Pin1在盐酸异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化大鼠中的表达

目的 探讨肽脯氨酰顺反异构酶(Pin1)在盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌纤维化大鼠中的表达.方法 27只SD大鼠随机分为对照组(10只)、实验组(17只),其中实验组腹腔注射ISO,对照组注射等体积生理盐水,持续用药21 d,最终对照组和实验组各有10只大鼠纳入研究.超声心动图测定两组大鼠射血分数、短轴缩短率、左室收缩末期内径和左室舒张末期内径等相关心功能指标后处死取材,分别行苏木精-伊红染色(HE染色)、苦味酸-天狼猩红染色(PSR染色)观察心肌纤维化情况;实时荧光定量PCR技术检测Pin1、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平.结果 病理形态学观察显示实验组大鼠心肌纤维化程度较高.实验组射血分数、短轴缩短率均低于对照组,Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、Pin1 mRNA表达水平均高于对照组(P＜0.05).结论 Pin1或参与了ISO诱导的心肌纤维化,可能是心肌纤维化的潜在治疗靶点.     

牛磺酸对异丙肾上腺素引起大鼠心肌纤维化的保护作用

目的 研究牛磺酸(Taurine,Tau)对异丙肾上腺素(isoproterenol,Iso)引起大鼠心肌纤维化的保护作用及其机制.方法 用Iso 5 mg/(kg·d)背部皮下注射,连续7天,建立大鼠心肌纤维化模型.造模第2天起给大鼠腹腔注射Tau 80、160和320 mg/(kg·d) ,连续用药14 d,测量大鼠心脏重量指数(heart weight/body weight, HW/BW)和左心室重量指数(left ventricular weight/body weight, LVW/BW);分光光度法检测左心室心肌组织中羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性;自动生化仪检测血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH) 、肌酸激酶(creatine kinase, CK)含量.结果 与对照组比较,Iso模型组大鼠心重指数和左心室重量指数明显增大,左心室心肌组织中Hyp含量增高,MDA含量增高,SOD水平下降,血清中LDH和CK含量增加;给Tau 80、160 和320 mg/(kg·d)均能降低心重指数和左心室重量指数,提高心肌组织中的SOD含量,增强SOD活力,抑制MDA产生,降低Hyp含量,抑制胶原的产生,降低血清中LDH和CK的含量.结论 Tau对Iso引起大鼠心肌纤维化具有一定的改善作用,该作用与抑制胶原的形成、抗脂质过氧化、清除氧自由基及减少心肌酶的漏出有关.     

p53在异丙肾上腺素所致心肌纤维化大鼠心肌组织中的表达及意义

目的：探讨p53在异丙肾上腺素（Iso）所致心肌纤维化大鼠心肌组织中的表达及意义,阐明其在心肌纤维化中的作用。方法：25只大鼠随机分为5组,正常对照组及注射Iso后12 h、24 h、1周和3周组。除正常对照组外,其他各组皮下多点注射Iso（15 mg·kg^-1）复制大鼠心肌损伤模型。采用免疫组织化学染色及RT-PCR分别检测心肌p53蛋白及基因表达。结果：免疫组织化学染色显示,注射Iso后12和24 h心肌P53蛋白表达水平明显高于正常对照组（P<0.05）,注射1和3周后p53蛋白表达增加更明显（P<0.01）。RT-PCR结果显示,与正常对照组比较,注射Iso后12 h心肌组织中p53 mRNA表达明显增高（P<0.05）,注射Iso后24 h p53 mRNA表达水平达到最高（P<0.01）,而注射Iso后1周心肌p53 mRNA表达较注射后24 h有所下降,但仍高于正常对照组(P<0.05)。结论：P53蛋白在大鼠损伤心肌中呈持续高表达,p53基因表达上调,提示p53在心肌纤维化形成过程中起一定作用。     

LncRNA-MEG3在心肌纤维化过程中的表达变化研究

目的研究LncRNA-MEG3在大鼠心肌纤维化及心肌成纤维细胞(CFs)活化增殖过程中的表达变化。方法用异丙肾上腺素(ISO)腹部皮下注射SD大鼠构造心肌纤维化动物模型为实验组(ISO组),对照组注射等量的生理盐水;提取乳鼠CFs,采用转化生长因子β1(TGF-β1)作用CFs构建细胞水平纤维化模型为实验组(TGF-β1组),对照组为未经TGF-β1作用正常培养的CFs; HE、Masson染色观察心肌组织胶原变化;用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原分子(CollagenⅠ)蛋白的表达;qRT-PCR法检测CollagenⅠ、α-SMA mRNA和MEG3的表达;CCK-8法检测经TGF-β1作用CFs后的吸光度(OD)值。结果与对照组比较,ISO组的心肌细胞体积变大、紊乱,组织胶原面积明显增加;ISO组和TGF-β1组中CollagenⅠ、α-SMA蛋白和mRNA表达都显著增多,LncRNA-MEG3表达显著减少;CCK-8实验结果提示使用TGF-β1刺激CFs 24、48 h后较对照组的细胞OD值明显增加,即细胞增殖活性增强。结论 LncRN...     

