雷公藤甲素对白血病HL-60和Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨雷公藤甲素对人急性髓系白血病HL-60细胞、急性T淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:采用MTT法、Annexin V-FITC/PI双染法、PI染色法、透射电镜观察不同浓度雷公藤甲素作用于两种细胞,对其生长增殖、凋亡、细胞周期及形态等方面的影响。结果:雷公藤甲素能显著抑制HL-60、Jurkat细胞的增殖,降低其存活率。给药24 h后,半数细胞抑制剂量(IC50)分别为(42.50±9.38)nmol/L和(60.91±9.77)nmol/L。能以剂量依赖方式诱导两种细胞凋亡,细胞周期分布G1期比例增加,S期比例降低(P<0.05),且伴有典型的细胞凋亡形态学改变。结论:雷公藤甲素能显著抑制HL-60、Jurkat细胞的生长增殖,并诱导细胞凋亡。     

雷公藤甲素对哮喘动物模型气道反应性的观察

雷公藤作为一种免疫调制剂已被用于多种疾病的治疗。但雷公藤是否影响哮喘气道反应性尚不清楚。我们对此做了初步研究，报道如下。一、材料与方法１．动物处理：选健康豚鼠２３只（重量４００～５５０ｇ），雌雄不拘，随机分为（１）哮喘组：在第一和第八天，用１％卵蛋白（ＯＡ）给豚鼠雾化吸入致敏。在第１６～２０天，用２％ＯＡ进行激发，使致敏豚鼠出现哮喘样发作为止。激发前４５～６０分钟给予苯海拉明１０ｍｇ／ｋｇ皮下注射，以预防ＯＡ激发导致动物死亡。第１９、２０天用１％ＯＡ激发。不用苯海拉明。在第２１天测定气道反应性。…     

雷公藤甲素对哮喘小鼠白三烯B_4、C_4表达的影响

目的研究雷公藤甲素对哮喘小鼠哮喘小鼠白三烯B4、C4表达的影响,探讨其治疗哮喘的机制。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型,随机分为7组,分别为对照组、地塞米松治疗组及不同剂量雷公藤甲素治疗组,用ELISA测定支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织匀浆中白三烯B4、C4表达水平。结果哮喘组白三烯B4、C4表达明显高于正常对照组(P<0.01),雷公藤甲素治疗组及地塞米松组明显低于哮喘组(P<0.01)。结论雷公藤甲素抑制哮喘气道炎症的机制可能与其抑制白三烯B4、C4表达的表达活性有关。     

雷公藤甲素对哮喘小鼠白介素8及白介素10表达的影响

目的研究雷公藤甲素对哮喘小鼠的治疗作用及对白介素8（IL-8）及白介素10（IL-10）表达的影响。方法 60只小鼠,随机分6组,每组各10只。分别为正常对照组（A）、哮喘组（B）、地塞米松治疗组（C）及不同剂量雷公藤甲素治疗组（D、E、F）,建立小鼠卵蛋白哮喘模型,用ELISA测定肺组织匀浆及气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-8、IL-10表达水平。结果哮喘组小鼠肺组织匀浆及BALF中IL-8表达均高于正常对照组（P〈0.01）,哮喘组小鼠肺组织匀浆及BALF中IL-10表达均低于正常对照组（P〈0.01）,雷公藤甲素治疗组及地塞米松组IL-8低于哮喘组（P〈0.01）,雷公藤甲素治疗组及地塞米松组IL-10高于哮喘组（P〈0.01）。结论雷公藤甲素对哮喘小鼠有明显治疗作用,可抑制IL-8表达及提高IL-10的表达。     

雷公藤诱导细胞凋亡的研究进展

雷公藤Tripterygium wilfordii提取物在临床上常用于治疗类风湿关节炎等多种疾病，其疗效已被广泛认可，近5年来国内外学者从其提取物诱导细胞凋亡的角度，对其药理机制进行了细胞分子水平的探讨，现对其研究进展进行综述。     

雷公藤甲素对兔血管平滑肌细胞增生和凋亡的影响

目的 研究雷公藤甲素（TP）是否具有抑制血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖并诱导其发生凋亡的作用,为临床开发新型药物洗脱支架提供实验依据。方法主动脉SMCs体外培养和流式细胞仪检测,DNA凝胶电泳。结果TP组与阳性对照地塞米松相比,凋亡率有显著提高;TP干预组凝胶电泳谱型呈凋亡特征性梯状条带。结论TP可抑制指数生长期SMCs增殖并诱导其凋亡。     

