大鼠肾脏异丙酚代谢相关ugt1α6基因在无肝期表达变化的研究

目的研究无肝期前后与异丙酚代谢相关的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶ugt1α6在大鼠肾脏中的基因表达变化,初步阐释异丙酚无肝期肝外代谢特点形成的原因.方法15只雄性大鼠随机分为3组(5只/组),A组为对照组,B组阻断肝门30 min,C组阻断肝门60 min,截取各组大鼠肾脏组织,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测各组ugt1α6 mRNA的表达.结果大鼠肾脏组织ugt1α6的基因表达水平B、C组明显高于A组(P＜0.05);B组与C组相比,无显著差异(P＞0.05).结论大鼠肾脏组织ugt1α6基因表达在无肝期比无肝期前增多,这可能是异丙酚无肝期肝外代谢增强的机制之一.     

无肝期大鼠小肠异丙酚代谢相关UGT1A6的基因表达变化

目的研究无肝期前后与异丙酚代谢相关的UGT1A6在大鼠小肠基因表达的变化,以期初步阐释异丙酚无肝期肝外代谢特点形成的原因.方法 15只大鼠随机分为3组(5只/组),A组为对照组,B组阻断肝门30min,C组阻断肝门60min,截取各组大鼠小肠组织,采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,检测各组UGT1A6mRNA的表达.结果大鼠小肠组织UGT1A6的基因表达水平B、C组明显高于A组(P<0.01);B组与C组相比,没有显著差异(P>0.05).结论大鼠小肠组织UGT1A6基因表达在无肝期比无肝期前增多,这可能是异丙酚无肝期肝外代谢增强的机制.     

大鼠无肝状态肾脏罗库溴铵相关转运蛋白OATP-3及其基因的表达变化的研究

目的研究无肝状态前后大鼠肾脏罗库溴铵相关转运蛋白阴离子转运多肽-3(organ anion-transporting polypeptides 3,oatp-3)及其基因表达的变化,以期初步阐释罗库溴铵无肝期肝外代谢特点形成的原因.方法 12只大鼠随机分为2组(6只/组),对照组与阻断肝门60 min组,取各组大鼠肾脏组织,采用Western blot检测各组OATP-3蛋白的表达.采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组oatp-3 mRNA的表达.结果大鼠肾脏组织OATP-3蛋白表达水平阻断肝门60min组表达水平高于对照组(P<.01);大鼠肾脏组织oatp-3 mRNA表达水平阻断肝门60min组明显高于对照组(P<0.05).结论大鼠肾脏组织oatp-3在无肝期比无肝期前增多,oatp-3基因表达在无肝期比无肝期前增多,这可能是罗库溴铵无肝期肝外代谢增强的机制.     

大鼠无肝状态小肠CYP3A1酶活性增强和mRNA表达增高及芬太尼肝外代谢

目的 研究无肝期前后芬太尼血药浓度变化及其代谢酶CYP3A1在大鼠小肠活性的改变和基因表达的变化,探讨无肝期芬太尼的代谢及其形成原因.方法 分两部分实验:实验一,20只大鼠随机分成对照组和阻断肝门组(n=10),LC/MS/MS法测芬太尼血药浓度,观察无肝期前后芬太尼的代谢;实验二,30只大鼠随机分为3组(n=10):①为对照组(BI组);②阻断肝门30 min组(B2组);③阻断肝门60 min组(B3组).采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组CYP3A1 mRNA的表达,荧光比色法检测CYP3A1酶的活性.结果 无肝期组芬太尼浓度下降比对照组明显减慢(P＜0.05),但仍有下降趋势.小肠组织CYP3A1酶的活性和mRNA表达水平B2、B3组均明显高于B1组.B2组与B3组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 芬太尼主要在肝脏代谢,无肝期小肠CYP3A1mRNA表达上调,酶活性增加, 可能为无肝期芬太尼肝外代谢的机制之一.     

