miR-181a对唾液腺腺样囊性癌细胞株侵袭和迁移的影响

目的研究与唾液腺腺样囊性癌（SACC）侵袭转移相关的微小RNA（miRNA）,探讨miR-181a对SACC侵袭和迁移的影响。方法选择1对不同侵袭迁移能力的SACC细胞株（SACC-LM/SACC-83）,采用miRNA芯片技术分析细胞株中miRNA的表达差异,初步筛选出与SACC侵袭转移相关的miRNA。再通过过表达或沉默细胞株中miR-181a的表达,进行细胞划痕和Transwell侵袭实验检测细胞的侵袭、迁移能力。采用SPSS 17.0软件对数据进行统计学处理,以P〈0.05为差异具有统计学意义。结果 miRNA芯片结果显示,高侵袭迁移能力的SACC细胞株miR-181a表达明显下降。细胞划痕和Transwell实验结果表明,SACC-LM细胞转染miR-181a mimics后体外侵袭迁移能力明显受到抑制（t=-5.235,P〈0.05）;SACC-83细胞转染miR-181a LNA后体外侵袭迁移能力有所提高（t=7.713,P〈0.05）。结论不同侵袭迁移能力的SACC细胞株中存在多种miRNA的差异表达。miR-181a的表达降低可能导致SACC细胞侵袭迁移能力的增强。     

PPARγ在人肺高、低转移涎腺腺样囊性癌细胞系中的表达及意义

目的检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）在涎腺腺样囊性癌高、低转移细胞系中的表达,并探讨PPARγ是否与涎腺腺样囊性癌（SACC）肺转移转移相关。方法采用Western blot和逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及实时定量PCR（Quantitative Real-time PCR）方法检测肺高转移性涎腺腺样囊性癌（SACC-LM）及肺低转移性涎腺腺样囊性癌（SACC-83）细胞系中PPARγ蛋白表达和PPARγmRNA的表达水平。所得实验数据采用SPSS 16.0统计软件进行t检验。结果 PPARγ蛋白及mRNA在SACC-LM细胞系及SACC-83细胞系中均有表达,与SACC-83细胞系相比,SACC-LM细胞系中PPARγ蛋白较高表达,并且SACC-LM细胞系中PPARγmRNA表达水平是SACC-83细胞中表达水平的4.346939倍（P〈0.01）。结论 PPARγ在SACC肺高低转移细胞系中的差异表达,初步证实PPARγ在SACC远处转移方面有重要作用。     

SOX2基因对唾液腺腺样囊性癌细胞生物学特性的影响

探索转染SOX2-shRNA载体慢病毒对唾液腺腺样囊性癌（SACC）细胞系SACC-LM和SACC-83生物学行为的影响。     

沉默RhoA基因对腺样囊性癌细胞迁移和侵袭的影响

目的 探讨RhoA基因对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞的迁移和侵袭能力的影响.方法 将液氮冻存的20例SACC及正常癌旁组织研磨匀浆,分别提取总RNA和总蛋白检测RhoA的表达情况.同时构建RhoA-siRNA转染2个细胞株SACC-LM和SACC-...     

miR-181a抑制唾液腺腺样囊性癌侵袭、转移机制的实验研究

目的 探讨miR-181a在唾液腺腺样囊性癌细胞侵袭、转移中的作用。方法 利用QRT-PCR检测miR-181a在一对不同侵袭、迁移能力细胞株中的表达水平。过表达或沉默miR-181a在SACC-LM和SACC-83细胞中的表达。利用激光共聚焦显微镜观察转染后细胞骨架的改变。Western免疫印迹检测转染后侵袭、转移相关因子的表达。通过尾静脉注射miR-181a mimics和mimics NC细胞,建立裸鼠肺转移模型。采用SPSS17.0软件包对数据进行统计学处理。结果 QRT-PCR结果显示,miR-181a在低侵袭、迁移能力SACC-83细胞中的表达量显著高于高侵袭、迁移能力的SACC-LM细胞。SACC-LM细胞转染miR-181a mimics后,细胞呈梭形,Slug、pERK1/2、ERK1/2表达水平下调;SACC-83细胞转染miR-181a LNA后,细胞变圆,体积变小,Slug、pERK1/2、ERK1/2表达水平升高。裸鼠肺转移模型miR-181a mimics组,细胞形成肺转移灶面积显著小于mimics NC组（P<0.05）。结论 miR-181a能抑制SACC的侵袭和转移。     

