BACTEC MGIT-960结核菌快速培养800例分析

目的了解BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法在临床中的应用。方法应用BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法培养结核菌,并与改良罗氏培养法进行比较。结果 800例临床标本应用BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法培养阳性496例,阳性报告平均时间15d,优于改良罗氏培养法。结论应用BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法培养结核分枝杆菌可以提高阳性率和缩短培养时间,能有效的服务于临床。     

实时荧光聚合酶链反应和结核培养仪法对非痰液标本结核杆菌检测的比较

目的评估比较实时荧光聚合酶链反应(FQ-PCR)和结核培养仪(BACTEC960)法在检测非痰液标本中结核分支杆菌的特异性和灵敏度。方法对34例临床可疑患者用BACTEC960法和FQ-PCR技术2种方法作阳性检出率比较。结果FQ-PCR诊断肺外结核病的特异度为95%,灵敏度为14·3%。BACTEC960法诊断肺外结核病的特异度为100%,灵敏度为21·4%。结论BACTEC960法诊断结核病的特异性和灵敏度与国内外文献报道较一致,而实时荧光PCR技术诊断结核病的特异性和灵敏度与国内外文献报告有较大差异,明显低于平均阳性检出率。     

Cyscope~荧光显微镜技术用于结核病检测的临床应用评价

目的评价Cyscope荧光显微镜技术用于结核病检测的临床诊断价值。方法收集拟诊肺结核病人痰标本,分别用金胺-罗丹明染色发光二极管Cyscope荧光显微镜涂片检查(LED荧光法)、萋尼氏抗酸染色明场显微镜涂片检查(萋尼法)、改良罗氏培养基培养(罗氏培养法)和BACTEC MGIT960快速培养系统培养(BACTEC MGIT960法)进行检测。将LED荧光法与其他3种方法的检测结果进行比较。结果本研究共收集、检测拟诊肺结核病病人痰标本106份。LED荧光法、萋尼法、罗氏培养法和BACTECMGIT960法的阳性检出率分别为31.13%、26.42%、39.62%和45.28%。以罗氏法为金标准,LED荧光法与萋尼法的灵敏度分别为69.05%和64.29%,χ2值为0.17,P值为0.687,差异无统计学意义,而特异性分别为95.08%和100.00%。以BACTEC MGIT960法为金标准,LED荧光法与萋尼法的灵敏度分别为60.42%和54.17%,特异性分别为93.10%和96.55%,χ2值分别为0.80和0.17,P值分别为0.375和0.687,差异均无统计学意义。LED荧光法与罗氏培养法和BACTEC MGIT960法的一致率分别为84.47%和78.30%。结论 Cyscope荧光法较准确,并且镜检敏感、快速,是目前诊断结核病的一种较为理想的检测方法。     

TB-DNA在结核病诊断中的检测价值

目的对结核病诊断中实时荧光定量PCR法检测TB-DNA预以评价。方法现对我院结核病患者2016年11月份送检的134人份痰标本同时进行实时荧光定量PCR法TB-DNA含量检测、涂片找抗酸杆菌、酸性罗氏培养基培养。结果 PCR法、涂片法、培养法阳性率分别为20.1%、12.7%、14.9%;涂阳PCR阳性16例,涂阴PCR阳性10例,涂阴培养阳性2例,培阴PCR阳性3例。三法阳性率差异较大具有统计学意义(P﹤0.05)。结论PCR法比其它两种法敏感度高,对结核病的早期诊断有重要的参考价值,三种方法联合检测可提高阳性检出率。     

噬菌体裂解法在肺结核分枝杆菌检测中的应用

目的探讨噬菌体裂解法在基层结核病防治机构实验中的应用价值。方法应用噬菌体裂解法、改良罗氏培养法及直接涂片法同时检测250份临床上确诊为肺结核初诊患者的痰标本。结果①250份痰标本用噬菌体裂解法、改良罗氏培养法及直接涂片法检出的阳性率分别为50.1%、43.2%、27.6%。②噬菌体裂解法的阳性检出率远高于涂片法的阳性检出率,两者的差异有统计学意义（χ2=28.23,P〈0.01）;噬菌体裂解法的阳性检出率高于改良罗氏培养法的阳性检出率,但两者的差异无统计学意义（χ2=2.90,P〉0.05）。结论噬菌体裂解法能快速、简便地检测结核分枝杆菌,且检出率较高,可作为结核病诊断的重要方法,且无需特殊设备,在普通微生物实验室中就能开展,适合在基层结核病防治机构实验室中推广应用。     

