高压氧对大鼠肠缺血-再灌注损伤致细胞凋亡的影响

目的 观察大鼠在小肠缺血-再灌注(I/R)不同时期应用高压氧(HBO)治疗对小肠黏膜细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制.方法 采取大鼠肠系膜上动脉(SMA)钳夹缺血60 min,松钳夹再灌注60 min,建立S-D大鼠小肠I/R损伤模型,并随机(随机数字法)分成4组:I/R组、缺血前HBO治疗组或HBO预处理组(HBO-P)、缺血期HBO治疗组(HBO-I)和再灌注期HBO治疗组(HBO-R).再灌注60 min后,取回肠末端小肠标本.采用酶连免疫吸附试验法(Elisa)检测肠道组织TNF-α,用比色法检测肠道组织匀浆含量ATP,用免疫组化法检测小肠组织中半胱氨酸天门冬氨酸特异蛋白酶(Caspase-3)的表达.数据以均数±标准差(-x±s)表示,采用单因素方差分析检验,独立样本间比较采用SNK-q检验.结果 肠道组织TNF-α含量在HBO-I组最低,其次为HBO-P组(每两组比较P＜0.05),但前两组明显低于HBO-R组和I/R组(P＜0.05),HBO-R组略低于I/R组,但差异无统计学意义(P＞0.05);Caspase-3表达在HBO-I组最低,HBO-P组次之(两组比较P＜0.05);HBO-R和I/R组最高(与前两组比较P＜0.05),尽管HBO-R组略低于I/R组,但差异无统计学意义(P＞0.05);ATP含量在HBO-I组最低,HBO-P组次之(两组比较P＜0.05),HBO-R和I/R组最高(与前两组比较P＜0.05),尽管HBO-R组略低于I/R组,但差异无统计学意义(P＞0.05).结论 HBO、小肠I/R损伤和小肠黏膜上皮凋亡之间存在联系;HBO治疗可以维持黏膜上皮细胞能量代谢,减少ATP耗竭,降低肠道组织TNF-α含量,减轻I/R损伤小肠黏膜上皮凋亡;在缺血期和缺血前应用HBO治疗显示有益结果,特别是在缺血期应用HBO效果最好,再灌注期应用HBO无效.     

高压氧防止创伤/失血性休克复苏后大鼠肠道缺血-再灌注损伤

目的 观察高压氧(HBO)对创伤/失血性休克复苏后大鼠肠道缺血-再灌注损伤的保护作用并探讨其作用机制.方法Wistar大鼠用铁块砸击左侧股骨并同时通过右颈动脉放血建立创伤/失血性休克模型,随后进行自体血和液体复苏.大鼠随机分成对照组、休克组、HBO一次和三次治疗组.结果 复苏24 h后HBO一次和三次组大鼠肠道组织乳酸含量、诱生型一氧化氮合成酶(iN0s)活性、一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均明显低于休克组(P<0.05);HBO一次和三次组中肠组织病理损伤评分明显低于休克组(P<0.05).电镜显示休克组肠黏膜上皮细胞肿胀,微绒毛广泛脱落;线粒体肿胀,嵴消失,形成空泡,广泛线粒体溶解;桥粒连接稀疏,细胞间紧密连接开放.HBO一次和三次组上述改变明显减轻:线粒体部分溶解,嵴部分消失,紧密连接得以保存.HBO三次组在以上所有的指标中均要好于HBO一次组,但差异无统计学意义(P>0.05).结论HBO可以减少创伤性休克后肠道组织炎性细胞因子的产生,减轻炎症反应,保护肠道组织和黏膜屏障免受创伤/失血性休克后缺血/再灌注的损伤.     