持续恒速输注异丙酚在大鼠无肝期前后血药浓度变化的研究靠

目的探讨异丙酚持续恒速输注在大鼠无肝期前后血药浓度变化规律、肝外代谢、肺脏对异丙酚肝外代谢的作用。方法通过大鼠左颈深静脉持续恒速输注异丙酚,于分离肝门时、肝门阻断即刻、肝门阻断15、30、60 m in等时间点,同时从右侧颈深动、静脉分别采血(100μl),采用高效液相色谱荧光法(HPLC)检测异丙酚血药浓度。结果颈深静脉或颈深动脉异丙酚血药浓度各时相点间比较,肝门阻断15、30、60 m in时的血药浓度比阻断前和阻断即刻明显升高(P<0.01),但3组间没有显著性差异(P>0.05);颈深静脉与颈深动脉异丙酚血药浓度比较,任何时刻均无显著性差异(P>0.05)。结论肝脏是异丙酚主要代谢器官,异丙酚存在肝外代谢,肺脏不是异丙酚肝外代谢的主要器官。     

持续恒速输注异丙酚在大鼠无肝期前后血药浓度变化的研究靠

目的探讨异丙酚持续恒速输注在大鼠无肝期前后血药浓度变化规律、肝外代谢、肺脏对异丙酚肝外代谢的作用.方法通过大鼠左颈深静脉持续恒速输注异丙酚,于分离肝门时、肝门阻断即刻、肝门阻断15、30、60 min等时间点,同时从右侧颈深动、静脉分别采血(100μl),采用高效液相色谱荧光法(HPLC)检测异丙酚血药浓度.结果颈深静脉或颈深动脉异丙酚血药浓度各时相点间比较,肝门阻断15、30、60min时的血药浓度比阻断前和阻断即刻明显升高(P＜0.01),但3组间没有显著性差异(P＞0.05);颈深静脉与颈深动脉异丙酚血药浓度比较,任何时刻均无显著性差异(P＞0.05).结论肝脏是异丙酚主要代谢器官,异丙酚存在肝外代谢,肺脏不是异丙酚肝外代谢的主要器官.     

大剂量地塞米松对大鼠无肝期芬太尼血药浓度的影响

目的揭示大剂量地塞米松处理后大鼠无肝期血药浓度变化规律,探讨芬太尼的肝外代谢及地塞米松对其肝外代谢的影响.方法将大鼠30只随机分为对照组(A组)、无肝期组(B组)、地塞米松处理无肝期组(C组),每组10只,其中,B组直接分离并夹闭大鼠肝门,C组于夹闭肝门前1 h,注入地塞米松20 mg/kg.单次20μg/kg芬太尼静脉注射后,采取血样,用高效液相色谱紫外法检测芬太尼血药浓度.结果无肝期组芬太尼浓度下降比对照组明显减慢(P<0.01),地塞米松处理组较对照组无明显差异(P＞0.05).结论肝脏是芬太尼代谢的主要器官,芬太尼存在肝外代谢,地塞米松可以增强芬太尼的肝外代谢.     

肝缺血再灌注损伤后电解质变化对心肌细胞超微结构的影响

目的 观察大鼠肝门阻断后缺血再灌注(IR)损伤对心肌细胞超微结构的影响.方法 大鼠气管切开机械通气,监测肺动脉压(PAP).72只大鼠随机分为对照组(A组)、肝血流阻断组(B组)及门静脉转流下肝血流阻断组(C组).于IR前和IR后1,6h取左心室前壁心肌组织数块.血气分析肝门阻断期间门脉血pH和电解质;光、电镜下观察心肌细胞形态学改变.结果 与A组比较,B,C组IR后PAP显著升高(P＜0.05),但C组较B组更快恢复至阻断前水平.肝门阻断期间,B组pH降低显著(P＜0.05,);K 较IR前升幅超过1倍(P＜0.01),IR后下降,但6h时仍处于较高水平(P＜0.05);Ca2 呈进行性下降.C组变化与A组比较差别无统计意义(P＞0.05).电镜观察,A组心肌细胞超微结构正常;B组心肌细胞6h可见线粒体水肿,心肌肌丝断裂,细胞间隙增大,部分心肌细胞可见坏死区域,结构崩解;C组IR后部分心肌肌丝模糊,线粒体肿胀,心肌细胞局灶性坏死.结论 肝门阻断后门脉内酸性物质和高钾血症直接抑制心肌收缩力,减少心排,肠道IR损伤是引起心肌细胞超微结构损害的主要因素.     