白细胞介素8对异丙肾上腺素所致大鼠心肌细胞坏死的影响

近年来发现白细胞介素8(IL-8)具有抑制中性粒细胞与血管内皮细胞粘附的作用。本研究用重组 IL-8治疗异丙肾上腺素(ISO)所致大鼠心肌坏死,与单纯 ISO 组比较,重组 IL-8治疗能明显减轻 ISO 引起的心肌坏死,使心肌丙二醛含量减少,降低心肌髓过氧化物酶活性,使血浆内皮素放免活性明显降低。实验结果提示,IL-8可以通过抑制白细胞粘附和浸润,抑制内皮素的释放,从而达到防治缺血心肌坏死。     

葛根素对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化大鼠左室收缩功能的影响

目的研究葛根素对异丙肾上腺素(ISO)诱导的心肌纤维化大鼠左室收缩功能的影响及其作用机制。方法采用ISO(5 mg.kg-1.d-1×10 d)皮下注射诱导大鼠心肌纤维化,给予葛根素(100 mg.kg-1.d-1)干预,实验共进行8周。将32只雄性SD大鼠随机分成4组:模型组8只,空白对照组8只,葛根素早期干预组8只,葛根素后期干预组8只。于实验末,予超声心动图检测大鼠左室射血分数(LVEF)及缩短分数(FS),计算左心室质量指数,取左室心肌组织进行VG染色、免疫组织化学染色,分别测算胶原容积积分(CVF)、心肌组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CTGF)表达量,取左室游离壁心肌组织检测羟脯氨酸浓度,并运用RT-PCR半定量分析CTGF mRNA和TGF-β1mRNA水平。结果与模型组比较,葛根素明显改善大鼠左室收缩功能(P<0.01),降低左心室质量指数、CVF及羟脯氨酸浓度(P<0.01),以及抑制CTGF和TGF-β1的过度表达(P<0.01)。相关分析显示4组大鼠的左室心肌组织CTGF蛋白与CVF和羟脯氨酸浓度呈正相关(P<0.05)。结论葛根素能明显改善左心室收缩功能,这种作用机制可能是通过抑制左室心肌组织中TGF-β1和CTGF的过度表达来实现。     

益母草碱对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌纤维化IGF-1表达的影响研究

目的:探讨益母草碱对异丙肾上腺素(ISO)诱导的大鼠心肌纤维化胰岛素样生长因子-1(IGF-1)表达的影响。方法:10只SD大鼠作正常对照组;另80只SD大鼠作为实验鼠,连续2周腹腔注射ISO诱导心肌纤维化动物模型。造模成功后将实验鼠随机分为5组,模型组、益母草碱低剂量组(7. 5mg·kg~(-1)d~(-1))、中剂量组(15 mg·kg~(-1)d~(-1))、高剂量组(30 mg·kg~(-1)d~(-1))、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)抑制剂组(0. 3 mg·kg~(-1)d~(-1)),连续给予相应药物腹腔注射2周后,分别以免疫组织化学法检测左心室肌IGF-1蛋白质的表达水平和酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清B型利钠肽(BNP)的含量。结果:与模型组比较,高剂量益母草碱能明显减少左心室肌IGF-1蛋白质的表达水平(P0. 05)及血清BNP的含量(P0. 05)。结论:益母草碱(30 mg·kg~(-1)d~(-1))具有抑制ISO诱导大鼠心肌纤维化作用,其机制可能与减少左心室肌组织IGF-1蛋白质的表达及血清BNP的含量有关。     

不同给药方式建立异丙肾上腺素诱导小鼠心肌纤维化模型的评价

目的 评价2种不同的给药方式建立异丙肾上腺素(isoproterenol, ISO)诱导小鼠心肌纤维化模型的效果。方法选取60只8～10周龄的雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、模型组A和模型组B,每组各20只。对照组小鼠给予腹腔注射0.9%氯化钠溶液,模型组A小鼠腹腔注射ISO[5mg/(kg·d)],模型组B小鼠皮下多点注射ISO[5mg/(kg·d)],每天1次,连续给药21天。在末次给药24h后采用小动物超声仪检测小鼠心功能,计算左心室重量(left ventricular mass, LV mass)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction, LVEF)和左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening, LVFS),并计算不同时间点的小鼠死亡率;小鼠安乐死后取材计算心脏重量与体质量比率(HW/BW)、心脏重量与胫骨长度比率(HW/TL)和肺脏重量与体质量比率(LW/BW);通过Masson染色观察心肌纤维化的程度;Western blot法检测小鼠心脏组织胶原蛋白表达水平。结果...     

