移植重编程星形胶质细胞对大鼠损伤脊髓恢复的影响

目的探讨移植经直接重编程后的星形胶质细胞对大鼠脊髓损伤功能恢复的影响。方法建立SD大鼠脊髓损伤模型48只,随机均分为四组,分别为移植转染了含有神经原素2(Ngn2)的星形胶质细胞组(A组)、移植转染了绿色荧光蛋白基因的星形胶质细胞组(B组)、移植星形胶质细胞组(C组)和移植PBS组(D组)。移植后4周,免疫荧光染色观察脊髓组织的神经元特异性核蛋白(NeuN)和微管相关蛋白2(MAP2)的表达;利用Basso Beattie and Bresnahan(BBB)评分系统对移植后的大鼠进行连续8周的BBB评分,观察其运动功能的恢复情况。结果连续观察8周后,A组的BBB评分高于其他三组(P<0.05)。A组的NeuN和MAP2表达均高于B组(P<0.05)。结论在大鼠脊髓损伤模型中,移植经直接重编程处理过的星形胶质细胞能提高受损脊髓组织的神经元数量,有助于损伤脊髓的运动功能恢复。     

白藜芦醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤后星形胶质细胞活化的影响

目的研究白藜芦醇对大鼠脑缺血/再灌注损伤后星形胶质细胞活化的影响。方法 45只SD♂大鼠随机分成假手术组(Sham)、对照组(Con)和白藜芦醇组(30 mg·kg-1,Res),每组15只。于缺血/再灌注后3 h使用白藜芦醇或溶剂治疗,连用7 d。脑缺血24 h时,TTC法检测脑梗死体积,HE染色检测病理变化,Longa评分行神经功能评分,免疫组织化学检测缺血半暗带皮质半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达。脑缺血14 d时,免疫组织化学及免疫荧光法检测胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和神经元NeuN蛋白表达。结果白藜芦醇治疗较对照组能明显改善神经功能、减小梗死体积、减少神经元脱失及凋亡,抑制星形胶质细胞的活化与增殖(P<0.01)。结论白藜芦醇治疗可抑制星形胶质细胞的异常活化,保护缺血半暗带神经元,改善神经功能。     

铅对星形胶质细胞活力影响的检测评价

近 2 0年来 ,人们对脑组织中星形胶质细胞的结构和功能有了更深入的了解。它在神经系统的正常生理活动、脑的发育和神经病理过程中都具有重要作用[1,2 ] 。对星形胶质细胞的体外研究表明 ,星形胶质细胞可合成铅特异结合蛋白 ,对铅有主动摄取和储存作用 ,被称为铅在脑组织中的储藏池[3 ] 。同时 ,研究也表明它对铅毒性作用远较内皮细胞敏感[4] 。所以 ,探索低水平铅暴露对星形胶质细胞的影响及防护方法是十分必要的。到目前为止 ,有关铅毒性的判定 ,基本上采用细胞形态观察 ,该方法不仅烦琐 ,而且主观。更主要的是 ,它不能反映铅对细胞活力的…     

EGB对大鼠神经干细胞分化为星形胶质样细胞的影响

目的：观察银杏叶提取物（EGB）对大鼠海马神经干细胞（NSCs）增殖及分化为星形胶质样细胞的影响。方法：取新生24h内的Wistar大鼠海马组织的细胞进行体外培养，1周后将其接种在培养板中．观察不同浓度的EGB对细胞的生长作用．并检测胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。结果：各实验组NSCs的生长明显好于对照组．免疫细胞化学显示：同一时间内，诱导NSCs分化为星形胶质样细胞的百分率增高；同一浓度的EGB，诱导神经干细胞分化为星形胶质样细胞的百分率随着时间的延长呈上升的趋势。结论：EGB能促进神经干细胞的存活、增殖及向星型胶质样细胞的方向分化。     

