复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化TGF-β1/Smads信号通路的影响

目的 探讨复方三七饮(CPNG)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为6组:正常组、模型组、醋酸泼尼松组、CPNG大、中、小剂量组[CPNG(H、M、L)],每组10只.经气管内注入BLM(5mg/kg)制备大鼠肺纤维化模型.造模第2天,治疗组分别灌服醋酸泼尼松3.33 mg/(kg ·d)、CPNG大、中、小剂量(100、50、25) mg/(kg·d),正常组和模型组大鼠灌服等体积的蒸馏水,1次/d.28 d后处死大鼠,HE染色和Masson染色进行肺组织病理学观察;碱水法测定肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量;Western blot法检测TGF-β1、Smad2、Smad7蛋白的表达水平.结果 与模型组大鼠比较,肺组织的病理组织学HE和Masson染色显示CPNG能明显减轻大鼠肺泡炎和肺纤维化程度(P＜0.01);CPNG各剂量组大鼠肺组织中HYP降低(P ＜0.01);CPNG各剂量组TGF-β1、Smad2蛋白的表达水平降低(P＜0.01),Smad7蛋白表达水平升高(P＜0.01).结论 复方三七饮对博莱霉素致大鼠肺纤维化具有一定的防治作用,可能与调节TGF-β1/Smads信号通路有关.     

大黄素通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1通路的活性减轻大鼠肺纤维化北大核心CSCD

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路在大黄素抗肺纤维化中的作用。方法按随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为6组:正常对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量组(20 mg/kg)、大黄素高剂量组(80 mg/kg)和泼尼松组(5 mg/kg),每组10只大鼠。假手术组大鼠气管内注入生理盐水,而后4组大鼠气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型,次日起,大黄素低、高剂量组大鼠分别以20 mg/kg、80 mg/kg大黄素2 m L灌胃,泼尼松组予5 mg/kg醋酸泼尼松2 m L灌胃,其余3组则以生理盐水2 m L灌胃。造模后第28天处死大鼠,取血并分离肺组织。常规HE和Masson染色观察肺组织病理改变,荧光实时定量PCR检测各组大鼠肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA的水平,Western blot法检测肺组织TGF-β1、ADAMTS-1、Col1、Col3蛋白水平,ELISA测定血清中1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平。结果与模型组比较,各药物处理组肺泡炎及肺纤维化程度明显减轻。与正常对照组、假手术组比较,模型组肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平以及血清P1CP、P3NP浓度升高,而肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平降低。与模型组相比,给予低、高剂量大黄素或泼尼松处理后,肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平及血清P1CP、P3NP浓度则下调,肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上调。与大黄素低剂量组相比,大黄素高剂量组和泼尼松组上述指标明显改善,但后二者相比无明显差异。结论大黄素抑制TGF-β1/ADAMTS-1途径的活性引起肺组织Col1、Col3降解增多,是其抗肺纤维化的重要机制。     

大黄素通过抑制TGF-β1/ADAMTS-1通路的活性减轻大鼠肺纤维化

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)/含1型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)信号通路在大黄素抗肺纤维化中的作用。方法按随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为6组:正常对照组、假手术组、模型组、大黄素低剂量组(20 mg/kg)、大黄素高剂量组(80 mg/kg)和泼尼松组(5 mg/kg),每组10只大鼠。假手术组大鼠气管内注入生理盐水,而后4组大鼠气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型,次日起,大黄素低、高剂量组大鼠分别以20 mg/kg、80 mg/kg大黄素2 m L灌胃,泼尼松组予5 mg/kg醋酸泼尼松2 m L灌胃,其余3组则以生理盐水2 m L灌胃。造模后第28天处死大鼠,取血并分离肺组织。常规HE和Masson染色观察肺组织病理改变,荧光实时定量PCR检测各组大鼠肺组织中TGF-β1、ADAMTS-1、1型胶原蛋白(Col1)、Col3 mRNA的水平,Western blot法检测肺组织TGF-β1、ADAMTS-1、Col1、Col3蛋白水平,ELISA测定血清中1型前胶原蛋白羧基端前肽(P1CP)和3型前胶原蛋白氨基端前肽(P3NP)水平。结果与模型组比较,各药物处理组肺泡炎及肺纤维化程度明显减轻。与正常对照组、假手术组比较,模型组肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平以及血清P1CP、P3NP浓度升高,而肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平降低。与模型组相比,给予低、高剂量大黄素或泼尼松处理后,肺组织TGF-β1、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平及血清P1CP、P3NP浓度则下调,肺组织ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上调。与大黄素低剂量组相比,大黄素高剂量组和泼尼松组上述指标明显改善,但后二者相比无明显差异。结论大黄素抑制TGF-β1/ADAMTS-1途径的活性引起肺组织Col1、Col3降解增多,是其抗肺纤维化的重要机制。     

