用~(105)Rh-ABDET标记蛋白质

本实验先合成双功能配位体4-(对-氨基苄基)-二乙撑三胺(ABDET):用1,7-苯二酸二乙撑三胺与对硝基溴苯反应,生成4-(对-硝基苄基)-1,7-苯二酸二乙撑三胺,水解、催化氢化得ABDET;然后,ABDET与~(105)Rh络合,产物经一系列反应,再与蛋白质联接.由于双功能螯合剂的性质决定了所形成铑络合物动力学不活泼性,使它可进行一系列分离纯化,有利于避免放射性核素对抗体的非特异标记,减少对标记蛋白质的损伤.不同pH值的络合反应结果表明,pH9.0时络合产率最高.MgO吸附法估算总产率达79%.络合物与蛋白质联接反应中,经一系列实验表明:①用二氯硫化碳的CHCl_3溶液提取到有机层的络合物,几乎全部为ABDET的异硫腈酸盐衍生物,24h联接产率约为98%.②不同pH值时,制备的络合物性质不同,在pH低于9和高于10.5时,制备的络合物与蛋白质无联接.③联接率与Rh/蛋白质比值有关,当此比值为1时,联接率最高.④根据反应动力学数据,虽然反应24h比反应4h收率高,但最终饱和度只差2%,又由于~(105)Rh的衰变,因此,最佳反应时间为4h.⑤用Sephadex G-75柱分离,凝胶亲和层析进一步纯化,表明此法未损伤蛋白质.     

低压冻干巨型聚合白蛋白的生产及其用~(99m)锝的标记

放射性同位素标记的巨型聚合白蛋白(AMAA)已广泛用于核医学作肺栓塞和其它肺疾患的常规肺扫描。本文研究在醋酸盐缓冲液内(pH=4.6)HSA(人血浆白蛋白)聚合的最宜条件。AMAA悬浮液用SnCl_2·2H_2O(10微克/毫升)溶液低压冻干,然后加入高~(99m)锝酸盐以标记冻     

测定植物样品中钚的一种方法

通常从样品溶液中分离的钚回收率低且相当不稳定,须采用内标记法校正~(238)Pu,~(239)Pu和~(240)Pu的回收率.假如钚能被定量回收,则不必使用内标记.一、方法的主要程序:将10克干燥植物样品灰化,用HN0_3、HF加热硝化,用6mol/L HCl溶解,加入H_2SO_3(使其浓度为0.06%),在水浴中80℃下保持5分钟,使样品溶液中的Pu(Ⅳ、Ⅵ)还原为Pu(Ⅲ),通过一阴离子交换柱与一些金属离子     

~(105)Rh标记血卟啉的制备及其与人γ球蛋白的结合研究

早在1979～1982年,Mcbride等人用血卟啉衍生物探查恶性肿瘤时就提出,~(105)Rh-血卟啉有可能用作治疗癌症的放射性药物.本研究目的在于先制     

新型~(99m)Tc标记的脑灌注显像剂

对~(99m)Tc-乙烯半胱氨酸二聚物、~(99m)Tc-六甲基丙烯胺肟及锝肟的~(99m)Tc-硼酸加合物等三类中性和脂溶性的~(99m)Tc络合物在脑中摄取和滞留的构效关系做了研究.这些新型~(99m)Tc脑灌注显像剂能用于各种脑血管异常的检测.尽管确切的截留机制及其与临床应用潜力的关系尚待阐明,但临床初步研究表明,~(99m)Tc制剂与~(123)I标记的脑灌注显像剂具有同样的临床效果.     

结直肠癌患者免疫闪烁显像的临床价值:前瞻性研究

本文用~(123)I标记抗-CEA单克隆抗体(McAb)的F(ab')_2或Fab片段及ECT对怀疑患有产生CEA肿瘤的57例患者进行了RIS前瞻性研究,并与其它诊断技术进行了比较.最终根据手术、活检和尸检(n=39)以及随访结果(n=18)加以证实.     

