寒凝血瘀证动物模型的量化研究

实验以中医经典理论为指导,运用现代科学技术手段,试在大鼠上复制寒凝血瘀证量化模型,此种将造模依据－模拟病因,模拟症状,实验室检查和药物反证四者融为一体所建立的动物模型,为定量研究寒凝血瘀证的本质和温通活血化瘀作用的原因及其药物的筛选,为指导临和充实中医实验教学内容,提供了又一新的,成功的动物模型。     

寒凝血瘀证表征模型的建立

目的建立寒凝血瘀证表征模型,为探讨血瘀证生物学基础提供实验模型。方法采用多次冰水冷冻刺激法诱导寒凝血瘀证大鼠模型,采用数码相机拍摄实验大鼠证候表征变化。结果模型大鼠舌质紫暗,舌下脉络增粗增长,与正常大鼠舌质鲜红润泽舌下脉络清晰有明显差异。模型大鼠耳廓润泽、微血管清晰但显暗红较正常大鼠耳廓、微血管略有变化。模型大鼠血液流变学全血黏度和还原黏度高切和低切各项指标与正常组比较均有升高(P<0.05);模型大鼠聚集指数、聚集面积显著高于正常大鼠(P<0.05);模型大鼠血小板最大聚集率显著高于正常大鼠,模型大鼠凝血酶时间和凝血酶原时间显著短于正常大鼠(P<0.05)。结论冰水冷冻20次后,血瘀证表征尤其舌质紫暗和舌下脉络增粗增长显现,符合寒凝血瘀证表征模型评价的基本条件。多次冰水冷冻刺激法造模,方法简单,模型稳定性好。     

玉米须水提物对2型糖尿病大鼠胰高血糖素的影响

目的 探讨玉米须水提物对2型糖尿病大鼠胰高血糖素的影响. 方法 采用高脂高糖饲养加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导模拟2型糖尿病雄性SD大鼠模型,给药干预8周后,分别测定各组大鼠空腹血糖(FBG)和胰高血糖素(glucagon)的水平;免疫组化法分析胰岛中胰高血糖素的表达水平. 结果 与模型组比较,中、高剂量的玉米须水提物可呈剂量依赖型显著降低糖尿病大鼠FBG和glucagon的水平(P<0.05或P<0.01),明显降低胰岛细胞中胰高血糖素的表达(P<0.05或P<0.01),对胰岛细胞具有一定的保护作用. 结论 玉米须水提物可降低糖尿病大鼠空腹血糖和胰高血糖素,抑制胰高血糖素大量分泌,对2型糖尿病大鼠可产生一定的保护作用.     

血瘀证患者血栓素和前列环素的临床观察

血瘀是指血液运行不畅甚至停滞凝聚,或离经之血积于体内,皆为瘀血[1],即祖国医学的“血行失度”而引起的“积血”、“蓄血”之证。《巢氏诸病源候论》说:“血之在身,随气而行,常无停积,若因堕落损伤,血行失度……皆成瘀血”。从现代医学来看,血瘀可能是与血液循环障碍有关的病理过程,但对其发病机理,过去只看重于血液动力学方面的研究,而本文则是观察血瘀证患者的血栓素(TXB2)和前列环素(PGFla)水平变化,来进一步了解血瘀的本质。     

玉米须水提物对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子β1表达的影响

目的观察玉米须水提物对链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1 ）表达的影响。方法水溶提取法制备玉米须水提物。 采用高脂高糖饲养加小剂量链脲佐菌素诱导的糖尿病肾病大鼠模型,实验动物分为正常对照组、模型对照组、玉米须水提物干预组,共3组。600mg/（kg&#183;d）剂量的玉米须水提物灌胃给药8周后,测定各组大鼠空腹血糖、体重和肾脏肥大指数,免疫组化法分析肾脏中肾小球内TGF-β1表达水平,并作HE染色观察。结果与正常对照组比较模型组空腹血糖、肾脏肥大指数和肾小球内TGF-β1表达显著升高。 与模型对照组比较,玉米须水提物组可显著降低糖尿病大鼠空腹血糖、肾脏肥大指数、明显使肾小球内TGF-β1表达减少（P＜0.05或P＜0.01）,并对肾脏病理改变有所改善。结论玉米须水提物对糖尿病肾病具有一定肾保护作用及抗肾小球纤维化的作用,其作用机制可能是通过使TGF-β1表达下调而实现的。     