急性脑缺血/再灌注后细胞病理改变及星形胶质细胞活化规律

目的 观察脑缺血/再灌注后不同时间点细胞病理改变及星形胶质细胞活化的规律。方法 本实验共采用85只SD雄性SPF级大鼠,将其随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞90 min再灌注不同时间点组,后者分为再灌注3、6、12、24、48 h组。HE染色观察细胞病理改变,采用透射电镜观察脑缺血/再灌注后星形胶质细胞的亚显微结构,免疫印迹联免疫荧光法检测脑缺血/再灌注损伤后的GFAP表达。结果 脑缺血/再灌注后不同时间点可导致神经细胞发生不同程度的缺血/再灌注损伤,再灌注后24 h细胞损伤最为严重。透射电镜结果提示星形胶质细胞亚显微结构发生改变,细胞出现不同程度肿胀,线粒体嵴断裂等。脑缺血/再灌注后在缺血区GFAP表达呈时间依赖性逐渐升高,再灌注48 h后表达最高,而在梗死区表达逐渐减少。结论 脑缺血/再灌注后24 h神经细胞损伤最重,缺血半暗带区的星形胶质细胞形态发生变化,星形胶质细胞激活,伴随再灌注的推移,梗死区、缺血区边界逐渐清晰,可能出现胶质瘢痕。     

星形胶质细胞对神经干细胞分化的影响实验研究

目的研究星形胶质细胞对神经干细胞分化的影响。方法随机在我院动物实验中心选取3只大鼠为研究对象,将本次实验均分为普通星形胶质细胞的培养的对照组以及星形胶质细胞与神经干细胞互不接触状态下共同培养的实验组。对比两组星形胶质细胞对神经干细胞分化的影响效果。结果实验组的纯化星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白抗体标记为阳性,其细胞纯度高到96%,且在神经元特异性烯醇化酶阳性细胞与酪氨酸羟化酶阳性细胞均比对照组多。结论星形胶质细胞不仅可以加快神经干细胞向神经元细胞的分化以及向多巴胺神经元细胞的分化,而且可以延长神经元存活时间,降低神经元凋亡率。     

IL-36Ra抑制炎性痛小鼠脊髓A1型星形胶质细胞极化

目的评价不同剂量IL-36Ra对炎性痛小鼠痛行为以及脊髓A1型星形胶质细胞极化的影响。方法雄性C57BL/6小鼠32只,采用足底注射完全弗氏佐剂(CFA)建立炎性痛模型。随机将小鼠分为CFA+生理盐水组、CFA+IL-36Ra 50 ng组、CFA+IL-36Ra 100 ng组以及CFA+IL-36Ra 200 ng组,每组8只。各组小鼠在造模后d 1~d 7,每日1次鞘内给药。同时,分别在造模前以及造模后d 1、3、5、7检测4组小鼠机械刺激缩足阈值(mechanical withdraw threshold, MWT)和辐射热刺激缩爪潜伏期(PWL)的变化。以逆转录聚合酶链反应检测IL-36Ra对CFA小鼠脊髓A1、A2型星形胶质细胞标志物表达水平的影响。以免疫组化法检测各组小鼠脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3与GFAP共表达水平的变化。结果炎性痛小鼠造模后患侧MWT、PWL均明显下降,IL-36Ra(100、200 ng)可显著改善小鼠的机械性痛觉超敏与热痛觉过敏;且在治疗7 d后,IL-36Ra可降低CFA小鼠脊髓星形胶质细胞激活标志物GFAP、Lcn2的表达水平,抑制星形胶质细胞激活;同时,IL-36Ra(100、200 ng)可下调CFA小鼠脊髓A1型星形胶质细胞标志物Serping1、 H2-T23的mRNA水平,但IL-36Ra各个剂量对A2型星形胶质细胞标志物表达没有明显作用;此外,IL-36Ra还可抑制脊髓背角A1型星形胶质细胞标志物C3表达。结论 IL-36Ra可能通过抑制CFA小鼠脊髓A1型星形胶质细胞极化,进而改善小鼠炎性痛痛行为。     

清开灵有效组分对大鼠缺血脑组织星形胶质细胞活化的影响

目的：探讨清开灵有效组分对大鼠缺血脑组织星形胶质细胞活化的影响。方法：参照Longa法复制大鼠脑缺血模型，清开灵有效组分干预，免疫组化分析缺血脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、酸性钙结合蛋白(S-100β)表达的组间与时效特征。结果：脑缺血后GFAP、S-100β表达增强。用药可增强缺血：12hGFAP、S-100β的表达，促进星形胶质细胞的激活，对受损神经元发挥保护作用；至缺血24h，除珍珠母水解液组外，其余用药组促进GFAP、S-100β表达的作用减弱。结论：清开灵有效组分促进星形胶质细胞活化的作用具有明显时效性和相对特异性，黄芩苷、栀子苷的作用在于促进星形胶质细胞的反应性增生，而胆酸、珍珠母水解液则表现为对星形胶质细胞功能活化的促进作用。     

