制备大鼠离体心脏损伤模型的最佳缺血再灌注时间

目的 探索离体心脏最佳缺血再灌注(I/R)时间,增加制备可用于心肌保护药物的方法筛选的离体心脏I/R模型的成功率。方法 采用Langendorff离体心脏恒压灌流模式,缺血31 min后,分别于再灌5, 10, 20和30 min时测定心电图、左心室压力(LVP)、冠脉流量(CF)、左心室舒张末期压(LVEDP)和收缩末期压(LVESP);观察心律失常发生率,计算左心室发展压(LVDP)、收缩期舒张期左心室内最大上升/下降速率(±dp/dt_max)和心率(HR)。结果 离体心脏再灌后HR和CF低于停灌前,差异显著(P<0.05);停灌期间,LVEDP升高,心肌挛缩。再灌时90%心脏可成功自主复跳,100%复跳心脏出现心律失常(室速或室颤),持续约5~10 min。再灌后LVDP下降、左心室最大舒缩速度下降。结论 停灌31 min,再灌30 min可成功制备出用于药物筛选的离体心脏I/R损伤模型。     

参麦注射液对正常及缺血再灌注离体豚鼠心脏的影响

目的观察参麦注射液(SM)对正常及缺血再灌注离体豚鼠心脏的影响。方法采用正常Langendorff灌流及缺血再灌注离体豚鼠心脏模型,观察SM对冠脉流量的影响,测定冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)活性及心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果SM可显著提高正常及缺血-再灌注离体豚鼠心脏的冠脉流量,减少缺血-再灌注后LDH的漏出总量,降低缺血再灌后心肌组织MDA的含量,升高SOD的活性。结论SM可增加正常及缺血-再灌离体豚鼠心脏冠脉流量,减轻缺血-再灌引起的心肌损伤。     

五甲基槲皮素对离体大鼠心脏缺血-再灌注损伤的影响

目的：经不同的给药方式，研究PMQ对缺血-再灌注离体大鼠心脏的保护作用及机制。方法和结果：（1）体外灌流系统中急性给药实验分为正常灌流组、模型对照组、溶剂对照组（0．1％DMSO），PMQ三个剂量组（3μM、10μM和30μM）。实验流程：正常灌流30min、停灌30min、复灌60min；左室水囊法全程监测LVDP，定时测量CF。     

三七三醇皂苷对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的作用研究

目的建立Langendorff离体心脏局部缺血再灌注(IR)模型,探讨三七三醇皂苷对大鼠离体心脏IR损伤的作用.方法将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、IR模型组和低、中、高剂量三七三醇皂苷组(PTSL组、PTSM组、PTSH组),各8只.对照组只穿线不结扎冠状动脉左前降支近分支,以K-H液持续灌流105 ...     

丹酚酸B对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究丹酚酸B对大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法：大鼠离体心脏采用Langendorff装置,灌注含氧K．H液30min后,夹闭,停止灌流30min,然后再灌注40min。实验分为模型（空白K_H液）组、葛根素（0．24mmol／1）组与丹酚酸B高、中、低浓度（60、30、15gmol／1）组。灌注含氧K．H液20min后加入相应药物灌注10min。实时测定血流动力学指标、左室舒张末期压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室收缩压最大变化速率（＋dP/dtmax）、左室舒张压最大下降速率（-dP／dtmax）。收集灌流液,并测定肌酸激酶（CK）的活力;取部分心肌组织测定丙二醛（MDA）含量与超氧化物歧化酶（sou）活性。结果：与模型组比较,丹酚酸B高、中浓度组大鼠离体心脏在复灌10min后L、厂EDP显著降低,LVDP显著升高,＋dP/dtmax。显著升高,-dP／dtmax显著降低（P〈0．01或P〈0．05）;丹酚酸B高浓度组离体大鼠心脏组织CK活性显著减弱（尸〈O．01）,丹酚酸B高、中浓度组大鼠离体心脏MDA含量显著减少,SOD活性显著增强（P〈0．01）;丹酚酸B高、中、低浓度组大鼠离体心脏复灌5min后灌流液显著增加（P〈O．01或P〈0．05）。结论：丹酚酸B对大鼠离体心脏有保护作用,其机制可能是通过清除氧自由基,抵抗氧化应激发挥治疗作用。     