高压氧治疗对大鼠重度脑创伤后炎性反应的影响

目的观察高压氧治疗对重度脑创伤大鼠其脑组织内炎性细胞因子水平的影响及大鼠脑组织病理学改变,并探讨高压氧治疗的作用机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、高压氧组及脑创伤组。采用高压气体冲击脑组织制作大鼠局部脑创伤模型。分别于术后3h、1d、3d、5d及7d时观察大鼠脑组织病理学改变;同时应用放射免疫检测技术测定脑创伤组及高压氧组在上述各时间点时脑内TNF-α、IL-6、IL-8及IL-10的水平。结果当大鼠发生脑创伤后,上述各炎性细胞因子水平较假手术组均有不同程度提高,经高压氧治疗后,发现炎性细胞向脑组织内浸润现象减缓,并有大量小胶质细胞、星形胶质细胞聚集、增生,而且高压氧组大鼠脑组织内上述炎性细胞因子在各时间点均较脑创伤组降低(均P<0.01);与假手术组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论高压氧可抑制炎性细胞向脑创伤组织处浸润,降低各炎性细胞因子水平,促进小胶质细胞、星形胶质细胞聚集、增生,具有保护受损脑组织的功效。     

肠上皮细胞凋亡与肠缺血损伤及再生修复的实验研究

目的 探讨小肠黏膜缺血损伤及再生修复的特征及规律，以及与肠上皮细胞凋亡的关系。方法 应用小肠缺血再灌注模型，检测小肠缺血及再生修复过程中肠黏膜结构、黏膜隐窝上皮细胞分裂活性及黏膜上皮细胞凋亡的改变。结果 肠缺血再灌注lh，肠黏膜损害加重，黏膜上皮细胞凋亡明显增加，黏膜隐窝上皮细胞分裂活性降低；肠黏膜再生ld、3d组肠黏膜上皮细胞凋亡明显减少，黏膜隐窝上皮细胞分裂活性增加，并逐渐恢复至正常水平，肠黏膜结构逐渐恢复至正常。结论 肠上皮细胞凋亡在肠缺血再灌注损伤及肠再生修复过程中起重要作用。     

高压氧对油酸诱导大鼠急性肺损伤作用的实验研究

目的 探讨高压氧(HBO)对油酸(OA)诱导大鼠急性肺损伤(ALI)的干预作用.方法 80只SD大鼠按随机数字表法分为4组.OA组30只,经鼠尾静脉注射OA 0.15 ml/kg制备ALI模型,分别于制模后4 h、3 d、7 d各随机活杀10只;OA+HBO组20只,在HBO治疗箱给予2.5 atm(1 atm=101.325 kPa)下单次治疗90 min,分别于HBO治疗后3 d、7 d各随机活杀10只;单纯HBO干预组20只,分别于HBO治疗后3 d、7 d各随机活杀10只;另设正常对照组10只.取腹主动脉血进行血气分析,测定血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6;取左肺标本,观察大体形态改变及镜下病理学改变;取右肺,测定湿/干重(W/D)比值.结果 OA组4 h后动脉血氧分压(PaO2,mm Hg,1 mm Hg=0.133 kPa)由107.70±5.37降至57.40±2.63;肉眼可见肺脏明显淤血、水肿;光镜下肺泡正常结构消失,间质水肿增宽,大量炎性细胞浸润,毛细血管明显扩张、透明膜形成;W/D比值较正常对照组明显增加(6.94±0.44比4.59±0.44,P<0.05),血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平升高[TNF-α(μg/L):18.52±1.20比5.27±0.61,IL-1β(μg/L):13.73±1.37比6.13±1.51,IL-6(μg/L):14.51±1.21比11.14±0.89].经HBO治疗3 d、7 d时PaO2(mm Hg,3 d:79.20±1.68比59.00±2.70,7 d:94.30±3.77比74.00±3.85)、肺W/D比值(3 d:7.43±0.73比9.82±0.99,7 d:6.75±1.14比8.77±1.60)均较OA组同期有不同程度改善(P<0.05或P<0.01).治疗3 d后HBO有降低血清中IL-1β(μg/L)的作用(6.46±1.99比9.09±1.09,P<0.05).结论 HBO治疗有改善ALI大鼠氧合,促进肺水吸收、抑制部分炎症介质产生的作用.     

