养精种玉汤对兔卵巢颗粒细胞孕酮生成的影响及机制

目的：观察养精种玉汤加减方剂的醇提取液对离体培养卵巢颗粒细胞孕酮生成的影响，并进行机制探讨；方法；应用放免检测孕酮血清浓度；结果：该提取液可增加颗粒细胞孕酮基础分泌量和hCG诱导下的增加分泌量，明显增加细胞cAMP的浓度。     

宁心红杞含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞超微结构及雌激素分泌的影响

目的:探讨宁心红杞含药血清对离体大鼠卵巢颗粒细胞超微结构及雌激素分泌的影响.方法:体外培养的卵巢颗粒细胞用氯化镉造模,加入宁心红杞舍药血清作用24h后,在电镜下观察颗粒细胞超微结构的变化,放射免疫法测定培养液中雌激素的浓度.结果:宁心红杞舍药血清可明显增加雌二醇(B)的分泌,能明显改善离体大鼠卵巢颗粒细胞超微结构,电镜下表现为分泌颗粒增多,滑面内质网增多等.结论:宁心红杞胶囊可通过增加雌二醇的分泌及超微结构的改变来改善卵巢功能,延缓卵巢衰老.     

左归丸水提醇沉液对体外培养大鼠卵巢颗粒细胞生长的影响

目的:初步探讨左归饮对围绝经期综合征治疗的机理。方法:将左归饮的水提醇沉液以10-4、10-5、10-6g/ml三个终浓度加入单独培养的大鼠卵巢颗粒细胞或含有10%围绝经期大鼠血清的大鼠卵巢颗粒细胞培养系统,通过MTT法观察药物对卵巢颗粒细胞生长的影响。结果:左归饮对单独培养的大鼠卵巢颗粒细胞或含有10%围绝经期大鼠血清的大鼠卵巢颗粒细胞的生长均未显示任何作用。结论:左归饮治疗围绝经期综合征的机理可能通过促进卵巢颗粒细胞生长以外的途径。     

阿胶对去卵巢小鼠雌激素的影响

目的:研究阿胶对去卵巢小鼠雌激素的影响.方法:成年雌性小鼠切除双侧卵巢后,将造模后小鼠按体重随机分为假手术组、阿胶高剂量组(16 g/kg)、阿胶中剂量组(8 g/kg)、阿胶低剂量组(4 g/kg)和补佳乐组(0.4 mg/kg),每组10只,连续灌胃给药30 d.末次给药后,称重,计算小鼠子宫系数、Elisa法检测...     

右归丸鼠血清恢复冻融小鼠卵巢的功能

目的探讨右归丸(熟地黄,附子,肉桂,山药,吴茱萸,菟丝子,鹿角胶,枸杞子,当归,盐杜仲)鼠血清对程序化冻融小鼠卵巢组织功能的影响。方法 40只6周龄ICR小鼠经孕马血清促性腺激素刺激,其卵巢经液氮中冻存2 d后复苏,将所有卵巢组织随机分为空白组、空白血清组、尿促卵泡素组及右归丸血清组。所有卵巢经特殊DMEM高糖培养基培养24 h后从左侧卵巢中取出未成熟卵母细胞,微滴法培养24 h观察并计算小鼠卵细胞体外第一极体(PB1)排出率。并通过酶联免疫吸附法检测培养基中雌二醇(E2)水平,右侧卵巢组织中小鼠成熟促进因子(MPF)、卵泡刺激素受体(FSH-R)及黄体生成激素受体(LH-R)水平。结果卵巢组织冻融后,右归丸血清组的卵母细胞成熟率、卵巢组织中的MPF、FSH-R和LH-R的水平高于尿促卵泡素阳性组和空白组。右归丸血清组体外培养基中E2水平较空白血清组高,并显著高于空白组。结论右归丸有可能在临床上成为一种辅助冻存卵巢组织功能恢复有效的补肾中药复方。     

宁心红杞含药血清对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及机制

目的探讨宁心红杞含药血清对离体大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及其机制。方法体外培养的卵巢颗粒细胞中用氯化镉造模,加入宁心红杞含药血清共同作用24 h后收集颗粒细胞,通过流式细胞仪观察其凋亡现象和用酶标法检测caspases-3蛋白的表达。结果流式细胞仪结果显示宁心红杞含药血清可明显改善氯化镉导致的颗粒细胞凋亡,凋亡峰较模型组明显降低;含药血清组明显降低caspases-3的表达,与模型组相比有显著性差异（P〈0.01）。结论宁心红杞可通过降低caspases-3蛋白的表达来改善颗粒细胞的凋亡,延缓卵巢衰老。     