异丙肾上腺素致心肌纤维化大鼠心肌MCP-1和ICAM-1的表达

目的研究异丙肾上腺素（1SO）诱导大鼠心肌纤维化后单核细胞趋化蛋白-1（MCP—1）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）等表达的变化,探讨炎性因子在心肌纤维化发生发展中的作用。方法16只雄性sD大鼠随机分为对照组、模型组,每组8只。模型组皮下注射ISO5mg·k^-1·d^-1×7天,对照组皮下注射等量生理盐水7天,于实验第5周末处死动物留取心脏标本。实验末各组取心脏计算心重指数（heartweightindex,HWI）,左心室心肌组织行Masson染色测胶原容积积分（CVF）;ELISA法检测心肌组织MCP-1和ICAM-1的水平;RT—PCR测定心肌组织MCP-1mRNA和ICAM-1mRNA表达。结果与对照组相比,模型组大鼠HWI及左心室心肌组织CVF明显升高（P〈0。01）;模型组心肌组织中MCP-1mRNA和蛋白及ICAM-1mRNA和蛋白的表达均明显升高（P〈0．01）。结论炎性因子MCP-1和ICAM-1的过度表达参与了ISO诱导大鼠心肌纤维化的发生发展。     

乙醛刺激大鼠肝星状细胞活化的动力学分析

目的:从动力学角度分析乙醛刺激大鼠肝星状细胞活化的时间变化,以确定大鼠肝星状细胞活化的最佳时间,从而为后续肝纤维化的相关研究提供实验数据。方法:培养大鼠肝星状细胞,同步化处理12h,随机分为乙醛刺激组和对照组。其中乙醛刺激组细胞加入乙醛(终浓度200μmol/L)分别刺激12h、24h和36h,每12h补加一次乙醛;对照组加入等量培养基。采用MTT法测定各组细胞增殖;ELISA法检测Ⅰ型胶原蛋白、纤维黏连素;Western blotting检测α-SMA的表达。结果:加入乙醛后,细胞的增殖活性随时间的延长而增强,24h细胞增殖活性达最高峰;ELISA测定结果显示,乙醛刺激组较对照组有明显上调;Western blotting检测结果,乙醛刺激组明显促进α-SMA表达量上调,且在24h达高峰。结论:乙醛可激活大鼠肝星状细胞且活化的最佳作用时间为24h。     

黄芩苷对UUO大鼠肾间质纤维化的影响及可能机制

目的 探讨黄芩苷对单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾间质纤维化(RIF)的影响及可能机制.方法 40只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、黄芩苷组、贝那普利组及黄芩苷+贝那普利组,每组各8只.黄芩苷组给予黄芩苷溶液灌胃40 mg·kg-1·d-1,贝那普利组给予贝那普利混悬液灌胃10 mg·kg-1·d-1,黄芩苷+贝那普利组给予黄芩苷溶液40 mg·kg-1·d-1和贝那普利混悬液10 mg·kg-1·d-1灌胃,假手术组与模型组大鼠给予等量生理盐水灌胃.在造模第14、21和28天处死动物,取肾脏标本,免疫组化法检测肾组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果 与假手术组相比,模型组大鼠在造模第14、21和28天,肾组织内TGF-β1、α-SMA的表达均明显升高(P＜0.05).与模型组相比,黄芩苷组、贝那普利组及黄芩苷+贝那普利组大鼠在造模第14、21和28天,肾组织内TGF-β1、α-SMA的表达均不同程度降低(P＜0.05).而黄芩苷组、贝那普利组和黄芩苷+贝那普利组3组之间各时间点肾组织内TGF-β1、α-SMA的表达两两比较差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 黄芩苷可能通过下调TGF-β1、减少α-SMA表达,从而延缓UUO大鼠RIF的进展.     