BDNF和TrkB在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义

目的:观察BDNF和TrkB在唾液腺腺样囊性癌组织和细胞系中的表达,揭示BDNF和TrkB与唾液腺腺样囊性癌高转移特性和神经侵袭特性的关系。方法:以30例SACC标本为研究对象,以5例正常腮腺及3例腺泡细胞癌作为对照,采用免疫组化法对BDNF和TrkB进行检测。以SACC高、低转移细胞系ACC-2和ACC-M为研究对象,利用免疫组化、RT-PCR、实时荧光定量PCR和Western印迹,检测BDNF和TrkB在其中的表达差异。采用χ2检验进行统计学分析。结果:组织标本免疫组化显示:TrkB表达水平在嗜神经现象组显著高于未见嗜神经现象组(Ρ<0.05),BDNF表达水平与嗜神经现象无关(Ρ>0.05)。实时荧光定量PCR和Western印迹均检测到BDNF和TrkB在ACC-M中的表达高于ACC-2(Ρ<0.01)。结论:TrkB的表达强度与SACC的神经侵袭特性相关,BDNF和TrkB的表达强度与SACC的高转移特性相关。     

NDRG2对唾液腺腺样囊性癌增殖、侵袭的影响

目的:探讨NDRG2基因在唾液腺腺样囊性癌组织中的表达及其对SACC-LM细胞增殖、侵袭的影响。方法:采用蛋白质免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析唾液腺腺样囊性癌组织及癌旁组织样本中NDRG2的表达,采用RNA干扰技术降低腺样囊性癌细胞SACC-LM中NDRG2基因的表达,利用CCK-8实验及集落形成实验检测细胞增殖能力的变化,利用划痕实验及Transwell实验分别检测细胞迁移及侵袭能力的变化,利用Western 免疫印迹实验检测侵袭标志蛋白以及上皮-间充质转化（EMT）相关蛋白的表达。采用SPSS 17.0软件包进行数据处理。结果:NDRG2基因在唾液腺腺样囊性癌组织中的表达低于癌旁组织（P=0.017）。在降低NDRG2基因的表达后,SACC-LM细胞的增殖、迁移及侵袭能力显著增强（P<0.05）,侵袭标志蛋白MMP2表达量显著升高（P=0.0004）,上皮标志物E-Caherin表达量显著降低（P=0.0229）,间充质标志物N-Cadherin表达量显著升高（P=0.0009）。结论:NDRG2基因在腺样囊性癌中低表达,降低NDRG2的表达可增强SACC-LM的增殖、迁移及侵袭能力。     

EGFR及C-erbB-2蛋白表达与腺样囊性癌细胞系转移力之间的关系

目的:研究表皮生长因子受体(EGFR)和C-erbB-2在涎腺腺样囊性癌2个细胞系中的表达,探讨其与腺样囊性癌肺转移的关系。方法:培养人涎腺腺样囊性癌SACC-83和肺高转移性腺样囊性癌SACC-LM细胞系,分别提取它们的胞质和胞膜样品并采用Western Blot技术检测EGFR和C-erbB-2在其中的表达差异,利用电泳凝胶成像分析软件对结果进行量化分析。结果:EGFR在SACC-83细胞的细胞膜中呈现高表达(P<0.01),而在SACC-LM细胞的胞质中呈现高表达(P<0.01)。SACC-83与SACC-LM细胞比较,前者胞膜中EGFR的表达明显高于后者,而胞质中的表达却明显低于后者(均为P<0.01)。C-erbB-2无论在SACC-LM细胞的胞质和胞膜中的表达都明显高于SACC-83细胞系,经灰度值分析,差异非常显著(P<0.01)。结论:EGFR基因在胞质中的高水平积累以及C-erbB-2基因的高水平表达可能在腺样囊性癌肺转移中发挥重要作用。     