葛根对15月龄雌性大鼠子宫、卵巢及卵巢颗粒细胞中雌激素表达的影响

目的：研究葛根对15月龄雌性大鼠子宫、卵巢的影响及卵巢颗粒细胞中雌激素变化。方法：选用雌性wistar大鼠50只，月龄15个月，体重240～380g。随机分为围绝经期组、葛根高剂量组（4倍于低剂量）、葛根低剂量组、西药对照组（尼尔雌醇）、中药对照组（更年康组）。每组10只。另选10只月龄5个月，体重180～200g雌性wistar大鼠作为青年对照组。各组给药4周后，处死，剥离子宫称重。用免疫组化的方法测卵巢颗粒细胞中雌激素的表达及用HE染色的方法观察卵巢形态学的变化。结果：显示葛根能增加围绝经期雌性大鼠子宫重量及卵巢颗粒细泡中雌激素的分泌和改变卵巢形态的作用。结论：葛根具有类雌激素样作用，为开发治疗绝经期综合征的新药提供实验依据。     

当归注射液对辐射损伤后小鼠卵巢颗粒细胞凋亡影响的实验研究

目的 :探讨当归注射液对辐射损伤的卵巢颗粒细胞凋亡的影响。方法 :应用当归注射液对 6 0 Co- γ射线辐射损伤后的小鼠卵巢组织给予治疗 ,连续给药 30 d,通过脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测治疗后的卵巢颗粒细胞凋亡率。结果 :实验用药组卵巢颗粒细胞凋亡率显著低于实验对照组 (P <0 .0 0 1)。结论 :当归注射液对辐射损伤后的小鼠卵巢结构和功能具有重要的保护作用     

右归丸对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗的临床研究

目的：观察右归丸对多囊卵巢综合征胰岛素抵抗（PCOS-IR）的临床疗效。方法：将82例PCOS—IR患者随机分为治疗组42例,采用右归丸治疗,对照组40例采用盐酸二甲双胍片治疗。观察治疗前后胰岛素、血脂、性激素水平及临床疗效。结果：两组患者在临床疗效、性激素水平、胰岛素水平、血脂等方面比较治疗组均优于对照组,结果有统计学意义。结论：右归丸能改善PCOS—IR,调节内分泌紊乱,恢复正常月经和排卵周期。     

补肾活血方对离体培养卵巢颗粒细胞性激素分泌的影响

目的:比较不同浓度补肾活血方含药血清对离体培养卵巢颗粒细胞内分泌功能的影响.方法:采用针刺提取卵泡颗粒细胞、离心分离,HE染色及FSHR免疫组化鉴定细胞,分别用0ng/mL、2.5ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL FSH刺激颗粒细胞,wst-1法测定相关OD值.用ELISA法测定不同浓度补肾活血方含药血清对离体培养卵巢颗粒细胞E2、P激素分泌的影响.结果:分离培养的颗粒细胞存活率＞90％;光镜下细胞贴壁规则,形态完整,呈梭型;HE染色:核深蓝色,胞浆淡红色;免疫组化:核呈蓝紫色,浆呈棕黄色.结论:补肾活血方能明显促进卵巢颗粒细胞的分泌功能,且中剂量效果更为显著.     

左、右归饮对小鼠血浆环核苷酸的影响

分别给予左、右归饮煎液和生理盐水灌胃6天,测试小鼠血浆环核苷酸含量。结果表明左、右归饮对小鼠血浆环核苷酸的含量有不同影响,提示滋肾阴和温肾阳对机体环核苷酸系统有不同作用。     

左归丸、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导的影响

目的:研究左归丸、右归丸及其拆方对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)成脂诱导的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:将90只SD雌性大鼠,随机选取10只作为正常组,其余80只再随机选取10只经双侧腰背部切口切除卵巢周围少量脂肪组织作为假手术组,其余70只以相同切口切除双侧卵巢作为模型组,分别以正常组,假手术组,模型组,左归丸组(18.9 g·kg~(-1)),右归丸组(20.52 g·kg~(-1)),共同药组(15.12 g·kg~(-1)),滋阴药组(12.96 g·kg~(-1)),补阳药组(8.1 g·kg~(-1))和戊酸雌二醇片组(0.36 mg·kg~(-1))共9组,对BMSCs进行干预,流式细胞仪鉴定BMSCs,用油红O检测脂滴的形成;采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ),脂蛋白脂肪酶(lipoprotein,LPL),脂肪酸结合蛋白4(fatty acid binding protein 4,FABP4)mRNA的表达;采用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测CCAAT/增强子结合蛋白β(CCAAT/enhancer binding proteinβ,C/EBPβ)蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组BMSCs明显向脂肪细胞分化,PPARγ,LPL,FABP4 mRNA表达及C/EBPβ蛋白的表达明显升高(P0.05);与模型组比较,左归丸、右归丸及其拆方均可抑制BMSCs向脂肪细胞分化,其中右归丸组可明显下调PPARγ,LPL,FABP4 mRNA,降低C/EBPβ的蛋白的表达(P0.05)。结论:左归丸、右归丸及其拆方均能抑制BMSCs的成脂分化,且右归丸抑制成脂分化的作用优于左归丸,以及补阳药及二者的共同药组。     