寒凝血瘀证动物模型制备方法的评价与选择

目的：探讨中医寒凝血瘀证动物模型的制备方法。方法：对近年来制备寒凝血瘀证动物模型的方法进行比较、分析及综合评价。结论：制备符合中医辩证施治理论特点的寒凝血瘀证动物模型的方法繁多,综合相关文献报道,认为制备寒凝血瘀证动物模型的关键因素是温度,尚需进一步的摸索。     

寒凝血瘀证大鼠模型的优化筛选研究

目的 探讨不同冷冻时间对寒凝血瘀证动物模型建立的影响,从而为中医学寒凝血瘀证的研究提供实验模型.方法 将大鼠随机分5组,即空白组、5d组、10d组、15d组、20 d组.除空白组外,其余大鼠置于0℃冰水中15 min,每日1次,各组分别冷冻相应天数,造成寒凝血瘀模型.观察血常规、卵巢和子宫指数和血液流变指标.结果 与空白组比较,造模5d和10d组大鼠红细胞可见显著降低和APTT的显著延长(P＜0.01);另外造模5天还可见血浆黏度、低转速全血黏度和红细胞聚集指数的显著降低,红细胞变形能力的显著增加,血红蛋白显著降低,子宫指数可见显著减少(P＜0.05～0.01).造模10d组还可见中性粒细胞百分比的显著增加,TT的显著缩短(P＜0.05～0.01).造模l0d和15d虽然均可见红细胞压积的显著减少,但是造模10 d组却可见红细胞变形指数的降低,而造模15d却见其变形指数的显著增加(与空白组比较,P＜0.01),TT的显著缩短(P＜0.05),血浆黏度的显著增加(P＜0.01),另外APTT也有缩短的趋势.而当造模时间延长到20d,反而可见PT和APTT的显著延长(P＜0.01).但是各组大鼠肛温在整个造模过程中未见显著改变(与空白组比较,P＞0.05).结论 造模10 d和15d可见大鼠出现凝血功能增强,并且15d组血液流变学异常最明显.该造模方法为中医寒凝血瘀证的研究提供新的思路.     

寒凝血瘀证实验及临床研究近况

血瘀证是指血液循行迟缓,或流行不畅,甚则血液瘀结停滞成积的病理状态.寒凝血瘀证则是由寒邪入于血分而致,多系素体肾阳不足,寒邪内生,或因常处于寒湿环境损伤阳气,而致体内阳气不足,失其温煦、推动的作用而致瘀.     

寒凝证动物模型的建立

目的:探讨建立寒凝证动物模型的最佳温度条件。方法:将50只雌性SD大鼠随机分为A、B、C、D、E 5组,每组10只,A组为对照组,B、C组为-15℃冷冻组,D、E组为-25℃冷冻组,各组均冷冻5 d,每天冷冻4 h。C、E组同样冷冻后,正常喂养5 d。观察大鼠体征和体重,在冷冻结束后第1天和第5天取血检测血液流变学指标。结果:与A组比较,B、C、D、E组大鼠体征变化评分均明显升高,P<0.05;与A组比较,B组和D组冷冻期内大鼠体重下降,P<0.05,E组冷冻结束后体重增加较少,P<0.05;与A组比较,B组与D组全血还原黏度高切明显升高,P<0.05,红细胞刚性指数有升高趋势,但未见统计学差异。结论:每天-25℃、4 h,连续冷冻5 d,可建立寒凝证模型,结合整体体征评分及血液流变学指标评价,符合中医寒凝证候特点。     

寒凝血瘀证痛经中医药研究进展

痛经患病率逐年上升,令现代女性苦不堪言。历代医家对痛经证型总体上分为寒凝血瘀证、气滞血瘀证、湿热蕴结证、气血虚弱证、肝肾亏损证,而寒凝血瘀证痛经居多。查阅近年的相关文献,中医药治疗寒凝血瘀证痛经日趋完善,尤其对病因病机和临床治疗等方面研究深入,以探索更有效的治疗方法。故该文总结近年来寒凝血瘀证痛经的中医药研究进展,为临床治疗和循证医学提供依据。     