骨髓间充质干细胞移植对大鼠肝纤维化模型的修复作用

目的：观察骨髓间充质干细胞（MSCs）移植对大鼠肝纤维化模型的修复作用,为MSCs的临床应用提供可靠的理论依据。方法：分离、纯化大鼠MSCs并进行体外培养。用皮下多点注射CCl4制备肝纤维化大鼠模型,将大鼠随机分为3组：正常对照组、模型损伤组和MSCs移植组,每组6只。将MSCs经尾静脉回输到MSCs移植组大鼠体内,30 d取肝脏,观察病理变化,免疫组织化学检测α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达。结果：流式细胞术检测体外分离培养的MSCs 93.27%处于G0/G1期,且MSCs表面CD44呈阳性表达;将分离的MSCs输入肝纤维化模型大鼠30 d 后,镜下可见MSCs移植组病理改变较模型损伤组明显减轻,肝小叶结构基本正常,肝血窦基本正常,纤维结缔组织无明显增生;α-SMA染色强度MSCs移植组低于模型损伤组。结论：MSCs在一定程度上可以促进纤维化肝组织的修复。     

氧化樟脑注射液对大鼠心肌纤维化的改善作用

目的: 探讨氧化樟脑注射液对异丙肾上腺素(Iso)所致大鼠心肌纤维化的作用,阐明其抗心肌纤维化的作用机制,为其临床应用奠定基础。方法: 60只SD大鼠随机分为对照组、Iso模型组、维生素C组和不同剂量氧化樟脑注射液组;采用2 mg·kg^-1·d^-1Iso皮下注射制备大鼠心肌纤维化模型,连续14d,不同剂量氧化樟脑注射液组和维生素C组大鼠同时腹腔注射氧化樟脑注射液 (0.8、1.6和3.2 mg·kg^-1·d^-1)和维生素C(80 mg·kg^-1·d^-1),连续28 d。实验结束后采用BL-420 E⁺生物机能实验系统检测各组大鼠心电图和心功能,测定心脏质量指数(HMI)和左心室质量指数(LVMI);紫外分光法检测心肌组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性;酶标仪检测心肌组织中乳酸脱氢酶(LDH)活性和一氧化氮(NO)含量;ELISA法检测心肌组织中Ⅰ型胶原(ColⅠ)和Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)含量;HE染色观察心肌组织病理学。结果: 与对照组比较,Iso模型组大鼠心率增快、左室收缩压(LVSP)降低、左室内压最大上升速率(LVdp/dt_max)降低(P<0.05或P<0.01);HMI和LVMI升高,但差异无统计学意义(P>0.05);左心室心肌组织中MDA含量和LDH活性增高, NO含量降低,SOD和iNOS活性降低,ColⅠ和Col Ⅲ含量增高(P<0.05或P<0.01)。与Iso模型组比较,不同剂量氧化樟脑注射液组大鼠HMI和LVMI降低,且呈剂量依赖性,但差异无统计学意义(P>0.05);不同剂量氧化樟脑注射液组大鼠心肌组织匀浆中LDH活性、MDA含量降低,NO含量增加(P<0.05或P<0.01),ColⅠ和Col Ⅲ含量降低(P<0.05或P<0.01),iNOS和SOD活性升高(P<0.05或P<0.01)。结论: 氧化樟脑注射液可抑制Iso所致的大鼠心肌纤维化,其机制可能与抗氧化、提高NO水平进而抑制胶原的合成有关。     

中药复方861合剂对大鼠急性心肌梗死后心肌纤维化影响的初步研究

目的探讨中药复方861合剂对大鼠急性心肌梗死(AMI)后心肌纤维化、心室重构的影响.方法雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支制成心肌梗死模型,随机分为未治疗组(M组)、中药复方861合剂治疗组(T组)及假手术组(S组).术后第14日及第56日时测定大鼠体重(BW)、心脏重量(HW)、左室重量(LVW)、心脏重量/体重比(HW/BW)、左室重量/体重比(LVW/BW)及心肌胶原含量.各组心肌组织MASSON染色,光镜下观察病理改变.结果T组在术后第14日HW、LVW、HW/BW、LVW/BW均明显低于M组及S组,术后第56日的上述指标显著低于M组但高于S组.T组术后14d及56d的胶原含量均显著低于M组,但仍高于S组.结论中药复方861合剂有明显的抑制和减轻大鼠AMI后心肌纤维化的作用,但并不能完全阻止其发生.     

