Effects of berberine on L-and T-type calcium channels in guinea pig ventricular myocytes

目的：研究小檗碱（Ｂｅｒ）对心室肌细胞钙通道的影响．方法：全细胞膜片箝技术．结果：Ｂｅｒ（１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１）使豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙流由１４００±２４７ｐＡ分别减至９７８±２０４ｐＡ及６１７±２３ｐＡ（ｎ＝５，Ｐ＜００５），抑制效应呈浓度依赖及非频率依赖，其电流－电压曲线的峰值下降．Ｂｅｒ（１０μｍｏｌ·Ｌ－１）使Ｌ型钙流失活曲线的最大半激活电压由－２７８ｍＶ变为－３４２ｍＶ，斜率因子由９２２变为１３０３，对激活曲线无影响．Ｂｅｒ（１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１）使Ｔ型钙流峰值由加药前的１５４±８０ｐＡ降至１０１±７８ｐＡ及４８±４５ｐＡ（ｎ＝８，Ｐ＜００５）．结论：Ｂｅｒ对Ｌ和Ｔ型钙通道均有抑制作用．     

钙通道阻塞剂对大鼠肝细胞钙释放激活的钙电流的影响

目的 研究钙通道拮抗剂对大鼠肝细胞钙释放激活的钙电流（ＩＣＲＡＣ）的影响。方法 应用全细胞膜片箝技术。结果：ＩＣＲＡＣ的电流峰值是（－０．４１±０．０９）ｎＡ（ｎ＝１５）反转电位约为０ｍＶ。维拉帕米（Ｖｅｒ）地尔硫Ｚｕｏ（Ｄｉｌ）和硝苯地平（Ｎｉｆ）显著降低ＩＣＲＡＣ不影响它的反转电位,Ｖｅｒ５μｍｏｌ．Ｌ＾－１的抑制率是４０％±１２％（ｎ＝３）,Ｖｅｒ５０μｍｏｌ．Ｌ＾－１使ＩＣＲＡＣ的幅值从（     

延髓腹外侧头端注射莫索尼定对大鼠血压,心率和肾交感神经放电…

目的：观察延髓腹外侧头端（ＲＶＬＭ）注射莫索尼定（Ｍｏｘ）对麻醉大鼠血压（ＢＰ）、心率（ＨＲ）及肾交感神经放电（ＲＳＮＡ）的影响。方法：麻醉大鼠ＲＶＬＭ注射１μＬ Ｍｏｘ１，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１，同步记录ＢＰ，ＨＲ及ＲＳＮＡ。结果：Ｍｏｘ１，１０，１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１分别使ＢＰ从１３．９±１．０ｋＰａ降至１３．０±１．７ｋＰａ（Ｐ〈０．０５），１３．８±１．８ｋＰａ至１１．４±１．５     

IQ_(23)对豚鼠心室肌细胞钙通道和CHO H_(10)细胞异源表达的钙通道α_1亚单位的作用

应用膜片钳全细胞记录技术,观察了具有正性肌力作用的苄基异喹啉衍化物ＩＱ２３,即１－〔对甲氧苄基－２－（Ｎ－苄基,Ｎ－甲基）〕－６,７－二甲氧基异喹啉盐酸盐,对豚鼠心室肌分离细胞的Ｃａ２＋通道,以及ＣＨＯＨ１０细胞表达的Ｃａ２＋通道α１亚单位的作用．结果显示,当豚鼠心室肌细胞从保持电位（Ｖｈ）－５０ｍＶ除极至测试电位（Ｖｔ）０ｍＶ时,ＩＱ２３３,１０μｍｏｌ·Ｌ－１分别使Ｃａ２＋电流（ＩＣａ）由对照的（０．４７±０．２３）ｎＡ增至（０．５７±０．２３）和（０．７９±０．３１）ｎＡ（Ｐ＜０．０５）．在ＣＨＯＨ１０细胞Ｖｔ为２０ｍＶ时,ＩＱ２３１０μｍｏｌ·Ｌ－１电压依赖性的增强Ｂａ２＋电流（ＩＢａ）,ＩＢａ从（０．４５±０．１０）ｎＡ增至（０．６７±０．２０）ｎＡ（Ｖｈ＝－８０ｍＶ）,或从（０．４３±０．０８）ｎＡ增至（０．６０±０．１４）ｎＡ（Ｖｈ＝－４０ｍＶ）．ＩＱ２３１０和３０μｍｏｌ·Ｌ－１还分别使电流－电压曲线的峰值和失活曲线的半失活电位向负膜电位方向移动．实验结果表明,ＩＱ２３通过作用于通道的α１亚单位,对心肌Ｌ型Ｃａ２＋通道产生电压依赖性激动作用,此作用为其正性肌力效应提供了部分解释．     

雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞内向整流和延迟整流钾通道电流

研究雌二醇对心室肌细胞动作电位,内向整流钾通道电流及延迟整流钾通道电流的影响。方法：全细胞膜片箝技术。结果：ＥＳＴ１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１使豚鼠心室肌细胞ＡＰ时程明显缩短,ＡＰＤ５０由给药前（４７４±７１）ｍｓ缩短至（３３０±７５）ｍｓ（Ｐ〈０．０５）,Ｅｓｔ１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１使ＡＰＤ５０缩短至（２２９±６７）ｍｓ,ＡＰＤ９０由（５８７±６０）ｍｓ缩短至（４１８±７９）ｍｓ,Ｅｓｔ浓度依赖性地     

长春西汀对大鼠心肌细胞钠电流的抑制作用

目的：研究长春西汀对心肌细胞钠电流的作用。方法：用全细胞膜片箝技术记录大鼠心肌细胞钠电流。结果：长春西汀可逆性抑制心肌细胞钠电流的作用为剂量依赖性和电压依赖性，但未发现频率或使用依赖性。长春西汀１０－８０μｍｏｌ·Ｌ＾－１，对钠电流的抑制作用为１３％±２％至７５％±６％，半数抑制浓度ＩＣ５０值（９５％可信限）为３６．４（２８．１－４７．１）μｍｏｌ·Ｌ＾－１，在膜电位以１０ｍＶ的间隔从－９０ｍＶ阶     

粉防己碱对大鼠脑细胞内游离钙的影响

利用荧光钙指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ，测定脑细胞内游离钙的浓度，细胞内静息钙浓度为２２１±１８ｎｍｏｌ·Ｌ＾－１。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１对细胞内静息钙无影响。Ｔｅｔ（１－１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１）能抑制胞外高钾引起的胞内钙升高，其ＩＣ５０为８．２（９５％可信限为１．８９－３２．９０μｍｏｌ·Ｌ＾－１）。Ｔｅｔ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１可抑制去甲肾上腺素１０μｍｏｌ·Ｌ＾－１引起细胞内钙升高，其幅…     

3,6—（二甲氨基）—二苯骈碘杂六环枸橼酸盐体外对家兔血小板钙？…

目的：观察Ｉ－６５对家兔血小板胞浆游离钙离子（（Ｃａ＾２＋）ｉ）浓度的影响。方法：用Ｑｕｉｎ２－ＡＭ荧光探针在体外测定家兔血小板（Ｃａ＾２＋）ｉ结果：ＣａＣｌ２１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１时，Ｉ－６５（１０，２０和３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１）使血小板（Ｃａ＾２＋）ｉ分别由１４２±２２ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１和１２４±１８ｎｍｏｌ．Ｌ６－１减产到１１８±２０，７８±１２，４０±１０ｎｍｏｌ．Ｌ＾－１和１０８±１５，７     

