氧化苦参碱对人结肠癌细胞P21,P27,Cyclin E1及CDK2表达的影响

目的:观察氧化苦参碱(OM)对人结肠癌细胞P21,P27,Cyclin E1及CDK2表达的影响,研究其抑制细胞增殖的其他途径,探讨OM抗肿瘤的作用机制.方法:培养人结肠癌细胞株SW1116,以2,3,4 g/L OM作用24和48 h,以流式细胞仪测定OM对SW1116细胞的周期阻断作用;并采用RT- PCR、Western blot法测定细胞周期相关蛋白P21、P27、Cyclin E1和CDK2的表达水平.结果:与对照组相比,不同浓度(2,3,4 g/L)OM可使细胞阻滞于G_1/G_0期(24 h:67.5%±0.1%,69.5%±1.4%,71.0%±1.0% vs 58.6%±0.4%,P<0.05;48h:68.5%±0.3%,71.9%±0.9%,78.0%±0.4% vs 58.8%±0.1%,P<0.05),下调Cyclin E1的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),上调细胞周期负调控因子P21、P27的mRNA及蛋白表达水平(P<0.05),降低CDK2的mRNA水平而对其蛋白表达无影响.结论:OM可能通过阻滞细胞周期,降低Cyclin E1蛋白,上调P21、P27的基因表达,来发挥其抗肿瘤作用.     

氧化苦参碱对人结肠癌细胞株SW1116杀伤作用的实验研究

目的探讨氧化苦参碱(OM)对于人结肠癌细胞株SW1116的杀伤作用及其抗肿瘤作用的机制。方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、流式细胞仪、PCR—ELISA和RT-PCR法检测OM对SW1116细胞的杀伤作用、细胞周期分布、端粒酶活性和端粒酶逆转录酶(hTERT)及其上游调控基因(c-myc、p53、mad1)表达的影响。结果0M对SW1116细胞具有剂量依赖性杀伤作用；可以引起G1／G0期细胞增加、S期细胞减少；OM可抑制SW1116细胞的端粒酶活性，其作用呈剂量和时间依赖性；OM可引起SW1116细胞hTERT基因表达下调，pS3和mad1基因的表达升高，对c-myc基因的表达无影响。结论OM对人结肠癌细胞株SW1116具有杀伤作用，可能通过影响hTERT及其上游调控基因的表达来抑制肿瘤细胞端粒酶活性，发挥其抗肿瘤作用。     

表型遗传修饰对人结肠癌细胞周期和抑癌基因表达的调控

目的：分析和探讨同一结肠癌细胞系DNA甲基化和组蛋白乙酰化对抑癌基因表达和细胞周期的影响。方法：培养结肠癌细胞HT－29、SW1116和Colo-320，分别以去甲基化制剂5－氮脱氧胞苷（5－aza-dC）和（或）组蛋白脱乙酰化酶（HDAC）抑制剂trichostatinA(TSA)及丁酸盐干预细胞。提取基因组DNA和RNA，部分行甲基化特异性PCR（MSP）检测p16^INK4A基因启动子区甲基化情况；以RTPCR研究p16^INK4A和p^21WAF1 mRNA表达水平；同时以流式细胞仪分析SW1116和Colo-320细胞周期。结果：干预前，HT－29、SW1116和Colo-320三种结肠癌细胞系中均有较弱的p16^INK4A表达；SW1116和Colo-320细胞的p21^WAF1表达缺如，对于HT－29细胞，1μmol/L的5－aza-dC干预时则无显著改变。在SW1116和Colo-320细胞中，5－aza-dC干预后p16^INK4A表达增强，且以10μmol/L或5μmol/L浓度干预24h者为最明显，相反p21^WAF1仍无明显表达，该两个细胞系经TSA或丁酸盐使细胞阻滞于G1期。结论：三种人结肠癌细胞中，p16^INK4A基因的表达均受甲基化调节。SW1116和Colo-320细胞中p21^WAF1基因表达主要受乙酰化调节，在该两个细胞系中，乙酰化使细胞周期停滞于G1期。     