~(113m)铟标记的骨扫描剂

本文介绍了~(113m)铟标记的乙二胺四甲撑膦酸(EDTMp)和二乙撑三胺五甲撑膦酸(DTPMP)两种骨扫描剂的标记方法及动物实验结果。作者用无菌蒸馏水制成EDTMP和DTPMP的溶液,用氢氧化钠调pH到6.5,使溶液中游离酸的浓度为40毫克/毫升。     

3-羟基-4甲酰吡啶、谷氨酸、锝络合物——可能作为胆囊造影剂

最近用Tc-99m标记化合物来诊断肝胆系统疾病引起很大重视,由吡哆醛、谷氨酸(glu)和Tc-99m形成的络合物已被认为是一个优良的胆道扫描剂。作者研究了许多芳香族醛,氨基酸和过锝化物间的反应。将等量的(0.1毫克分子)醛和氨基酸蒸馏水溶液用0.1NaOH校正pH至7.0～7.5,     

锝〔~(99m)Tc〕标记羧甲基纤维素:一种新研制的用于胃排空研究的纤维标记物

锝〔~(99m)T〕标记羧甲基纤维素(~(99m)Tc-CMC)是一种新研制的胃内不易消化的固体标记物,它具有简单、标记快速、标记率高和在胃肠道中稳定等优点,对胃排空临床研究可能有应用价值.~(99m)Tc-CMC的标记方法:每次标记前的当天,用0.05mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.6)立即配制1%的CMC悬浮液,它在4℃条件下可保存3周.在室温下进行标记:先用20ml塑料注射器抽取3mlCMC     

99Tcm-AE105的制备及荷胰腺癌裸鼠显像研究

目的 以99Tcm标记尿激酶型纤维蛋白酶原激活剂受体(uPAR)靶向多肽分子D-Cha-F-s-r-Y-L-W-S (AE105),探讨标记产物作为显像剂无创性评价肿瘤组织内uPAR表达的可行性.方法 采用三(羟甲基)甲基甘氨酸(Tricine)作为协同配体,SnCl2为还原剂,应用99Tcm标记AE105及阴性对照多肽D-Cha-F-s-r-Y-L-E-S(AE105mut).采用完全随机法将荷胰腺癌(bxpc-3细胞株)裸鼠模型分为2组,每组30只,分别注射18.5 MBq (0.2 ml)99Tcm-AE105与99Tcm-AE105mt,比较两者体内分布及γ显像结果.采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织内uPAR表达,并探讨其与标记物摄取的相关性.数据分析采用两样本t检验和Pearson直线相关分析.结果 99Tcm-AE105标记率达(94.64±0.72)％,放化纯达(97.72±1.73)％,且体外稳定性良好.注射99Tcm-AE105后2h,荷瘤鼠肿瘤显影,4、6h显影清晰;注射99Tcm-AE105mut组始终未见清晰显影.肿瘤组织中99Tcm-AE105的分布均明显高于99Tcm-AE105mut,注射后4h放射性摄取分别为(3.12±0.27) ％ID/g和(1.65±0.53) ％ID/g(t=4.496,P＜0.01);注射后6h放射性摄取分别为(2.98±0.15) ％ID/g和(1.41±0.38)％ID/g(t=6.787,P＜0.01).4～6h肿瘤组织内uPAR表达与99Tcm-AE105摄取呈正相关(r=0.791,P＜0.01),而99Tcm-AE105mut组两者之间无相关性(r=-0.415,P＞0.05).结论 99Tcm-AE105的标记过程简单易行,标记率高,稳定性好,具有良好的uPAR靶向性与特异性,有望应用于临床.     

两相放射性标记试餐胃排空研究的设计

检测胃排空率要求检测技术与实际进餐情况极为接近.实验选用普通煎饼和橙汁作为固、液相食物载体,对应用~(111)In-树脂作固相标记物,各种~(9m)Tc放射性药物作液相标记物进行了稳定性和相互影响的研究,以求设计出最接近生理餐的放射性标记试餐.在煎饼中加入~(111)In-树脂,再分别将~(99m)TcO_4~-及~(99m)Tc标记DTPA、MAG_3、锑胶体、铼胶体,用0.04mol/L HCl制备成接近胃液pH值的稀释液.然后分别测定各种~(99m)Tc放射性药物的稳定性、~(111)In-固     