高压氧对脑外伤大鼠额叶皮质和海马胆碱乙酰转移酶阳性神经元数目的影响

目的观察高压氧（HBO）对脑外伤大鼠额叶皮质和海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性神经元数目的影响。方法采用自由落体撞击法造模。将30只大鼠随机分为假手术对照组（A组）、脑外伤组（B组）和脑外伤加HBO治疗组（C组），各组大鼠在造模24d后同时进行ChAT阳性细胞数及相关参数的定量分析。结果C组大鼠额叶皮质和海马ChAT阳性神经元数目比B组明显增多（P〈0．01）。结论HBO治疗能抑制乙酰胆碱能神经元的退行性变，从而使损伤大鼠海马区ChAT阳性纤维增生。这可能是HBO治疗改善颅脑损伤大鼠学习记忆功能障碍的原因。     

高压氧预处理对脊髓损伤大鼠神经元线粒体凋亡通路的影响

目的 研究高压氧预处理(HBO-PC)对大鼠脊髓损伤(SCI)后运动功能及线粒体凋亡通路的影响.方法 共选取健康雄性Wistar大鼠36只,采用随机数字表法将其分为对照组、模型组及高压氧预处理组.高压氧预处理组大鼠经7次高压氧预处理后,采用Allen's法将高压氧预处理组及模型组大鼠制成SCI模型,对照组末给予特殊处理.于制模2周后采用BBB运动功能评分对各组大鼠肢体运动功能进行评定,同时采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脊髓组织内caspase-3、细胞色素C(CYC)、Bak、Bax、Bcl-x及Bc1-2 mRNA表达量.结果 制模2周后发现模型组及高压氧预处理组BBB评分[分别为(6.15±1.24)分和(10.80 ±2.16)分]均较对照组[(21.00 ±0.00)分]明显降低(P＜0.05);并且模型组BBB评分亦显著低于高压氧预处理组(P＜0.05).制模2周后模型组caspase-3 mRNA表达量(2.46 ±0.60)较对照组(1.86±0.53)显著增高(P＜0.05);高压氧预处理组caspase-3 mRNA表达量(1.97 ±0.28)亦较对照组有增高趋势,但差异无统计学意义(P＞0.05);同时高压氧预处理组caspase-3 mRNA表达量较模型组显著降低(P＜0.05);高压氧预处理组CYC mRNA表达量(1.38±0.22)较对照组(1.98±0.62)及模型组(2.69±0.50)均显著降低(均P＜0.05).高压氧预处理组、模型组Bak mRNA表达量[分别为(2.15±0.78)和(1.93 ±0.61)]均较对照组(1.21 ±0.46)显著增高(P＜0.05).结论 高压氧预处理能改善SCI大鼠肢体运动功能,其治疗机制可能与减弱SCI大鼠神经元线粒体凋亡通路激活程度有关.     

高压氧治疗弥漫性轴索损伤的临床疗效观察

目的：探讨高压氧治疗弥漫性轴索损伤的疗效。方法：60例弥漫性轴索损伤患者分为治疗组32例和对照组28例，观察GCS评分平均值的变化和GOS预后情况。结果：治疗组GCS评分平均值曲线抬高，病死率下降，GOS评分高于对照组，其差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：高压氧辅助治疗弥漫性轴索损伤可以明显降低病死率，改善患者的预后     

高压氧对下肢动脉缺血再灌注损伤的影响

目的：观察高压氧（Hyperbaricoxygen,HBO）治疗下肢动脉缺血再灌注损伤对患肢及肾功能的影响。方法：将经腔内血管重建后的重症下肢缺血患者72例（80条肢体）随机分为HBO组和常规组,每组40条肢体。HBO组接受高压氧治疗外,两组其它治疗措施完全相同。检测不同时间患肢血液内氧代谢、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酐（Cr）、pH值水平,测定踝肱指数（ABI）,观察患肢情况。结果：不同时间点HBO组氧代谢水平、LDH、Cr、pH值及ABI与常规组比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。术后24h内常规组有5条患肢、HBO组有1条患肢出现筋膜室综合症行切开减压。结论：下肢动脉缺血再通后,早期HBO治疗能显著提高氧含量,改善微循环障碍、抑制组织水肿,降低肾功能损害、促进肢体缺血后再灌注损伤的修复。     