纳洛酮对人离体肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的研究纳洛酮对人离体肾脏缺血再灌注损伤的影响。方法用人离体肾脏 ,实验组在灌注液中加入纳洛酮(NAL)0.8μg/ml,分别在0～10min、10～20min和20～30min时收集灌注流出液 ,测定其丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)及肾组织匀浆中的Na ,K _ATP酶、Ca2 _ATP酶含量 ,并做病理观察。结果上述各项指标在用NAL组与对照组比较均无显著性差异。结论NAL对离体肾脏缺血再灌注无明显影响 ,NAL对在体肾脏缺血再灌注的保护作用不是直接作用在肾脏本身。     

纳洛酮对人离体肾脏缺血再灌注损伤的影响

目的 研究纳洛酮对人离体肾脏缺血再灌注损伤的影响。方法 用人离体肾脏，实验组在灌注液中加入纳洛酮（NAL）0.8μg/ml，分别在0－10min、10－20min和20－30min时收集灌注流出液，测定其丙二醛（MDA）、过氧化物歧化酶（SOD）及肾组织匀浆中的Na^ ，K^ -ATP酶、Ca^2 -ATP酶含量，并做病理观察。结果 上述各项指标在用NAL组与对照组比较均无显性差异。结论 NAL对离体肾脏缺血再灌注无明显影响，NAL对在体肾脏缺血再灌注的保护作用不是直接作用在肾脏本身。     

Apelin-13对离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤的影响及机制探讨

目的观察apelin-13对离体大鼠缺血/再灌注损伤的影响,并初步探讨其作用机制。方法Langendorff恒流灌注大鼠心脏,采用停灌/复灌方式复制缺血/再灌注模型;观察缺血/再灌注期间心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+LVdp/dtmax)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-LVdp/dtmax);采用比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)及超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化,Westernblot方法检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和ERK1/2的表达。结果apelin-13可以增加缺血/再灌注损伤后心脏±dp/dtmax(P<0·01),降低灌流液中LDH水平,增加心肌组织中SOD活性,上调心肌组织中eNOS表达和下调细胞外调节蛋白激酶1和2(ERK1/2)的表达。结论apelin-13拮抗缺血/再灌注引起的心脏收缩及舒张功能障碍及心肌细胞膜稳定性改变;其作用机制可能与增加心肌清除氧自由基的能力、改变eNOS与ERK1/2表达有关。     

红景天苷对大鼠离体心脏缺血-再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的研究红景天的主要成分红景天苷对大鼠离体心脏缺血－再灌注损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法将大鼠随机分为对照组和红景天苷组2组,取各大鼠离体心脏,按Langendorff预灌注10min,夹闭30min,再灌注120min,期间实时测定血流动力学指标：左室舒张末期压（LVEDP）、左室发展压（LVDP）、左室收缩压最大变化速率（＋dP／dtmax）、左室舒张压最大下降速率（－dP／dtmin）。复灌末,心脏用1％三苯四氯化磷酸盐缓冲液（TTC）孵育15min,通过TTC染色法测定大鼠心肌梗死面积。实验结束后,测定丙二醛（MDA）含量及心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）和一氧化氮合酶（NOS）活力。结果与对照组相比,红景天苷组的LvEDP下降,而LVDP、＋dP／dtmin、－dP／dtmin均上升。给药后,大鼠离体心脏的血流动力学指标有所好转。红景天苷组梗塞面积（14．7±5．5）％明显低于对照组（28．4±4．6）％（P＝0．00012）。生化指标测定结果表明红景天苷组可降低磷酸肌酶（CK）活性和MDA含量,提高SOD和NOS的活性。结论红景天苷对大鼠离体心脏缺血－再灌注损伤的保护作用,这可能是它能抑制氧化应激所致的。     

