异丙酚对肝移植术患者围术期血清TNF-α、IL-6和IL-10浓度的影响

目的 探讨异丙酚对肝移植术患者围术期血清TNF-α、IL-6和IL-10浓度的影响.方法 择期原位经典肝移植术患者20例,年龄38～52岁,ASA Ⅲ级,肝功能Child评分5～11分,随机分为2组(n=10):异丙酚组(P组)于麻醉诱导后即刻静脉注射异丙酚0.5 mg/kg,然后静脉输注2 mg·ks-1·h-1至术毕;对照组(C组)给予生理盐水.于麻醉诱导后即刻(T1)、无肝期之前5 min(T2)、新肝期之前5 min(T3)、新肝期15min(T4)、新肝期60min(T5)、新肝期3 h(T6)和术后4 h(T7)时,采集静脉血3 ml,采用酶联免疫吸附法测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-10(IL-10)浓度.结果 与T1时比较,2组T2-7,时血清TNF-α、IL-6和IL-10浓度升高(P＜0.05或0.01);与C组比较,P组,T1-7时血清TNF-α和IL-6浓度降低,T4时血清IL-10浓度降低(P＜0.05或0.01).结论 异丙酚可明显抑制肝移植术患者血清TNF-α和IL-6的释放,对IL-10无影响.     

异丙酚对LPS诱导中性粒细胞Toll样受体2和Toll样受体4表达的影响

目的 探讨异丙酚对内毒素(LPS)诱导中性粒细胞Toll样受体2(TLR2)和TLR4表达的影响.方法 健康志愿者6名,年龄20～35岁,各采集外周静脉血样50 ml,加入20 U/ml肝素抗凝,分离提纯中性粒细胞,制备细胞悬液,然后随机分为6组,每组6皿:对照组(C组)不给予任何药物,置于37℃、5%CO_2培养箱中培养12 h;异丙酚脂质溶剂intralipid组(I组)、异丙酚组(P组)和LPS组(L组):分别加入intralipid(终浓度为5 μg/ml)、异丙酚(终浓度为5 μg/ml)或LPS(终浓度为1μg/ml),置于37℃、5%CO_2培养箱中孵育12 h;intralipid+LPS组(IL组)和异丙酚+LPS组(PL组)先分别加入intralipid(终浓度为5 μg/ml)或异丙酚(终浓度为5 μg/ml)后,置于37℃、5%CO_2培养箱中孵育20 min,然后加入LPS(终浓度为1μg/ml),置于37℃、5%CO_2培养箱孵育12 h.采用流式细胞仪测定中性粒细胞膜TLR2和TLR4的表达;采用荧光定量PGR检测中性粒细胞膜TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达;采用ELISA法测定培养上清液TNF-α和IL-8的浓度.结果 与C组比较,I组和P组TLB2和TLR4的表达、1NF-α和IL-8L-8的浓度差异无统计学意义(P>0.05),L组和IL组TLR2和TLR4的表达上调,L组TNF-α和IL-8L-8的浓度升高,IL组IL-8浓度升高(P<0.05);与L组比较,IL组TLR2和TLR4的表达、TNF-α和IL-8L-8的浓度差异无统计学意义(P>0.05),PL组TLR2和TLR4的表达下调,TNF-α和IL-8L-8的浓度降低(P<0.05).各组TLR2 mRNA和TLR4 mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 异丙酚可下调LPS诱导的中性粒细胞TLR2和TLR4的表达,从而抑制炎性反应.     