叶酸对脑梗死大鼠星形胶质细胞GFAP表达的影响

目的:探讨叶酸对脑梗死大鼠星形胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为假手术(SO)组、缺血(IM)组、缺血 低剂量叶酸(IM LFA)组和缺血 高剂量叶酸(IM HFA)组。通过叶酸灌胃给药28d后制备大脑中动脉栓塞模型,采用免疫荧光双标记的方法检测各组大鼠脑缺血后脑组织GFAP的荧光强度及BrdU GFAP双标阳性细胞密度。结果:在7d及14d4组均可见BrdU GFAP双标阳性星形胶质细胞,缺血 叶酸组GFAP荧光强度及BrdU GFAP双标阳性细胞密度均高于IM组及SO组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:补充叶酸可以使星形胶质细胞GFAP表达增强,并促进神经干细胞的分化,从而对脑梗死大鼠具有保护作用。     

Somatostatin receptor type 2 contributes to the self-renewal of murine embryonic stem cells

Aim:

The roles of G-protein coupled receptors (GPCRs) in stem cell biology remain unclear. In this study, we aimed to identify GPCRs that might contribute to the self-renewal of mouse embryonic stem cells (mESCs).

Methods:

The expression levels of pluripotent genes and GPCR gene were detected in E14 mESCs using PCR array and RT-PCR. Immunofluorescent staining was used to examine the expression of pluripotent markers and the receptor translocation. Western blot analysis was used to detect phosphorylation of signal proteins. Knock-down of receptor was conducted to confirm its role in pluripotency maintenance.

Results:

In leukemia inhibitory factor (LIF)-free medium, mESCs lost the typical morphology of pluripotency, accompanied by markedly decreases in expression of somatostatin receptor type 2 (SSTR2), as well as the pluripotency biomarkers Oct4, Sox2, Rex1 and Nanog. Addition of the SSTR2 agonist octreotide or seglitide (0.1–30 μmol/L) in LIF-free medium dose-dependently promoted the self-renewal of mESCs, whereas the SSTR2 antagonist S4 (0.03–3 μmol/L) dose-dependently blocked octreotide-induced self-renewal. Knock-down of SSTR2 significantly decreased the self-renewal of mESCs even in the presence of LIF. Addition of LIF (1000 U/mL) or octreotide (1 μmol/L) in LIF-free medium significantly increased both phosphorylation and nuclear ocalization of STAT3.

Conclusion:

The activation of SSTR2 contributes to the self-renewal of mESCs via activation of the STAT3 pathway.     

大豆异黄酮活性组分对H2O2诱导的PC12细胞损伤的影响

目的:探讨大豆异黄酮活性组分对H2 O2 诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法:以H2 O2 损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型,采用光学显微镜观察细胞形态,MTT法判断细胞的存活率,LDH法检测细胞的损伤程度。结果:不同浓度大豆异黄酮能明显改善H2 O2 导致的细胞甲瓒减少,大豆异黄酮处理组细胞存活率明显高于H2 O2 处理组(P <0 .0 1) ;而LDH漏出率则明显低于H2 O2 处理组(P <0 .0 5 )。结论:大豆异黄酮活性组分对H2 O2 诱导的PC12细胞损伤具有保护作用。     

Smad6信号干扰对MSCs骨向分化的影响

目的研究Smad6信号干扰对骨形态发生蛋白2（BMP-2）诱导的骨髓间充质干细胞（MSCs）骨向分化的促进效应。方法培养小鼠MSCs,用BMP-2诱导骨向分化。细胞分为3组：A组细胞用携带绿色荧光蛋白（GFP）的Smad6重组RNA干扰载体转染;B组细胞用空白载体转染;C组细胞作为对照。结果病毒转染后GFP在MSCs中有效表达,病毒转染效率达98．5％。与B组比较,Smad6RNA干扰显著提高了A组细胞AIP活性和骨钙素水平（P〈0．01）,而C组ALP活性和骨钙素水平均显著低于其他2组（P〈0．01）。茜素红染色显示,A组矿化结节数目显著多于B组（P〈0．05）,而c组无矿化结节形成。结论Smad6RNA干扰可有效促进BMP-2诱导的MSCs骨向分化,该研究为骨组织工程中骨缺损修复提供了一个极具价值的手段。     