丹参对大鼠肝组织Bcl-2表达的影响及意义

目的 探讨丹参对大鼠肝组织Bcl-2基因表达的影响和对肝纤维化的作用及其机制.方法 利用CCl4诱导形成大鼠肝纤维化模型.将30只SD大鼠按随机数字表法分成纤维化模型组(A组,n=15)和丹参干预组(B组,n=15).用RT-PCR法检测各组大鼠肝脏Bcl-2的表达,常规HE和网状纤维染色检测肝组织标本.结果 大鼠肝纤维化模型成功建立.丹参干预组纤维化程度、肝细胞脂肪变性及肝组织炎症较纤维化模型组显著减轻.丹参干预组和纤维化模型组Bcl-2基因表达量分别为(0.84±0.02)%、(1.03±0.03)%.丹参干预组Bcl-2 基因的表达显著低于纤维化模型组(P＜0.01).结论 丹参能够阻断CCl4诱导的肝纤维化和减少肝脂肪变性.其机制不仅直接通过抗炎作用,也可能通过调节Bcl-2基因表达从而阻断肝纤维化.     

异丙酚对大鼠血流动力学和血浆及心肌内皮素、降钙素基因相关肽的影响

目的　探讨异丙酚对大鼠血流动力学和血浆及心肌内皮素 (ET)、降钙素基因相关肽 (CGRP)的影响。　方法　 12～ 14周 Wistar大鼠 2 4只 ,随机分为 3组 ,每组 8只 :A组 (对照组 ,注射 0 .9%生理盐水 ) ,B组 (低剂量异丙酚 )和 C组 (高剂量异丙酚 )静注异丙酚 5 m g/kg诱导麻醉后分别静脉持续 30 min注入异丙酚 30、6 0 m g·kg- 1 · h- 1 。总容量均相同 ,记录未注药时、注药后 2 ,10 ,2 0 ,30 m in的收缩压 (SBP)、平均动脉压 (MAP)、舒张压(DBP)、心率 (HR)及呼吸 ,测定血浆及心肌 ET、CGRP的含量。　结果　组内比较 :B组各时点血压、心率无差异(P<0 .0 5 ) ;C组随时间的延长 ,2 0 ,30 min的 SBP、MAP、DBP、HR均下降 (P<0 .0 5或 0 .0 1)。组间与 A组比较 :各组基础值无差异 ;B组仅在 2 ,10 m in时 HR下降 (P<0 .0 5 ) ;而 C组 SBP、MAP、DBP、HR均下降 (P<0 .0 5或0 .0 1) ,且 HR随时间的延长与 A组的差异明显增加 ,30 m in时 P<0 .0 0 1;B组和 C组血浆中 CGRP增高、ET下降 ,C组改变显著 ,心肌中 CGRP、ET无变化。　结论　异丙酚促进 CGRP释放 ,抑制 ET的释放 ,通过改变 CGRP/ET的平衡呈时间剂量依赖性降血压 ,减慢心率     

