黄芪对自然衰老小鼠肠道功能及菌群稳态的作用研究

伴随着衰老的进程,机体内多个组织、器官功能发生退行性改变。肠道功能失调及菌群稳态失衡是老年人常见表现。本研究旨在探讨黄芪对自然衰老小鼠肠道功能及菌群稳态的影响,为进一步的抗衰老机制研究提供依据。采用自然衰老小鼠模型,动物实验遵循南京中医药大学动物伦理委员会规定。首先采用“虚弱指数”综合评分对小鼠衰老表型进行整体评价。检测小鼠肠道葡萄糖吸收能力、肠道运输时间、肠道脂肪酶以及淀粉酶的活性,评估肠道吸收和运输功能,酶联免疫吸附法(ELISA)检测结肠炎症因子水平,苏木精-伊红(H&E)染色评价肠道绒毛长度,阿立新蓝(AB)染色评价肠道黏膜厚度及杯状细胞数量,利用qRT-PCR方法检测肠道干细胞增殖与分化相关基因的转录水平, 16S rDNA测序分析肠道菌群组成。结果显示,在衰老整体表型方面,黄芪具有降低衰老小鼠“虚弱指数”的趋势,但并没有显著性差异。在衰老表型的某些指标上,黄芪对衰老小鼠毛发以及体能的改善作用最为显著。在肠道功能方面,黄芪可增加衰老小鼠肠道葡萄糖吸收能力,缩短肠道运输时间,促进脂肪酶分泌。黄芪可降低衰老小鼠肠道组织中炎症因子如肿瘤坏死因子α (TNF-α)、白介素6 ...     

三才汤氯仿提取液对小鼠脑SOD、Na、K~ -ATPase活性及MDA含量的影响

本实验研究以D-半乳糖衰老模型小鼠为研究对象,探讨了三才汤氯仿提取液对小鼠脑SOD、Na、K －ATPase活性及MDA含量的影响。结果表明三才汤氯仿提取液能显著提高小鼠脑SOD、Na、K －ATPase的活性（P＜o．o1）,降低脑MDA含量,提示三才汤氯仿提取液可延缓小鼠脑衰老。     

三才汤乙醇提取液对D-半乳糖衰老小鼠脑抗氧化作用的实验研究

为探讨三才汤抗衰老机理,本实验采用D-半乳糖衰老小鼠,灌胃三才汤醇提液30d,测定衰老小鼠脑SOD、NOS、Na+,K+－ATP酶活力和NO、MDA含量．实验结果表明,与模型组相比,三才汤醇提液能提高衰老小鼠脑SOD、NOS和NA+,K+－ATP酶的活性（P＜0.01和P＜0．05）,降低脑组织MDA含量（P＜0.01）,提高脑NO含量（P＜0．01）,提示三才汤醇提液对衰老小鼠脑有抗氧化作用,可延缓小鼠脑衰老。     

三才汤氯仿提取液对小鼠脑SOD,Na,K^＋—ATPase活性及MDA含量的 …

本实验研究以Ｄ－半乳糖衰老模型小鼠为研究对象,探讨了三才汤氯仿提取液对小鼠脑ＳＯＤ、Ｎａ、Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性及ＭＤＡ含量的影响。结果表明三才汤氯仿提取液能显著提高小鼠脑ＳＯＤ、Ｎａ、Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ的活性（Ｐ〈０．０１）,降低脑ＭＤＡ含量,提示三才汤氯仿提取液可延缓小鼠脑衰老。     

研究发现饮食对个体肠道菌群环境改变起重要作用

近日，来自加州大学旧金山分校和哈佛大学 peter J, Turnbaugh 研究小组的一项最新研究成果，他们利用5种不同的近交系小鼠和＞200只远交群小鼠发现相比于宿主基因型，饮食对个体肠道菌群环境改变起到更为重要作用。虽然人类或者同种类哺乳动物之间的肠道菌群存在一些相类似特征，但是仍然存在很大差别，这种差别主要由宿主基因型不同导致还是主要受到外部因素，仍不清楚。因此 Rachel N, Carmody 等为解决这个问题，选用5种不同近交系小鼠，4种转基因小鼠和最近得到广泛应用的多样性远交群小鼠（DO）系统性分析饮食摄取和宿主基因型对肠道菌群的影响。研究发现，在给与近交系小鼠高脂饮食和高糖饮食刺激后，近交系小鼠的肠道菌群因饮食不同出现两个明显不同的群落，但同时也发现，不同近交系小鼠在受到高脂和高糖饮食刺激后，肠道菌群改变的方向也因宿主基因型不同和宿主肠道菌群背景不同而存在差异。     