Ufd1基因沉默逆转SW1116／HCPT细胞株对羟基喜树碱耐药的研究

泛素融合降解1样蛋白（Ufd1）在蛋白质逆向转运中发挥一定作用。前期研究发现羟基喜树碱（HCPT）耐药人结肠癌细胞株SW1116／HCPTUfd1表达增高。目的：探讨Ufd1基因沉默在逆转SW1116／HCPT细胞株对HCPT耐药性中的作用。方法：干扰组SW1116／HCPT细胞转染Ufd1特异性siRNA以沉默Ufd1基因．对照组转染非特异性siRNA。体外药物敏感性试验检测细胞对HCPT的敏感性,流式细胞术检测细胞周期,比色法测定caspase-3活性,蛋白质印迹法检测p-JNK、p53表达情况和细胞内泛素化蛋白贮留情况。结果：干扰组SW1116／HCPT细胞对HCPT的敏感性显著高于对照组（P〈0．05）。经HCPT作用,干扰组和对照组细胞均出现S期阻滞、caspase-3活性增高和p-JNK、p53、泛素表达增加,干扰组更为明显。结论：以RNA干扰技术沉默Ufd1基因可逆转SW1116／HCPT细胞株对HCPT的耐药性,推测该作用可能与活化JNK信号通路、上调p53表达以及致细胞内泛素化蛋白贮留而破坏细胞内蛋白代谢的协调性有关。     

氧化苦参碱调控CDK4/cyclinD1通路诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的细胞周期调控机制

目的 研究氧化苦参碱对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、细胞周期的影响及CDK4/cyclinD1通路调控方面的作用,探讨其对前列腺癌可能产生的作用机制。方法 噻唑蓝(MTT)法观察前列腺癌PC-3细胞增殖情况;荧光染色观察前列腺癌PC-3细胞核形态改变情况;流式细胞仪观察前列腺癌PC-3细胞凋亡率与细胞周期情况;实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)观察细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK4)、细胞周期蛋白(cyclin)D1基因表达情况;Western印迹观察CDK4、cyclinD1表达情况。结果 与对照组相比,8μmol/L氧化苦参碱组作用72 h前列腺癌PC-3细胞的增殖活力最弱。荧光染色发现,氧化苦参碱使前列腺癌PC-3细胞核形态改变,且细胞核皱缩程度随氧化苦参碱浓度增加而加深。与对照组相比,氧化苦参碱组前列腺癌PC-3细胞的凋亡率显著上升且随浓度增加而显著上升(P<0.05);与对照组相比,2、4、8μmol/L氧化苦参碱组G1期比例明显增加,S期、G2的比例显著降低(P<0.05)。PCR法发现,与对照组相比,氧化苦参碱组CDK4和cyclinD1 mRNA的...     

肺癌中PI3K／AKT信号通路对Skp2调控机制的研究

目的探讨肺癌中磷脂酰肌醇-3-激酶（P13K）／AKT信号通路对S期激酶相关蛋白2（Skp2）的调控机制。方法体外培养4种类型肺癌细胞系H460、LK2、H446和A549,经LY294002处理细胞24h后实时RT—PCR法检测Skp2基因表达变化;Westernblot检测E2F1蛋白表达变化。结果实时RT—PCR显示LY294002作用后4种肺肿瘤细胞系中skp2基因表达均下降;Westernblot结果表明在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中E2F1蛋白表达降低,肺腺癌中E2F1蛋白未表达。结论肺癌中P13K／AKT通路可在转录水平调节Skp2表达,在小细胞肺癌、肺鳞癌、大细胞肺癌中此种调节可能通过转录因子E2F1发挥作用,而肺腺癌中E2F1不参与此种调节。     