七氟醚静-吸复合麻醉对原位肝移植手术患者围术期细胞因子的影响

目的观察七氟醚静-吸复合麻醉对原位肝移植手术患者围术期核因子-κB(NF-κB)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)的影响。方法 90例行经典非转流式原位肝移植手术的终末期肝病患者,随机均分为异氟醚组(I组)和七氟醚组(S组),两组均采用静-吸复合麻醉,静脉麻醉药为丙泊酚。分别于术前(T1)、无肝期前(T2)、无肝期35min(T3)、新肝期30min(T4)、新肝期2h(T5)及术后12h(T6),静脉采血检测TNF-α及IL-8。新肝再灌注后2h取部分移植肝组织,用于测定肝组织中NF-κB蛋白表达量及其入核后与靶基因的结合活性。结果与T1时比较,T3~T5时两组患者TNF-α、IL-8水平明显升高(P0.05或P0.01)。T3~T5时S组患者TNF-α、IL-8水平均明显低于I组(P0.05或P0.01);S组患者再灌注后肝组织中NF-κB蛋白表达量明显低于I组(P0.05)。结论与异氟醚比较,肝移植手术中应用七氟醚静-吸复合麻醉可以降低NF-κB、TNF-α和IL-8的表达,减轻肝缺血-再灌注损伤,对保护肝组织有利。     

加速康复外科策略对肝切除术患者术后早期认知功能的影响

目的探讨加速康复外科(ERAS)策略对肝切除术患者术后早期认知功能的影响。方法筛选96例原发性肝癌择期行肝部分切除术患者,随机分为两组,每组48例。C组实施常规围术期处理及麻醉方法,ERAS组实施ERAS策略对围术期处理及麻醉方法进行优化。于术前1d(T0)、术后1d(T4)、3d(T5)、7d(T6)应用简易智能量表(MMSE)评估两组患者认知功能,于T0、术后30min(T1)、6h(T2)、12h(T3)、T4取患者静脉血检测血清S100β蛋白、神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量和IL-1β、IL-6及TNF-α表达量。结果与C组比较,T4、T5时ERAS组MMSE评分明显升高,T1、T2时S100β蛋白、IL-1β、IL-6明显降低,T2、T3时NSE明显降低,T1~T3时TNF-α明显降低(P0.05)。与T0时比较,T4、T5时C组患者MMSE评分明显降低,T4时ERAS组MMSE评分明显降低(P0.05)。两组T1~T3时S100β蛋白明显升高,T2~T4时NSE含量明显升高,T1~T4时IL-1β、IL-6、TNF-α表达量均明显升高(P0.05)。结论 ERAS策略应用于肝癌肝切除术患者可改善患者术后认知功能,其机制可能与降低患者术后血清中S100β蛋白、NSE、IL-1β、IL-6及TNF-α的含量有关。     

心肺转流心内直视术围术期血清重要炎性细胞因子水平变化与全身炎性反应综合征

目的探讨心肺转流（CPB）心内直视术后血清主要炎性细胞因子水平变化及与全身炎性反应综合征（SIRS）之间的关系。方法选择60例CPB心内直视术患者,根据手术后是否发生SIRS,分成SIRS组和非SIRS组。围术期血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-18、IL-6、IL-8水平采用放射免疫方法测定。结果60例心内直视术患者术后26例合并SIRS,发生率为43％。其中2例继发多系统器官功能衰竭（MOF）而死亡。SIRS组血清TNF-α、IL-18、IL-6、IL-8水平及外周血中性粒细胞计数从CPB期间至术后第10天均较手术前对照值明显升高（P〈0．05或P〈O．01）,而且显著高于非SIRS组。结论CPB心内直视术后血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8水平明显升高者常合并SIRS,甚至继发MOF。     

大鼠供肝冷缺血时间与肝移植术后受者肺损伤的关系

目的 探讨大鼠供肝冷保存时间与肝移植术后受者肺损伤的关系。方法 用Wismr大鼠建立原位肝移植模型，按供肝冷保存时间的不同分为5组（n=10），A组为假手术组，B组、C组、D组及E组的供肝冷保存时间分别为45min、90min、120min及180min。各组大鼠在移植肝恢复血流180min后处死，观察肺组织病理学变化，测定肺组织湿干重比值（W／D）、肺组织中髓过氧化氢酶（MPO）的活性，同时检测肝脏流出道血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素18（IL-1β）的水平以及肺组织中TNF-α和IL-1β的表达。结果随着供肝冷保存时间的延长，肝脏流出道血清TNF-α和IL-1β水平及肺组织中TNF-α和IL-1β的表达均逐渐升高，肺组织W／D和MPO活性逐渐增高，肺损伤加重。结论供肝冷缺血时间与肝移植术后受者肺损伤相关，肺损伤随供肝冷缺血时间的延长而加重；血清中TNF-α和IL-1β升高及肺组织中TNF-α和IL-1β表达上调可能与肝移植后的肺损伤有关。     