右归饮对皮质酮大鼠下丘脑单胺类递质含量以及体重饮食摄水的影响

本研究观察大鼠在每日注射皮质酮（１０ｍｇ／ｋｇ皮下注射共１４天）状态下，下丘脑单胺类递质含量、每日体重、饮食、摄水的变化，以及右归饮对这些变化的影响。结果表明：皮质酮大鼠下丘脑去甲肾上腺素、３，４二羟基苯乙酸、多巴胺、５－羟基吲哚乙酸、５－羟色胺等单胺类递质含量明显升高，体重增长严重受抑，每日饮食与摄水量显著减少；加用右归饮（１０ｇ／ｋｇ灌胃共１４天）后能有效改善皮质酮大鼠的上述各项指标。提示：外源性糖皮质激素在抑制下丘脑—垂体—肾上腺轴（ＨＰＡ）时可能激活中枢单胶类递质的合成与代谢和抑制体重增长，减少每日饮食摄水量；右归饮在改善皮质酮大鼠ＨＰＡ轴抑制程度的同时，抑制其中枢单胺类递质的激活，保护下丘脑对饮食摄水的正常调节。     

四君子汤和右归饮对衰老大鼠学习记忆能力及自由基水平的影响

目的观察比较四君子汤、右归饮对衰老模型大鼠学习记忆能力和脑组织中自由基的影响。方法以D-半乳糖腹腔注射致亚急性衰老动物模型,观察大鼠水迷宫游泳到达出口的时间及错误次数及脑组织中SOD、MDA、NO、NOS等有关自由基指标。结果四君子汤可缩短衰老模型大鼠水迷宫游泳到达出口的时间;右归饮可升高衰老模型大鼠脑组织SOD水平,降低MDA水平,四君子汤可降低衰老模型大鼠脑组织中NO、NOS水平。结论四君子汤可改善D-半乳糖致衰老模型大鼠空间学习记忆能力,具有增强记忆的功能;右归饮能减轻模型大鼠脑组织自由基对机体的损伤,具有良好的抗自由基作用。     

低浓度人参水提液对肺A549细胞癌性的影响及其机制研究

目的：探讨低浓度人参水提液(LWEG)对肺癌A549细胞癌性包括细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响,以更加全面地了解人参对肺癌A549细胞的影响。方法：将细胞分为对照组、WEG组(1.25,2.5,5,10,20,40,80,160 mg/mL)。通过MTT法检测不同浓度WEG对A549细胞增殖的影响,进而筛选出LWEG的浓度范围,再通过划痕实验与Transwell小室侵袭实验分别检测LWEG(2.5,5,10 mg/mL)对A549细胞迁移、侵袭能力的影响。并运用网络药理学研究策略对其潜在的作用机制进行预测分析。结果：与对照组相比,LWEG组A549细胞增殖显著增加,细胞的迁移和侵袭能力均明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。网络药理学预测分析表明这一作用可能与ErbB信号通路及代谢和应激反应有较大关联。结论：LWEG直接作用于A549细胞,能够提高A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力。     

淫羊藿激活内源性干细胞及其机制研究

干细胞是具有自我更新与增殖分化能力的细胞,通过激活内源性的干细胞而改善再生反应为治疗退行性疾病提供了一个新的思路。笔者在皮质酮大鼠（肾阳虚证模型）观察到淫羊藿总黄酮（EF）能促进肾上腺皮质干细胞的增殖、迁移,采用基因芯片技术发现EF对皮质酮大鼠生长激素（GH）、生长激素释放激素（GHRH）及各类促生长因子如胰岛素样生长因子结合蛋白（IGFBP）、神经生长因子（NGF）等具有显著上调作用。在自然衰老大鼠（肾虚证模型）发现EF能使多个组织的基因表达年轻化,也使老年大鼠下调的GH、GHRH及IGFBP、NGF等的表达上调。采用体外分离的胚鼠神经干细胞进一步证明淫羊藿及其提取物对干细胞具有直接促增殖作用。上述一系列的研究提示淫羊藿及其提取物对干细胞的作用可能是其拮抗糖皮质激素对下丘脑－垂体－肾上腺轴的抑制和延缓衰老的细胞学基础;也表明中医药可通过动员与提高激素、细胞因子水平激活内源性干细胞,发挥机体储备的潜力而治疗疾病。     