丝裂原活化蛋白激酶特异性小干扰RNA表达载体对结肠癌细胞周期和DNA甲基化的影响

目的 构建丝裂原活化蛋白激酶（MEK）基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体，观察其静默效应及对结肠癌细胞SW1116生长周期和DNA甲基化的影响。方法 选择MEK不同靶点寡核苷酸片段，克隆到pGCsilencer真核表达载体中。脂质体转染SW1116细胞，荧光显微镜评估转染效率，G418筛选稳定表达siRNA的细胞。Western印迹法检测siRNA对MEK蛋白表达的静默效果。应用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法检测细胞生长活力，流式细胞术分析细胞周期，甲基化特异性PCR和DNA测序检测p16^INK4A基因启动子甲基化状态。结果 构建2个靶点的MEK重组质粒，分别转染和联合转染SW1116细胞，转染效率约为72．1％，G418筛选培养2周得到稳定表达MEK siRNA的细胞，MEK蛋白抑制率分别为74．2％和69．1％和90．2％，下游分子ERK蛋白磷酸化水平随之降低；细胞增殖活力下降2～4倍和细胞周期阻滞于G1期，细胞周期负调控冈子p16^INK4A启动子区呈低甲基化状态。结论 MEK特异性siRNA表达载体对结肠癌细胞MEK蛋白表达有一定的静默效果，多靶点联合效果更好，阻滞细胞周期于G1期，促进p16^INK4A基因去甲基化。     

pemt2-Cdna转染抑制大鼠肝癌CBRH-7919细胞周期相关蛋白的表达

目的探讨磷脂酰乙醇胺-N-甲基转移酶2（PEMT2）的转染抑制肝癌细胞增殖的分子机制。方法将带有完整pemt2-cDNA质粒转染人大鼠肝癌CBRH-7919细胞，筛选出稳定传代并高表达PEMT2的细胞株，用Westem blot比较了细胞周期调控因子细胞周期蛋白D1／细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）4、细胞周期蛋白E／CDK2、phospho—Rb、caspase3、c-jun以及小窝蛋白caveolin的表达变化。结果在PEMT2高表达细胞中CDK2、CDK4、phospho—Rb和cjtin表达下调，caspase3表达上调。结论PEMT2的高表达降低cDK2和cDK4的表达水平，同时下调原癌基因phospho—Rb和c-jun的表达，抑制肝癌细胞由G1期进入S期，从而抑制肝癌细胞增殖并诱发肝癌细胞的凋亡。     

苦参碱诱导人结肠癌SW1116细胞凋亡及机制探讨

目的观察苦参碱（Ma）诱导结肠癌SW1116细胞凋亡的作用，并探讨其机制。方法采用不同浓度的Ma处理SW1116细胞48h，并设正常对照组，MTT法检测细胞增殖抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，半定量RT-PCR检测Fas和Bax mRNA表达水平。结果与正常对照组相比，不同浓度Ma处理的SW1116细胞抑制率、胞凋亡率显著升高（P均〈0.01），Fas和Bax mRNA表达上调（P〈0.05，P〈0.01）。结论Ma可诱导SW1116细胞凋亡，其作用机制可能与上调Fas和Bax mRNA表达有关。     

慢病毒介导的CDK2-shRNA促进黑色素瘤细胞A375凋亡

目的探讨慢病毒介导的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)2-shRNA对人黑色素瘤细胞A375凋亡的影响。方法依据CDK2基因序列,设计3条靶向干扰CDK2的序列,构建CDK2-shRNA慢病毒载体,质粒转染人胚肾细胞株(HEK293)细胞进行慢病毒包装,滴度测定包装的重组p GMLV-CDK2-shRNA慢病毒,免疫印迹检测对CDK2的干扰效率及对细胞周期蛋白(cyclin)E、E2F1、RB蛋白表达的影响,四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)检测细胞增殖活力,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测A375凋亡的发生。结果成功获得包装的重组p GMLV-CDK2-shRNA慢病毒,病毒滴度为5×108TU/ml。重组的p GMLV-CDK2-shRNA慢病毒能有效下调CDK2、cyclin E、E2F1蛋白表达,抑制A375细胞增殖和触发凋亡。结论基于慢病毒介导的CDK2-shRNA能够促进黑色素瘤细胞A375凋亡发生,为黑色素瘤的基因治疗提供理论支撑。     

