＣ增殖和蛋白合成的促进作用     

前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶2和基质金属蛋白酶9表达的影响

目的:探讨前列地尔对局灶性脑缺血模型大鼠大脑皮层基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP-9表达的影响。方法:取SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照(尼莫地平1 mg.kg-1)组和前列地尔低、中、高剂量(1.25、2.50、5.00μg.kg-1)组,每组5只,连续给予相应药物6 d,每日1次,末次给药后建立局灶性脑缺血模型,于大鼠清醒后进行神经功能缺损评分,缺血24 h后检测各组大鼠大脑皮层MMP-2、MMP-9的表达情况。结果:与假手术组比较,模型组神经功能缺损评分明显更高,MMP-2、MMP-9表达明显升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和前列地尔中、高剂量组神经功能缺损评分明显较低,MMP-2、MMP-9表达明显降低(P<0.05)。结论:前列地尔预处理对局灶性脑缺血模型大鼠具有神经保护作用,其机制可能与抑制大脑皮层MMP-2、MMP-9的表达有关。     

血管紧张素Ⅱ对大鼠肾入球小动脉细胞内钙离子浓度的影响及Losartan的拮抗作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾小球入球小动脉细胞内钙离子浓度([Ca²⁺]i)的影响与高血压肾小动脉重建的关系及Losartan的治疗作用。方法 细胞培养：大鼠肾小球入球小动脉细胞随机分为4组。对照组：不加AngⅡ处理;AngⅡ组：加入终浓度为0.1 μmol·L^-1的AngⅡ;Losartan组：加入终浓度为50 μmol·L^-1的Losartan;AngⅡ+Losartan组：同时加入Losartan 50 μmol·L^-1和AngⅡ0.1 μmol·L^-1。负载后上机检测[Ca²⁺]i。结果 细胞培养显示AngⅡ引起了细胞收缩变化,表现为胞突变细变短,胞突回缩,胞体变圆,细胞长度与直径均明显缩小。Losartan处理组较AngⅡ组细胞形态变化减轻且Losartan对AngⅡ增高RASMCs内[Ca²⁺]i有明显抑制作用。结论 AngⅡ可引起肾小球入球小动脉细胞内[Ca²⁺]i的上升,导致细胞收缩,因此Ca²⁺超载可能是肾素-血管紧张素系统起作用的重要环节。Losartan可抑制细胞内Ca²⁺超载。     

下调血管生成素样蛋白7表达对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨下调血管生成素样蛋白7(Angptl7)表达对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法 采用CCK-8法检测AngⅡ诱导的VSMC生长,流式细胞术检测下调Angptl7蛋白表达对细胞周期的影响。分别采用实时荧光定量PCR和Western blot法检测转染后细胞中Angptl7 mRNA和Angptl7、周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、细胞周期蛋白E1、p21、Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果 采用1μg/mL的AngⅡ处理24 h能提高VSMC活力(0.63±0.06 vs.0.37±0.06)(P<0.01),促进Angptl7 mRNA和蛋白的表达(3.05±0.21 vs.0.97±0.06和1.61±0.14 vs.1.01±0.12)(P<0.01)。下调Angptl7蛋白表达可抑制CDK2、细胞周期蛋白E1和Bcl-2蛋白的表达,促进p21和Bax蛋白的表达(P<0.05)。结论 AngⅡ能促进VSMC增殖,上调Angptl7 mRNA和蛋白表达。下调Angptl7表达可抑制AngⅡ诱导的V...     