异丙酚对LPS诱导BV-2小胶质细胞IL-1β和TNF-α释放的影响及TLR4在其中的作用

目的 评价异丙酚对LPS诱导BV-2小胶质细胞IL-1β和TNF-α释放的影响及Toll样受体4(TLR4)在其中的作用.方法 将体外培养的BV-2小胶质细胞接种于96孔培养板中,采用随机数字表法,将其随机分为4(n=12):对照组、LPS组、异丙酚组和LPS+异丙酚组.LPS组加入LPS1μg/ml孵育24h;异丙酚组加入异丙酚30 μmol/L孵育24 h;LPS+异丙酚组同时加入LPS 1 μg/ml和异丙酚30 μmol/L孵育24h.于孵育6h时,采用ELISA法检测细胞上清液TNF-α浓度,以此反映TNF-α的释放量,采用RT-PCR法测定TLR4 mRNA表达;于孵育24h时,采用ELISA法检测细胞上清液IL-1β浓度,以此反映IL-1β的释放量,采用Western Blot法检测TLR4蛋白表达.结果 与C组比较,LPS组和LPS+异丙酚组IL-1β和TNF-α的释放量升高,TLR4 mRNA及其蛋白表达上调(P＜0.05);与LPS组比较,LPS+异丙酚组IL-1β和TNF-α的释放量降低,TLR4 mRNA及其蛋白表达下调(P＜0.05).结论 异丙酚可抑制LPS诱导BV-2小胶质细胞IL-1β和TNF-α的释放,其机制与抑制TLR4的表达有关.     

戊乙奎醚对肝移植术患者新肝期炎性反应的影响

目的 探讨戊乙奎醚对肝移植术患者新肝期炎性反应的影响.方法 择期肝移植术患者60例,ASAⅡ或Ⅲ级,年龄20～64岁,体重46～83 kg,随机分为3组(n=20):对照组(C组)、戊乙奎醚0.1 mr,/kg组(Ⅰ组)和戊乙奎醚0.2 mg/kg组(Ⅱ组).均采用静吸复合全麻,于无肝期30 min开始,Ⅰ组和Ⅱ组分别静脉输注戊乙奎醚0.1、0.2 mg/kg,C组静脉输注等容量生理盐水.分别于无肝期30min(T0)、再灌注1、2、3、24 h(T1～4)时取上腔静脉血3 ml,放免法测定血清TNF-α及IL-1浓度,于T3时取新肝组织,测定肝细胞NF-κB蛋白表达及其活性;光镜下观察新肝病理学结果 .结果 与C组比较,Ⅰ组T1、Ⅱ组T1～3时血清TNF-α浓度降低,Ⅰ组和Ⅱ组T1,3时血清IL-1浓度降低,肝细胞NF-κB蛋白表达下调、活性降低(P<0.05);与Ⅰ组比较,Ⅱ组T1,2时血清TNF-α浓度降低,肝细胞NF-κB蛋白表达下调(P<0.05);Ⅰ组和Ⅱ组肝缺血再灌注损伤较C组减轻.结论 戊乙奎醚可通过抑制肝细胞NF-κB蛋白表达及其活性,降低肝移植术患者新肝期的炎性反应,从而减轻肝缺血再灌注损伤.     