99Tcm标记depreotide及与肺腺癌A549细胞亲和性研究

目的 筛选99Tcm标记depreotide的最佳条件,并通过99Tmm-depreotide与人肺腺癌A549细胞结合特性的研究,评价其作为肿瘤生长抑素受体显像剂的可靠性.方法 ①采用直接标记法,在不同pH值(5.0、6.0、7.0)的磷酸缓冲溶液和不同温度(15 ℃、37 ℃、50 ℃)条件下对depreotide进行99Tcm标记,以纸层析法测定标记率,并通过对比分析,筛选出最佳标记条件.②采用受体放射分析法,分别在不同温度下将99Tcm-depreotide与A549细胞孵化,分析不同温度在A549细胞对99Tcm-depreotide摄取率和滞留率中的作用.结果 ①相同温度下,缓冲液pH=6.0时,99Tcm与depreotide的标记率高于pH=5.0和pH=7.0两组;随着反应温度由15℃逐渐升高到50 ℃,各pH实验组的标记率呈不同程度下降.②A549细胞对99Tcm-depreotide的摄取率随温度的升高逐渐增加,在37℃时,摄取峰值时间在60 min;对99Tcm-depreotide的清除速度不依赖于温度,37 ℃时的半清除时间为48 min.结论 在低温(＜15℃)和弱酸性环境下,99Tcm直接标记depreotide的标记率高,稳定性好.在37 ℃时,A549细胞特异性结合99Tcm-depreotide,具有适于受体显像的摄取峰值时间和半清除时间.     

亲脂性与~(99m)Tc标记氨基硫醇生物学分布的相互关系

人工合成的、用异型杂环胺取代的~(99m)Tc-DADT复合物能够通过血脑屏障,并能在肺中聚积。DADT(或BAT)的N_2S_2型氨基乙烷硫醇是一种中性的、可溶于锝溶液的复合物,在N_2S_2主链上引入一个功能基团,能够影响脑组织对其摄取。本实验研究DADT衍生物的脂溶性与脑、肺摄取DADT作用关系。试验:用~(99m)Tc对其进行标记,Bu_4N~(99m)TcOCl_4作为其产物母体,并通过ir和ur光谱方法定性。制备时应在氢硼化钠溶液中进行,分配系数的测定是在pH=7.4辛酰基磷酸盐缓冲液中进行的。     

一种新的层析等电点聚焦技术提纯葡萄球菌肠毒素D

我们成功地建立了一个新的层析等电点聚焦的三步程序.细菌培养液首先以CG-50吸附,洗脱出的粗毒素溶液在PBE_(94)柱上进行层析等电点聚焦.分别用5mMTris-Base pH9.4和Buffalyte_(8-4) pH5.4缓冲液洗脱,出现多个洗脱峰,即刻测定pH值.收集pH6.8～7.1的洗脱液,混合、浓缩,最后通过Sephacryl s-200过滤,以0.05M PBS pH6.8洗脱,出现3个峰,毒素在第1峰.毒素纯度为98%,回收率89%,p17.6,MW28500,SDS-PAGE上1条带.以~(125)I标记SED作探针的电泳转移和放射自显影均证明了提纯SED的免疫学特异性.免疫扩散试验,即使200μg/ml SED与不产毒素的FRI-184抗血清,也未有可见沉淀线.     

金属型螯合树脂对~(14)C-丙氨酸、天门冬氨酸、三磷酸腺苷的吸附特性

本文用Fe(Ⅲ)型和Cu(Ⅱ)型螯合树脂研究了几个典型的~(14)C有机标记化合物的吸附特性。实验采用Chelex 100和Unicellex UR 10螯合树脂,分别将其转成Fe(Ⅲ)型和Cu(Ⅱ)型。F(Ⅲ)型树脂的制备是将50克Unicellex UR 10或Chelex 100树脂加入500ml含1 mol/L FeCl_3·6H_2O的0.3mol/L醋酸钠-醋酸(pH=3.0)缓冲溶液中,搅拌,水洗,60℃干燥,分别制成Fe(Ⅲ)-U和Fe(Ⅲ)-C树脂。Cu(Ⅱ)型整合树脂的制备是将50克Unicellex UR 10或Thelex 100树脂加入500ml 1mol/L CuCl_2·2H_2O水溶液中,搅拌8小时,过滤,在3mol/L氨水中浸渍,水洗,60℃干燥,分别制成Cu(Ⅱ)-U和Cu(Ⅱ)-C树脂。     

用~(99m)Tc标记蛋白质的一种新方法

本文介绍了一种新的锝标记蛋白质方法,并与应用Iodogen的放射性碘标记、锡还原法的~(99m)Tc标记和通过DTPA螯合的~(111)In标记等法作了比较。标记方法:将~(99m)Tc-高锝酸盐(200μl,在生理盐水中)、二甲基甲酰胺(11μl)和5N盐酸(3μl)混合,在140℃加热4h。用氯仿(200μl)提取干燥后的残留物,并移到另一试管内蒸发至干,得到中间物。在该中间物中加入200μl将要标记的蛋白质溶液(1～10mg/ml,用生理盐水配成),在40℃     