高压氧对脑外伤大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 研究高压氧对于脑外伤大鼠神经细胞凋亡的作用。方法 采用改进的Feency自Fh落体法建立脑外伤模型，72只大鼠随机分为正常对照组、脑外伤组、高压氧治疗组。在预定时间点采用TUNEL法和免疫组化法观察3组细胞的凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达情况。结果 高压氧治疗组伤后第1，7，24天细胞凋亡率均低于脑外伤组。各时间点Bcl-2染色阳性细胞率均高于脑外伤组，各时间点Bax染色阳性细胞率均低于脑外伤组。结论 高压氧可明显提高Bcl-2的表达，抑制Bax的表达，进而抑制细胞凋亡。     

高压氧对鼠损伤脊髓内神经生长相关蛋白表达的影响

目的研究高压氧(HBO)治疗对脊髓损伤(SCI)组织中神经生长相关蛋白(GAP-43)表达水平的影响。方法用Allen氏WD法制作鼠脊髓损伤模型。55只成年Wistar鼠随机分为正常组、SCI对照组和HBO治疗组。治疗组于术后每天HBO治疗1次，对照组无特殊治疗：各组分别于术后1d、4d、7d、10d、14d各随机取鼠5只，取损伤脊髓组织，Western blot法检测GAP-43表达水平。结果GAP-43在正常成年鼠脊髓中少量表达，SCI后表达增加且HBO治疗组较对照组表达更为显著：术后1周时SCI对照组GAP-43表达达到高峰，2周时降至接近初始水平，但HBO治疗组GAP-43表达仍维持高水平。结论HBO可增强损伤脊髓组织GAP-43表达。     

高压氧对脑外伤后一氧化氮及脑水肿的影响

观察高压氧对脑外伤后脑水肿及一氧化氮的影响。方法：建立大鼠液压脑外伤模型，采用生化、放免等方法观察脑外伤后不同时期高压氧（ＨＢＯ）治疗组和未治疗组血浆一氧化氮（ＮＯ）、脑组织ＮＯ、环磷酸鸟苷酸（ｃＧＭＰ）及脑组织含水量的变化，并进行病理学检查。结果：ＨＢＯ治疗组血浆ＮＯ、脑组织含水量、腋组织ＮＯ及ｃＧＭＰ较未治疗组均有不同程度下降（Ｐ＜０．０５）。脑组织含水量与血浆ＮＯ及脑组织ＮＯ、ｃＧＭＰ之间呈正相关关系（ｒ＝０．３４１４、０．３８１９、０．４８０４、Ｐ＜０．０５），病理检查可见ＨＢＯ治疗组脑组织损伤较轻。结论：ＨＢＯ能减轻脑外伤后脑水肿，并抑制脑外伤后ＮＯ的过量生成。ＨＢＯ减轻脑外伤后脑水肿的机制与ＮＯ有关。     