术中静脉输注乌司他丁对非体外循环冠状动脉旁路移植术患者围术期肺功能的影响

目的 评价术中静脉输注乌司他丁对非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCABG)患者围术期肺功能的影响.方法 择期OPCABG患者24例,NYHA心功能分级Ⅰ或Ⅱ级,年龄65～75岁,随机分为对照组(C组,n=12)和乌司他丁组(U组,n=12).U组于气管插管后经30 min静脉输注乌司他丁6 000 U/kg,随后以1 000 U·kg-1·h-1的速率静脉输注至术毕,C组采用同样方法静脉输注等容量生理盐水.分别于术前(T1)、术毕即刻(T2)、术后4 h(T3)、8 h(T4)和20 h(T5)时测定血浆白细胞介素6(IL-6)浓度、中性粒细胞CD11b/CD18表达水平、血清一氧化氮(NO)浓度,并行血气分析,计算肺泡-动脉血氧分压差[P(A-a)O2]和呼吸指数(RI);记录重症监护室期间机械通气时间.结果 与T1时比较,C组T3.4时血浆IL-6浓度、T2～5时中性粒细胞CD11b/CD18表达水平、P(A-a)O2和RI升高,血清NO浓度降低,U组T2～5时P(A-a)O2和RI升高(P<0.05或0.01),其余指标差异无统计学意义(P<0.05);与C组比较,U组T3.4时血浆IL-6浓度、T2～5时中性粒细胞CD11b/CD18表达水平、T2.3时RI和P(A-a)O2降低,T2.3时血清NO浓度升高(P<0.05或0.01);C组重症监护室期间机械通气时间长于U组(P<0.05).结论 术中静脉输注乌司他丁可改善OPCABG患者围术期肺功能,其机制可能与降低全身炎性反应有关.     

术中物理降温时急性重症胆管炎手术病人围术期炎性反应的变化

目的评价急性重症胆管炎病人术中降温时围术期炎性反应的变化。方法12例急性重症胆管炎手术病人随机分为两组,每组6例。Ⅰ组未进行物理降温,Ⅱ组麻醉后进行物理降温, 保持术中体温36.7-37.3℃。于麻醉前(t1)、手术结束即刻(t2)、术后24 h(t3)采集静脉血,测定血清TNF-α,IL-6及IL-8的浓度。结果与Ⅰ组比较,Ⅱ组t1时中心体温、血清TNF-α、IL-6和IL-8浓度均无显著性变化(P>0.05),t2和t3时均降低(P<0.05)。两组t2和t3时中心体温、血清TNF-α、IL-6和IL-8 浓度较t1时降低(P<0.05)。结论急性重症胆管炎术中物理降温有助于减轻病人围术期的炎性反应。     

肝移植术病人围术期中性粒细胞Toll样受体2表达与术后SIRS的关系

Objectlve investigate the role of Toll-like receptor 2 (TLR2) on polymorphonuclear neutrophil (PMN) during perioperative period in the development of postoperative systemic inflammatory response syndrome (SIRS) in patients undergoing orthotopic liver transplantation (OLT).Methods Twenty patients (18 male and 2 female, aged 33-58 yr and weighing 52-73 kg) with ASA Ⅲ or Ⅳ (NYHA Ⅱ or Ⅲ )undergoing OLT were studied. Blood samples were collected from the central vein for determination of TLR2 expression on PMN and plasma TNF-α, IL-1β and IL-8 concentrations before induction of anesthesia (T1, baseline), at 25 min of anhepatic phase (T2), 3 h (T3) and 24 h after beginning of reperfusion of the allograft (T4). The expression of TLR2 was measured by flow cytometry and the serum concentrations of TNF-α, IL-1β and IL-8 were measured by enzyme linked immunosorbant assay (ELISA). The patients were divided into SIRS and non-SIRS group depending on whether the patients developed SIRS or not within 7 days after operation. The diagnosis of SIRS was based on the criteria laid down by ACCP and SCCM in 1992.Results Ten patients developed SIRS within 7 days after operation. There was no significant difference in Child-Turcotte-Pugh (CTP) scores between the two groups. Compared with non-SIRS group, the TLR2 expression on PMN and the serum IL-1β concentration were significantly increased at T4 and the serum IL-8 concentration was significantly increased at T3 in SIRS group.There was positive correlation between serum TNF-α concentration and TLR2 expression on PMN in SIRS group ( r= 0.607, P ＜0.05).Conclusion The expression of TLR2 on PMN increases significantly at 24 h after beginning of reperfusion of allograft and may play an important role in the development of postoperative SIRS.     