血管紧张素Ⅱ对大鼠肾入球小动脉细胞内钙离子浓度的影响及Losartan的拮抗作用

目的 探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾小球入球小动脉细胞内钙离子浓度([Ca²⁺]i)的影响与高血压肾小动脉重建的关系及Losartan的治疗作用。方法 细胞培养：大鼠肾小球入球小动脉细胞随机分为4组。对照组：不加AngⅡ处理;AngⅡ组：加入终浓度为0.1 μmol·L^-1的AngⅡ;Losartan组：加入终浓度为50 μmol·L^-1的Losartan;AngⅡ+Losartan组：同时加入Losartan 50 μmol·L^-1和AngⅡ0.1 μmol·L^-1。负载后上机检测[Ca²⁺]i。结果 细胞培养显示AngⅡ引起了细胞收缩变化,表现为胞突变细变短,胞突回缩,胞体变圆,细胞长度与直径均明显缩小。Losartan处理组较AngⅡ组细胞形态变化减轻且Losartan对AngⅡ增高RASMCs内[Ca²⁺]i有明显抑制作用。结论 AngⅡ可引起肾小球入球小动脉细胞内[Ca²⁺]i的上升,导致细胞收缩,因此Ca²⁺超载可能是肾素-血管紧张素系统起作用的重要环节。Losartan可抑制细胞内Ca²⁺超载。     

基质金属蛋白酶在健康牙齿和龋齿成牙本质细胞中的表达

目的比较基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、MMP-8在健康牙齿和龋齿中的表达,探讨MMP在龋病进展中的作用。方法选取健康第三磨牙和龋病第三磨牙各30个,利用明胶酶谱、Western-blot、免疫组化的方法,对比研究MMP-2、MMP-9、MMP-8在健康牙齿和龋齿中的表达。结果免疫组化染色显示,3种蛋白在健康牙齿和龋齿成牙本质细胞层均有表达,且在健康牙齿中呈弱阳性,在龋齿中成强阳性。在健康和龋病成牙本质细胞上清液中均检测到一条相对分子质量为5×104的MMP-8条带,且其在龋齿成牙中的表达强度(22.71±1.73)高于健康牙齿(17.22±1.22),差异有统计学意义。在健康牙齿本质细胞培养液中,可检测到MMP-2的酶原和活性酶,MMP-9仅有酶原形式,龋齿组中MMP-2、MMP-9的水平(10.26±1.89)、(6.74±2.43)高于相应健康组(6.62±1.68)、(2.60±1.08),差异有统计学意义。结论 MMP-2、MMP-9、MMP-8可能在龋病进展中发挥作用。     

血管内皮素、基质金属蛋白酶-9与脑梗死相关性研究

目的 通过观察脑梗死患者血浆内皮细胞素(ET)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平的动态变化与梗死面积、神经损害的关系,从临床方面探讨二者在脑梗死发展过程中的作用.方法 对70例脑梗死患者第三天和病后14 d的血浆采用免疫分析法内皮细胞素、采用酶联免疫法测定基质金属蛋白酶-9,进行不同时程和同期神经功能缺损程度、脑梗死体积进行相关分析,并与30例正常人对照.结果 70例脑梗死患者第3天时血浆ET、MMP-9浓度为均显著高于对照组(P<0.05).脑梗死患者血浆ET、MMP-9水平CTV≥10 cm3、与CTV<10cm3比较(P<0.05).不同程度神经功能受损患者血浆ET、MMP-9水平CSS >30与CSS≤30之间比较(P<0.05).ET、MMP-9 水平呈正相关,(r=0.428,P<0.001).结论 ET、MMP-9参与脑梗死的病理过程,脑梗死急性期血浆ET、MMP-9水平可作为判断梗死面积大小、病情轻重及预后的客观指标.     

银杏内酯对血管紧张Ⅱ依赖性血管平滑肌细胞增殖的作用

目的 观察血管紧张Ⅱ（AngⅡ）对培养牛主动脉血管平滑肌细胞（VSMC）增殖的作用及银杏内酯对其增殖的影响。方法 采用组织块贴壁法培养牛主动脉VSMC,以^3H-TdR掺入法和流式细胞仪分别测定VSMC的DNA合成量及细胞周期中各期细胞构成比。结果 （AngⅡ）（0.1μmol/L)作用24h使用^3H-TdR掺入量比对照组增加34%;S期和G2/M期细胞增多,细胞增殖指数由35.15%增至45.03%。与（AngⅡ）组相比,AngⅡ加银杏内酯B（G-B,0.1-10μmol/L)组、AngⅡ加G-B和银杏内酯A（G-A）的混合物（G-AB,0.1-10μmol/L)组的^3H-TdR掺入量减少;S期细胞构成比和细胞增殖指数减少。结论 AngⅡ对VSMC有促增殖作用,要被G-B和G-AB所拮抗。