心室压力超负荷早期心肌纤维化的动态病理学变化

目的 通过主动脉弓缩窄建立小鼠心室压力超负荷模型,探讨在心室压力超负荷早期心肌纤维化的动态病理学变化.方法 选用10周龄、体质量23 ～ 25 g的雄性C57BL/6J小鼠40只,随机分为4组(n=10):(①假手术组(SHAM组)、②缩窄3d组(TAC3D组)、③缩窄7d组(TAC7D组)、④缩窄14 d组(TAC14D组).各缩窄组小鼠行主动脉弓缩窄术,假手术组除不缩窄主动脉弓部,其他操作同各缩窄组.心脏导管检测小鼠心脏功能变化情况;采用心脏体质量比、心肌细胞直径大小等指标评价小鼠心肌结构代偿性变化情况;Masson染色观察小鼠心肌纤维化变化情况.结果 ①与假手术组相比,各缩窄组射血分数无显著改变(P＞0.05);②与假手术组相比,各缩窄组心体比显著增加,心肌细胞直径显著增大[SHAM组、TAC3D组、TAC7D组、TAC14D组心肌细胞直径依次为(13.56 ±0.24)、(18.02±0.52)、(18.76±0.96)、(21.20±1.85) μm,P＜0.05].③与假手术组相比,各缩窄组心肌管周纤维化程度显著增加,且随缩窄时间延长而加重[SHAM组、TAC3D组、TAC7D组、TAC14D组血管周围纤维化面积与血管面积比依次为(0.18±0.02)、(0.37±0.02)、(1.22±0.08)、(2.05±0.12),P＜0.05].结论 在心室压力超负荷早期,心肌纤维化主要出现于血管周围,且纤维化程度随缩窄时间延长而逐渐加重.     

Effects of Ligustrazine on Myocardial Fibrosis in Rats with Pressure Overload

Objective: To investigate the effects of ligustrazine (Li) on myocardial fibrosis in rats with pressure overload. Methods: Pressure overload rat models were established by constricting the abdominal aorta. Sixty-three SD rats were divided into 3 groups: Sham operated group (SOG, n=21), operated group (OG, n=21) and operated combined with ligustrazine group (OG Li, n=21). Each group was randomly assigned to seven time points: The 1st, 2nd, 4th, 7th, 14th, 21st and 30th day after operation. Three rats were included in each time point. Serial sections of cardiac tissues were examined and the morphological or morphometric analysis of the SOG, OG and OG Li done by histopathological and computer image analyzer technique. Results: (1) It showed that there were reactive fibrosis (from the 4th day on after operation) and reparative fibrosis (from the 21st day on after operation) in the OG, while myocardial fibrosis in the OG Li was alleviated. Though reactive fibrosis (from the 21st day on after operation) was shown, reparative fibrosis wasn′t seen. (2) Perivascular collagen area (PVCA) in the OG (2. 09±0. 45) was significantly higher than SOG (0.83±0.06) from the 1st day on after operation and then steadily increased, while in the OG Li (1. 16±0.06), it was significantly lower than OG at the same time; collagen volume fraction (CVF) in the OG (3. 08±0.56) significantly increased compared with the SOG (2. 78±0.64) from the 2nd day on after operation and showed a trend of rapid ascending from the 21st day on after operation; and in the OG Li (4. 69±0.85), it was significantly decreased compared with the OG (7. 56±0.88) from the 21st day on after operation, with all P＜0. 05. Conclusion: Ligustrazine could alleviate and postpone the accumulation of myocardial collagen and has protective effects on the heart.     

洛沙坦抑制急性心肌梗死大鼠心肌纤维化的作用机制

目的 观察洛沙坦对急性心肌梗死大鼠心肌组织中盐皮质激素受体(MR)mRNA及心肌纤维化的影响.方法 结扎左冠状动脉致急性心肌梗死大鼠模型.随机分为急性心梗组和洛沙坦治疗组,而对照组为仅打开心包腔而未行冠状动脉结扎大鼠.在洛沙坦治疗4周时,用超声心动图和血流动力学指标评价心脏功能,心肌Masson染色法测定心肌胶原密度,放射性免疫法测定心肌组织中血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛同酮(Ald)含量,实时荧光定量PCR检测心肌MRmRNA表达.结果 (1)急性心梗组大鼠心肌组织中AngⅡ、Ald含量较对照组显著增加,心肌MRmRNA表达显著升高,同时心肌胶原密度显著增加(P<0.01).(2)洛沙坦治疗4周后,治疗组大鼠心肌组织中AngⅡ、Ald较急性心梗组显著减低(P<0.05),MRmRNA表达显著降低,心肌胶原密度也有显著降低(P<0.01).结论 洛沙坦可以抑制急性心肌梗死大鼠心肌组织中Ald信号通路.并且还可能通过下调心肌MRmRNA表达来抑制心肌纤维化.