胃神口服液对胃癌前病变大鼠作用机理及方剂解析

在临床疗效被肯定的基础上,首先建立了大鼠胃癌前病变模型,并借助该模型,通过胃神口服液及其拆方(软坚散结方、活血化瘀方、清热解毒方), 从组织形态学、超微结构、细胞代谢、细胞增殖与凋亡、细胞免疫等方面观察各组药物的作用特点, 进一步探讨胃神口服液治疗胃癌前病变的作用机理及其方剂的配伍意义.其实验结果表明:     

复胃煎对胃癌前病变大鼠胃粘膜VEGF、COX-2表达的影响

目的：观察中药复胃煎对胃癌前病变大鼠胃粘膜血管内皮生长因子（VEGF）及环氧合酶-2（COX-2）等相关因子表达的影响。方法：建立大鼠胃癌前病变模型,高、中、低剂量中药观察组分别按复胃煎汤剂高、中、低剂量给予每日灌胃,中药对照组予中剂量汤剂每日灌胃,空白对照组和模型对照组大鼠予等体积生理盐水灌胃。采用免疫组化方法检测COX-2及vEGF在大鼠胃组织中的表达;RT-QPCR法检测大鼠胃组织COX-2及VEGFmRNA的表达。结果：高、中、低剂量中药观察组COX-2、VEGF及其mRNA的表达较模型对照组低（P〈0．05）;高剂量中药观察组vEGF及其mR—NA表达量低于中药对照组（P〈0．01）及中药低剂量组（P〈0．05）。结论：中药复胃煎能够降低胃癌前病变大鼠胃组织COX-2、VEGF及其mRNA的表达;并且与VEGF的表达存在一定量效关系。     

善胃I号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组均明显降低（P〈0．05）,而其Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组明显增高（P〈0．05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2蛋白的表达,且促进Bax蛋白的表达,从而促进癌前病变细胞的凋亡,对胃癌前病变的发生、发展进行干预。     

活血化瘀、软坚散结法对子宫内膜异位症自然杀伤细胞活性影响的实验研究

目的　观察活血化瘀、软坚散结法 (代表方为妇痛宁颗粒 )对大鼠子宫内膜异位症模型自然杀伤 (NK)细胞活性的影响 ,分析其获效机制。方法　采用手术移植法制备大鼠子宫内膜异位症模型。实验共分 6组 ,即正常对照组、模型对照组和妇痛宁高、中、低剂量组及丹那唑组 ,每组 1 0只 ,观察 6组脾脏NK细胞活性。结果　模型对照组大鼠脾脏NK细胞活性显著低于正常对照组 (P <0 .0 1 )。妇痛宁高、中、低剂量组能够明显提高模型大鼠的脾脏NK细胞活性 ,与模型对照组比较有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,其中中剂量组疗效明显优于高剂量组 (P <0 .0 5 )。结论　子宫内膜异位症大鼠模型存在NK细胞功能异常。活血化瘀、软坚散结法的代表方妇痛宁颗粒冲剂对子宫内膜异位症模型大鼠脾脏NK细胞活性具有显著的调整作用 ,提示可能通过提高NK细胞活性达到治疗子宫内膜异位症的目的。     

和胃口服液对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜萎缩及细胞凋亡影响的实验研究

目的：观察和胃口服液对慢性萎缩性胃炎（CAG）大鼠胃黏膜萎缩及细胞凋亡的影响。方法：Wistar大鼠随机分为4组，正常组、CAG模型对照组、胃复春对照组、和胃口服液治疗组。以40％酒精加60℃热糊灌胃进行造模。观察各组大鼠精神状态、活动情况、毛发光泽度、食欲及大小便等情况。20周后处死大鼠，大体观察胃黏膜萎缩情况及病理组织切片观察，并以TDT介导的末端平移标记法（TUNEL）捡测胃黏膜萎缩情况。结果：CAG模型对照组大鼠胃黏膜表现以中～重度的萎缩为主，部分有不同程度的不典型增生，经和胃口服液干预治疗后，大鼠胃黏膜萎缩程度明显减轻；同时，CAG模型对照组大鼠胃黏膜细胞凋亡指数（AI）明显高于正常对照组，差异有非常显著性（P〈0．01），和胃口服液治疗组凋亡细胞数与模型对照组比较，差异有显著性（P〈0．05）。结论：和胃口服液能有效逆转CAG大鼠胃黏膜腺体萎缩，阻断CAG的发展；能调控CAG大鼠的黏膜细胞凋亡，对萎缩性胃炎有较好的干预治疗作用。     

姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠IL-2、NK细胞的调节及抑瘤作用

目的 探讨中药姬松茸菌孢多糖对胃癌大鼠IL-2、NK细胞的调节及抑瘤作用。方法 将Wistar大鼠 随机分为5组,除空白对照组外,其余4组均经免疫抑制处理(注射阿糖胞苷与60Co全身照射),皮下接种胃癌细胞 悬液,制成胃癌大鼠模型。其中3组分别用姬松茸菌孢多糖大、小剂量及香菇多糖灌胃治疗,正常对照组和模型对照 组分别用相等剂量的生理盐水灌胃。10 d后,观察各实验组肿瘤生长情况及相关免疫指标IL-2、NK细胞的含量或 活性。结果 胃癌大鼠模型组与正常对照组比较,IL-2含量及NK细胞杀伤活性均显著降低(P<0．01)。用药灌胃 后,IL-2含量及NK细胞杀伤活性均显著提高(P<0．01),瘤块明显减小(P<0．01);姬松茸菌孢多糖组的治疗效果 优于香菇组(P<0．05)。结论 姬松茸菌孢多糖有促进胃癌大鼠IL-2、NK细胞免疫功能及抑制肿瘤生长的作用。     

善胃Ⅰ号方对胃癌前病变大鼠胃黏膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的：通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法：将80只健康Wistar大鼠随机分为四组,即正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃黏膜中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果：善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组（P〈0.05）均降低,较正常对照组明显增高（P（0.05）,善胃Ⅰ号方组Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物对照组明显增高（P（0.05）。结论：善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃黏膜Bcl-2蛋白的表达并促进Bax蛋白的表达,从而促进胃癌前病变细胞凋亡对胃癌前病变的发展进行干预的。     

呕必宁对顺铂诱发脑及胃组织SP及NK1受体改变的影响

目的：观察呕必宁对顺铂诱发大鼠胃、延髓组织SP含量及NK1受体表达改变的影响，探讨呕必宁防治顺铂诱发呕吐机制同时，为中医学“胃气上逆”等理论提供实验依据。方法：Wistar大鼠54只，分成对照组、模型组和中药组，分别灌服盐水、呕必宁煎液6天时，对照组腹腔注射盐水，余两组注射顺铂48h后，取延髓、胃组织，放免法检测SP含量，免疫组化法检测NK1表达，并进行灰度值测定。结果：模型组大鼠胃窦及延髓组织SP含量、NK1表达高于对照组和中药组（P〈0．01）；中药组SP含量及NK，表达与对照组无明显差异（P〉0．05）。结论：呕必宁能够抑制顺铂所致大鼠胃、延髓组织SP升高及NK1表达。大鼠胃及延髓组织SP增多、NK1表达上调可能是“胃气上逆”的病理学基础之一。     

益气化淤中药对大鼠胃癌前病变蛋白激酶C蛋白表达的影响

目的观察益气化淤中药时大鼠胃癌前病变胃黏膜蛋白激酶C（PKC）表达的影响。方法采用MNNG、乙醇、饥饱失常等多因素造模。造模型成功后，将造模存活大鼠随机分为自然恢复组，中药高、中、低剂量组，各组大鼠作相应的处理后，免疫组化法检测各组大鼠胃黏膜组织PKC表达水平。结果各治疗组PKC表达较自然恢复组下调，有显著性差异（P〈0．05）。结论益气化瘀中药可能是下调PKC的表达，抑制细胞增殖，诱导细胞凋亡，而发挥时大鼠胃癌前病变的治疗作用。     

胃癌前病变大鼠中抑癌基因APC、P16表达与浊毒的相关性研究

目的：观察化浊解毒中药对胃癌前病变模型大鼠胃黏膜APC、P16蛋白表达的影响,探讨胃癌前病变大鼠中抑癌基因APC、P16的表达与浊毒之间所存在的相关性。方法：采用结合致癌物的综合造模方法复制胃癌前病变大鼠模型,将造模大鼠随机分为化浊解毒中药组（以下简称＂中药组＂）、模型对照组、空白对照组3组。造模成功后中药组给予化浊解毒中药灌服,模型对照组和空白对照组均给予生理盐水灌胃。连续给药4周后将大鼠断头处死,解剖取胃,石蜡包埋连续切片,用免疫组化方法检测胃黏膜APC和P16蛋白的表达。结果：与空白对照组相比,模型组大鼠胃黏膜APC和P16蛋白的表达明显降低（P〈0.05）。与模型对照组比较,中药组大鼠胃黏膜APC和P16蛋白的表达明显升高（P〈0.05）。结论：化浊解毒中药能上调胃癌前病变大鼠抑癌基因APC、P16的水平,增加APC、P16蛋白的表达,从而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,说明胃癌前病变大鼠中抑癌基因APC、P16表达与浊毒之间存在相关性。