灵菌红素对小鼠肺纤维化及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的观察灵菌红素对小鼠肺纤维化的改善作用,探讨Wnt/β-catenin信号通路的调控机制。方法C57BL/6小鼠随机分为对照组(Control group)、博来霉素组(Bleomycin group)和灵菌红素组(Peptide group),每组15只。除对照组外,其余各组小鼠气管内分别一次性注入100μL博莱霉素溶液(5mg/kg)以制备小鼠肺纤维化模型;造模完成后,治疗组分别腹腔注射300μg/kg灵菌红素或300 mg/kg吡非尼酮,连续28天。HE及Masson染色观察肺组织病理变化;测定肺组织羟脯氨酸含量;Western Blot检测肺组织中TGF-β1、α-SMA、Colla I、CollaⅢ及GSK-3β、p-GSK-3β、α-catenin蛋白的表达。结果灵菌红素明显改善小鼠肺组织病理损伤,降低肺组织中羟脯氨酸含量,下调TGF-β1、α-SMA、Colla I、CollaⅢ、p-GSK-3β及β-catenin蛋白表达水平,上调GSK-3蛋白表达水平。结论灵菌红素改善小鼠肺纤维化,与抑制Wnt/β-catenin信号通路活性相关。     

干扰素γ对实验性大鼠肺纤维化、肺组织干扰素γ和转化生长因子β表达的影响

目的：研究干扰素γ（IFN-γ）对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化实验模型肺泡炎和肺纤维化的影响,并探讨其对肺纤维化影响的可能机制。方法：60只SD大鼠随机分为正常对照组（N组）、模型对照组（M组）和干扰素γ组（R组）,每组各20只大鼠。于造模后3、7、14、28天分批处死动物,留取肺组织,观察肺泡炎和肺纤维化的程度,测定肺组织中的羟脯氨酸含量、IFN-γmRNA、转化生长因子β（TGF-β）mRNA的表达。结果：M组、R组大鼠肺泡炎3、7、14、28天均较N组严重,7天时最重,R组14天时肺泡炎显著高于M组;M组、R组肺纤维化评分及肺羟脯氨酸含量14、28天均高于N组,于28天最重;R组肺组织IFN-γmRNA表达3、7、14、28天均显著高于M组;R组肺组织中TGF-βmRNA表达在3天显著高于M组（P〈0.05）。结论：在博莱霉素诱导大鼠肺纤维化早期给予干扰素γ并不能减轻肺部炎症和肺纤维化,可能与其促进肺组织IFN-γ、TGF-β基因表达有关。     

大黄酸通过抑制miR-21而干预TGF-β1/Smad通路并减轻博莱霉素所致大鼠肺纤维化

目的:观察大黄酸(rhein,RH)对博莱霉素所致肺纤维化大鼠微小RNA-21(miR-21)表达以及转化生长因子β1(TGF-β1)/Smad通路的影响。方法:博莱霉素一次性气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,随机分为RH低、中、高剂量组及模型(model)组;正常对照组大鼠气管内注射生理盐水。用药28 d后,HE染色观察各组大鼠肺组织形态学的变化;测定肺系数、肺组织羟脯氨酸含量;real-time PCR检测肺组织中miR-21和TGF-β1/Smad7m RNA表达;Western blot法分析TGF-β1和Smad7蛋白的表达。结果:与model组相比,RH用药组大鼠的肺泡炎及肺纤维化程度有明显降低,肺系数及肺组织羟脯氨酸含量也显著减少,肺组织中miR-21表达下降,TGF-β1的m RNA和蛋白表达水平也明显下降,Smad7的mRNA及蛋白表达水平明显增高(P0.05)。结论:RH抗肺纤维化的作用可能与抑制miR-21的表达,从而干预TGF-β1/Smad信号通路,减少细胞外基质沉积有关。     