M期促进因子在唾液腺腺样囊性癌中的表达

目的：研究M期促进因子（MPF）的表达与唾液腺腺样囊性癌（SACC）临床病理特点之间的关系。方法：应用免疫组织化学SP法检测40例SACC组织及40例正常唾液腺组织中MPF的表达。应用Westem印迹测定SACC细胞系SACC-83和SACC肺高转移细胞系SACC-LM中MPF的表达。采用SPSS11．5统计软件包,分别应用χ^2检验、配对t检验和线性相关分析进行统计学处理。结果：SACC组织中MPF的表达明显升高,与正常唾液腺组织之间存在显著差异（P〈0．05）。MPF的表达与SACC的病理类型有关（P〈0．05）。体外培养的SACC细胞系SACC-LM中MPF的表达显著高于SACC-83中MPF的表达（P〈0．05）。结论：MPF在SACC组织中呈高表达,其表达与SACC的发生密切相关,MPF的异常激活是SACC恶性增殖的原因之一,MPF与SACC的转移能力有关。     

唾液腺腺样囊性癌组织中ERK蛋白的表达及其临床意义

目的探讨唾液腺腺样囊性癌(SACC)组织中有丝分裂活化蛋白激酶(ERK)的表达及临床意义。方法采用免疫组化法(SP法)检测63例SACC组织中ERK的表达,数据采用χ2和t检验进行显著性比较。结果在带有癌旁非癌组织的38个病例中,所有唾液腺腺样囊性癌组织中均有ERK蛋白表达,在癌旁非癌组织中ERK表达阳性31例(52.63%),两者的差异有显著性(P<0.01);在25例有转移病例中ERK表达阳性24例(96%),在38例无转移病例中ERK表达阳性27例(71.05%),两者的差异有显著性(P<0.05);而ERK的表达在年龄、性别和病理分型上均无显著性差异(P>0.05)。结论ERK的高表达可能与唾液腺腺样囊性癌的发生发展密切相关,是患者预后的重要指标之一。     

BDNF/TrkB在唾液腺腺样囊性癌上皮-间质转化过程中的表达及意义

目的 研究BDNF、TrkB和E-cadherin在唾液腺腺样囊性癌（SACC）细胞系中的表达,初步探讨BDNF、TrkB和E-cadherin与SACC高转移性及神经侵袭性之间的关系。方法 以SACC高、低转移细胞系SACC-LM和SACC-83为研究对象,利用实时荧光定量 PCR和Western 免疫印迹技术检测BDNF、TrkB和E-cadherin在其中的表达差异;在SACC-83细胞系中加入外源性BDNF因子、TrkB抑制剂k252a,分析BDNF/TrkB通路在SACC侵袭转移过程中的生物学作用;利用实时荧光定量 PCR、Western 免疫印迹、细胞形态观察、细胞迁徙和侵袭实验评估SACC细胞上皮-间质转化（EMT）进程。应用SPSS17.0软件包对数据进行统计学处理。结果 BDNF 和TrkB在SACC-LM中的表达高于SACC- 83,E-cadherin在SACC-LM中的表达低于SACC- 83;外源性BDNF刺激能有效诱导TrkB的激活和表达,降低E-cadherin的表达,提高N-cadherin的表达,使细胞形态呈长梭形改变,促进SACC-83细胞的迁徙、侵袭能力;而TrkB受体抑制剂k252a可有效抑制BDNF的各种作用,降低SACC-83细胞形态变化和迁徙、侵袭能力。结论 BDNF/TrkB信号通路通过介导SACC的EMT过程,促进SACC的迁徙、侵袭能力。     