乌司他丁后处理及其联合预先给药对CPB下心脏瓣膜置换术患者心肌炎性反应的影响

目的 评价乌司他丁后处理及其联合预先给药对CPB下心脏瓣膜置换术患者心肌炎性反应的影响.方法 择期行CPB下心脏瓣膜置换术患者80例,性别不限,年龄21～59岁,心功能分级Ⅱ或Ⅲ级.采用随机数字表法,将患者随机分为4组(n=20):生理盐水对照组(C组)、乌司他丁预先给药组(U1组)、乌司他丁后处理组(U2组)和乌司他丁预先给药联合后处理组(U3组).U1组于气管插管后至升主动脉阻断前10 min经中心静脉输注乌司他丁500～ 1000 U·kg-1·min-(剂量20 000U/kg);U2组于主动脉开放前5～7 min经主动脉根部灌注乌司他丁4000～5000 U·kg-1·min-1(剂量10 000 U/kg);U3组进行乌司他丁预先给药联合后处理;C组给予等容量生理盐水.分别于升主动脉阻断前10 min(T1)、升主动脉阻断后40 min(T2)、主动脉开放后45 min(T3)和术毕(T4)时采集动脉血样,测定血浆IL- 10、IL-1、IL-6和TNF-α的浓度,并进行中性粒细胞(PMN)计数.于主动脉开放后45min时取右心耳组织,采用免疫组化法测定IL-6和IL-1β的表达.结果 与C组比较,U1组、U2组和U3组血浆IL-10浓度升高,血浆IL-1、IL-6、TNF-α的浓度和PMN计数降低,心肌组织IL-1β和IL-6表达下调(P＜ 0.05);与U1组和U2组比较,U3组T2-4时血浆IL-10浓度升高,血浆IL-1、IL-6、TNF-α的浓度和PMN计数降低,心肌组织IL-1β和IL-6表达下调(P＜0.05).结论 乌司他丁后处理可抑制CPB下心脏瓣膜置换术患者心肌炎性反应,联合预先给药时其效应增强.     

TLR4表达在大鼠小肠缺血再灌注损伤中的改变及意义

目的:观察大鼠小肠缺血再灌注（I/R）损伤后小肠组织TLR4的表达及其与炎症因子水平变化的关系。方法:雄性SD大鼠90只,随机分为正常对照（N）组、假手术（S）组、小肠部分缺血/再灌注损伤（肠I/R）组。分别于缺血再灌注后6，12，24,48 h检测各组小肠组织TLR4mRNA的表达，门静脉血清中TNF-α和IL-6水平，并进行相关性分析。用免疫组化法观察TLR4在小肠组织中的表达和分布。结果:（1）肠I/R组TLR4mRNA表达上调,于I/R12 h最强,阳性细胞主要是小肠黏膜细胞;（2）I/R组门静脉血清中IL-6及TNF-α浓度与N组相比各时点均明显增高（P<0.01）;在I/R24 h后达到峰值，与S组比较差异亦有显著性 (P< 0.01);（3） 肠I/R组门静脉IL-6及TNF-α浓度的增高与小肠TLR4mRNA表达的上调呈正相关（r=0.752，r=0.812;均P<0.01）;（4）免疫组化法显示小肠黏膜细胞表面TLR4表达明显增强。结论:大鼠小肠I/R损伤后,小肠组织TLR4的表达上调可能是导致肠黏膜免疫屏障功能下降的机制之一，也可能是系统性炎症反应的始动环节。     