内皮素-1对离体豚鼠工作心脏的作用

在离体豚鼠工作心脏模型上,单次推注内皮素-1(ET-1·30,90,300pmol·L~(-1))能引起初始短暂的正性肌力作用及随后持续的负性肌力,负性频率作用。低剂量的ET-1(30,90,pmol·L~(-1))能使心脏各功能指标可逆性恢复.而高剂量的ET-1(300pmol·~(-1))则强烈收缩冠脉,造成心肌缺血,LDH值升高,最终导致心功能指标显著受抑。环氧化酶抑制剂In-domethacin 30 μmol·L~(-1)能显著增强ET-l收缩冠脉血管的作用,加重心肌缺血。上术结果表明:ET-1通过强烈收缩冠脉血管,造成心肌缺血而引起离体豚鼠工作心脏心功能的抑制。并提示PGI_2能显著拮抗ET-1的缩血管作用。     

水杉总黄酮对豚鼠工作心脏缺血再灌注损伤的影响

目的　观察水杉总黄酮对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法　采用豚鼠工作心脏缺血再灌注损伤模型 ,观察水杉总黄酮对缺血再灌注损伤心肌心功能以及生化指标的影响。结果　水杉总黄酮能明显改善缺血再灌注损伤心肌的舒缩功能 ,剂量依赖性地降低冠脉流出液中肌酸磷酸激酶以及乳酸脱氢酶的活性 ,减少缺血心肌组织中丙二醛的含量。结论　水杉总黄酮对缺血再灌注损伤心肌具有保护作用 ,其机制与其抗脂质过氧化有关     

豚鼠离体心肌缺血再灌注的电生理模型

目的 应用计算机信号采集和处理技术研究豚鼠离体心肌细胞正常、缺血及再灌注时的电生理特性. 方法离体细胞灌流,细胞内微电极记录,计算机信号采集与处理.结果 豚鼠右心室乳头肌肌细胞静息电位RP为-72±6.58 mV,动作电位峰值(APA)为112.22±8.65 mV,0相最大去极化速率(Vmax)为107.37±10.55 mV·s-1.复极达峰值电位的10%、50%、90%所需时间(APD10、APD50、APD90)分别为39.25±8.55 ms、123.45±15.25 ms和169.35±18.12 ms.缺血缺氧台氏液灌流的心肌细胞APA与Vmax降低,APD90显著缩短,与缺血缺氧前相比有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01).再灌注2 min内可见AP缺血缺氧样变化加重, Vmax继续降低,与缺血缺氧灌流相比有显著性意义(P＜0.01).豚鼠再灌注10 min后RP与AP波形基本恢复正常.结论 计算机信号采集和处理技术在心肌细胞电生理研究方面的应用,为全面的分析心肌细胞生物电的变化及其形成机制,亦为深入研究病理及药物作用情况下对生物电的影响提供真实客观的数据.     

无创性延迟肢体缺血预适应对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注氧化损伤的影响

目的:观察无创性延迟肢体缺血预适应(NDLIP)对糖尿病(DM)大鼠心肌缺血/再灌注氧化损伤的保护作用。方法:尾静脉注射链脲佐菌素(STZ)制备DM大鼠模型。将DM大鼠随机分成心肌缺血再灌注(I/R)、心肌缺血预适应(MIP)、无创性延迟肢体缺血预适应(NDLIP)组。通过3个循环的左后肢5 min缺血/5 min再灌注,每天1次,连续3 d,建立NDLIP模型。心肌冠状动脉左前降支(LAD)实施3次5 min缺血/5 min再灌注建立MIP模型。各组实施LAD 30 min缺血/120 min再灌注复制I/R模型。用BL-420E生物机能实验系统连续监测心电图(ECG),记录缺血期间室性心律失常(VA)的发生情况。TTC染色测定大鼠心肌I/R后梗死面积(IS)。检测心肌组织中总-超氧化物歧化酶(T-SOD)、锰-超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。结果:与I/R组相比,MIP组和NDLIP组室性早搏(VPC)出现时间明显推迟(P<0.01),持续时间明显缩短(P<0.01),室性心动过速(VT)和心室纤颤(VF)发生率都明显降低(P<0.05),IS明显缩小,梗死面积/危险区(IS/A...     