应用噬菌体空斑法快速检测煤工尘肺结核病人的研究

目的探讨噬菌体空斑法结核菌快速鉴定技术(噬菌体空斑法)在煤工尘肺结核病人中的应用价值及与其他检测方法的比较。方法对我科已被确诊的120例煤工尘肺结核病人的痰标本同时进行涂片、集菌、改良罗氏培养、细菌(BACTEC)培养和噬菌体空斑法检测,对比其检查结果。结果涂片法、集菌法、改良罗氏培养法、BACTEC培养法和噬菌体空斑法的阳性率分别为:10.00%、23.33%、8.33%、28.33%和52.50%;对所有经噬菌体空斑法检测阳性的病例进行重复检测,其重复符合率为84.21%。结论噬菌体空斑法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,而且方法简单、快速,无需贵重仪器,完全可以应用于煤工尘肺结核病人的初筛和结核病的常规诊断。     

3种方法检测结核分枝杆菌检测的比较

目的分析比较结核患者痰标本结核杆菌检验痰涂片、痰培养及分子生物学检测方法的检测效果。方法选取2017年1月1日~6月30日开封市结核病防治所住院的606例疑似肺结核者的痰标本,同时进行荧光定量PCR、痰培养和痰涂片抗酸染色检测。结果例肺结核患者PCR检查、罗氏改良培养、痰液直接厚涂片检查检测法检测阳性率分别为33.0%、27.9%、20.1%;PCR技术与罗氏培养和直接涂片之间的灵敏度分别为86.98%和86.98%;特异性分别为88.56%和84.50%。结论肺结核患者经由荧光定量PCR检查检验痰结核杆菌准确率较高,建议进一步在临床应用及推广。     

浓缩集菌法与其他方法检测结核杆菌结果比较分析

目的评价浓缩集菌法、直接涂片镜检法、罗氏培养法、Xpert MTB/RIF法检测痰标本结核分枝杆菌阳性率,探讨浓缩集菌法在结核病检查中的应用。方法选取2016年6月-2017年6月本院疑似肺结核患者痰标本355份,分别采用浓缩集菌法、直接涂片镜检法、罗氏培养法、Xpert MTB/RIF法检测结核分枝杆菌结果比较分析。结果浓缩集菌法、直接涂片镜检法、罗氏培养法和Xpert MTB/RIF法的结核分枝杆菌阳性检出率分别为32.96%、17.18%、33.52%、33.80%;浓缩集菌法的结核杆菌检出率明显高于直接涂片镜检法,差异有统计学意义(P0.05)。而浓缩集菌法与罗氏培养法、Xpert MTB/RIF法在结核杆菌检出率差异无统计学意义(P0.05)。结论痰浓缩集菌法用于痰标本结核分枝杆菌检测具有操作简便、阳性检出率高及实验室安全等优点,可与培养法、Xpert MTB/RIF等检测法联合运用,提高结核分枝杆菌的检出率。     

三种方法检测痰标本结核杆菌的比较研究

目的 比较结核杆菌三种检验方法的检测率. 方法本文应用涂片抗酸杆菌镜BBL MGIT手工分枝杆菌快速培养以及实时荧光定量PCR分别对370例可疑肺结核患者晨痰进行检测. 结果 370例可疑肺结核患者的痰标本用涂片镜检发现抗酸杆菌阳性55例,检出率14.8%;分枝杆菌快速培养MGIT检测阳性71例,阳性率19.2%;实时荧光PCR检测阳性78例,检出率21%. 结论比较三种方法的阳性检出率:涂片镜检与快速培养差异有统计学意义(P<0.05),涂片镜检与实时荧光PCR差异有统计学意义(P<0.05),快速培养与实时荧光PCR差异无统计学意义(P>0.05).     

BACTEC MGIT 960用于结核分枝杆菌快速培养的初步评价

目的评价BACTEC MGIT 960系统快速分离结核分枝杆菌及药敏试验的效果。方法对临床拟诊结核病患者痰样本,采用直接涂片萋-尼法抗酸染色显微镜检、BACTEC MGIT 960和改良罗氏(L-J)培养法进行检测,并对分离到的结核分枝杆菌进行药敏试验。比较其分离的阳性率、培养及药敏所需的时间。结果共对634例拟诊结核病患者痰样本进行了检测,MGIT960培养的阳性率(51.7%)明显高于L-J法(37.7%),直接涂片法阳性率最低(14.7%)。MGIT960和L-J法的污染率分别为4.9%和4.4%。MGIT960和传统的L-J法的检出时间分别为12.0 d和32.0 d。MGIT960和L-J法对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的药物敏感性检出时间分别为9.0 d和36.5 d。结论 BACTEC MGIT 960可以明显提高分离培养阳性率、缩短培养和药敏试验的时间。     