胫骨癌痛大鼠脊髓Toll样受体4及其下游细胞因子表达的变化

目的 评价胫骨癌痛大鼠脊髓Toll样受体4(TLR4)及其下游细胞因子(TNF-α和IL-1β)表达的变化,探讨TLB4信号转导通路在骨癌痛中的作用.方法 健康雌性SD大鼠72只,体重150～180 g,随机分为3组(n=24):正常对照组(C组)、假手术组(S组)和胫骨癌痛组(BP组).BP组于大鼠左侧胫骨干骺端骨髓腔内注射5μl Walker 256(1×10~5)乳腺癌细胞制备胫骨癌痛模型,S组仅左侧胫骨上端注入Hank液5μl.于接种前(基础状态)、接种后2、4、6、9、12、14、16、18和21 d时行痛行为学评分,测定机械痛阈.于接种后6、12、18 d时行胫骨X线摄片,观察胫骨破坏情况,并于各时点取3只大鼠,处死后取L_(4～6)脊髓,测定TLR4、TNF-α和IL-1β的mRNA表达,各时点另取3只大鼠,处死后取L_(4～6)脊髓,计数TLR4阳性细胞;测定TLR4蛋白表达.结果 与基础值比较,BP组接种后6～21 d时痛行为学评分逐渐升高,机械痛阈逐渐降低(P＜0.05),C组和S组各时点痛行为学评分差异无统计学意义(P＞0.05).与C组和S组比较,BP组痛行为学评分升高,机械痛阈降低,TLR4 mRNA和蛋白、TNF-α mRNA和IL-1β mRNA表达上调,TLR4 阳性细胞计数增多(P＜0.05或0.01).BP组接种后6 d即可见左侧胫骨上端骨小梁轻微缺损,12 d时多处骨小梁缺损,骨皮质破坏,18 d时胫骨上端双侧骨皮质明显破坏,大片骨质缺损.结论 大鼠胫骨骨髓腔内肿瘤细胞通过激活脊髓TLR4,导致其下游细胞因子大量释放,而诱发骨癌痛.TLR4可能是胫骨癌痛潜在治疗靶点.     

瑞芬太尼对大鼠心肌缺血再灌注时血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度的影响

目的 探讨瑞芬太尼对大鼠心肌缺血再灌注时血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及白细胞介素-6(IL-6)浓度的影响.方法 雄性SD大鼠32只,体重200～250 g,随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IP组)和瑞芬太尼组(R组),每组8只.I/R组阻断冠状动脉左前降支(LAD)30 min,开放120 min;IP组阻断LAD 5 min,开放10 min,阻断30 min,开放120 min;R组静脉输注瑞芬太尼0.5 μg·kg-1·min-1 20 min,阻断LAD 30 min,开放120 min,此期间静脉输注100 μg/L瑞芬太尼,速率0.5 μg·kg-1·min-1.分别于再灌注120 min取颈内静脉血样,并取左心室心肌组织.ELISA法测定血清TNF-α、IL-Iβ及IL-6浓度,电镜下观察心肌细胞超微结构.结果 与S组比较,其余3组血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度升高(P＜0.01);与I/R组比较,IP组和R组血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度均降低(P＜0.01);与IP组比较,R组血清TNF-α和IL-1β浓度降低(P＜0.05).R组和IP组心肌细胞损伤程度轻于I/R组.结论 瑞芬太尼可通过降低血清TNF-α、IL-1β和IL-6浓度减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤.     

异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响

目的 探讨异氟烷对发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA表达的影响.方法 出生7 d的SD大鼠64只,随机分为2组(n=32):对照组(C组)和异氟烷麻醉组(I组).I组大鼠吸入1.5%异氟烷麻醉6 h,C组吸入空气.I组于麻醉前(T0,基础状态)、麻醉2 h(T1)、4 h(T2)、6 h(T3)、麻醉停止后4 h(L)、6 h(T5)、12 h(T6)、24 h(T7)时,C组在对应时点各取4只大鼠,测定海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA及TNF-α mRNA的表达水平.结果 C组各时点海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA比较差异无统计学意义(P＞0.05);与C组比较,I组海马T1～5 时IL-1βmRNA表达上调,T2,3 时IL-6 mRNA表达上调,T1～6时TNF-α mRNA表达上调(P＜ 0.05).结论 1.5%异氟烷麻醉可短暂上调发育期大鼠海马IL-1β mRNA、IL-6 mRNA和TNF-α mRNA的表达.     