美西律对海马脑片突触功能缺氧损伤的保护作用

记录大鼠海马脑片ＣＡ１区锥体细胞的群锋电位（ＰＳ）和突触前排放（ＰＶ），缺氧３ｍｉｎ时对照组ＰＳ幅度下降至０．４±０．４ｍＶ，而提前１ｈ灌流美西律（Ｍｅｘ）１０或１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１组ＰＳ仅下降至１．２±１．２或１．５±０．４ｍＶ。复氧３０ｍｉｎ后对照组ＰＳ恢复率为１１％，Ｍｅｘ１０或１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１组分别为４８％和６５％。可见Ｍｅｘ减慢缺氧时ＰＳ下降过程，加速度复氧时ＰＳ恢复过程，…     

氯米帕明在人肝微粒体中的N—去甲基代谢

目的：研究ＣＹＰ４５０选择性抑制剂对体外氯米帕明（Ｃｌｏ）Ｎ－去甲基代谢的影响。方法：应用米氏方程计算肝微粒体中Ｃｏｌ Ｎ－去甲基代谢的动力学参数，比较加入抑制剂前后这些参数的改变。结果：Ｋｍ１，Ｋｍ２，Ｖｍａｘ１，Ｖｍａｘ２，Ｖａｍｘ２／Ｖｍ１和Ｖａｍｘ２／Ｋｍ２分别为（０．１１±０．０６），（２４±１１）μｍｏｌ·Ｌ＾－１，（１１４±４７），（４２８±１８８）ｎｍｏｌ·ｇ＾－１·ｍｉｎ＾－１。     

7—溴化乙氧苯四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞电压依赖性通道电流…

目的：研究７－溴化乙氧苯四氢巴马汀（ＥＢＰ）对电压敏感通道电流的影响，方法：在豚鼠心室肌细胞进行全细胞电流钳和电压钳记录，结果：ＥＢＰ３０μｍｏｌ．Ｌ＾－１可使单细胞ＡＰＤ９０从４３０±４７ｍｓ延长至５１４±６１ｍｓ（Ｐ〈０．０５，ｎ＝５）。电压钳研究表明ＥＢＰ可依剂量也抑制１Ｋ及其尾电流，而对１ｋ１，ｌｃａ和ｌＮａ无明显作用，结论：以上结果提示选择性地抑制ｌＫ从而延长动作电位时程，可能是ＥＢＰ抗     

O—（4—乙氧基丁基）小檗胺对离体蛙心的影响

目的：探讨Ｏ－（４－乙氧基丁基）小檗胺（ＥＢＢ）对离体蛙心的影响。方法：应用Ｓｔｒａｕｂ法制备离体蛙心；使用ＬＭＳ－２Ａ记录仪经张力换能器描记心脏活动。结果：ＥＢＢ１－１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１剂量依赖性增强蛙心收缩与舒张活动，但不影响心率；ＥＢＢ２５０－５００μｍｏｌ·Ｌ＾－１则引起心跳减慢，甚至停搏。ＥＢＢ的正性肌力作用不受西咪替丁１０μｍｏｌ·Ｌ＾－１和哌唑嗪１００μｍｏｌ·Ｌ＾－１影响；但可     

Blocking effect of tanshinone Ⅱ－Aon L－type Ca~（2＋） curent of single ventricular myocyte from guinea pig

本实验采用全细胞膜片钳技术，观察了丹参酮Ⅱ－Ａ对分离的豚鼠单个心室肌细胞Ｌ－型钙电流及跨膜电位的影响．使用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置和蛋白酶循环消化（０．２ｇ·Ｌ－１）的方法，获取了７０％～８０％的横纹清晰，呈杆状的耐钙心肌细胞．并使用ｐＣＬＡＭＰ５．５１微机程序和ＥＬＰ－７膜片钳放大器记录心肌细胞膜电流和跨膜电位的变化．丹参酮采用累积加药法，所有的观察指标均在同一细胞完成．数据分析采用配对ｔ检验．当使心肌细胞的保持电压为－４０ｍＶ，除极到０ｍＶ，刺激电压的时程为２５０ｍｓ，频率为０．５Ｈｚ时，１０，２０和４０μｍｏｌ·Ｌ－１的丹参酮Ⅱ－Ａ可使维拉帕米敏感的钙内向电流分别减少３５．２％，５７．７％和７４．７％（Ｐ＜０．０５），并能使动作电位时程亦呈剂量依赖性缩短，冲洗后两指标均部分恢复．该药的三种不同浓度，对不同电压最大激活的钙电流的电压依赖曲线均无影响．结果表明，丹参酮Ⅱ－Ａ具有类似维拉帕米样Ｌ－型钙通道阻断剂作用，其阻断作用呈非电压依赖性．     