果王素通过下调转化生长因子-β1表达抑制大鼠肺纤维化北大核心CSCD

目的:通过观察果王素对博莱霉素诱导的肺纤维化(PF)大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA表达的影响,探讨果王素是否可通过调节TGF-β1抑制PF,并探究其给药浓度对大鼠PF的影响。方法:将128只SD大鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组、果王素低、中、高剂量组(60、120、180 mg/kg),通过向气管内注入博莱霉素建立大鼠PF模型。自造模后第2天起将泼尼松及果王素按一定配比分别予以各组大鼠灌胃,空白组和模型组每日予以等量0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d。空白组大鼠全部于第28天处死,余组分别于第7、14、28天各处死8只并取材,通过HE、Masson染色观察大鼠肺组织病理变化,采用免疫组化、Western blot、实时荧光定量PCR检测TGF-β1蛋白及mRNA表达。结果:果王素对PF有抑制作用,并与剂量相关,空白组大鼠肺组织TGF-β1蛋白及mRNA表达最低,其余各组大鼠TGF-β1蛋白及mRNA在7 d时达到高峰,并随时间的推移逐渐下降。同一时间点,模型组大鼠TGF-β1蛋白及mRNA在肺组织中的表达明显高于其他各组(P<0.01,P<0.05),药物干预组间,泼尼松组及果王素高剂量组TGF-β1蛋白及mRNA明显低于果王素低、中剂量组(P<0.01,P<0.05),果王素高剂量组与泼尼松组间表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:果王素可能通过下调TGF-β1的表达抑制PF。     

吉非替尼下调肿瘤抑制素M抑制博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化

目的研究肿瘤抑制素M(OSM)及其下游通路在吉非替尼干预的肺纤维化小鼠中的改变,探讨OSM及下游通路在肺纤维化中的作用。方法 36只SPF级昆明小鼠随机分为3组:正常组(生理盐水气管内雾化)、博莱霉素组(博莱霉素3 mg/kg气管内雾化)、吉非替尼处理组(博莱霉素气管内雾化后,每天吉非替尼20 mg/kg灌胃)。实验第14天收集肺标本,肺组织行HE与Masson染色;RT-PCR法检测α-SMA、OSM m RNA表达水平;Western blot法检测α-SMA、OSM、ERK1/2、P-ERK1/2、P38、P-P38蛋白表达水平。结果博莱霉素组小鼠肺组织病理损伤较正常组小鼠明显加重、胶原沉积明显增加、炎症损伤评分及纤维化评分明显增加(P0.05),α-SMA、OSM m RNA及蛋白表达水平明显升高(P0.05),p-ERK1/2、p-P38蛋白表达水平明显升高(P0.05),吉非替尼组小鼠上述指标均较博莱霉素组明显降低(P0.05)。结论吉非替尼能显著缓解博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化,其机制可能与抑制OSM m RNA及蛋白的表达及其下游P38和ERK1/2的磷酸化密切相关。     

肺纤维化大鼠中基质金属蛋白酶-2的表达

目的：研究基质金属蛋白酶－2（MMP2）在肺纤维化中的作用。方法：（1）用免疫组织化学方法（ABC法）观察博莱霉素所诱导的实验性大鼠纤维化肺组织内MMP2表达的动态变化;（2）用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）观察博莱霉素所诱导的肺纤维化不同时期间质成纤维细胞MMP2 mRNA的动态变化。（3）用Northern印迹杂交和免疫细胞化学方法观察转化生长因子β1（TGFβ1）对体外培养的大鼠肺成纤维细胞MMP2mRNA和蛋白表达的影响。结果：（1）诱导纤维化组1－7d,病灶内浸润的单核巨噬细胞及肺泡间质细胞数量增多,MMP2免疫组织化学染色阳性,14d以后,阳性单核巨噬细胞减少,用博莱霉素28d时,阳性间质细胞亦减少。（2）博莱霉素作用后1d,肺成纤维细胞MMP2基因转录即明显增强,为对照组的2．05倍,28d时下降。（3）TGFβ1作用后,大鼠肺成纤维细胞MMP2mRNA及其蛋白表达增强。结论：肺组织内MMP2的过度表达,可能是肺纤维化启动的重要原因。     