玉米须水提物对2型糖尿病肾病大鼠转化生长因子-β1和纤维连接蛋白表达的影响

目的 研究玉米须水提物对2型糖尿病肾病大鼠肾组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)表达的影响,探讨其可能的作用机制.方法 采用高糖高脂饲养加小剂量链脲佐菌素(STZ)诱导2型糖尿病肾病大鼠模型,将实验动物分为正常对照组、模型对照组和玉米须水提物低、中和高剂量组,共5组.给药8周后,测定各组大鼠空腹血糖、体重、肾重、血清尿素氮、血肌酐和24 h尿蛋白;免疫组化法分析TGF-β1表达水平;实时定量RT-PCR定量检测肾组织TGF-β1和FN的表达水平.结果 与模型对照组比较,中和高剂量组的玉米须水提物可显著降低糖尿病肾病大鼠血糖、肾指数、血清尿素氮、血肌酐和24 h尿蛋白(P ＜0.05或P＜0.01),明显降低肾组织中TGF-β1和FN mRNA的表达量(P＜0.05或P＜0.01).结论 玉米须水提物能够降低糖尿病大鼠血糖、肾指数、血清尿素氮、血肌酐和24 h尿蛋白的水平,下调肾病大鼠肾组织中TGF-β1和FN的表达,调节细胞外基质的生成和降解,从而减轻糖尿病肾病大鼠肾脏的病理损害,发挥其肾脏保护作用.     

寒凝血瘀证模型大鼠中医表征指标量化研究

目的研究开发出中医实验动物证候表征采集分析系统,使某些中医病证模型动物表征指标的采集与分析数字化、自动化,从而达到客观、科学的要求。方法利用本系统对寒凝血瘀证模型大鼠的毛色、眼睛颜色、耳廓颜色、舌色与足爪等多项中医证候表征指标采集分析,并与检测的大鼠血液流变学指标与微循环指标进行对比分析。结果模型组大鼠与正常组大鼠在眼睛颜色、耳廓颜色、舌色与足爪颜色的三原色分量值（RGB值：R表示红色值、G表示绿色值、B表示蓝色值）比较（多数指标RGB百分比值比较）,差异有统计学意义（P〈0.05）,且与肉眼观察到的症状及其他病理指标反应的病证情况相一致。结论本系统初步实现了中医实验动物证候表征某些望诊指标采集的数字化,分析自动化,达到了客观、科学的要求,且实用性好。     

中医寒凝血瘀证模型大鼠血清游离钙和细胞流变学变化*

[目的]研究具有中医寒凝血瘀证证候表现特点的大鼠模型细胞流变学变化以及血清游离钙的改变,通过客观化指标来深入阐释寒凝血瘀证的生物学基础。[方法]制作急性寒凝血瘀证大鼠模型,腹主动脉取血检测游离钙、血沉、红细胞聚集指数、红细胞变形指数、红细胞刚性指数及红细胞压积。[结果]与正常对照组比较:模型组血清游离钙、血沉、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数及红细胞压积明显升高,红细胞变形指数下降,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。[结论]大鼠采用皮下注射盐酸肾上腺素结合冰水浸入法可以获得中医寒凝血瘀证的证候表现特征,其细胞流变学指标的相应改变准确反映出"寒凝血瘀证"的现代生物学基础。     

寒凝血瘀证动物模型的研制

本实验采用对家兔后肢低温冷冻,局部冻伤,引起紫绀、水肿等中医证候以及对全身的影响,造成寒凝血瘀证动物模型。方法简单,符合临床病症。材料和方法一、动物与分组:选用健康青紫蓝家兔40只,雌雄不拘,体重2.5kg左右。分为四组,即冻后1天、3天、5天和正常对照组,每组10只。二、造模方法:剪净两侧后腿足的毛,用70％酒精消毒,上、下、左、右围置冰袋(3份冰+1份结晶氯化钙,粉碎混合,温度降至零下20～25℃),冷冻1.5小时,在45℃温水中复温5分钟(室温12℃)。三、观察指标:分别测肛门体温,趾间皮温,足背周径,肢体血流量。观察眼球结膜微循环。心脏抽血。     

寒凝血虚血瘀证贵州小型猪模型的建立

目的:以中医基本理论为指导,建立贵州小型猪“血虚寒凝血瘀证”模型,探讨当归四逆汤的治疗作用及“血虚寒凝血瘀证”的发病机制.方法:将贵州小型猪21头随机分成三组,即空白对照组、血瘀模型组、当归四逆汤治疗组,每组7头.小型猪前腔静脉第一次采血,采血量为总血量的2.5％(占体重的0.15％),次日将小型猪放入0～1℃的冰水中...     