8羟基脱氧鸟苷在2型糖尿病大鼠肾脏的表达及瑞舒伐他汀钙的影响

目的观察8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)在2型糖尿病模型大鼠肾脏的表达及瑞舒伐他汀钙(Rosuvastatin)对它的影响。方法将大鼠分为正常对照组(C)、糖尿病组(D)、瑞舒伐他汀钙治疗组(N),比较各组大鼠肾组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物岐化酶(SOD)活性,和8羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,同时观察血糖、血胰岛素、肾功能和肾脏形态变化。结果与正常组比较,糖尿病组血液中MDA含量明显上升(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05),8-OHdG增多(P<0.05),肾功能和肾脏形态受损,而瑞舒伐他汀钙治疗组的上述表达较糖尿病组明显改善。结论 8-OHdG在糖尿病肾病中的表达明显增加,而瑞舒伐他汀钙可以通过抑制氧化应激反应对2型糖尿病模型大鼠肾脏产生保护作用。     

纳米二氧化钛对人皮肤基底细胞癌和胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应

目的探讨纳米粒子二氧化钛(TiO2)对体外培养的人皮肤基底细胞癌A431和人胚胎皮肤成纤维细胞的生物学效应。方法TiO2处理体外培养的人皮肤基底细胞癌A431(human skin Basal cell carcinoma,A431)和人胚胎皮肤成纤维细胞(human embryo skin Fibroblast,ESF),MTT法测定细胞生长活性,计数集落形成和荧光染色检测细胞凋亡情况。结果纳米TiO2显著抑制体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的集落形成,对其生长活性具有显著负相关性(P<0.05);能够抑制人胚胎皮肤成纤维细胞(ESF)的集落形成,但对其生长活性的抑制无相关性(P>0.05)。结论纳米TiO2可影响体外培养的人皮肤基底细胞癌A431的生长、集落形成,并可导致细胞凋亡。     

社区2型糖尿病患者实施健康教育干预效果观察

目的：观察社区2型糖尿病患者实施健康教育干预效果。方法100例社区2型糖尿病患者随机分为观察组和对照组,每组50例。对照组予药物治疗。干预组患者在此基础上着重实施健康教育干预措施,其内容包括饮食、运动、用药指导、心理干预、血糖自我监测。观察并比较两组治疗前后血糖的变化情况。结果两组空腹血糖、餐后2h血糖较治疗前显著降低（P＜0.05）,且干预组较对照组降低更显著（P＜0.05）。干预组干预后遵医嘱用药、按时用药、合理饮食、适量运动、血糖监测情况明显优于对照组,差异有统计学意义（x2=4.48、6.32、7.13、5.13、7.97,P＜0.05）。结论对社区2型糖尿病患者实施健康教育干预措施,可以有效控制血糖水平,从而进一步提高患者的生活质量。     

三种中药活性部位对H2O2致PC12细胞损伤保护作用的比较研究

目的：比较三种中药有效部位人参皂苷、葛根黄酮和麦冬皂苷对H2O2诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法：用H2O2诱导PC12细胞氧化损伤,用MTT法测定细胞的存活率,黄嘌呤氧化酶法测定培养液中超氧化物歧化酶（SOD）活性,硫代巴比妥酸法测定培养液中丙二醛（MDA）含量,Griess法测定培养液中NO含量。结果：在人参皂苷、葛根黄酮、麦冬皂苷三种中药有效组分中,葛根黄酮对H2O2氧化损伤的PC12细胞的保护作用最强,人参皂苷和麦冬皂苷较弱,且强度接近。葛根黄酮提高SOD活性的活性最强,麦冬皂苷次之,人参皂苷较弱。降低MDA的作用强度顺序为葛根黄酮〉人参皂苷〉麦冬黄酮。葛根黄酮减少NO生成的作用远强于人参皂苷,麦冬皂苷无此作用。结论：人参皂苷、葛根黄酮、麦冬皂苷均可保护PC12细胞免受H2O2的氧化损伤,该作用的强弱与它们提高SOD活性、减少脂质过氧化和NO产生的作用强弱有关。葛根黄酮的作用在三种有效组分中最强。     