右美托咪啶对脂多糖诱导大鼠外周血单核细胞Toll样受体4mRNA表达的影响

目的 探讨右美托咪啶对脂多糖(LPS)诱导大鼠外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)mRNA表达的影响.方法 健康雄性Wistar大鼠40只,取外周血分离培养单核细胞,采用随机数字表法,将其随机分为5组(n=8),A组:阴性对照;B组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml);C组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml)+右美托咪啶(终浓度为0.5 ng/ml);D组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml)+右美托咪啶(终浓度为5.0 ng/ml);E组:单核细胞中加入LPS(终浓度为1μg/ml)+右美托咪啶(终浓度为50.0 ng/ml).孵育24 h后,收集上清液,采用ELISA法测定TNF-α、IL-1β和IL-6的浓度,采用RT-PCR法测定TLR4 mRNA的表达.结果 与A组比较,B组TNF-α、IL-1p、IL-6的浓度升高,TLR4 mRNA表达上调(P＜0.01);与B组比较,C组、D组和E组TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度降低,TLR4 mRNA表达下调(P＜0.05或0.01);与C组比较,D组和E组TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度降低(P＜0.01),TLR4 mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05);D组和E组各指标比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪啶可通过下调TLR4 mRNA表达,抑制TLR4的合成,从而抑制LPS诱导大鼠外周血单核细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的生成与释放.

Abstract：

Objective To investigate the effects of different concentrations of dexmedetomidine on the expression of Toll-like receptor 4 (TLR4) mRNA in rat peripheral blood monocytes exposed to lipopolysaccharide ( LPS ). Methods Peripheral blood monocytes isolated from male Wistar rats were seeded in 24-well plate in RPMI 1640 liquid culture medium in CO2 incubator at 37 ℃ and 5% CO2 for 2 h, and were randomly divided into 5 groups ( n = 8 each): group A negative control; group B was exposed to LPS 1 μg/ml and C, D and E groups were exposed to LPS 1 μg/ml + dexmetomidine 0.5, 5.0 and 50.0 ng/ml respectively. The monocytes were then incubated for 24 h. The concentrations of TNF-α, IL-1β and IL-6 in the supernatant of the cultured monocytes were detected by ELISA. The expression of TLR4 mRNA in the monocytes was detected by RT-PCR.Results Exposure to LPS significantly increased the expression of TLR4 mRNA and the concentrations of TNF-α, IL-1β and IL -6 in group B as compared with group A ( P ＜ 0.01 ). Dexmedetomidine attenuated the LPS-induced increase in the expression of TLR 4 mRNA and the concentrations of TNF-α, IL-1β and IL-6 in a dose-dependent manner ( P ＜0.05or 0.01 ). Conclusion Dexmedetomidine can inhibit the synthesis of TLR4 and inhibit the secretion and dilivery of TNF-α, IL-1β and IL-6 by down-regulating the gene expression of TLR4 in rat peripheral blood monocytes exposed to LPS.     

危重烧伤患儿血小板计数变化及其临床意义

目的探讨严重烧伤患儿血小板变化及其意义。方法对37例严重烧伤患儿进行回顾性分析,观察烧伤患儿各病程血小板参数的动态变化,并根据患儿入院时有无全身炎性反应综合征(SIRS)将患儿分为两组,即SIRS组(n=19)和非SIRS组(n=18),观察SIRS对血小板计数的影响。同时分析死亡组和存活组血小板计数的动态变化。结果PLT和PDW各病程之间差异有统计学意义(P<0.05),烧伤后SIRS组和非SIRS组的血小板水平比较差异有统计学意义(P<0.01),在存活组和死亡组的比较中,死亡组血小板计数持续减少,存活组在短暂的减少后则逐步回复至正常。结论SIRS是影响血小板计数的重要因素,血小板计数是观察严重烧伤患儿预后和病情严重程度的重要指标。