BACTEC MGIT 960系统在分枝杆菌属菌种初步鉴定及药敏中的应用

目的评价BACTEC MGIT 960系统在分枝杆菌属菌种鉴定及药敏中的应用价值。方法显微镜观察BACTEC MGIT 960系统分离的162株分枝杆菌在液体培养基中的形态,传统生化和核酸检测法同时鉴定分枝杆菌属菌种,分析细菌形态与菌种之间的关系;应用BACTEC MGIT 960系统对分离的141株结核分枝杆菌进行药敏试验。结果 162株分枝杆菌属在MGIT液体培养基中呈索条状、分枝状、点粒状和分散状4种形态;呈索条状132株分枝杆菌属均为结核分枝杆菌,呈点粒状10株和分散状6株分枝杆菌属均为非结核分枝杆菌;对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药率分别为9.9%、14.2%、9.2%和6.4%,总耐药率18.4%,同时耐利福平和异烟肼的为8.5%;药敏平均检测时间为9.3 d。结论 BACTEC MGIT 960系统可快速将分枝杆菌属初步鉴定为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌,能快速准确获得临床一线抗结核药物的药敏结果。     

实时荧光定量RT-PCR技术在手足口病疫情监测中的应用

[目的]对手足口病患者标本进行病毒核酸检测,探讨实时荧光定量RT-PCR方法在手足口病疫情监测中的意义。[方法]采用实时荧光定量RT-PCR方法对2010年3～8月连云港市采集的307份手足口病患者标本进行肠道病毒核酸检测,并对肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CVA16)进行分型。[结果]307份手足口病患者标本中有221份肠道病毒核酸阳性,阳性率71.99%,其中EV71型病毒核酸阳性标本123份,阳性率40.07%,CVA16型病毒核酸阳性标本66份,阳性率21.50%。[结论]实时荧光定量RT-PCR方法耗时短、特异性强、灵敏度高,可作为手足口病疫情监测的诊断方法。     

Evaluation of the effectiveness of the BACTEC MGIT automatic system for culture of mycobacteria in comparison with classical methods of culture. Experience after one year of use

The fully automatic non-radiometric cultivation system BACTEC MGIT 960 of Becton Dickinson is one of the systems using the so-called rapid metabolic method of mycobacteria cultivation. For detection of mycobacterial growth it uses the fluorescent technology. The objective of the present work is to compare the effectiveness of this system with classical cultivation on solid (egg) and liquid media. During the period from April 27, 1999 till April 28, 2000 in our department concurrently by both methods a total of 2144 samples were examined from which a total of 149 mycobacterial strains were isolated. It was revealed that the BACTEC MGIT 960 system is much more sensitive than classical cultivation (it detected 136 isolates as compared with 103 detected by the classical method): in isolation of Mycobacterium the difference in sensitivity is even more marked (from the total number of isolated strains of Mycobacterium tuberculosis the BACTEC MGIT 960 detected 105, classical cultivation only 76). The mean Time to Detection (TTD) of positive samples in the BACTEC MGIT 960 system was 13.2 days while for classical cultivation it was 33.6 days. It was thus confirmed that the BACTEC MGIT 960 achieves, as compared with classical cultivation, better results which applies to the sensitivity of the two methods as well as to the detection rate of positive samples.     

荧光定量PCR和FISH技术诊断肺结核的价值比较

目的比较荧光定量PCR和FISH技术对肺结核诊断的敏感性和特异性。方法共收集300例明确诊断为肺结核的患者作为阳性对照组,以及收集300例健康志愿者(明确排除肺结核患者)做为阴性对照组。收集800例新收临床疑似肺结核患者做为研究组。收集该800例患者的肺活检标本以及同期的痰液标本,其中痰液进行涂片、结核杆菌分离培养以及结核杆菌DNA荧光定量PCR检测和FISH检测。比较荧光定量PCR和FISH技术对肺结核诊断阳性符合率和阴性符合率。结果 1FISH技术检测结核杆菌阳性符合率为99.3%;荧光定量PCR检测结核杆菌阳性符合率为97.3%。两者阳性符合率存在统计学差别(p=0.015)。2FISH技术检测结核杆菌阴性符合率为98.2%,荧光定量PCR技术检测结核杆菌阴性符合率为96.9%。两者阴性符合率存在统计学差别(p=0.007)。结论与荧光定量PCR比较,FISH对肺结核诊断具有较高的阳性符合率和阴性符合率。     