高压氧修复缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的自噬机制

目的 观察高压氧舱治疗对缺血再灌注损伤大鼠脑血管内皮细胞微管相关蛋白1轻链3 (LC3)和Beclin-1表达的影响,探究高压氧修复缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障的机制。方法 54只成年雌性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(n=12)、缺血再灌注损伤模型组(n=18)、高压氧组(n=12)和抑制剂组(n=12)。模型组、高压氧组和抑制剂组采用线栓法建立大鼠大脑中动脉缺血2 h再灌注损伤模型。高压氧组和抑制剂组建模后予高压氧舱治疗;抑制剂组治疗前侧脑室注射3-甲基腺嘌呤。损伤后72 h,各组进行伊文思蓝染色,观察梗死区伊文思蓝含量;模型组采用免疫荧光双标法观察LC3在CD₃₁⁺血管内皮细胞的表达;采用Western blotting检测各组梗死区皮质微血管段LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达水平。结果 与假手术组相比,模型组梗死区伊文思蓝含量明显升高(P < 0.01);与模型组相比,高压氧组梗死区伊文思蓝含量明显降低(P < 0.01);与高压氧组相比,抑制剂组梗死区伊文思蓝含量增高(P<0.05)。模型组损伤区CD₃₁⁺血管内皮细胞可见LC3表达;模型组梗死区微血管段Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达水平均明显高于假手术组(P < 0.01);高压氧组的LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达水平较模型组均升高(P<0.05);抑制剂组较高压氧组和模型组均明显下降(P<0.01)。结论 缺血再灌注损伤大鼠损伤区的血管内皮细胞存在自噬现象,高压氧舱治疗能够上调梗死区血管内皮细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的表达,从而促进血脑屏障修复。     

高血压治疗对损伤后生长相关蛋白-43在神经系统表达的影响

目的 探讨应用高压氧治疗大鼠脑缺血再灌注损伤后,生长相关蛋白-43( GAP-43)在神经系统的表达. 方法 成年健康雄性SD大鼠32只,随机分为高压氧组(n=16)和高压空气组(n=16),每组再分为脑缺血再灌注模型组(n=8)和假手术组(n=8).应用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注动物模型,免疫组化法检测GAP-43在...     

高压氧治疗糖尿病大鼠心肌病变的研究

目的研究高压氧治疗能否改善链脲佐菌素（STZ）大鼠糖尿病性心肌的病损程度。方法STZ大鼠造模成功3个月、电镜证实有心肌病变后，随机分为3组：①高压氧治疗组60只：每天接受0．15MPa高压氧治疗1h，连续20d；②糖尿病对照组64只：不做治疗；③正常对照组40只：腹腔注射生理盐水的无糖尿病正常大鼠。分别在疗程的5、10、20d后处死治疗组及同期对照组大鼠，取心脏组织进行HE染色病理学观察和电镜观察。结果高压氧治疗20d后STZ大鼠的糖尿病性心肌病变明显好于同期糖尿病对照组，电镜观察显示肌丝排列整齐、线粒体排列规则、结构紧凑。结论高压氧治疗可减轻STZ大鼠糖尿病性心肌组织的病损程度。     

高压氧综合治疗颈脊髓损伤的疗效观察与护理

目的探讨高压氧综合治疗颈脊髓损伤的效果和护理措施。方法将颈脊髓损伤患者随机分为高压氧综合治疗组35例和常规药物治疗组35例,两组均给予常规药物治疗。高压氧综合治疗组在此基础上采用高压氧治疗加适宜护理。结果高压氧综合治疗组有效率94.3%,明显高于对照组的74.3%(χ2=5.285,P<0.05),未见高压氧治疗并发症。结论高压氧综合治疗及护理,对颈脊髓损伤有显著的疗效。     

舒芬太尼预处理对大鼠肠道缺血再灌注后氧自由基介导性损伤的影响

目的:观察舒芬太尼预处理对大鼠肠道缺血再灌注损伤(IRI)病变组织及血清中丙二醛(MDA)与超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响。方法:Wistar大鼠24只,随机平均分为假手术组(Sham组)、肠缺血再灌注组(IRI组)、舒芬太尼预处理组(SUF组)、纳洛酮拮抗组(NLX组)。以夹闭肠系膜上动脉60min再灌注120min制作IRI模型,于再灌注末刮取大鼠肠黏膜组织测SOD和MDA,留取腔静脉血检测血清中SOD和MDA,剪取相同部位4cm肠段检测组织含水率。结果:IRI组组织和血清MDA和组织含水率较Sham组显著升高,分别增加189.8%、285%和13.5%(均P<0.01);组织和血清SOD活性明显下降(73.5±4.3vs29.4±4.1,107±6vs51±5,均P<0.01)。舒芬太尼预处理可使IRI后MDA、组织含水率升高和SOD下降明显减缓,组织和血清中MDA较IRI组分别降低40.9%与53.2%,SOD升高99.6%与68.6%(均P<0.01),但与Sham组比较差异仍有显著性(均P<0.01)。纳洛酮不能完全拮抗舒芬太尼预处理对IRI的保护效应,两组各参数比较差异仍有显著性(均P<0.01)。组织和血清MDA和SODPearson相关系数分别为0.891和0.807。结论:舒芬太尼预处理大鼠肠缺血再灌注损伤可能通过抑制大鼠IRI后脂质过氧化、保护SOD等抗氧化酶活性,在一定程度上减轻IRI引起的氧自由基介导性损害。纳洛酮拮抗舒芬太尼预处理并不能完全地逆转舒芬太尼预处理对受损肠道的保护作用。     