麦盖提羊羊毛含硫氨基酸的研究

本文对新疆肉毛皮兼用型地方优良品种麦盖提羊（多浪羊）羊毛中含硫氨基酸胱氨酸和半胱氨酸进行研究。不同年龄的公母羊的羊毛中胱氨酸含量大于其它羊毛(X^-=10.67%)，可见此羊志具良好的化学品质和稳定性。通过分析可以看出，麦盖提羊不仅有优良性能，且羊毛也有一定的工艺价值。     

含末端半胱氨酸人表皮生长因子受体2亲和体的68Ga标记和显像

目的 在含末端半胱氨酸的人表皮生长因子受体2(HER2)亲和体的羧基末端甘氨酸-甘氨酸-甘氨酸-半胱氨酸(GGGC)的半胱氨酸残基标记68Ga,探讨该标记物用于乳腺癌模型小鼠的HER2显像.方法 通过基因工程制备含末端半胱氨酸的HER2亲和体,应用1,4,7,10-四氮环十二烷-1,4,7-三乙酸-10-马来酰亚胺乙基乙酰胺(MMA-DOTA)在半胱氨酸巯基上耦联DOTA.新洗脱的68Ga液和DOTA-HER2亲和体在90℃下反应,完成标记.标记产物经过C18柱纯化、乙醇洗脱后用于细胞结合分析和microPET显像.细胞结合分析采用表达HER2的乳腺癌细胞MBA-MD-361,动物模型采用该乳腺癌细胞接种的BALB/c裸鼠模型.于4只荷乳腺癌小鼠尾静脉注射3.7 MBq68Ga标记亲和体,分别于注射后20、60 min进行micmPET显像,随即将动物处死,取出心脏、肿瘤、肌肉、骨骼测质量,并用γ计数仪测量放射性,计算肿瘤与肝脏、肌肉、骨骼、心脏的放射性比值.结果 HER2亲和体纯度在95％以上,68Ga标记亲和体的放化纯为97％.应用HER2阳性细胞测出亲和体的亲和力KD值为1.5 nmoL/L.MicroPET显像示,68Ga标记亲和体进入荷瘤鼠血液循环系统后,很快结合于HER2阳性肿瘤,主要从泌尿系统清除.注射68Ga标记亲和体后,肿瘤与肝脏、肌肉、骨骼、心脏的放射性比值分别为17.4±1.0、35.1±10.9、20.7±6.2和20.9±4.0.结论 68Ga亲和体标记成功,适用于HER2阳性肿瘤的PET显像.     

~(99)Tc~m-DTPA核素肾动态显像对糖尿病肾功能的评价

目的 探讨,~(99)Tc~m-二亚乙基三胺五乙酸(~(99)Tc~m-DTPA)核素肾动态显像诊断糖尿病肾病(DN)的价值.方法 糖尿病(DM)患者90例,依据尿白蛋白排泄率(UAER)分为4组:①DM正常尿白蛋白(DM_1)组;②DM微量尿白蛋白(DM_2)组;③大量尿白蛋白(DM_3)组;④肾功能不全(DM_4)组;与正常对照(NC)组40例一起行放射性核素动态显像测定肾小球滤过率(GFR),同时测定尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)、β_2-微球蛋白(β_2-MG).结果 DM1组GFR明显高于NC组(t=12.5,P<0.01),DM_2组GFR与NC组相比无差异,但肾功能曲线半排时间(T_(1/2))延长,20min残流率(C_(20))增高.DM_3、DM_4组GFR明显低于对照组,T_(1/2)更加延长,C_(20)更高,随着DN的进展,UAER逐渐上升,GFR依次降低,二者呈显著负相关(r=-0.497,P<0.05).结论 ~(99)Tc~m=DTPA肾动态显像可早期诊断DN,并可了解肾功能受损程度,是反映DN损害的敏感指标.     

~(99m)Tc直接标记单克隆抗体的改进法

介绍一种用硼酸作路易斯酸催化荊,亚锡还原抗体的标记方法,并用该法标记抗体Lym-1和B72.3,进行了荷瘤裸鼠显像及体内分布实验。将0.25ml 10mg/ml的抗体Lym-1溶液(0.5ml,5mg/ml的B72.3),用0.1mol/L pH=9.3的硼酸缓冲液稀释到