天地汤醇提液对衰老模型小鼠脑SOD活性和MDA含量的影响

目的；为了探讨天地汤抗衰老的机制。方法：采用D—半乳糖致衰老小鼠灌胃天地汤的乙醇提取液30d，测定衰老小鼠脑的SOD活性和MDA含量。结果：天地汤的乙醇提取液能显著提高衰老小鼠脑SOD活性和MDA含量(P＜0．01)。结论：天地汤醇提液对衰老小鼠脑有抗氧化作用，可延缓小鼠脑衰老。     

饮水摄入抗生素对小鼠肠道菌群的影响

目的 采用抗生素饮水饲喂小鼠，观察抗生素对肠道菌群的影响。方法 高通量测序，分析肠道菌群的共有和特有OTUs、多样性和复杂度；PCA、NMDS、PCoA和UPGMA聚类树作多样本比较分析；聚类热图和柱状图分析小鼠肠道菌群相对丰度并预测肠道菌群功能的改变。结果 饮水摄入抗生素能够显著降低肠道菌群的物种丰富度、多样性、复杂度，升高优势菌群的总体占比，变形菌门的肠道细菌对抗生素的拮抗能力更强，并可能影响其功能。结论 抗生素具备改变肠道菌群的作用，需做好食品特别是饮用水受其污染的防控工作。     

基于调控脑肠轴探索解毒化瘀汤改善阿尔茨海默病小鼠认知功能的机制

目的研究解毒化瘀汤(黄连解毒汤加味方)对阿尔茨海默病(AD)模型小鼠学习、记忆障碍的影响及调控机制。方法侧脑室定位注射寡聚化Aβ42制备AD小鼠模型,灌胃给予黄连解毒汤、低剂量或高剂量解毒化瘀汤3周,多奈哌齐灌胃作为阳性对照。3周后,水迷宫、T迷宫、Y迷宫等检测小鼠学习、记忆功能;超高效液相色谱质谱联用(UPLC-Q-TOF/MS)分析比较黄连解毒汤原方和解毒化瘀汤的化学成分组成;飞行时间质谱联用技术(GC-TOF/MS)检测不同组别小鼠海马代谢物质的变化;16S rDNA检测不同组别小鼠肠道菌群多样性变化;Western印迹和免疫组化等手段检测信号通路表达变化。结果相较黄连解毒汤组,高剂量解毒化瘀汤显著改善了AD模型小鼠的学习、记忆障碍。UPLC-Q-TOF/MS结果显示,与黄连解毒汤相比,在解毒化瘀汤中,谷氨酸和天冬氨酸等氨基酸含量更丰富。分子生物学结果提示,解毒化瘀汤上调了AD模型小鼠海马NMDA受体亚基(NR1,NR2A和NR2B)的表达。基于GC-TOF/MS的代谢组学检测结果表明,相较黄连解毒汤,解毒化瘀汤显著提高了AD模型小鼠海马的腺苷水平。结合分子生物学,解毒化瘀汤同时也上调了腺苷下游的ATPase/AMPK信号通路。16S rDNA肠道菌群检测结果表明,解毒化瘀汤调控了AD模型小鼠肠道Firmicutes,Bacteroidetes,Proteobacteria等菌属的多样性。通过对代谢组学和肠道菌群进行的相关性分析,最终鉴定出Dorea是响应解毒化瘀汤上调AD模型小鼠海马腺苷水平的肠道菌属。结论相较黄连解毒汤原方,解毒化瘀汤显著改善AD模型小鼠的学习、记忆障碍,通过调控NMDA/ATPase/AMPK信号通路上调AD模型小鼠海马腺苷和肠道Dorea菌属水平,重塑大脑和肠道的沟通。上述研究提示,解毒化瘀汤可能是治疗AD的新型有效药物。     

厌氧—1号活菌制剂对抗生素菌群失调小鼠肠道菌群的影响

本实验用抗生素造成小鼠肠道菌群失调的模型，然后给小鼠灌喂厌氧-1号菌液（1亿活菌／ml）0.5ml，7d后查肠道菌群与自然恢复组比有显著差别，说明厌氧-1号活菌制剂对菌群失调小鼠肠道菌群具有调整作用．     