加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响

目的观察加减温经汤对寒凝血瘀模型大鼠卵巢功能的影响,探讨加减温经汤治疗寒凝血瘀型妇科疾病的作用机制。方法将大鼠置于0~1℃冰水中造成寒凝血瘀大鼠模型,采用阴道涂片检测大鼠动情周期;剖取子宫、卵巢,称重,计算子宫指数、卵巢指数;HE染色,光镜下观察子宫、卵巢组织形态学改变;采用放射免疫法测定血清生殖激素水平。结果各组大鼠子宫指数、卵巢指数之间差异无统计学意义;与正常组比较,模型组大鼠组织形态学异常,动情周期延长,血清生殖激素水平明显下降;与模型组比较,治疗组动情周期缩短,血清生殖激素水平明显升高;桃红组血清E2、P、LH、FSH明显升高;治疗组与桃红组比较动情周期缩短,血清E2、P明显升高。结论寒凝血瘀时内分泌紊乱,卵巢功能异常,加减温经汤可通过调节内分泌,改善卵巢功能而治疗寒凝血瘀型妇科疾病。     

血虚寒凝血瘀证大鼠模型的研制

目的:探索血虚寒凝血瘀证Wistar大鼠模型的制作方法.方法:大鼠尾部放血0.5～1ml/只,隔日一次,连续7次;放血次日将大鼠浸入0～1℃的冰水中20min,连续7次,共14天,造成血虚寒凝血瘀证模型.结果:模型组大鼠出现蜷缩少动,爪尾部紫暗等症状,血液流变学,血常规,凝血像,SOD、TXB2、6-酮-PGF1α与正...     

不同施灸方向对寒凝血瘀证大鼠血浆内皮素-1及前列环素的影响

目的：观察不同施灸方向对寒凝血瘀证模型大鼠血浆内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）及前列环素（Prostacyc-lin,PG12）的影响,探索艾灸获效的影响因素,完善艾灸的标准化治疗方案。方法：将Wistar大鼠随机分为四组：正常组、模型组、顺灸组和逆灸组,每组8只,制作寒凝血瘀证大鼠模型,并对顺灸组和逆灸组大鼠足太阳膀胱经分别行“自上至下”及“自下至上”单向艾灸治疗,股动脉取血采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血浆ET-1、PG12的浓度。结果：与正常组比较,模型组大鼠血浆ET-1浓度明显升高（P〈0．05）,PG12浓度明显下降（P〈0．05）;而与模型组比较,顺灸组大鼠血浆ET-1浓度明显下降（P〈0．05）,PG12浓度明显升高（P〈0．05）,逆灸组大鼠血浆ET-1浓度下降（P〉0．05）。PG12浓度升高（P〈0．05）。结论：顺灸与逆灸足太阳膀胱经均能明显促进寒凝血瘀证大鼠血浆PG12的释放。且顺灸组优于逆灸组,顺灸能明显抑制寒凝血瘀证大鼠血浆ET-1的释放。     

以药测证法对大鼠寒凝血瘀证关键证素的研究

目的以《中华医典》治疗寒凝血瘀证(实寒致瘀)的高频药物当归、香附、附子为切入点,探讨活血、行气、温阳单法及联合疗法对寒凝血瘀大鼠表征的影响,从而确定寒凝血瘀证的关键证素,以明确最佳治疗原则。方法采用全身冷冻法造模,将造模成功的大鼠,分别用附子、香附、当归单味药及联合组药物灌胃15 d,观察不同给药组大鼠表征及相应指标的变化。结果附子组对改善寒凝血瘀大鼠表征和TNF-α、IL-1β作用明显。结论治疗寒凝血瘀证以阳虚为主,应重用温阳,而活血、行气可少用。     

寒凝血瘀模型大鼠下丘脑神经递质的变化及其对生殖内分泌的影响

目的 观察寒凝血瘀模型大鼠下丘脑神经递质的变化及其对生殖内分泌的调节和影响.方法 将大鼠置于0～1℃冰水中造成妇科寒凝血瘀证大鼠模型,采用放射免疫分析方法测定血清孕酮(P)、雌二醇(E2)、睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的含量及下丘脑β-内啡肽(β-EP)含量,采用荧光分光光度法测定下丘脑5-羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NA)、多巴胺(DA)含量.结果 模型组大鼠的血清E2、P、T、LH、FSH明显降低,下丘脑β-EP、5-HT、NA、DA的含量明显升高,与正常组比较有显著性差异(P＜0.01或P＜0.05).结论 下丘脑分泌的神经介质β-EP、NA、DA、5-HT参与了生殖内分泌的调节和寒凝血瘀证的形成.