高压氧治疗重型颅脑损伤患者的疗效观察及护理

目的：探讨高压氧治疗重型颅脑损伤患者的疗效及护理措施。方法：将160例重型颅脑损伤的患者随机分为对照组和高压氧治疗组各80例。对照组按常规治疗,高压氧组在常规治疗的基础上加高压氧综合治疗,高压氧治疗时做好进舱前、舱内和出舱后的护理,指导患者正确吸氧,配合功能锻炼。比较两组患者的有效率及住院时间。结果：高压氧组治疗有效率高于对照组（P＆lt;0.05）,住院时间短于对照组（P＆lt;0.01）。结论：重型颅脑损伤患者配合高压氧治疗可提高治愈率,缩短住院时间。     

高压氧治疗对创伤性脑损伤大鼠认知功能的影响

目的:观察高压氧治疗对脑损伤大鼠认知功能的影响及海马区CCL2及其受体CCR2的表达变化。方法:75只成年雄性SD大鼠按数字表法随机分为假手术组(Sham组)、脑外伤组(TBI组)和高压氧治疗组(HBOT组),每组各25只。HBOT组和TBI组均采用Feeney自由落体法制作脑外伤模型,HBOT组每天进行HBO治疗;Sham组暴露硬脑膜不予打击。运用Morris水迷宫测试认知功能;荧光免疫双标检测海马CA1区CCL2和CCR2的表达。实时定量PCR测定损伤侧海马CCL2和CCR2mRNA的表达情况。结果:Morris水迷宫测试结果显示,HBOT组高压氧治疗后7d、14d和21d平均潜伏期下降,同时穿越平台次数增多,与TBI组相比,差异均有显著性意义(P0.05);免疫荧光双染法检测显示,大鼠TBI后海马CA1区CCL2主要表达在星形胶质细胞,CCR2主要表达在神经元;实时定量PCR显示,脑损伤后3—21d损伤侧海马CCL2 mRNA、CCR2 mRNA水平明显上升,差异有显著性意义;高压氧治疗后海马CCL2 mRNA明显下降,与TBI组相比,7d组、14d组及21d组差异有显著性意义(P0.05)。高压氧治疗7d、14d后海马CCR2 mRNA明显下降,与TBI组相比,7d组及14d组差异有显著性意义(P0.05)。结论:HBO治疗可以改善创伤性脑损伤大鼠认知功能,其机制可能与海马CCL2/CCR2表达下调有关。     

依达拉奉对大鼠肠缺血再灌注损伤的保护作用

目的:研究依达拉奉对大鼠小肠缺血再灌注肠黏膜损伤的保护作用,为扩展其临床新用途提供实验依据。方法:通过建立大鼠小肠缺血再灌注模型,检测缺血再灌注1h后血清和小肠组织的超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的含量,并观察小肠黏膜病理变化。结果:小肠缺血再灌注后,血清及小肠组织中反映氧化损伤程度的MDA明显升高,抗氧化酶SOD则明显减少,小肠黏膜损伤,应用依达拉奉后能显著改善上述改变。结论:依达拉奉对肠缺血再灌注引起的肠黏膜损伤具有明显保护作用。