芒硝对正常小鼠肠道菌群的影响

目的：探究芒硝对小鼠肠道菌群的影响。方法：将SPF级ICR小鼠分为空白对照组、芒硝低剂量组和芒硝高剂量组。在灌胃3周后,无菌条件下收集小鼠粪便,扩增肠道菌群16SrRNA基因高变域V3-V4,检测小鼠肠道菌群的Alpha多样性、Beta多样性,线性判别筛选差异肠道菌群。结果：与对照组相比,高芒硝组小鼠肠道菌群丰富度提高;Beta多样性结果显示各组层级聚类均能较好地分开;线性判别分析显示在门、纲、目、科、属水平上,经芒硝处理后小鼠肠道菌群相对丰度会发生变化,其中高剂量芒硝组的Ruminococcus丰度明显提高。结论：芒硝能够调整肠道菌群内组成结构,提高菌群丰度,特别是益生菌的水平。     

无花果叶对糖尿病小鼠抗氧化及肠道菌群影响

目的 探讨无花果叶提取物对链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病小鼠的抗氧化能力及肠道菌群的影响。方法 糖尿病小鼠随机分为模型组、无花果叶二氯甲烷萃取组、正丁醇萃取组和水萃取组(n=10),连续干预4周后观察其对小鼠血糖、体重、血脂以及肝脏抗氧化指标的影响。利用16S rRNA基因测序分析小鼠肠道菌群的多样性及菌群结构的变化。结果 与模型组相比，无花果二氯甲烷萃取物显著降低糖尿病小鼠的血脂水平(P<0.05),抗氧化能力明显高于其他组。无花果叶不同萃取物能减轻肠道菌群的紊乱，且二氯甲烷萃取物对厚壁菌门/拟杆菌门的比值上调趋势更明显。结论 二氯甲烷萃取物不仅能抑制糖尿病小鼠氧化-抗氧化失衡，对肠道菌群也具有一定的调节作用。     

芪附汤对衰老小鼠免疫功能的影响

目的：研究芪附汤对衰老小鼠免疫功能的影响。方法：用不同剂量黄芪组方的芪附汤连续每日喂服18月龄小鼠35d后，测其免疫功能。结果：各剂量组芪附汤均可增强小鼠脾细胞对刀豆蛋白A（ConA)的增殖反应，原剂量和大剂量组芪附汤可增强小鼠脾细胞产生抗体的能力及腹腔巨噬细胞活性，结论：芪附汤能明显地提高衰老小鼠的免疫功能，具有延缓衰老的作用。     

桑叶多糖调节小鼠肠道菌群失调的研究

目的研究桑叶多糖对小鼠肠道菌群失调的调节作用。方法利用盐酸林可霉素诱导小鼠肠道菌群失调。将造模成功的小鼠随机分为桑叶多糖组、乳酶生组、模型组,另设置对照组。桑叶多糖组小鼠ig 6.0 mg/m L桑叶多糖溶液0.6 m L(剂量0.144 mg/g),乳酶生组小鼠ig 5.5 mg/m L乳酶生混悬液0.6 m L(剂量0.132 mg/g)。2次/d,连续给药7 d。模型组、对照组小鼠自行饮水。取小鼠的新鲜粪便,提取肠道菌DNA。16S段DNA序列扩增,变性梯度凝胶电泳(DGGE)法分析。比对各条带及样品,进行聚类分析,对各组小鼠肠道微生物群落结构进行主成分分析。结果 DGGE直观图分析,经过自然恢复、桑叶多糖和乳酶生的作用,小鼠肠道菌群种类有了明显的增加,但与对照组小鼠的肠道菌群比较仍然有差别,并不能完全恢复到原来的水平。聚类分析结果可以看出,与对照组最接近的是乳酶生组,其次是桑叶多糖组,最后是自然恢复组。菌群落结构的主成分分析可以直观地看出,桑叶多糖、乳酶生组小鼠肠道菌群与对照组关系最近,模型组与对照组肠道菌群及其他组肠道菌群的差异明显。结论桑叶多糖对小鼠肠道菌群失调有调节作用。     

厌氧-1号活菌制剂对小鼠高脂血症模型肠菌群的影响

本实验应用血脂检测与肠道菌群检查法，探讨了对人工高脂血症小鼠模型灌喂厌氧-1号活菌制剂后小鼠血脂变化及其肠道菌群的相应变化．结果表明，用药第7天血脂即明显下降，与空白对照组比，（P＜0.01）血清胆固醇，降低率为45．1％．各治疗组小鼠肠道嗜酸乳杆菌及肠球菌明显高于空白对照组，至第14天各组间无显著差别。第14天后血脂均恢复正常水平．     