雷公藤甲素诱导大鼠肾上腺皮质细胞凋亡研究

目的：了解雷公藤甲素诱导大鼠肾上腺皮质细胞凋亡的发生。方法：体外分离培养大鼠肾上腺皮质细胞,以蛋白因子添加素V和碘化丙啶（PI）联合标记,流式细胞仪检测,观察雷公藤甲素诱导细胞凋亡的特征。结果：雷公藤甲素以时间和剂量依赖的方式诱导细胞凋亡,0、12．5、25、50、100和200μg／L雷公藤甲素处理细胞2h,凋亡率分别为1．67％、16．54％、32．53％、47．62％、57．12％72．77．45％;100μg／L雷公藤甲素染毒0、0．5、1、2、3和4h,细胞凋亡率分别为1．12％、14．37％、35．26％、4975％、62．65％及78．46％。结论：雷公藤甲素可诱导肾上腺皮质细胞凋亡。     

哮喘CD4、CD8T细胞凋亡的变化

活化的Ｔ细胞通过分泌ＩＬ ３、ＩＬ ５、ＧＭ ＣＳＦ促进嗜酸性细胞(ＥＯＳ)的分化、活化、存活延长及气道内募集［１］,在哮喘气道炎症的发病中起重要的调控作用。本研究采用免疫细胞化学 (ＩＣＣ)Ｓ ＡＰ法与３＇末端转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记 (ＴＵＮＥＬ)双标染色 ,对哮喘豚鼠外周血ＣＤ４、ＣＤ８Ｔ细胞凋亡进行检测 ,观察哮喘Ｔ细胞亚群凋亡的变化。１材料与方法１．１主要试剂淋巴细胞分离液为上海试剂二厂产品。小鼠抗人ＣＤ４、ＣＤ８单克隆抗体及Ｔ淋巴细胞亚群检测试剂盒购自北京中山公司。卵蛋白 (ＯＡ)购自上海生化试…     

雷公藤甲素对哮喘小鼠气道重塑及 转化生长因子-β1表达的影响

  【目的】 探讨雷公藤甲素对支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道重塑的影响。【方法】 40只雌性SPF级BABL/c小鼠,随机数字表法分为4组,每组10只、A组为生理盐水对照组;B组为卵蛋白(OVA)哮喘组;C组为雷公藤甲素治疗组;D组为地塞米松治疗组。在末次激发24 h后所有小鼠取左肺组织行苏木精-伊红(HE)染色,过碘酸-雪夫(PAS)染色,Masson三色染色以及抗转化生长因子β1(TGF-β1)抗体免疫组化染色。测定支气管管壁厚度(WAt/Pbm),支气管平滑肌厚度(WAm/Pbm)?取右肺组织行RT-PCR检测TGF-β1 mRNA表达。【结果】 B组小鼠支气管管壁厚度、杯状细胞百分数、气道平滑肌厚度、胶原纤维面积、TGF-β1的转录和表达水平均显著高于A组(P < 0.01)。C组小鼠上述各指标依次均显著低于B组(P < 0.05),D组小鼠上述指标显著低于B组(P < 0.05)。但C组和D组上述各指标间差异无统计学意义(P > 0.05)?肺组织的TGF-β1的蛋白表达水平与支气管的管壁厚度,平滑肌厚度,杯状细胞比,胶原纤维含量成正相关(相关系数分别为0.755?0.815?0.898?0.837;P < 0.01)。【结论】 雷公藤甲素可抑制BABL/c哮喘小鼠气道重塑的发生,其机制有可能是通过抑制TGF-β1的表达而实现的。     

糖皮质激素对哮喘豚鼠气道T淋巴细胞凋亡的影响

摘要：目的探讨地塞米松减轻哮喘气道炎症的作用及其分子机制。方法采用卵白蛋白致敏法建立豚鼠哮喘模型，以定喘止咳片做药物对照，治疗1周后记录各组的诱喘潜伏期，并进行肺组织病理学检查，同时分离BALF液中T淋巴细胞采用流式细胞仪定量检测方法（FITC—AnnexinV／PI染色法）测定其凋亡率。结果地塞米松能显著延长哮喘豚鼠的诱喘潜伏期、减轻气道炎症、促进BALF中T淋巴细胞的凋亡，作用明显优于定喘止咳片（P〈O．05）。结论地塞米松有明确的抗炎平喘作用，促进气道T淋巴细胞凋亡可能为其主要的作用机制之一。     