一氧化氮促释放剂在保护大鼠减体积肝移植后缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨一氧化氮促释放剂(FK409)在保护减体积肝移植大鼠移植肝脏缺血再灌注损伤中的作用。方法:将56对(112只)SD大鼠分为两组,分别为FK409处理组和对照组。其中各组的8对大鼠用于观察存活率,20对用于观察移植后血中肝脏天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素、NO水平及移植物内早期生长反应因子-1(EGR-1)蛋白水平的变化。结果:FK409处理组的1周存活率、血清NO水平均高于对照组(P<0.05),ALT、AST及肝组织中的EGR-1蛋白含量则低于对照组(P<0.05)。结论:一氧化氮促释放剂(FK409)能够通过增加NO的合成,来减轻原位减体积肝移植大鼠的再灌注损伤,改善微循环,提高移植肝脏的功能。     

一氧化氮在全肝缺血再灌注大鼠肺损伤中的作用

目的 观察全肝缺血再灌注大鼠血浆和肺组织一氧化氮（nitricoxide，NO）变化及作用。方法 阻断肝门及肝上、肝下下腔静脉20min建立大鼠全肝缺血再灌注模型，60只大鼠随机分成假手术组（A组）、全肝缺血再灌注组（B组）和全肝缺血再灌注加氨基胍治疗组（C组），每组20只，每组再根据观察时间段不同随机分成2个亚组，每亚组10只，A、B两组按1mL／kg从股静脉注射生理盐水，C组按1mL／kg注射氨基胍（AG）20mg／kg（溶于1mL／kg生理盐水中）。观察3组全肝缺血20min（T0）、再灌注4h（T1）门静脉血、肺组织NO浓度、肺湿干重比及电镜下肺组织结构变化。结果 与A组比较，B、C两组T1门静脉血、肺组织NO浓度明显升高，C组T1门静脉血、肺组织NO浓度与B组比较有明显降低；B、C两组肺组织均存在病理改变，但C组明显轻于B组。结论 NO可能在全肝缺血再灌注肺损伤过程起重要作用。     

丙泊酚、咪唑安定对心肌缺血再灌注损伤Fos蛋白表达的影响

目的：观察丙泊酚、咪唑安定在心肌缺血再灌注损伤（IR）时Fos蛋白表达的影响，从蛋白表达水平探讨其对心肌保护作用的机制。方法：健康SD大鼠36只，每组12只。分别给生理盐水（A组）、丙泊酚（B组）、咪唑安定（C组）静脉输注，在心肌缺血15min后，恢复心肌血液灌注，分再灌注0、15、30、60、120、240min 6个时相．各时相取2只大鼠，多聚甲醛灌注固定后取缺血心肌标本作石腊切片．免疫组化方法检测Fos蛋白表达．显微镜下观察阳性产物。拍片。结果：各组组内再灌注30、60、120min阳性表达灰度值较冉灌注0、240min Fos蛋白表达明显增强（P〈0．05）：A组再灌注30、60、120min Fos蛋白表达均比B、C组增强（P〈0．05）．统计学有显著性意义，结论：丙泊酚、咪唑安定对心肌缺血再灌注损伤有一定的保护作用，能降低缺血再灌注心肌Fos蛋白表达．为心肌缺血再灌注损伤时安全可用的麻醉药．其作用与缺血再灌注时间有关．即在30～120min内对缺血再灌注心肌有明显保护作用．这对临床选择合理时间窗用药有一定的指导意义。     

依达拉奉对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨依达拉奉在肝脏缺血再管注后损伤后对肝脏的保护作用。方法将54只健康SD大鼠随机分为3组：假手术组（A组）、缺血再灌注对照组（B组）、依达拉奉干预组（c组）,每组18只。大鼠肝脏缺血再灌注模型为阻断肝门30min,分别测定再灌注后2h、4h、6h肝丙氨酸转氨酶（ALT）,天冬氨酸转氨酶（AST）,黄嘌呤氧化酶（XOD）,超氧化物歧化酶（SOD）。结果与A组比较,C组各时间点均可见ALT、AST、XOD明显增高,SOD降低（P〈005）,而与B组比较,在C组再灌注后2、4、6h,ALT、AST、XOD值明显降低,SOD升高（P〈0．05）。结论依达拉奉能够减弱大鼠肝脏缺血再灌注损伤。     