CCL5/CCR5生物轴在涎腺腺样囊性癌细胞嗜神经侵袭中的作用

目的 探讨CCL5/CCR5生物轴在涎腺腺样囊性癌（SACC）细胞嗜神经侵袭中的作用。方法 应用细胞免疫荧光技术和流式细胞术检测SACC-LM细胞中趋化因子受体CCR5的表达;应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测周围神经细胞培养上清液中趋化因子CCL5的表达。应用流式细胞术检测CCL5对SACC-LM细胞内F肌动蛋白的作用,并通过划痕和侵袭实验观察趋化因子CCL5和其受体CCR5对SACC-LM细胞运动能力和侵袭能力的作用。结果 SACC-LM细胞高表达趋化因子受体CCR5;周围神经原代培养上清液中趋化因子CCL5质量浓度为（359.2±15.8）、（696.4±22.6） pg·mL^-1;趋化因子CCL5和其受体CCR5结合后对SACC-LM细胞的运动能力和侵袭能力可以产生促进作用。结论 CCL5/CCR5生物轴可能在SACC细胞嗜神经侵袭中起着重要的作用。     

涎腺腺样囊性癌细胞转移潜能与细胞外基质的关系

目的 了解不同转移能力的涎腺腺样囊性癌（ｓａｌｉｖａｒｙ ａｄｅｎｏｉｄ ｃｙｓｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ，ＳＡＣＣ）细胞与细胞外基质粘附、对细胞外基质侵袭及趋化运动的能力。方法 ＭＴＴ法测定ＳＡＣＣ－ＬＭ，ＳＡＣＣ－８３，ＡＣＣ－Ｍ，ＡＣＣ－２与纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的粘附，用改良Ｂｏｙｅｄｎ ｃｈａｍｂｅｒ方法观察了ＳＡＣＣ细胞对人工重组基底膜的侵袭以及趋化运动。结果 高转移的ＳＡ     

ERK在SACC-LM及SACC-83细胞中表达水平与活性的比较

目的：探讨细胞外信号调节激酶（ERK）在涎腺腺样囊性癌细胞中的活性及表达变化：方法：采用RT—PCR和Western blotting法检测SACC—LM及SACC-83细胞系中ERK蛋白mRNA和蛋白表达，测定ERK酶活力。所得实验数据采用SPSS12．0统计软件进行t检验组间比较。结果：ERK在SACC—LM及SACC-83细胞系中的平均活性分别为54．846pmol·min^-1·μg^-1和40．281pmol·min^-1·μg^-1．SACC—LM细胞中ERK具有较高活性：SACC-LM细胞中ERK有较高表达。结论：ERK蛋白活性变化及蛋白表达与SACC的转移有关。     

Paxillin expression levels are correlated with clinical stage and metastasis in salivary adenoid cystic carcinoma

J Oral Pathol Med (2010) 39 : 548–551 Aims: To investigate the relationship between paxillin expression and clinicopathological features and metastasis in salivary adenoid cystic carcinoma (SACC). Methods: A total of 47 SACC were assessed histochemically for paxillin expression. Paxillin immunoreactivity was compared with histological type, clinical stage and distant metastasis. Results: Paxillin expression was identified in 57.45% of SACC as cytoplasmic staining and the expression was correlated with distant metastasis and clinical stage (P < 0.05), but not with histological type. Conclusions: Our observations indicate that paxillin expression is upregulated in SACC. High expression of paxillin was correlated with a more advanced stage and metastasis in SACC, suggesting that paxillin is a disease marker in advanced SACC and SACC with distant metastasis, and, consequently, may have value as a therapeutic target for SACC.     

RD抗涎腺腺样囊性癌细胞转移的体外实验研究

目的　研究精氨酸 天冬氨酸 (RD)抗涎腺腺样囊性癌 (salivaryadenoidcysticcarcinoma ,SACC)转移的作用。方法　MTT法测定RD对SACC LM与纤维粘连蛋白、层粘连蛋白、Ⅳ型胶原粘连的影响 ,用改良Boydenchamber方法观察RD对SACC细胞人工重组基底膜侵袭以及趋化运动能力的作用。结果　RD在 5mg/L时能抑制SACC LM与细胞及纤维粘连蛋白的粘附 ,而对SACC LM与层粘连蛋白、Ⅳ型胶原的粘附无明显作用。RD在 1、5、2 5mg/L时能明显抑制SACC LM对人工基底膜的侵袭。RD在2 5mg/L时能抑制SACC LM的趋化运动。结论　体外实验表明RD有抗SACC转移的作用