Dynamic changes in infiltration and apoptosis of eosinophils in airway of asthmatic guinea pigs

Bronchialasthmaisachronicinflammatorydisorderinwhichmanykindsofcellsareinvolved.Amongthecells,eosinophilsplaytheimportantrole.Inadditiontotheincreaseofthedifferentiationandmaturingofeosinophilsinthebonemarrow,theprolongationofthelifespanandinhibitionoftheapoptosisofthesecellswerethoughttocontributetoeosinophiliaintheairwayofasthma[IJ.Inthisstudy,thedynamicchangesoftheeosinophilicaccumulationandapoptosiswereinvestigatedwithinsitutailing,examinationofthebronchoalveolarlavage(BAI-F)andhistologi…     

椒目油对豚鼠哮喘模型肥大细胞和类胰蛋白酶的影响

目的:探讨椒目油(ZSO)对豚鼠哮喘模型肺组织中肥大细胞及血浆类胰蛋白酶的影响,为ZSO治疗哮喘提供理论依据. 方法:实验分为4组:对照组,哮喘模型组,地塞米松治疗组和ZSO治疗组. 用卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏和雾化吸入激发建立哮喘豚鼠模型. 镜下观察肺组织肥大细胞数量及脱颗粒现象. 运用UniCAP100全自动体外变应原检测仪测定豚鼠血浆类胰蛋白酶含量. 结果:哮喘模型组豚鼠肺高倍视野肥大细胞数、脱颗粒百分率及血浆类胰蛋白酶含量分别为(14.87±4.67),(42.85±5.99),(119.78±12.50),与对照组(2.38±0.52),(24.91±9.79),(88.78±4.74)相比均升高,差异有统计学意义(P＜0.01). ZSO治疗组豚鼠肺高倍视野肥大细胞数、脱颗粒百分率及血浆类胰蛋白酶含量分别为(6.38±1.06),(25.44±8.21),(93.22±6.40),与地塞米松治疗组豚鼠肺高倍视野肥大细胞数、脱颗粒百分率及血浆类胰蛋白酶含量分别为(6.63±1.41),(25.33±6.14),(92.10±7.11),与哮喘模型组相比显著降低,差异有统计学意义(P＜0.01). ZSO与地塞米松两治疗组之间上述指标相比差异均无统计学意义(P＞0.05). 结论:ZSO能有效地减少哮喘豚鼠肺肥大细胞数量,抑制肥大细胞脱颗粒、释放类胰蛋白酶,从而能有效地治疗哮喘.     

雷公藤内酯醇对T淋巴细胞增殖活性的影响

应用体外细胞培养方法，研究了雷公藤内酯醇（Triptolide，Tri）对小鼠T淋巴细胞增殖活性的影响。结果表明：Tri对ConA激活的淋巴细胞转化及特异性抗原激活的混合淋巴细胞反应均有明显抑制作用，抑制作用的强度与Tri的应用剂量及时机有关。     

模拟高原低压舱治疗对哮喘缓解期豚鼠血清皮质醇和CD4+T淋巴细胞的影响

目的探讨模拟高原缺氧条件治疗哮喘的机制,为临床应用模拟高原低压舱治疗儿童哮喘提供部分理论依据.方法采用10%卵蛋白(OA)致敏和5次1%OA诱发复制哮喘豚鼠动物模型,设立正常对照组、哮喘对照组和低压舱治疗组3组.利用模拟4 000m海拔高原条件的低压舱治疗干预,结束后3组均作血清皮质醇、支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数和低密度EOS(HEOS)百分率和外周血CD4 T淋巴细胞数量以及气道平滑肌张力的测定.结果 (1)正常对照组和低压舱治疗组的血清皮质醇含量均非常显著地高于哮喘对照组(P<0.01),且低压舱治疗组值与正常对照组无显著差异(P>0.05).(2)哮喘对照组和低压舱治疗组BALF中EOS绝对值及HEOS百分率均数均非常显著高于正常对照组,同时,低压舱治疗组非常显著低于哮喘对照组(P<0.01);(3)正常对照组和低压舱治疗组外周血CD4 T淋巴细胞数量明显低于哮喘对照组(P<0.01);(4)哮喘组气道平滑肌张力明显增高.结论低压舱治疗能使哮喘缓解期豚鼠血清皮质醇升高,抑制CD4 T淋巴细胞活化,从而使其BALF中EOS数和活化的EOS(HEOS)减少,降低气道平滑肌张力,有利于预防哮喘复发和减轻哮喘发作症状,在临床上有潜在的应用价值.     

