兔肺血栓调节蛋白的分离纯化及其抗凝作用的初步研究

本文用凝血酶亲和层析,制备电泳分离纯化了兔肺血栓调节蛋白(TM)。并对兔肺TM抑制血凝和血小板聚集,以及激活蛋白C 等作用进行了初步研究。结果表明,兔肺TM 的抗凝作用主要是抑制了内源性凝血系统,而对外源性凝血系统影响很小;并可通过蛋白C 系统起抗凝和纤溶作用;能完全抑制由凝血酶和瑞斯托霉素诱导的血小板聚集。     

用人血栓调节蛋白检测血浆蛋白C抗凝活性及其初步临床应用

本文报告采用纯化的人血栓调节蛋白作为人凝血酶活化血浆蛋白C(PC)的辅助因子所建立的一种人血浆PC抗凝活性的检测方法。本法的标准曲线直线性良好,可信性和重复性满意,所测72例健康人正常值为97±35％;系统性红斑狼疮患者为178±43％,与正常对照组有显著性差异(P<0.001);脑血管病患者为115±46％,与正常值无显著性差异。结合AT-Ⅲ抗原和活性,因子ⅦR∶Ag、Fbg/FDP和CIC等指标,对该检测方法的测定结果,以及血浆PC在系统性红斑狼疮患者止凝血机制异常中的意义进行了探讨。     

血液透析并发脑血管病患者血栓调节蛋白与高敏C反应蛋白检测的临床意义

目的观察血液透析并发脑血管病患者血栓调节蛋白（TM）、高敏C反应蛋白（hs-CRP）的变化。方法维持性血液透析患者75例（分并发脑血管病组30例和未并发脑血管病组45例）及同期健康体检者40例,分别测定透析组与对照组的TM、hs-CRP。结果透析并发脑血管疾病组TM水平较透析未发生脑血管疾病组及正常对照组均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）。透析并发脑血管疾病组hs-CRP水平较透析未发生脑血管疾病组及正常对照组均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。结论TM、hs-CRP是透析并发脑血管疾病的重要危险因素,对诊断透析并发脑血管疾病有较高的临床价值。     

人血栓调节蛋白及各相关因素在蛋白C体外活化中的作用

本文应用人血栓调节蛋白进行蛋白C功能检测,观察蛋白C在体外活化过程中血栓调节蛋白、蛋白C和凝血酶三者间的相互关系。人血栓调节蛋白在体外与凝血酶形成复合物而加速蛋白C的活化,牛凝血酶比人凝血酶对人血栓调节蛋白有更强的亲和性。血栓调节蛋白与凝血酶在蛋白C活化的作用中均呈现饱和性。本文就钙离子和肝素对体外蛋白C活化的影响及其生理意义进行了初步探讨。     

血栓调节蛋白与冠心病的关系

血栓调节蛋白（thrombomoduin,TM）是一种广泛分布于各种组织血管内皮细胞膜的单链糖蛋白,具有抗凝、抑制凝血酶、促进抗凝血酶灭活凝血酶等作用.近年研究发现TM具有独特的抗血栓及抗炎特性[1];TM能改善内皮功能紊乱,可作为血管内皮功能受损的标志物[2].TM水平与冠心病及急性冠脉综合征发生有密切关系,是目前心血管疾病领域研究关注点之一.现综述于下.     