扶正固本丸对小鼠肠道菌群的影响

本文报告应用扶正固本丸对小鼠肠道内与人类关系密切的主要菌群的影响。用大黄水煎液灌胃予小鼠,造成实验性脾虚模型,引起小鼠肠道内菌群紊乱,其中双歧杆菌、乳杆菌菌量均下降,与对照组相比有显著性差异。当服用扶正固本丸后,双歧杆菌、乳杆菌均上升至正常值水平。本研究表明,扶正固本丸对小鼠肠道菌群的失调具有一定的促进作用。     

丹参茎叶总酚酸对2型糖尿病肾病小鼠肠道菌群和短链脂肪酸的调节作用

为研究丹参茎叶总酚酸对自发性2型糖尿病肾病小鼠的肠道菌群和短链脂肪酸的调节作用,以db/db小鼠为研究对象,进行丹参总酚酸干预.动物福利和实验过程均遵循南京中医药大学药物安全性评价研究中心动物伦理委员会的规定.采集小鼠新鲜粪便及盲肠内容物进行肠道菌群组成和差异菌群等分析;采用气相色谱法检测短链脂肪酸含量,并与肠道菌群进...     

甲壳低聚糖对糖尿病小鼠血糖和肠道菌群的影响

目的观察甲壳低聚糖对链脲佐菌素 (STZ)糖尿病小鼠血糖和肠道菌群的影响。方法将用STZ诱导的糖尿病模型小鼠分为糖尿病治疗组和糖尿病对照组 ,分别灌胃甲壳低聚糖 60 0mg (kg·d)和等体积的蒸馏水 ,连续 2 1d ,而后检测两组小鼠血糖及肠道菌群的变化。结果糖尿病治疗组小鼠的血糖降低、肠道菌群中双歧杆菌数量增多 ,与糖尿病对照组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论甲壳低聚糖具有降低STZ糖尿病小鼠血糖及调节肠道菌群功能     

中药褐多孔菌对实验性大肠癌小鼠肠道正常菌群调整的作用

目的:探讨中药褐多孔菌对大肠癌小鼠肠道正常菌群的影响.方法:本实验设三组:肿瘤对照组;中药组;微生态调节剂加中药组.以大肠癌裸鼠移植瘤为动物模型,观察肠道菌群用药前后的变化.结果:中药组在肠道菌群调节能力上优于对照组,微生态调节剂加中药组优于用药组.结论:表明褐多孔菌有明显的调整肠道菌群的作用,同时可抑制大肠癌的生长.     

基于肠道菌群发现用于治疗Treg缺失免疫缺陷病的新药

目的肠道菌群紊乱与机体多种免疫失衡疾病的发生密切相关,如自身免疫性疾病、肿瘤和代谢综合征等。正是由于肠道菌群的稳定对人体健康至关重要,因此肠道微生态药物已经成为了现在研究与发展的热门产业。本研究挖掘肠道菌群及其代谢产物,发现可用于治疗Treg缺失免疫缺陷病的益生菌和天然产物。方法利用16S r DNA测序技术对Treg缺失介导的自身免疫性疾病模型小鼠的肠道菌群进行检测;用代谢组学技术检测模型小鼠肠道菌群代谢组谱的变化;用分子生物学、基因敲除小鼠等研究益生菌和代谢物作用的分子机制。结果在Treg缺失介导的免疫缺陷病模型小鼠上,肠道菌群发生了严重的紊乱。根据肠道菌群和代谢组谱的变化,选择罗伊氏乳酸杆菌(L. reuteri)和代谢产物肌苷处理Treg缺失小鼠,L. reuteri和肌苷通过激活腺苷受体A2AR抑制了Treg缺失引起的自身免疫性疾病。结论肠道菌群含有大量的微生物以及产生的许多独特代谢产物,可以作为新型天然药物的重要源泉,用于发现治疗自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的新型益生菌和活性天然产物。     

^60Co辐射后肠道菌群改变的实验研究

目的:为研究辐射后肠道微生态的变化,本实验选用昆明种小鼠,应用60Co r 射线制备小鼠辐射损伤模型,并对辐射小鼠肠道腔菌群与膜菌群进行定量分析。结果:辐射损伤状态下肠道专性厌氧菌数量明显减少,肠杆菌与双歧杆菌比例倒置;表明辐射时肠道微生态发生了明显的改变。