小檗胺对ATP诱导的培养平滑肌及心肌细胞内游离钙动员的影响

目的：研究小檗胺（Ｂｅｒ）对ＡＴＰ诱导的细胞内动员的作用。方法：以Ｆｕｒａ３－ＡＭ负载培养的ＶＳＭＣ和心肌细胞,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化。结果：（１）ＡＴＰＣ使ＶＳＭＣ和心肌细胞内钙升高,但ＶＳＭＣ核区不明显。（２）Ｂｅｒ对静息荧光强度无影响,但降低ＡＴＰ升高的胞内钙（Ｐ〈０．０１）,Ｂｅｒ１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１延长达峰值的时间（Ｐ〈０．０１）,并不能完全抑制ＡＴＰ升高的胞内钙。（３     

兔窦房结细胞超极化激活内向电流的全细胞膜片钳测定及小檗碱…

用酶分离的家兔窦房结构进行了全细胞膜片钳制实验，在保持膜电位－４０ｍＶ条件下，用－６０ｍＶ至－１１０ｍＶ的超极化电位，引出Ｉｔ，该电流大部分被ＣｓＣｌ２ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１所抑制。在上述超极化电位范围内，小檗碱（Ｂｅｒ）１μｍｏｌ·Ｌ＾－１使Ｉｔ部分受到抑制。结果表明：本实验引出的Ｉｔ为ＣｓＣｌ敏感电流，Ｂｅｒ抑制调节窦房结组织自发除极的Ｉｔ可能是该药负性频率作用机制之一。     

粉防己碱,Fura2—AM和BayK8644对脂多糖刺激大鼠腹腔巨噬细胞释…

目的：研究化钙与脂多糖（ＬＰＳ）刺激大鼠腹腔巨噬细胞（ＰＭφ）释放血小板活化因子（ＰＡＦ）的关系，方法：通过ＰＡＦ的生物测定法，观察了粉防己碱（Ｔｅｔ），Ｆｕｒａ２－ＡＭ和Ｂａｙｋ８６４４对ＬＰＳ刺激ＰＭφ释放ＰＡＦ的影响，结果，ＬＰＳ刺激ＰＭφ释放ＰＡＦ，但并不使其细胞内钙增高，Ｔｅｔ在０．１，１．０，１０，１００μｍｏｌ．Ｌ＾－１和Ｆｕｒａ２－ＡＭ在０．０１，０．１，１０，１０μｍｏｌ．Ｌ＾－     