siRNA沉默PPARα减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡

背景:多药耐药一直是遏制提高结肠癌化疗有效性的瓶颈问题。目的:探讨沉默PPARα能否减弱羟喜树碱诱导的人结肠癌细胞凋亡,从而阐明PPARα在羟喜树碱耐药中的潜在作用。方法:构建针对PPARα基因的siRNA干扰载体,并转染人结肠癌SW1116细胞,经G418筛选出稳定转染的细胞,以RT-PCR和蛋白质印迹法验证干扰效果。经羟喜树碱干预后,以MTT法检测细胞增殖,Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡。以定量RT-PCR检测不同浓度miR-506前体转染SW1116细胞后对PPARα下游调控靶基因mRNA表达的影响。结果:siRNA干扰载体Ⅲ的沉默效果最佳,PPARα mRNA和蛋白表达分别下调了约94.1%±3.4%和70.8%±8.6%。稳定转染siRNA的SW1116细胞的半数抑制浓度(IC_(50))为(332±19)μg/L,亲本SW1116细胞为(152±12)μg/L。在相同浓度羟喜树碱的作用下,亲本SW1116细胞的凋亡率显著高于稳定转染siRNA的SW1116细胞(150μg/L:7.0%±2.5%对2.8%±1.6%;300μg/L:32.4%±7.1%对18.5%±2.7%)。miR-506前体下调HMGCS-2表达,上调FABP-2、CCND1和TGF-β1表达,其中上调CCND1的作用最为明显。结论:成功构建了针对PPARα的siRNA干扰载体;沉默PPARα能增强SW1116细胞对羟喜树碱的抵抗性,可能与下调HMGCS-2表达并上调FABP-2、CCND1和TGF-β1表达有关。     

Effect of indomethacin on cell cycle proteins in colon cancer cell lines

AIM: To study the effect of indomethacin (IN) on human colon cancer cell line SW480 with p53 mutant and SW480 transfected wild-type p53 (wtp53/SW480) in vitro and investigate molecular mechanism of anti-tumor effect of IN on colon cancer. METHODS: SW480 cells and wtp53/SW480 cells were treated with different concentrations of IN respectively, the expressions of CDK2, CDK4 and p21WAF1/CIP1 protein were detected by Western blotting. RESULTS: IN gradually down-regulated the expression of CDK2, CDK4 protein of wtp53/SW480 cells in a dose-dependent manner, and inhibitory effect reached the maximum level at 600 μmol/L; IN up-regulated the expression of p21WAF1/CIP1 protein in a dose-dependent manner at a certain concentration range, and the expression reached the maximum level at 400 μmol/L, and returned to the base level at 600 μmol/L. The expression of CDK2, CDK4 and P21WAF1/CIP1 protein of SW480 cells did not change. CONCLUSION: IN exerts antitumor effect partly through down regulation of the expression of CDK2, CDK4, protein and up regulation of the expression of p21WAF1/PIC1.     

曲古霉素A对人胃癌细胞的抑制作用及其机制探讨

背景：组蛋白去乙酰基酶抑制剂（HDACi）是一类新型抗肿瘤药物。曲古霉素A（TSA）是目前研究最为广泛的HDACi之一,已发现其对多种肿瘤细胞具有明显抑制作用,但关于TSA对胃癌作用的研究尚少。目的：观察TSA对人胃癌细胞增殖、凋亡、细胞周期以及相关基因表达的影响,探讨其抑制人胃癌细胞的可能作用机制。方法：以不同浓度TSA（0—1μmol／L）处理人胃癌细胞株AGS和HGC-27。CCK-8实验检测细胞增殖抑制情况,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,realtimeRT-PCR和蛋白质印迹法检测细胞凋亡、细胞周期相关基因mRNA和蛋白水平的表达。结果：TSA能剂量依赖性地抑制AGS、HGC-27细胞增殖（P=0．000）,对两者的半数致死浓度分别约为0．25μmol／L和0．5μmol／L。TSA能诱导AGS、HGC-27细胞发生G0／G1期和G2／M期阻滞,以G0／G11期阻滞更为明显。TSA对AGS细胞的诱导凋亡作用强于HGC-27细胞（P〈0．05）。TSA尚能上调p21、p53、BaxmRNA和蛋白表达,下调Bel-2、CDK2、cyelinD1mRNA和蛋白表达,作用均呈时间依赖性（P〈0．05）。结论：TSA抑制人胃癌细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用可能是通过调节细胞凋亡、细胞周期相关分子、激活多种肿瘤相关信号通路实现的。     