嗜酸氧化亚铁硫杆菌实时荧光定量PCR检测方法的建立

〔目的〕建立一种检测进出境环保用微生物菌剂中嗜酸氧化亚铁硫杆菌(acidithiobacillus ferrooxidans,A.ferrooxidans)的实时荧光定量PCR方法。〔方法〕用9K培养基培养A.ferrooxidans标准菌株A.ferrooxidans ATCC23270,并提取基因组DNA作模板;根据GenBank中嗜酸氧化亚铁硫杆菌的16S基因序列设计合成引物和探针,用含有101 bp扩增目标产物的pGEM誖-T Easy载体质粒为阳性对照,构建标准曲线,建立荧光定量PCR检测方法,并进行方法学的评估。〔结果〕成功建立了嗜酸氧化亚铁硫杆菌的荧光定量PCR检测方法,该方法对嗜酸硫杆菌属中嗜酸氧化硫硫杆菌(Acidithiobacillus thiooxidans,A.thiooxidans)和嗜酸喜温硫杆菌(Acidithiobacillus caldus,A.caldus)无交叉反应;最少可检测到100个阳性质粒,说明有很好的敏感性;试验内变异系数为0.32%,具有很好的重复性。〔结论〕建立的嗜酸氧化亚铁硫杆菌的TaqMan探针荧光定量PCR检测方法特异性和灵敏度高、重复性好,可作为嗜酸氧化亚铁硫杆菌高通量的快速检测方法。     

铁岭市一起皮肤炭疽疫情中炭疽芽胞杆菌的快速检测与分析

目的 对2015年7月铁岭市发生一起皮肤炭疽疫情中运用UPT上转发光免疫分析仪联合荧光定量PCR技术进行描述与分析,探讨可以快速现场检测炭疽芽胞杆菌的方法。方法 采集疑似皮肤炭疽患者的焦痂下涂抹样本10份和炭疽疫区外环境样本19份,运用上转发光免疫层析技术联合荧光定量PCR技术对标本进行检测,与此同时进行细菌分离培养。结果 10份患者的痂下涂抹物样本和2份病死牛血污染土壤样本在上转发光免疫层析技术和荧光定量PCR技术检测结果均呈现阳性。细菌分离培养技术仅分离到1株炭疽芽胞杆菌。结论 实验室检测结果充分证明此次疫情的病原体为炭疽芽胞杆菌的感染。上转发光免疫层析技术和荧光定量PCR方法的联合应用,能快速、特异、灵敏检测出炭疽芽胞杆菌,具有推广应用价值。     

HBV—DNA实时荧光定量检测与HBV免疫标志物结果相关性分析

目的通过对血清中乙型肝炎病毒核酸（HBV～DNA）的实时荧光定量PCR（real—timePCR）（荧光探针法）检测结果与乙肝免疫标志物相关性分析,从而探讨二者在临床诊断中的应用。方法采用real—timePCR法检测HBV—DNA．ELISA法检测血清HBV免疫标志物。结果121例乙型肝炎标本中,FIBsAg＋、HBeAg＋、FIBcAb＋阳性组患者有39例．血清HBV—DNA阳性率67％,平均浓度1．42x10’Iu／rnl;HBsAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋阳性组患者有64例,血清HBV—DNA阳性率45％,平均浓度4．29×10^5IU／ml;HBsAg＋,HBcAb阳性组患者有6例,血清HBV—DNA定量值均为〈500;HBsAg＋,HBeAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋有2例,血清HBV-DNA阳性50％,平均浓度2．96×10^4IU／ml。结论血清中HBV—DNA定量检测结果与乙肝免疫标志物结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断数据。     

实时荧光定量PCR检测女性淋球菌的评价

[目的]评价实时荧光定量PCR检测方法在诊断女性淋球菌(NGH)感染的效果和可行性,试图寻找一种快速而敏感的淋球菌检测方法。[方法]用革兰染色涂片法、培养法和FQ-PCR法检测女性疑诊淋病患者,其中FQ-PCR法采用宫颈拭子、阴道拭子和尿液3种取材方法进行对比。以培养法为“金标准”,分别计算其敏感性、特异性、阳性预期值和阴性预期值。并对部分患者治疗前后定量结果进行分析。[结果]培养法检测淋球菌的检出率为6.7%,涂片法的敏感性为60.00%,阳性预期值为54.55%。宫颈拭子FQ-PCR、阴道拭子FQ-PCR和尿液FQ-PCR法的敏感性分别为90%、95%和80%,3种FQ-PCR法特异性高达98%。[结论]FQ-PCR法检测女性淋球菌,具有快速、定量准确、较高敏感性和特异性等优点,可弥补涂片法较粗糙、培养法耗时长的缺点。是一种具有临床应用价值的淋球菌快速定量检测方法。