强直性脊柱炎患者外周血CD4+CD25+high调节性T细胞的表达及其与传统指标相关性研究

目的 研究强直性脊柱炎(AS)患者外周血CD4+CD25+high调节性T细胞(regulatory cells,Treg)表达特点,探讨CD4+CD25+high调节性T细胞在AS发生发展中的作用.方法 采用流式细胞术检测30例AS和20例健康人外周血CD4+CD25+high调节性T细胞及HLA-B27,同时检测与AS相关的传统指标血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)等,并分析CD4+CD25+high调节性T细胞与AS活动性指标的相关性.结果 与正常对照组相比,AS患者外周血CD4+CD25+high调节性T细胞表达水平及CD4+CD25+high/CD4+比率显著升高(P＜0.05),AS患者外周血CD4+CD25+high调节性T细胞表达与HLA-B27平均荧光强度呈正相关(r=0.623, P=0.027),而与HLA-B27的百分数及ESR、CRP无明显相关性(P＞0.05).结论 AS患者外周血CD4+CD25+high调节性T细胞表达数量增加,但其功能有可能是存在异常,AS患者体内存在免疫功能紊乱.     

CD4+Treg细胞在再生障碍性贫血中的变化及其意义

目的 研究再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血调节性T细胞(Treg细胞)的变化及其临床意义.方法 采用直接免疫荧光法,应用流式细胞术检测CD4+ CD25+T细胞、CD4+ FOXP3+T细胞分别占CD4+T细胞的比例,实验组为初次诊断AA患者20例,健康对照组22例.结果 AA初治组CD4+...     

CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞在系统性红斑狼疮活动期患者中的表达

目的 检测调节性T细胞(Treg)的新旧标志,进一步探讨Treg细胞在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用.方法 采用三色直接荧光素标记法和多参数流式细胞术检测29例SLE患者及24例正常对照组外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+ CD25highT细胞及CD4+ CD25+FOXP3+T细胞的比例,同时检测外周血抗dsDNA等抗体及免疫球蛋白、补体等水平并进行相关分析.结果 SLE患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05),CD4+ CD25+ FOXP3+T细胞[(2.1±1.2)%]及CD4+ CD25highT细胞[(0.8 ±0.4)%]与正常对照组[(1.8±0.8)%及(4.0±1.4)%]比较差异有统计学意义(P＜0.01);SLE组3种细胞占CD4+ CD25+T细胞的比例均明显低于正常对照组(均P＜0.01),CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+CD25+ FOXP3+T细胞及CD4+ CD25highT细胞分别占CD4+ CD25+T细胞的比例及与年龄、性别和病程,IgG、IgA、IgM、尿蛋白,24 h蛋白尿,抗dsDNA、抗Clq、抗核小体抗体水平均无相关性(均P＞0.05);但其与SLEDAI评分均存在负相关(P＜0.05).仅CD+ CD25+ GD127low/-T细胞/CD+ CD25+T细胞与补体C4存在明显的负相关(P＜0.01).结论 Treg细胞与活化的CD4+T细胞的相对比例可能在SLE的发病中起到重要作用.     

Th17/CD4+CD25+Treg细胞与自身免疫病

CD4+ CD25+ 调节T 细胞(CD4+ CD25+ Treg) 是调节性T 细胞的一个重要亚类,Treg 可以通过IL-2 、TGF-β1等促炎症细胞因子调节Th17 / Treg平衡, 调控Th17 细胞介导的炎症反应、自身免疫反应.本文将Th17细胞/CD4+ CD25+ Treg 细胞与自身免疫性疾病的关系作一综述.     

CD4+CD25+Treg细胞调节T细胞的作用机制分析

目的通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系.方法对比分析Treg细胞与效应性T细胞膜分子CTLA4、CD28表达和细胞因子IL-10、TGF-β1分泌水平;以TransWell Millicell-PCF分隔培养槽分隔培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系,采用向共培养及分隔培养体系加入与不加入IL-10、TGF-β1抗体的阻断方法,检测Treg细胞对不同组混合淋巴细胞反应的抑制效率.结果 Treg细胞分泌IL-10和TGF-β1的浓度水平明显高于效应性T细胞,Treg细胞培养上清中IL-10和TGF-β1水平分别达到(380±36.3) pg/ml和(790±56.8) pg/ml,Treg细胞分泌IL-10和TGF-β1的浓度水平与效应性T细胞比较,均有显著性差异(P<0.01).共刺激分子CTLA4、CD28在Treg细胞和效应性T细胞膜表面的表达水平存在明显差异,Treg细胞以表达CTLA4为主.Treg细胞对共培养体系混合淋巴细胞反应的抑制效率明显高于分隔培养,通过分泌IL-10对效应性T细胞的抑制作用亦明显强于通过TGF-β1.结论细胞接触机制是Treg细胞抑制效应性T细胞的主要作用机制,而细胞因子机制中,以通过分泌IL-10的方式对效应性T细胞的抑制作用更明显.     

寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞水平的表达

目的 研究寻常型银屑病患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg细胞)水平的表达,探讨CD4+CD25+Treg细胞在寻常型银屑病发病机制中的作用.方法 对寻常型银屑病患者分期并进行Pasi评分,采用流式细胞术检测银屑病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞表达.结果 银屑病患者外周血CD4+CD25+Treg细胞占T细胞淋巴细胞的比例表达,寻常型明显低于正常对照组(P<0.05);其中进行期明显低于静止期和正常对照组(P<0.05);CD4+CD25+Treg细胞占T淋巴细胞的比例与Pasi及病程评分无相关关系(P>0.05).结论 寻常型银屑病的发病与外周血CD4+CD25+Treg细胞数目的减少有关,CD4+CD25+Treg细胞占T淋巴细胞的比例与Pasi评分及病程无相关关系.     

溃疡性结肠炎患者CD4~+CD25~+调节性T细胞的表达及意义

目的溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一种病因及发病机制迄今尚未完全明确的累及肠道的慢性非特异性炎症,近年来,研究发现免疫异常与其发病密切相关。通过分析UC患者外周血和肠黏膜中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及其特异性标志物Foxp3的表达特点,探讨CD4+CD25+Treg和Foxp3在UC发病机制中的作用。方法 20例UC活动期患者,15例健康体检者作为正常对照组,分别抽取外周静脉血和经电子肠镜活检肠黏膜组织,以流式细胞术检测外周血单个核淋巴细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)和肠固有层单个核细胞(lamina propria mononu-clear cell,LPMC)中CD4+CD25+T细胞和CD4+T细胞比例,应用免疫组化方法检测肠黏膜中Foxp3的表达,并检测血清中IL-10的水平。结果 UC患者外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例明显低于正常对照组(P<0.05),肠黏膜CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞比例和Foxp3+T细胞表达明显高于正常对照组(P<0.05),两组PBMC和LPMC中CD4+T细胞比例无明显差异(P>0.05),两组血清IL-10水平无显著差异(P>0.05)。结论 CD4+CD25+Treg在UC的发病机制中起重要作用,外周血Treg数量减少可能是疾病发生的重要因素。     

CD4+CD25+调节性T细胞在胃癌患者的表达及其临床意义

目的研究胃癌患者肿瘤组织、淋巴结及外周血中CD4 、CD25 调节性T细胞(T regulatory cells,Treg)的表达情况与胃癌临床病理的关系并分析其意义.方法胃癌患者肿瘤组织、淋巴结、外周血及对照组中Treg表达情况分别以冰冻切片荧光抗体染色、流式细胞仪进行检测,结合胃癌患者临床病理情况分析.结果健康成人对照外周血Treg表达率为(4.1±5.7)%,胃癌患者外周血Treg表达显著增高(16.8±7.9)%.胃癌组织Treg表达为(6.5±7.2)%,胃癌周围淋巴结Treg比例为(8.4±7.2)%,均较对照组显著增高.胃癌外周血和淋巴结Treg表达与淋巴结转移率和TNM分期有着负相关性,淋巴结转移阳性和TNM分期越晚,Treg表达率越高.结论Treg在胃癌患者的瘤组织、淋巴结及外周血中表达较对照组显著增高,并与临床病理存在显著相关性.     