塞来昔布联合热疗对胰腺癌细胞周期的影响

背景：选择性环氧合酶-2抑制剂塞来昔布和热疗对肿瘤细胞生长均有抑制作用。目的：研究塞来昔布联合热疗对人胰腺癌细胞周期的影响。方法：流式细胞仪检测常规热疗、塞来昔布以及两者联合对人胰腺癌细胞株SW1990周期的影响。40只新生裸鼠建立胰腺癌SW1990细胞移植瘤模型，并分为对照组、高强聚焦超声（HIFU）热疗组、塞来昔布组和联合组，逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测p21^Wafl、p27^Kipl、p16、p53在各组细胞和移植瘤中的表达。免疫组化方法检测移植瘤组织中p53表达。结果：流式细胞仪结果显示常规热疗组、塞来昔布组和联合组SW1990细胞周期阻滞，尤以联合组抑制作用最明显（G1期77．8％，S期6．5％）。体外实验RT-PCR示p21^Wafl和p53在4组中的表达无明显差异；p27^Kipl。在常规热疗组、塞来昔布组和联合组中表达上调，尤以联合组更明显；p16在常规热疗组和联合组中表达明显上调。体内实验RT—PCR示p21^Wafl、p27^Kipl。和p53在对照组和塞来昔布组中表达相对较强；p16在HIFU热疗组、塞来昔布组和联合组中的表达极弱。免疫组化染色示对照组和塞来昔布组中有p53蛋白表达。结论：常规热疗、塞来昔布以及两者联合均有抑制胰腺癌细胞周期的作用，其机制可能为上调p27^Kipl、p16表达而诱导细胞周期G1期阻滞以及抑制S期发展。HIFU热疗可能通过促焦点处肿瘤细胞迅速坏死，诱导周边肿瘤组织细胞周期阻滞。从而抑制肿瘤细胞生长。     

MSK1和RSK2介导的组蛋白磷酸化对人结直肠癌细胞恶性表型的影响

背景:ERK-MAPK信号通路与消化系肿瘤的发生、发展密切相关。前期研究发现抑制ERK-MAPK信号转导可能通过抑制其下游效应分子MSK1、RSK2活性而降低组蛋白H3磷酸化水平,进而下调原癌蛋白c-fos表达,抑制人结直肠癌细胞增殖。目的:探讨MSK1、RSK2与组蛋白磷酸化对人结直肠癌细胞肿瘤相关基因表达和恶性表型的影响。方法:以不同浓度ERK-MAPK阻断剂U0126干预人结肠癌细胞株HCT1 16和SW11 16,或以RNA干扰技术靶向沉默细胞中的MSK1、RSK2表达,分别采用CCK-8实验、流式细胞分析和蛋白质印迹法检测经不同处理的肿瘤细胞的增殖情况、细胞周期分布以及MSK1、RSK2磷酸化位点、组蛋白H3磷酸化水平和MSK1、RSK2、c-fos蛋白表达。结果:U0126能阻断人结直肠癌细胞MSK1(Thr581)、RSK2(Ser386)的磷酸化活化,转染MSK1 siRNA或RSK2 siRNA能特异性抑制MSK1、RSK2表达,导致组蛋白H3(Set10)磷酸化水平降低,c-fos蛋白表达下调,肿瘤细胞发生G0/G1期阻滞,细胞增殖显著受抑(P均<0.05)。结论:阻断ERK-MAPK信号转导可能通过抑制MSK1(Thr581)、RSK2(Ser386)磷酸化活化及其介导的组蛋白H3磷酸化而下调肿瘤相关基因如c-fos表达,从而抑制人结直肠癌细胞的恶性表型。     