层黏连蛋白受体1单克隆抗体抑制博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化

目的 研究层黏连蛋白受体1(LAMRl)单克隆抗体(mAb)干预博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化.方法 雄性SD大鼠72只,随机分为LAMRl mAb组(L)、对照组(C)和模型组(M)3组,气管内滴入博莱霉素(5 mg/kg体质量)制备肺纤维化模型.3组分别给予LAMRl mAb、地塞米松、生理盐水3次/周,腹腔注射,于第7、14、28天处死8只大鼠.HE染色观察肺纤维化程度;免疫组化方法检测肺组织中表面活性物质A(SP-A)的含量;ELISA测定血清中羟脯氨酸(Hyp)的含量;PCR方法检测肺组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA的含量.结果 各时间段,M组肺纤维化程度及Hyp含量均高于C组和L组,SP-A的含量均低于其余两组,M组肺组织的MMP-9和TGF-β1的mRNA的含量明显高于其余两组.结论 LAMRl mAb可明显减轻博莱霉素诱导的肺纤维化程度.     

扶正软坚方对肺纤维化大鼠转化生长因子β表达的影响

<正>目的:研究扶正软坚方对肺纤维化的干预作用及对转化生长因子β(TGF-β)表达的影响。方法:Wistar雄性大鼠,随机分为空白对照组,模型组(采用博莱霉毒诱发肺纤维化)、扶正软坚方煎剂灌胃组     

紫檀茋减轻百草枯诱导的模型大鼠肺纤维化

目的 探究紫檀茋(Pte)减轻百草枯(PQ)诱导大鼠肺纤维化的作用及机制。方法 将大鼠随机分为对照(control)组,PQ组(1次性灌胃50 mg/kg百草枯),低、中、高剂量Pte干预组(灌胃PQ 30 min后分别灌胃25、50和100 mg/kg Pte。每天1次,共7 d。)。治疗7 d后,用苏木精-伊红(HE)染色评价肺组织形态,用Masson三色染色评价肺纤维化。ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-1β、IL-6和MIP-2水平。用试剂盒检测肺组织中MDA和SOD含量。Western blot检测肺组织中E-cadherin、α-SMA、vimentin、Nrf2、NF-κB p65、p-NF-κB p65、TGF-β1、Smad3和p-Smad3的蛋白表达。结果 与对照组比较,PQ组大鼠肺组织损伤程度,肺纤维化评分,BALF中的IL-1β、IL-6和MIP-2水平,肺组织中MDA含量,α-SMA、vimentin和TGF-β1的蛋白表达水平,NF-κB p65和Smad3蛋白的磷酸化水平均显著升高(P<0.05),而肺组织中SOD含量,E-cadhe...     

大环内酯类抗生素减轻大鼠油酸性急性肺损伤

目的：观察大鼠油酸性急性肺损伤过程中的肺组织病理改变，并比较大环内酯类抗生素干预前后油酸肺组织病理形态学的变化及肺组织和血清中TNF-α、IL-10含量的变化。方法：48只健康Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组：尾静脉注射生理盐水（0.15 mL/kg）；油酸（OA）模型组：尾静脉注射油酸（0.15 mL/kg）；红霉素预防组和阿奇霉素预防组：分别尾静脉注射红霉素针剂（75 mg/kg）和阿奇霉素针剂（15 mg/kg）后1 h时再选另1条尾静脉注射油酸（0.15 mL/kg）；红霉素治疗组和阿奇霉素治疗组：分别尾静脉注射油酸（0.15 mL/kg）后0.5 h时选另1条尾静脉分别注射红霉素针剂（75 mg/kg）和阿奇霉素针剂（15 mg/kg），注射油酸4 h后取材进行各组大鼠肺组织病理形态学评分，计算肺湿干重比，检测肺组织及大鼠血清TNF-α及IL-10含量。结果：油酸致大鼠急性肺损伤时肺组织病理形态学评分值明显高于对照组（P＜0.01），肺湿干重比值高于对照组（P＜0.01），肺组织及血清TNF-α、IL-10含量也明显高于正常对照组（P＜0.01），药物干预组与OA模型组比较，肺组织病理形态学评分值明显降低（P＜0.01），肺湿干重比值明显减小（P＜0.05），肺组织及血清TNF-α含量明显减少（P＜0.01），而肺组织及血清IL-10含量无显著差别（P＞0.05）。结论：大鼠静脉注射油酸可导致肺损伤和全身炎症反应；大环内酯类抗生素红霉素和阿奇霉素可以不同程度抑制TNF-α的产生并减轻油酸性急性肺损伤。     