危重患者血浆血栓调节蛋白的检测及意义

目的观察危重患者血浆血栓调节蛋白(TM)的变化及临床意义。方法40例危重患者按入院时急性生理学及慢性健康状况评分Ⅲ(APACHEⅢ)分组。A组23例,APACHEⅢ≥60分;B组17例,APACHEⅢ<60分。所有患者均于入院当时及入院后第二、三、五、七天,用ELISA法测定血浆TM水平。结果A组患者血浆TM浓度为(78.72±12.75)ng/ml,B组为(55.27±15.61)ng/ml,二组比较差异有统计学意义(P<0.01)。18例预后不良者与22例预后良好者血浆TM水平比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论血浆TM水平对判断危重患者病情的严重度及预后有一定临床意义。     

糖尿病血浆血栓调节蛋白水平的测定

目的：研究血浆血栓调节蛋白（ＴＭ）水平在糖尿病中的意义。方法：用酶联免疫吸附试验检测５２例２型糖悄病病人的ＴＭ水平,依照动脉粥样硬化病变的范围将病人分成３组：１组,糖尿病未并发闭塞性 样硬化性疾病组;２组,糖尿病并发一种闭塞性动脉粥样硬化性疾病组;３组,糖尿病并发两种或两种以上闭塞性动脉粥样硬化性疾病组。结果：糖尿病组及它的各亚组的ＴＭ水平均比对照组显著增加（Ｐ〈０．０１）;１组、２组、３组的ＴＭ     

肝病患者血栓调节蛋白检测的临床意义

目的 探讨急性肝炎、肝硬化和肝癌病人血浆血栓调节蛋白(TM)水平及其在疾病病情进展及预后判断中的意义.方法 采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法,检测30例急性肝炎和肝硬化病人、14例肝癌病人治疗前和治疗后血浆TM水平,并与12例健康者进行对照.结果 急性重症肝炎、肝硬化代偿、肝硬化失代偿组血浆TM水平皆较正常对照组显著增高,急性重症肝炎组明显高于急性甲型肝炎组,肝硬化失代偿组显著高于代偿组,肝癌病人术前血浆TM水平明显升高,与正常对照组比较差异有显著性. 结论 TM为血管内皮细胞损伤的标志物,可作为某些肝脏疾病病情进展及预后判断的重要指标.     

人Ⅲ型前胶原的提取、纯化与抗血清的制备

本文从雷佛诺尔引产的胎儿皮肤提取、纯化Ⅱ型前胶原，经聚丙酰胺凝胶电泳证实为单一区带；经还原后得到两个亚单位：Proα_1（Ⅱ）与pα_1（Ⅱ），前者分子量为19万，后者为17万。用此抗原免疫家兔获得高效价抗血清。免疫组化可见肝硬化与慢活肝的肝组织中的胶原染为棕色。本文系首次报道从人工流产的人胎皮中提纯Ⅱ型前胶原获得成功。     

人胎盘催乳素的纯化与鉴定

以正常产妇的新鲜胎盘为原料，经过盐析、等电点沉淀、离心等粗提，再经ＤＥＡＥ─纤维素阴离子交换层析，Ｓｅｐｈａｄｅｘ－Ｇ－１００凝胶过滤，并首次利用圆盘制备电泳纯化。最后获得人胎盘催乳素纯品，其活性采用１２５Ｉ－ｈＰＬ放免检测药盒测定。     

大鼠胰岛分离与纯化的实验研究

本实验经胰管注射胶原酶、胰腺静止消化方法。分离成年Wistar大鼠胰岛,葡聚糖密度梯度离心纯化。大鼠胰腺消化后,胰岛收获量为710～1015个/胰腺,纯化后胰岛收获量为610—820个/胰腺,纯度达92%。纯化胰岛形态结构完整,内分泌细胞超微结构保持良好;对葡萄糖刺激反应,胰岛素释放量是基础分泌水平的8倍;异体移植可逆转实验性糖尿病小鼠的高血糖达一周。     

人类胎盘碱性磷酸酶的分离纯化

①目的分离纯化人类胎盘碱性磷酸酶（ＰＬＡＰ）。②方法应用正丁醇抽提、丙酮沉淀、热处理、ＤＥＡＥ－纤维素和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析，从人类胎盘中提纯ＰＬＡＰ；聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）和高压液相层析（ＨＰＬＣ）鉴定其纯度；十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶电泳测其亚基分子量。③结果ＰＬＡＰ的纯化倍数为１６１倍，比活力为１３８ｍｍｏｌ·ｓ－１／ｇ；纯化的ＰＬＡＰ经ＰＡＧＥ鉴定为单一区带，ＨＰＬＣ分析为单一对称峰；测得酶的亚基分子量为６４．６９ｋｕ．④结论纯化的ＰＬＡＰ已达电泳纯和层析纯，可用于其结构与功能的研究     