人结肠癌羟基喜树碱耐药细胞株SW1116/HCPT的建立与鉴定

背景：肿瘤细胞的多药耐药性是造成化疗失败的主要原因，其机制是多种耐药相关基因表达的改变。目的：探讨消化道肿瘤的多药耐药机制和逆转策略。方法：应用药物浓度递增诱导法建立羟基喜树碱（HCPT）耐药结肠癌细胞株SW1116／HCPT；细胞计数法测定细胞生长曲线；流式细胞仪测定细胞周期分布；细胞染色体染色进行核型分析；四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法进行药物敏感实验；聚合酶链反应（PCR）-酶联免疫吸附测定（ELISA）检测细胞端粒酶活性；肿瘤药物耐受功能分类基因芯片筛选差异表达的耐药相关基因。结果：与亲代细胞相比，SW1116／HCPT细胞生长曲线无明显改变；对HCPT的耐药倍数增加120．0倍，并与阿霉素（48．2倍）、氧化苦参碱（2．1倍）、阿糖胞苷（2．0倍）、5．氟尿嘧啶（1．8倍）、顺铂（1-3倍）存在交叉耐药现象；细胞周期分布明显改变，G1期细胞增加，S期细胞减少；细胞染色体无明显变化，核型为非整倍体54-69；细胞端粒酶活性无明显改变；功能分类基因芯片显示，耐药细胞株表达改变的基因有30个。其中表达下调10个，上调20个。结论：SW1116／HCPT是研究消化道肿瘤多药耐药现象的模型之一。     

苦参素注射液对人食管癌Eca-109细胞周期的影响及机制研究

目的 探讨苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖周期的影响及其机制.方法 运用流式细胞术检测细胞周期变化和调控细胞增殖周期相关蛋白CyclinD1和CDK4的表达.结果 与阴性对照组和阳性对照组比较,苦参素对Eca-109细胞持续作用48 h后,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少(P均<0.05);CyclinD1和CDK4的表达量均随苦参素剂量增加而减少.结论 苦参素可以明显将人食管癌Eca-109细胞阻滞于G0/G1期,其主要机制可能与CyclinD1及CDK4的低表达有关.     

PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖中的作用

结肠癌的发生与肠腔内脱氧胆酸引起的DNA损伤有关,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1（PARP-1）对DNA损伤具有修复作用.目的：探讨PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖中的作用及其可能机制.方法：选用不同浓度的脱氧胆酸钠、PARP-1抑制剂5-氨基异喹啉酮（5-AIQ）或两者联合分别作用于人结肠腺癌细胞株HT-29.MTT实验检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,免疫细胞化学染色检测环氧合酶-2（COX-2）、caspase-3、PARP-1蛋白表达.结果：10～50 μmol/L脱氧胆酸钠能促进HT-29细胞增殖,增加COX-2、PARP-1蛋白表达,减低caspaae-3蛋自表达.100μmol/L 5-AIQ单独作用对HT-29细胞增殖无明显影响,但能减低COX-2、PARP-1蛋白表达.与单独作用相比,10μmol/L脱氧胆酸钠与100 μmol/L 5-AIQ联合能显著抑制HT-29细胞生长,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,COX-2、PARP-1蛋白表达减低,caspase-3蛋白表达无明显变化.结论：COX-2与PARP-1在脱氧胆酸钠促结肠癌细胞增殖的过程中可能存在相互作用,PARP-1抑制剂5-AIQ可能用于预防脱氧胆酸诱发的结肠癌.     

腺病毒介导XAF1基因诱导胰腺癌细胞株SW1990凋亡的实验研究

背景：X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）相关因子1（XAF1）是～种潜在的肿瘤抑制基因,能拮抗XIAP的抗凋亡作用。目的：探讨Ad5／F35腺病毒介导XAF1基因诱导胰腺癌细胞株SW1990凋亡的作用及其可能机制。方法：构建重组腺病毒Ad5／F35-XAF1和对照病毒Ad5／F35一Null,感染胰腺癌细胞株SW1990。分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白质印迹法检测XAF1mRNA和蛋白表达,以Annexin V—FITC／PI双染法和原位末端标记（TUNEL）法检测细胞凋亡率,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Caspase-3、PARP、Caspase．8、Caspase．9和细胞色素C的表达。结果：Ad5／F35．XAF1感染SW1990细胞后。XAF1mRNA和蛋白表达均显著增高,并能诱导细胞凋亡,同时伴有Caspase．3、PARP、Caspase．8和Caspase-9活化增强以及细胞色素C蛋白表达增加。结论：重组腺病毒Ad5／F35-XAF1感染胰腺癌细胞株SW1990后．能明显诱导细胞凋亡,其机制可能与XAFI激活了死亡受体途径和线粒体凋亡途径有关。