补肾丹对衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因表达的影响

目的:研究补肾丹对衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因表达的影响。方法:将清洁级健康Wistar雄性大鼠,随机分为7组:正常对照组、金匮肾气丸组、补肾丹高、中、低剂量组、维生素E组及模型组。除正常对照组外,各组腹腔注射D-gal[250mg/(kg.d)]60天,采用D-半乳糖致亚急性衰老法[1],造成大鼠拟衰老动物模型。同时,正常对照组和模型对照组给等体积的生理盐水,金匮肾气丸组同时给予金匮肾气丸[0.72g/(kg.d)]灌胃,补肾丹高、中、低剂量组同时分别给予相当于生药2.7g/(kg.d)、1.35g/(kg.d)、0.675g/(kg.d)灌胃。维生素E组每日灌服维生素E0.027g/kg,每日1次,共60天。观察衰老模型大鼠脑海马组织超微结构及Bcl-2、Bax基因的表达。结论:补肾丹具有改善衰老模型大鼠海马组织病理改变的作用,还可提高Bcl-2基因的表达,抑制Bax基因的过度表达,这有可能是其延缓衰老的作用机制之一。     

人参茎叶皂甙对创伤小鼠活化T细胞内CAMP代谢、蛋白激酶A活性的影响

皮下注射人参茎叶皂甙(GS)50mg／kg，连续4天。可明显拮抗撞击创伤小鼠活化T细胞内CAMP含量、腺苷酸环化酶(AC)、蛋白激酶A(PKA)活性的升高及CAMP-磷酸二酯酶(CAMP-PDE)活性的降低。0．1～100p．g／ml的GS在体外也可降低创伤小鼠活化T细胞内CAMP含量及AC和PKA的活性，并升高CAMP-PDE活性。表明GS对创伤后T细胞功能受抑状态的纠正作用与此有关。     

大黄素对小鼠缺血再灌注肠黏膜肥大细胞活性的影响

目的:研究大黄素对小鼠肠缺血再灌注肠黏膜肥大细胞活性的影响。方法:28只昆明种小鼠随机均分为4组,假手术组(A组)、模型组(B组)、模型+大黄素60 mg.kg-1组(D1组)及模型+大黄素120 mg.kg-1组(D2组)。采用肠系膜上动脉夹闭法建立小肠缺血再灌注模型,观察肠黏膜病理结构变化、肠黏膜肥大细胞超微结构变化及类胰蛋白酶表达、比较计算肥大细胞数量,测定小肠组织组胺、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度。结果:与假手术组比较,模型组Chiu’s评分、肥大细胞数量、组胺及TNF-α浓度显著增加(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,大黄素60,120 mg.kg-1组的肥大细胞数量明显减少(P<0.05),大黄素120 mg.kg-1组的小肠组织TNF-α浓度明显降低(P<0.05)。假手术组肥大细胞超微结构正常,模型组肥大细胞颗粒包膜相互融合形成细胞内空泡等脱颗粒现象,大黄素60,120 mg.kg-1组肥大细胞形成空泡较少。结论:大黄素能减少小鼠小肠黏膜结构破坏,抑制小肠肥大细胞活化及脱颗粒,从而起到防治肠缺血再灌注损伤的作用。     

针刺对糖尿病周围神经病变垂体-肾上腺轴激素和免疫细胞因子的影响

方法：测定针刺前后单纯针刺组及针药联合组促肾上腺皮质激素（ACTH）、皮质醇（CS）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素－6（IL－6）、血小板聚集率（PAgT)、纤维蛋白原（FG）、凝血酶原时间（PT）、空腹血糖（EBG）含量和临床症状评分。结果：两组治疗均能明显降低垂体－肾上腺轴激素、免疫细胞因子、PAgT、FG、FBG水平（P＜0．01），提高PT浓度（P＜0．01），减少症状评分量值（P＜0．01），差值比较，尤以针药组为突出（P＜0．05，P＜0．01）。