应用Percoll分离纯化NK细胞

目的：从人外周血中分离纯化高纯度、高纯度及活性良好的静息状态ＮＫ细胞,为进一步研究其特性打下基础。方法：应用Ｐｅｒｃｏｌｌ非连续密度梯度离心法结合ｐａｎｎｉｎｇ负分离法获得所需ＮＫ细胞,并用免疫组化Ｅｎｖｉｓｉｏｎ二步法,ＭＴＴ还原法分别对ＮＫ细胞的纯度,酶活性及细胞毒活性进行全面鉴定。     

人肝癌金属硫蛋白的分离纯化及其性质的初步研究

将人肝癌组织匀浆、离心、乙醇沉淀后，经SephadexG－50、SephadexG－75和DEAE－SephadexA－25层析获得金属硫蛋白的两种亚型：MT－1，MT－2。结果表明，人肝癌组织中金属硫蛋白含量低（59．67μg／g肝重），该蛋白中半胱氨酸约占该蛋白氨基酸总量的1／3，未发现有芳香族氨基酸。研究发现，肝癌组织的MT主要含Zn而不是Cd。     

人类精浆特异性抗原p30的分离纯化

作者采用CM-Sephadex-C50,Sephadex-G100和DEAE-Sephadex-A50等柱层析方法,从人类精浆中分离纯化精浆特异性抗原p30,经聚丙烯酰胺凝胶电泳、SDS-凝胶电泳与免疫电泳等鉴定证实。     

人血浆载脂蛋白E的分离及纯化

本文建立了一种快速、简便、较大量分离载脂蛋白Ｅ（ＡｐｏＥ）方法。其优点：①选用高脂血症病人血浆，因ＡｐｏＥ的含量高，来源方便，故克服了分离提纯ＡｐｏＥ时因含量少，不易分离提纯的困难；②采用不连续密度梯度直立头超速离心法，此法只需加两种不同密度的溶液，比经典地超速离心法减少两种不同密度的溶液，故操作方便，且离心时间比经典方法（２４小时）缩短了十分之九；③获得极低密度脂蛋白中的载脂蛋白（ＡｐｏＶＬＤＬ），用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析（１．１×１００ｃｍ）分离提纯得到的ＡｐｏＥ，即是纯的ＡｐｏＥ，且避免了柱太长、不便操作的麻烦。纯化了的ＡｐｏＥ在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ中显示一条带，测得分子量为３．８ｋＤａ。     

人血浆低分子量激肽原的分离与纯化

血浆低分子量激肽原是舒缓激肽前体之一。本文报道应用四柱层析纯化法,分离两种高纯化低分子量激肽原。纯化的低分子量激肽原Ⅰ的分子量为50000,低分子量激肽原Ⅱ分子量为55000。并测定其等电点分别为4.7与4.6。     

人胎肝金属硫蛋白的分离纯化及其性质的研究

从人胎肝分离得到金属硫蛋白两种亚型(CdBPⅠ和CdBPⅡ)。研究发现人胎肝中金属硫蛋白的含量较高(1.0～1.3mg/克肝重),且可能随胎龄增长发生某种变化。CdBPⅠ的氨基酸成份分析结果表明,该蛋白中半胱氨酸约占1/3,随后依次是丝氨酸、赖氨酸、谷氨酸等,未发现有芳香族氨基酸和组氨酸。并对CdBPⅠ和CdBPⅡ的分子量、金属离子结合能力和紫外吸收光谱等物理化学性质进行了初步研究。