甘草酸对博莱霉素诱导的实验性肺纤维化的干预作用

目的:探讨甘草酸(GA)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及其可能机制。方法:将160只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、BLM+NS组和BLM+GA组。通过口咽气管吸入法吸入博莱霉素(2.5 mg/kg)建立实验性肺纤维化模型,BLM+GA组及BLM+NS组每天给予40 mg/kg甘草酸或等体积的生理盐水灌胃,于术后第3、7、14、21天取材。采用HE染色和Masson染色观察肺组织病理学变化及纤维化程度,采用流式细胞术检测循环单核细胞和肺泡巨噬细胞的亚群比例变化,采用RT-qPCR检测肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达水平,采用碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)含量。结果:与NS组相比,BLM组和BLM+NS组肺组织的炎症浸润及胶原含量明显增多,实验性肺纤维化模型制备成功。与BLM+NS组相比:BLM+GA组肺组织的炎症细胞浸润及胶原纤维沉积较少;第3、7天的Ly6C~(hi)单核细胞亚群比例和第7、14天肺泡巨噬细胞M2表型比例显著降低(P0.01);肺组织TGF-β1 mRNA表达量和HYP含量显著降低(P0.01)。结论:GA可以减轻博莱霉素诱导的小鼠肺组织的炎症反应和胶原纤维沉积,可能与GA对单核巨噬细胞的表型偏移和调控以及肺组织TGF-β1的表达下调有关。     

穿心莲内酯对肺纤维化大鼠BALF中细胞因子和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨穿心莲内酯灌胃对博来霉素(BLM)致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1浓度和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响。方法:取健康雄性SD大鼠90只,随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、泼尼松(Pred)组、不同剂量穿心莲内酯组(即穿A组62.5mg/kg、穿B组125 mg/kg、穿C组250 mg/kg),各组大鼠15只,分别气管内灌注BLM(BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组)或NS(NS组)后,每天给予NS(NS组、BLM组)、Pred(Pred组)或穿心莲内酯(穿A组、穿B组、穿C组)灌胃,各组分别于气管内灌注药物后第7、14、28天处死大鼠5只。用HE、Masson染色观察肺泡炎症和纤维化改变;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达;酶联免疫吸附试验测定BALF中TNF-α、TGF-β1浓度;同时监测肾功能指标血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及肝功能指标血丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)。结果:肝肾功能监测显示:不同剂量穿心莲内酯组、NS组、BLM组、Pred组所监测的AST、ALT、BUN、Cr比较,差异无统计学意义(P>0.05)。NS组大鼠肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润和纤维化形成。BLM组第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时肺泡炎仍存在,但炎症细胞明显减少,肺泡间隔内成纤维细胞明显增多,肺泡结构破坏,肺泡隔增宽,第28天时炎症较前减轻,肺纤维化程度加重,部分肺泡腔消失,形成严重纤维化。穿A组病理形态改变与BLM组相似。Pred组、穿B组、穿C组大鼠第7天有较多的炎症细胞浸润及局部聚积,第14天和第28天的纤维化病理改变均较BLM组、穿A组明显减轻。NS组各个时间点BALF中TGF-β1、TNF-α含量均明显低于同时间点BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组BALF中的浓度(P<0.05)。BLM组3个时间点BALF中TGF-β1、TNF-α含量较Pred组、穿B、穿C组高(P<0.05)。与BLM组比较,穿A组BALF中TGF-β1、TNF-α含量无统计学意义。NS组各个时间点肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均明显低于同时间点BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组肺组织中的表达(P<0.05)。BLM组3个时间点Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较Pred组、穿B组、穿C组高(P<0.05)。与BLM组比较,穿A组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达无统计学差异。结论:穿心莲内酯灌胃可减轻BLM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,降低肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,降低BALF中TNF-α、TGF-β1浓度,且对肝肾无明显毒副作用。     

橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响

目的：研究橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响。方法：构建重症肺炎大鼠模型，分为SD组、Control组、Model组（肺炎模型）、Hesperidin-L组（12 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-M组（24 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-H组（36 mg/kg橙皮苷治疗），检测肺组织湿干重比（W/D），对肺组织病理损伤程度评分，计数肺泡灌洗液中炎症细胞数目，qRTPCR检测肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA水平，ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6含量，Western blot检测肺组织中Bax、ccaspase-3、Bcl-2、p-STAT3、p-JAK2、STAT3、JAK2、JAK1和p-JAK1蛋白表达水平，TUENL染色检测肺组织中细胞凋亡水平。结果：与Control组相比，Model组大鼠肺组织病理评分升高，W/D升高，肺泡灌洗液中单核巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、白细胞数目均升高，肺组织中炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达水平和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均...     