CD_4~+ CD_(25)~+调节性T细胞与动脉粥样硬化

动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病,而且炎性反应的起始与持续都有先天性和获得性免疫应答的参与。CD4+ CD25+调节性T细胞(CD4+ CD25+ Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,能够抑制效应T细胞的活性。过去许多研究已证实,CD4+ CD25+ Treg在动脉粥样硬化中起着重要作用,本文综述了CD4+ CD25+ Treg与动脉粥样硬化的关系。     

CD4+CD25+Treg细胞对角膜移植免疫排斥反应的影响

角膜移植排斥反应是由多种免疫细胞和免疫分子参与的复杂的免疫反应过程。CD4~+CD25~+Treg细胞介导的移植耐受,利用免疫系统的原始功能诱导供体产生特异性免疫耐受而不影响免疫系统的其它功能,为移植免疫排斥反应的防治提供新的思路。总结CD4~+CD25~+Treg细胞介导的移植耐受对角膜移植免疫排斥反应的影响,为深入了解Treg细胞功能及其相关免疫负调节机制对于角膜移植免疫排斥反应的影响提供理论依据。     

CD4+CD25+Treg细胞调节T细胞作用机制的实验研究

目的 :通过检测Treg细胞表达介导抑制性共刺激分子CTLA4和分泌抑制性细胞因子 ,并设置Treg细胞与效应性T细胞共培养和分隔培养实验模型 ,分析Treg细胞对效应性T细胞形成抑制作用的可能机制及各机制的主次要关系。方法 :对比分析Treg细胞与效应性T细胞膜分子CTLA4、CD2 8表达和细胞因子IL 10、TGF β1 分泌水平 ;以TransWellMillicell PCF分隔培养槽分隔培养Treg细胞与不同淋巴细胞组成的反应体系 ,采用向共培养及分隔培养体系加入与不加入IL 10、TGF β1 抗体的阻断方法 ,检测Treg细胞对不同组混合淋巴细胞反应的抑制效率。结果 :Treg细胞分泌IL 10和TGF β1 的浓度水平明显高于效应性T细胞 ,Treg细胞培养上清中IL 10和TGF β1 水平分别达到(380 0± 36 3)pg ml和 (790 0± 5 6 8)pg ml,Treg细胞分泌IL 10和TGF β1 的浓度水平与效应性T细胞比较 ,均有显著性差异 (P <0 0 1)。共刺激分子CTLA4、CD2 8在Treg细胞和效应性T细胞膜表面的表达水平存在明显差异 ,Treg细胞以表达CTLA4为主。Treg细胞对共培养体系混合淋巴细胞反应的抑制效率明显高于分隔培养 ,通过分泌IL 10对效应性T细胞的抑制作用亦明显强于通过TGF β1 。结论 :细胞接触机制是Treg细胞抑制效应性T细胞的主要作用机制 ,而细胞因子机制中     

哮喘患儿CD4+CD25+调节性T细胞及FOXP3的表达

目的:研究CD4+CD25+调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义.方法:采用细胞内染色的流式细胞术检测急性发作期哮喘患儿外周血CD4+CD25+Treg及其调控基因FOXP3的表达,并与健康对照组进行比较.结果:急性发作期哮喘患儿外周血CD4和CD25双阳性细胞所占比例与健康对照组无明显差异(P>0.05),而CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显低于健康对照组(P<0.01).结论:哮喘患儿外周血CD4+CD25+FOXP3调节性T细胞在外周血中的比例明显减少,可能与哮喘的发病机制有关.     

白癜风患者CD+4 CD+25调节性T细胞水平检测

目的探讨CD4 CD2 5调节性T细胞在白癜风发病的作用。方法用流式细胞仪直接免疫荧光检测进展期白癜风患者、接受NB-UVB治疗后的白癜风患者及正常人外周血CD4 CD2 5调节性T细胞的百分率。结果进展期白癜风患者CD4 CD2 5调节性T细胞百分比低于正常人,经NB-UVB治疗后的白癜风患者CD4 CD2 5调节性T细胞百分比较进展期白癜风患者明显提高,差异有显著性,与正常对照组相比差异无显著性。结论CD4 CD2 5调节性T细胞可能在白癜风的发病中起一定的作用。     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+调节性 T细胞和TGF-β1含量