五味子乙素对HK-2细胞缺氧损伤的保护作用

卢爱龙 1, 谭小月 2, 张勉之 3△, 吴银娜摘要： 目的 探讨五味子乙素 （Sch B） 对氯化钴 （CoCl2） 诱导的人类近端肾小管上皮 （HK-2） 细胞缺氧损伤的保护作用及其可能机制。方法 取离体培养 HK-2 细胞, 随机分为 4 组。对照 （C） 组： 细胞未经任何处理。CoCl2组 （化学乏氧组）： 加入 600 μmol/L 的 CoCl2 处理 24 h。Sch B 预保护（CoCl2+ Sch B）组： 分别加入终浓度为 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 预处理 2 h 后, 其余操作同 CoCl2 组。Sch B 组： 分别加入终浓度 1 μmol/L 和 10 μmol/L Sch B 处理 2 h。CCK-8 试剂盒检测各组细胞活性; AnnexinV-FITC/PI 双标记流式细胞仪检测各组细胞凋亡率; Western Blot 检测各组缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白表达; RT-PCR 检测各组 HIF-1α和诱导型一氧化氮合酶（iNOS） mRNA 表达。结果 与对照组相比, CoCl2组细胞活性明显降低, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量和 iNOS mRNA 表达量显著增加, HIF-1α mRNA 表达量差异无统计学意义; Sch B 预保护组较 CoCl2组细胞活性显著增加, 细胞凋亡率、 HIF-1α蛋白表达量、 HIF-1α及 iNOS mRNA 表达量均显著减少; Sch B 组与对照组细胞活性、 细胞凋亡率差异无统计学意义, Sch B 组几乎不表达 HIF-1α蛋白。结论 Sch B 可能通过抑制 HIF-1α蛋白和 iNOS mRNA 的表达减少 HK-2 细胞的凋亡, 从而对 HK-2 细胞缺氧损伤起保护作用。     

艾塞那肽对2型糖尿病患者胰岛素敏感性的影响

目的 观察短期艾塞那肽治疗对2型糖尿病患者胰岛素敏感性的作用.方法 42例口服磺脲类药物治疗糖化血红蛋白不达标的2型糖尿病患者,按数字表法随机分为两组;艾塞那肽组20例,甘精胰岛素组22例,各组患者均给予糖尿病常规治疗,继续使用原用药物,同时艾塞那肽组使用艾塞那肽早晚餐前皮下注射,甘精胰岛素组给予甘精胰岛素每晚睡前注射1次,共治疗5个月.治疗前后采用高胰岛素-正葡萄糖钳夹术评价两组胰岛素敏感性,并测定相关代谢指标.结果 与治疗前比较,艾塞那肽组葡萄糖代谢率升高[(5.12±0.35)与(2.94±0.41)]mg· kg-1·min-1,P＜0.05],稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)降低[4.51(1.32 ～6.12)与1.96(1.32 ～6.12),P＜0.05],体质量指数下降较甘精胰岛素组显著(P＜0.05);两组均无严重低血糖事件发生.结论 短期艾塞那肽治疗对2型糖尿病患者胰岛素敏感性有改善作用.     

泻心汤有效成分对高糖诱导的HK-2细胞迁移的抑制作用

目的研究泻心汤有效成分对高糖诱导的肾小管上皮（HK-2）细胞迁移作用的影响。方法体外高糖（30mmol·L-1）培养HK-2细胞,分别加入不同浓度的大黄酸、小檗碱和黄芩苷,孵育48h后采用Transwell法检测细胞迁移能力,荧光定量PCR法检测黏着斑激酶（FAK）mRNA表达,Westernblot法检测a-平滑肌肌动蛋白（a-SMA）表达;孵育24h后收集细胞上清,利用比色法检测丙二醛（MDA）的含量及超氧化物歧化酶（SOD）活力。结果高糖诱导IIK-2细胞迁移能力增强,大黄酸、小檗碱和黄芩苷均可不同程度地抑制细胞迁移能力,降低FAKmRNA表达、a-SMA蛋白表达和MDA产生,并提高SOD的酶活力。结论泻心汤有效成分具有抑制高糖诱导的HK-2细胞迁移作用。