穿心莲内酯对肺纤维化大鼠BALF中细胞因子和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响

目的:探讨穿心莲内酯灌胃对博来霉素(BLM)致肺纤维化大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1浓度和肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达的影响.方法:取健康雄性SD大鼠90只,随机分为生理盐水(NS)组、BLM组、泼尼松(Pred)组、不同剂量穿心莲内酯组(即穿A组62.5mg/kg、穿B组125 mg/kg、穿C组250 mg/kg),各组大鼠15只,分别气管内灌注BLM(BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组)或NS(NS组)后,每天给予NS(NS组、BLM组)、Pred(Pred组)或穿心莲内酯(穿A组、穿B组、穿C组)灌胃,各组分别于气管内灌注药物后第7、14、28天处死大鼠5只.用HE、Masson染色观察肺泡炎症和纤维化改变;实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应检测肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达;酶联免疫吸附试验测定BALF中TNF-α、TGF-β1浓度;同时监测肾功能指标血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及肝功能指标血丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST).结果:肝肾功能监测显示:不同剂量穿心莲内酯组、NS组、BLM组、Pred组所监测的AST、ALT、BUN、Cr比较,差异无统计学意义(P＞0.05).NS组大鼠肺组织未发现肺泡间隔水肿、炎性细胞浸润和纤维化形成.BLM组第7天时肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,第14天时肺泡炎仍存在,但炎症细胞明显减少,肺泡间隔内成纤维细胞明显增多,肺泡结构破坏,肺泡隔增宽,第28天时炎症较前减轻,肺纤维化程度加重,部分肺泡腔消失,形成严重纤维化.穿A组病理形态改变与BLM组相似.Pred组、穿B组、穿C组大鼠第7天有较多的炎症细胞浸润及局部聚积,第14天和第28天的纤维化病理改变均较BLM组、穿A组明显减轻.NS组各个时间点BALF中TGF-β1、TNF-α含量均明显低于同时间点BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组BALF中的浓度(P＜0.05).BLM组3个时间点BALF中TGF-β1、TNF-α含量较Pred组、穿B、穿C组高(P＜0.05).与BLM组比较,穿A组BALF中TGF-β1、TNF-α含量无统计学意义.NS组各个时间点肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达均明显低于同时间点BLM组、Pred组、穿A组、穿B组、穿C组肺组织中的表达(P＜0.05).BLM组3个时间点Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较Pred组、穿B组、穿C组高(P＜O.05).与BLM组比较,穿A组肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达无统计学差异.结论:穿心莲内酯灌胃可减轻BuM致肺纤维化大鼠肺泡炎和肺纤维化程度,降低肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达,降低BALF中TNF-α、TGF-β1浓度,且对肝肾无明显毒副作用.     

替普瑞酮诱导肺纤维化大鼠肺HSP70表达及干预肺纤维化的研究

目的:研究替普瑞酮(GGA)对博莱霉素(BLM)诱导的肺纤维化大鼠肺组织HSP70表达的影响及对大鼠肺纤维化的干预作用。方法:SD大鼠30只,随机分为假手术组(SO)、模型组(M)和替普瑞酮组(GGA)。M组和GGA组大鼠气管内一次性注射BLM 5 mg/kg,SO组大鼠气管内注射等体积的生理盐水。造模后第1天开始隔天灌胃给予GGA,持续到处死动物的前1天,模型组灌服等体积的生理盐水。记录大鼠每日体重,造模后第28天时处死大鼠,测定肺纤维化大鼠的肺系数、肺组织内HSP70表达及羟脯氨酸(HYP)的含量,观察肺组织病理改变。结果:GGA能提高博莱霉素处理后大鼠肺组织HSP70的表达(P<0.01);与M组相比,大鼠体重下降得到明显恢复(P<0.01),而肺组织的肺系数和羟脯氨酸(HYP)含量则明显降低(P<0.05),病理结果显示肺泡内结构完整,未出现类似M组肺组织实变现象,肺纤维化程度较轻。结论:替普瑞酮能诱导BLM肺纤维化模型大鼠肺组织HSP70表达,减轻肺纤维化程度。     

地塞米松联合川芎嗪对肺纤维化大鼠肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β1含量及肺纤维化程度的影响