异丙酚麻醉对大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白表达的影响

目的观察不同浓度异丙酚静脉全身麻醉对大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白表达的影响。方法 40只Wistar大鼠随机分成4组:空白对照组(A组)、小剂量异丙酚组(50 mg/kg,B组)、中等剂量异丙酚组(100 mg/kg,C组)和大剂量异丙酚组(150 mg/kg,D组)。采用反转录-聚合酶联反应和蛋白印迹方法检测大鼠海马各区c-fos、c-jun基因及蛋白的表达水平。结果 A组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.32±0.06,0.27±0.05;0.37±0.07,0.28±0.07),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(0.47±0.12,0.41±0.10;0.51±0.14,0.44±0.09);B组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.54±0.11,0.41±0.10;0.61±0.12,0.44±0.12),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(0.75±0.24,0.72±0.21;0.82±0.27,0.68±0.17);C组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(0.87±0.23,0.75±0.18;0.92±0.27,0.72±0.21),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(1.07±0.37,1.01±0.32;1.12±0.38,0.97±0.25);D组大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因表达水平为(1.22±0.30,0.96±0.24;1.31±0.34,0.95±0.28),c-fos、c-jun蛋白表达水平为(1.43±0.41,1.38±0.39;1.46±0.41,1.31±0.33)。大鼠海马CA1区和DG区c-fos、c-jun基因和蛋白的表达水平随着异丙酚麻醉药物作用浓度的增加显著性升高(P<0.05);海马CA3区未发现异丙酚对c-fos、c-jun基因和蛋白表达水平的影响。结论异丙酚可能通过影响c-fos、c-jun基因及蛋白的表达,从而发挥抑制中枢神经系统的作用,且此作用部位存在明显的差异性。     

异丙酚对兔实验性肝缺血损伤的影响

目的研究异丙酚对肝脏缺血损伤的影响。方法 45只家兔随机分3组,每组15只,A组生理盐水2ml/kg·h;B组依托咪酯0.1mg/kg·h;C组异丙酚20mg/kg·h。肝脏缺血前后测AST、ALT及SOD,测肝组织MDA。结果缺血后三组的ALT、AST、MDA均升高,C组最轻,与A组比较差异非常显著(P<0.01),与B组比较亦有显著性差异(P<0.05)。缺血后三组的SOD均下降,C组最轻,与A组比较有非常显著性差异(P<0.01),与B组比较亦有显著性差异(P<0.05)。结论异丙酚对肝脏缺血损伤有保护作用。     

腹腔注入乳酸钠林格液对大鼠肝肾血流动力学的影响

目的:探讨腹腔介质增强超声显像技术安全性,为其临床应用提供一定的实验性依据。方法:健康SD大鼠50只,雌雄各半,随机分为5组,A组:正常对照组;B、C、D、E组分别为腹腔注入乳酸钠林格液后10 min组、1 h组、24 h组及7 d组。对5组大鼠分别进行超声检测:测量肝脏门静脉(PV)的内径,监测肝门静脉最高流速(Vmax)、肝固有动脉(HA)的收缩期血流峰值速度(Vmax)、舒张末期血流速度(Vmin)、阻力指数(RI);肾主、肾段动脉的收缩期峰值血流速度(Vmax)、舒张末期血流速度(Vmin)、阻力指数(RI)等。结果:各实验组与正常对照组比较:超声监测大鼠肝脏PV内径及各项血流动力学指标差异无显著性意义(P>0.05);各实验组与正常对照组比较:肾脏血流动力学各项指标差异亦无显著性意义(P>0.05)。结论:腹腔注水成像技术是一种较为安全的超声增强显像技术。