甲基莲心碱对心肌细胞I_(Na)、I_(Ca-L)及稳态外向K~+电流的影响

目的　为证明甲基莲心碱（ Ｎｅｆｅｒｉｎｅ, Ｎｅｆ） 对单个心肌细胞离子通道电流的影响及抗心律失常作用的离子通道机制。方法　采用全细胞记录膜片钳技术,记录了 Ｎｅｆ 对培养大鼠心室肌细胞钠电流（ Ｉ Ｎａ） 及豚鼠心室肌细胞动作电位、 Ｉ Ｎａ 、 Ｌ 型钙电流（ Ｉ Ｃａ Ｌ） 及稳态外向 Ｋ＋ 电流的影响。结果　 Ｎｅｆ ３０ ,１００ μｍｏｌ· Ｌ－ １ 明显抑制培养大鼠心室肌细胞 Ｉ Ｎａ ,分别从对照水平的（３４ ±０７） ｎ Ａ 降至（２１ ±０５） 和（０４ ±０２） ｎ Ａ。 Ｎｅｆ １０ μｍｏｌ· Ｌ－ １ 可降低豚鼠心室肌细胞动作电位振幅、静息电位,延长动作电位时程。 Ｎｅｆ １０ ,３０ μｍｏｌ· Ｌ－ １ 分别使豚鼠心室肌细胞 Ｉ Ｎａ 及 Ｉ Ｃａ Ｌ从给药前的（７９ ±２１） ｎ Ａ 和（６８９ ±２４３） ｐ Ａ 降至（４０ ±１４） 、（１３ ±０６） ｎ Ａ和（３７４ ±１７２） 、（１０９ ±６７） ｐ Ａ。 Ｎｅｆ １０ μｍｏｌ· Ｌ－ １ 还抑制 Ｉ Ｎａ 、稳态外向 Ｋ＋ 电流和 Ｉ Ｃａ Ｌ的 Ｉ Ｖ 曲线并使后者的峰值电流电位略右移。结论　 Ｎｅｆ 有钠、 Ｌ 型钙通道阻滞作用并抑制稳态外向 Ｋ＋ 电流,这些可解释     

四氢巴马汀对豚鼠心室肌细胞跨膜内向Ca^2＋电流

目的：研究四氢巴马汀（ＴＨＰ）对豚鼠心室肌细胞膜Ｃａ＾２＋通道的作用。方法：分离豚鼠心室肌细胞，利用膜片箝技术观察，记录心室肌细胞膜跨膜内向钙电流（１Ｃａ）结果：ＴＨＰ灌流５ｍｉｎ后明显抑制豚鼠心肌肌细胞内向１Ｃａ，其作用呈现剂量效应关系，并具有频率依赖性，０．１，１，１０μｍｏｌ．Ｌ＾－１的ＴＨＰ使１ｃａ从１．１５±０．２２，０．９１±０．１８，１．６０±０．４２ｎＡ（ｃｏｎｔｒｏｌ，ｎ＝５）分     

苦参碱对大鼠输精管的作用与激活钙通道的关系

哌唑嗪（１０μｍｏｌ·Ｌ＾－１），硝苯地平（５０ｎｍｏｌ·Ｌ＾－１）可竞争性拮抗苦参碱收缩大鼠离体输精管，ｐＡ２值分别为５．１和９．２９。维拉帕米（１μｍｏｌ·Ｌ＾－１）可非竞争性拮抗苦参碱，ｐＤ２为６．０７。苦参碱可增强ＣａＣｌ２和ＫＣｌ收缩输精管的作用，对ＫＣｌ的增强作用更显。提示苦参碱是一钙通道激动剂。     

小檗碱对神经递质引起的新生大鼠脑细胞内游离钙升高的影响

以Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂，利用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子系统测定小檗碱（Ｂｅｒ）对新生大鼠脑细胞静息Ｃａ２＋和神经递质引起的脑细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）变化的影响．Ｂｅｒ１，１０，３０μｍｏｌ·Ｌ－１对脑静息［Ｃａ２＋］ｉ无明显影响．Ｂｅｒ１～１００μｍｏｌ·Ｌ－１剂量依赖的抑制谷氨酸引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高．Ｂｅｒ１０μｍｏｌ·Ｌ－１能降低Ｈａｎｋｓ液有Ｃａ２＋和无Ｃａ２＋时去甲肾上腺素引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，且能降低５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高（在细胞外液有Ｃａ２＋时）．结果提示Ｂｅｒ可降低谷氨酸，去甲肾上腺素和５－羟色胺引起的［Ｃａ２＋］ｉ升高，这可能是其抗脑缺血机理之一．