  【目的】 了解初发系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1在SLE发病中的作用。 【方法】 流式细胞仪检测25例初发未治疗的SLE患者和15例健康对照者外周血单个核细胞中CD4+CD25+、CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞占CD4+ T 细胞的百分比,ELISA检测血清中TGF-β1含量。【结果】 SLE患者PBMC中CD4+CD25+ T细胞、CD4+CD25+Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞百分比均较健康对照组明显减少(分别为7.9 ± 2.2 vs 12.5 ± 5.3和2.1 ± 1.1 vs 4.0 ± 1.8,P < 0.05)。SLE患者血清中TGF-β1含量(pg/mL)低于健康对照组(214 ± 48 vs 419 ± 85,P < 0.05)。SLE患者PBMC中CD4+CD25+ T细胞?CD4+CD25+Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞的百分比以及血清TGF-β1的含量均与病情活动指数(DAI)成负相关(r分别 = -0.68?-0.56?-0.53, P < 0.05),但各型T细胞占CD4+ T细胞的百分比与血清TGF-β1的含量之间相关分析均无统计学意义。 【结论】 Treg与TGF-β1参与SLE的发病,两者均可作为病情活动的观察指标。且血清TGF-β1的含量与Treg占CD4+ T细胞的百分比在SLE中的下降趋势一致,提示两者之间存在一定的联系,推测是TGF-β1的不足导致Treg的生成减少。     

胃肠道恶性肿瘤患者CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的探讨胃肠道恶性肿瘤患者外周血及病理组织调节性T细胞(Tregs)的表达及临床意义。方法采用流式细胞仪对60例胃肠道恶性肿瘤患者及20例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞占CD4+T细胞(CD4+CD25+Foxp3+Tregs/CD4+T)的比率进行检测,采用免疫组化法检测相应患者病理组织中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达水平。结果胃癌、结直肠癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Tregs/CD4+T细胞的比率分别为(7.46±0.85)%和(7.79±1.19)%,与对照组(6.65±0.79)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。胃癌、结直肠癌病理组织中CD4+CD25+Foxp3+Tregs的表达平均阳性细胞绝对数为(53.52±16.31)和(58.15±14.86),与癌旁组织(6.53±2.68)比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌、结直肠癌患者外周血及病理组织中Tregs的高表达可能具有肿瘤免疫的抑制作用,并与肿瘤的发生、发展密切相关。     

重症肌无力胸腺中CD4+CD25+ Treg细胞分布与数量变化的临床意义

目的 探讨重症肌无力(myasthenia gravis, MG)患者胸腺内CD4 CD25 天然调节性T细胞(nTreg)的分布和数量变化及其临床意义.方法 采用免疫组化染色观察50例MG胸腺和20例正常胸腺CD25的表达, 同时采用流式细胞技术检测10例MG患者胸腺与外周血中CD4 CD25 T细胞在CD4 T细胞中的比例.结果 MG增生胸腺中CD25表达与对照胸腺相比显著升高(P＜0.05),与MGFA分期呈正相关.增生胸腺中CD4 CD25 细胞占CD4 细胞比例明显高于对照胸腺(P＜0.05),而外周血中CD4 CD25 T细胞比例无显著变化(P＞0.05).结论 胸腺内nTreg细胞数量的下降与MG自身耐受的破坏有重要的关系,进一步研究胸腺内nTreg细胞数量和功能的变化有助于了解MG的发病机制.     

BALB/c小鼠1型糖尿病模型的构建与CD4~+ CD25~+ Treg的检测

目的 探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导BALB/c小鼠1型糖尿病模型的方法,检测糖尿病模型中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的变化及意义.方法 将60只雄性BALB/c小鼠随机分为A、B、C、D 4组,每组15只,A组采用一次性腹腔注射150 mg/kg STZ,B组采用一次性腹腔注射与A组等量无菌柠檬酸缓冲液,C组采用200 mg/kg STZ分5次腹腔注射,D组采用与C组等量无菌柠檬酸缓冲液分5次腹腔注射,监测不同时点空腹血糖变化,A、B、C、D 4组均自由饮食.用流式细胞术检测成模前后外周血Treg细胞数的变化.结果 A组糖尿病成模率为86.67%,血糖在3周后稳定在较高水平且无明显下降;C组糖尿病成模率为93.33%,血糖的动态变化与A组相似;两组糖尿病成模率相比差异无统计学意义(P＞0.05);B、D组无糖尿病成模;非成模组与成模组外周血CD4+CD25+Treg分别为(4.05±0.37)%和(8.68±0.45)%,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 采用一次性腹腔注射STZ是构建BALB/c小鼠1型糖尿病模型较为理想的方法.外周血CD4+CD25+Treg的比例可作为1型糖尿病模型构建成功的参考指标.     