氨茶碱、地塞米松对哮喘患者CD4+CD25+T调节细胞抑制功能的影响

目的探讨哮喘患者CD4+ CD25+ T调节细胞的作用是否存在缺陷及药物(地塞米松、小剂量氨茶碱)对其作用的影响,为有效控制哮喘提供依据。方法分离哮喘患者及健康对照者外周血CD4+ CD25+ T调节细胞及CD4+CD25-T淋巴细胞并培养,设CD4+ CD25+ T调节细胞组、CD4+CD25-T淋巴细胞组及CD4+ CD25+ T调节细胞联合CD4+CD25-T淋巴细胞组,第3组又分为氨茶碱干预组、地塞米松干预组及空白对照组,72h后取培养上清液用ELISA法检测IFN-γ、IL-5、IL-13水平。结果健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞可抑制IFN-γ、IL-5及IL-13的生成(P<0.01),哮喘患者仅抑制IFN-γ、IL-5的生成(P<0.01);地塞米松预处理CD4+ CD25+ T调节细胞后,健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制IFN-γ(P<0.05)、IL-5(P<0.01)、IL-13(P<0.01)生成能力增强,哮喘患者抑制IL-5、IL-13生成能力增强(P<0.01);采用氨茶碱预处理后,健康对照者CD4+ CD25+ T调节细胞抑制IL-5(P<0.01)、IL...     

滨蒿内酯对哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和IL-2生成的影响

目的：研究哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和白细胞介素2（IL-2）含量的变化及滨蒿内酯（Sco）对其的影响。方法：建立卵蛋白致敏的哮喘豚鼠模型。MTT比色分析法测定光密度值，比较不同浓度Sco对淋巴细胞增殖、植物血凝素（PHA）诱导的T淋巴细胞转化以及脾细胞分泌IL-2活性的影响。结果：Seo剂量依赖地对哮喘豚鼠淋巴细胞增殖有抑制作用；Seo能够抑制PHA诱导的哮喘朦鼠T淋巴细胞转化；哮喘豚鼠IL-2生成水平高于正常对照组。Seo也可抑制哮喘豚鼠IL-2的活性。结论：Seo在体外抑制哮喘豚鼠脾淋巴细胞转化和脾淋巴细胞产生IL-2的水平，可能是其治疗哮喘的免疫学机制之一。     

雷公藤对致敏小鼠T细胞活化及其IL-5 mRNA表达的影响

目的　探讨致敏小鼠T淋巴细胞活化与IL 5mRNA表达间的关系及雷公藤内酯醇 (TP)的影响。方法　采用卵蛋白(OVA )致敏的方法建立模型 ;运用免疫细胞化学与原位杂交双染法 (ICC ISH)观察活化的T淋巴细胞 (CD2 5 )与IL 5mRNA表达的相关性及TP、地塞米松 (DM)的影响 ;同时就TP的作用与DM相比较。结果　致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著高于正常对照组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著高于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著低于正常对照组 (P <0 0 1) ,CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与正常对照组间无显著差异(P >0 0 5 )。经TP、DM处理后 ,致敏小鼠T淋巴细胞CD2 5与IL 5mRNA表达均显著低于致敏组 (P <0 0 1)。CD2 5 IL 5mRNA双染结果显示 :CD2 5 + IL 5mRNA+ T淋巴细胞显著低于致敏组 (P <0 0 1) ,CD2 5 - IL 5mRNA- T淋巴细胞显著高于致敏组 (P <0 0 1) ,而CD2 5 + IL 5mRNA- 及CD2 5 - IL 5mRNA+ T淋巴细胞与致敏组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。TP组与DM组间无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论　IL 5mRNA表达与T淋巴细胞活化关系密切。TP、DM抑制T淋巴细胞活化可能是其抑制IL 5产生的机制之