目的探讨地塞米松联合川芎嗪对博来霉素诱导肺纤维化大鼠肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和转化生长因子-β1(TGF-β1)含量及肺纤维化程度的影响。方法将60只雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组(N组)、模型组(M组)、地塞米松治疗组(D组)、川芎嗪治疗组(L组)和地塞米松联合川芎嗪治疗组(DL组),N组大鼠气管内注入0.9%氯化钠溶液0.3 m L,其他4组大鼠气管内注入5 mg/kg博莱霉素(溶于0.3 m L 0.9%氯化钠溶液)进行肺纤维化造模,造模成功后N组、M组大鼠每天给予腹腔注射0.9%氯化钠溶液2 m L治疗,D组、L组和DL组大鼠分别每天给予腹腔注射地塞米松3 mg/kg(溶于2 m L 0.9%氯化钠溶液中)、川芎嗪50 mg/kg(溶于2 m L 0.9%氯化钠溶液中)和两种药物联合(地塞米松3 mg/kg、川芎嗪50 mg/kg溶于2 m L 0.9%氯化钠溶液中)治疗。各组大鼠在气管注入药物后第28天处死。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组大鼠BALF中TNF-α和TGF-β1的含量,用苏木精-伊红染色在光学显微镜下对大鼠肺组织病理标本进行观察并进行半定量评分。结果与M组相比,D组、L组和DL组大鼠BALF中TNF-α、TGF-β1含量均下降,差异有统计学意义(均P<0.05);与D组和L组相比,DL组大鼠BALF中TNF-α、TGF-β1含量(25.182±4.823)、(14.047±2.234)pg/m L均下降,差异有统计学意义(均P<0.05)。病理结果显示N组大鼠肺泡结构正常;M组大鼠肺泡结构消失,出现大量成纤维细胞;D组和L组大鼠可见肺泡间隔增宽,肺泡压缩变形,纤维化程度较M组减轻;DL组大鼠肺纤维化程度较D组和L组大鼠进一步减轻,部分区域可见肺泡结构。M组、D组、L组和DL组大鼠肺纤维化半定量评分分别为6(5.00,6.75)、5(4.00,5.75)、5(4.25,5.75)、4(4.00,5.00)分。与M组相比,D组、L组和DL组大鼠肺纤维化程度半定量评分均减少,差异有统计学意义(均P<0.05)。与D组和L组相比,DL组大鼠肺纤维化程度半定量评分减少,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论与单一药物相比,地塞米松联合川芎嗪治疗能更显著地降低大鼠BALF中TNF-α和TGF-β含量及减轻肺纤维化程度,两者联合应用可能适合肺纤维化治疗。     

硫化氢通过抑制TGF-β1/Smad信号通路抗大鼠肺纤维化

目的观察硫化氢(H2S)对博莱霉素所致大鼠肺纤维化的影响,并探讨其是否通过转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad信号通路发挥作用。方法 SD大鼠50只随机分为正常对照组、假手术组、模型组、硫氢化钠(Na HS)组和地塞米松组,每组10只,假手术组大鼠以生理盐水气管内注入,而后3组大鼠以博莱霉素A5气管内注入制备肺纤维化模型。自第2天起,Na HS组、地塞米松组大鼠分别以Na HS、地塞米松腹腔注射,其余3组腹腔注射等量生理盐水。全部大鼠第28天处死,留取肺组织,行HE和Masson染色,通过试剂盒测定肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,采用实时荧光定量PCR和Western blot分别检测肺组织中TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)m RNA和蛋白表达。结果与模型组比较,Na HS组和地塞米松组肺泡炎症与肺纤维化程度明显减轻(P0.01)。与正常对照组或假手术组比较,模型组肺组织HYP含量以及TGF-β1、Smad 2、Smad 3、α-SMA、ColⅠ、ColⅢm RNA和蛋白表达水平升高,但Smad 7 m RNA和蛋白表达水平降低,差异均有统计学意义(P0.01)。通过Na HS或地塞米松处理后,肺组织HYP含量以及TGF-β1、Smad 2、Smad 3、α-SMA、ColⅠ、ColⅢm RNA和蛋白表达水平减少,而Smad 7 m RNA和蛋白表达水平增加,与模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01)。然而,Na HS组与地塞米松组以及假手术组与正常对照组上述指标相比无显著性差异(P0.05)。结论 H2S可能通过抑制TGF-β1/Smad信号转导通路下调α-SMA表达,从而减少ColⅠ、ColⅢ合成发挥抗大鼠肺纤维化作用。