胰腺癌患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞分析

目的：探讨胰腺癌患者外周血高表达CD25的CD4＋调节性T（CD4^＋CD25^highT）细胞比率变化特点及其临床意义。方法：用流式细胞术检测58例胰腺癌患者和14名健康人外周血CD4^＋CD25^highT细胞水平,进行分层分析,初步探讨其表型特征。结果：胰腺癌患者外周血中CD4^＋CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的百分比率为（15.61±13.97）%,明显高于健康人群（2.53±1.26）%（P〈0.01）;CD4＋CD25highT细胞具有调节性T细胞的表面标记特征,即HLA-Ⅰ、CD45 RO阳性,CD45 RA、CD69阴性。人白细胞DR抗原的表达水平在不同个体间的CD4^＋CD25^highT细胞差异较大。这群细胞细胞膜表面共刺激分子CD80、CD86表达水平很低,而共刺激分子CD152（CTLA-4）在不同个体间的CD4^＋CD25^highT细胞差异较大。胰腺癌Ⅰ-Ⅱ期患者,其外周血CD4^＋CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比率为（18.75±20.76）%;Ⅲ期为（13.71±9.53）%;Ⅳ期为（14.20±7.46）%;各期CD4^＋CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比率均显著高于健康人群水平（P〈0.01）。结论：胰腺癌患者外周血CD4^＋CD25^highT细胞水平明显升高,可能与肿瘤免疫功能低下及肿瘤发生、发展密切相关。     

CD4+CD25+Foxp3+:与SLE疾病相关的Treg标志

目的:研究与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)病理活动相关的调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)标志?方法:分离正常人和SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs),用三色流式细胞术(flowcytometer,FCM)检测CD4和CD8 T细胞亚群的CD25?Foxp3表达,分析T细胞Foxp3+/CD4+T?CD25+Foxp3+/CD4+?Foxp3+/CD4+CD25+?Foxp3+/CD8+?CD25+Foxp3+/CD8+?及Foxp3+/CD8+CD25+的比值变化,及其与SLE疾病活动指数(SLE disease activity index,SLEDAI)?抗-dsDNA阳性?补体C3/C4水平降低?血清IgG水平增高?肾脏损害?关节病变?白细胞减少?疾病初/复发的关系?结果:①与正常人相比,SLE患者T细胞CD4+CD25+/CD4+比值无明显改变,但中/重度SLE患者外周血T细胞Foxp3+/CD4+?CD25+Foxp3+/CD4+?及Foxp3+/CD4+CD25+比值均显著下降,并与SLEDAI呈负相关;其中CD25+Foxp3+/CD4+比值还与SLE的抗-dsDNA阳性?补体C3/C4水平降低?血清IgG水平增高相关,在疾病初发?肾脏损害?白细胞减少患者该比值下降更为显著;②SLE患者CD8+ T细胞中CD25+?Foxp3+亚群比例未见明显减少,仅中/重度活动性SLE患者Foxp3+/CD8+CD25+比例减少,但与SLEDAI无相关性?结论:以CD25+Foxp3+作为Treg标志,可以明显反映出SLE患者CD4+ Treg存在数量缺陷,并与疾病活动性?免疫功能紊乱和病理损害密切相关,故将CD4+CD25+Foxp3+作为标志进行Treg检测对辨明SLE患者免疫系统功能状态具有一定的临床参考价值?     

TGF-β1上调CD4+CD25+调节性T细胞FOXP3的表达

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在肺癌患者CD4 CD25 调节性T细胞比例增高中发挥的作用.方法 采用酶消化法培养原代肺癌细胞,将培养的肺癌细胞及肺癌细胞培养上清液分别与自身来源的外周血单个核细胞共培养,不同浓度(2、5、10 ng/ml)的TGF-β1进行干预后,检测各组CD4 CD25 调节性T细胞标志物FOXP3 mRNA的表达.结果 肺癌细胞与外周血单个核细胞共培养组FOXP3 mRNA的表达呈阳性,且随着TGF-β1干预浓度的增加,FOXP3 mRNA的表达强度逐渐增高,两者呈正相关(r=0.663,P＜0.05);外周血单个核细胞经肺癌细胞培养上清液孵育后亦有FOXP3 mRNA的表达,TGF-β1干预后,FOXP3 mRNA的表达虽有上调但与干预前相比,差异无显著性意义(P＞0.05).结论 TGF-β1能上调外周血单个核细胞中FOXP3的表达,即增加CD4 CD25 调节性T细胞的比例,从而参与肺癌免疫逃逸机制.