Chronic intermittent hypobaric hypoxia protects the heart against ischemia/reperfusion injury through upregulation of antioxidant enzymes in adult guinea pigs

Aim： To investigate the protection and the anti-oxidative mechanism afforded by chronic intermittent hypobaric hypoxia （ClHH） against ischemia/reperfusion （I/R） injury in guinea pig hearts.
Methods： Adult male guinea pigs were exposed to ClHH by mimicking a 5000 m high altitude （pB=404 mmHg, po2=84 mmHg） in a hypobaric chamber for 6 h/day for 28 days. Langendorff-perfused isolated guinea pig hearts were used to measure variables of left ventricular function during baseline perfusion, ischemia and the reperfusion period. The activity and protein expression of antioxidant enzymes in the left myocardium were evaluated using biochemical methods and Western blotting, respectively. Intracellular reactive oxygen species （ROS） were assessed using ROS-sensitive fluorescence.
Results： After 30 min of global no-flow ischemia followed by 60 min of reperfusion, myocardial function had better recovery rates in ClHH guinea pig hearts than in control hearts. The activity and protein expression of superoxide dismutase （SOD） and catalase （CAT） were significantly increased in the myocardium of ClHH guinea pigs. Pretreatment of control hearts with an antioxidant mixture containing SOD and CAT exerted cardioprotective effects similar to ClHH. The irreversible CAT inhibitor aminotriazole （ATZ） abolished the cardioprotection of ClHH. Cardiac contractile dysfunction and oxidative stress induced by exogenous hydrogen peroxide （H2O2） were attenuated by CIHH and CAT.
Conclusions： These data suggest that CIHH protects the heart against I/R injury through upregulation of antioxidant enzymes in guinea pig.     

JNK在缺血后处理减轻再灌注损伤肺细胞凋亡中的作用

目的:探讨C-Jun氨基末端激酶(JNK)在缺血后处理(IPO)减轻缺血/再灌注损伤大鼠肺细胞凋亡中的作用.方法:雄性SD大鼠随机分成5组(n=8),即对照组(C组)、肺缺血/再灌注组(I/R组)、肺缺.血/再灌注+缺血后处理组(IPO组)、缺血后处理+溶剂对照组(PPCES溶液)(P组)、缺血后处理+ SP600125组(SP组).分别于再灌注2h颈动脉取血、留取左肺组织,检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO),检测肺组织湿/干重比(W/D)和总肺含水量(TLW);光电镜观察肺组织形态学结构改变,并进行肺组织损伤定量评估(IQA);原位末端标记法(TUNEL)检测肺细胞凋亡情况并计算凋亡指数(AI).结果:与C组相比,I/R组血清SOD活性显著降低,MDA含量、MPO活力显著升高(P均＜0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著升高(P＜0.05或P＜0.01),光镜电镜下肺组织结构发生明显损伤;IPO组、P组、SP组与I/R组相比,MDA含量、MPO活力显著降低,SOD活性升高(P＜0.05或P＜0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著降低(P ＜0.05或P＜0.01),光镜电镜下肺组织结构损伤情况有所改善;P组与IPO组比较各项指标均无明显差异(P均＞0.05);SP组与IPO组相比,MDA含量、MPO活力显著降低,SOD活性升高(P＜0.05或P＜0.01),肺组织W/D、TLW、IQA和AI均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),光镜电镜下肺组织结构未见明显损伤.结论:I/R导致大鼠肺组织过度氧化应激,激活JNK,肺内中性粒细胞聚集,导致肺组织结构严重破坏,细胞大量凋亡;IPO可以减轻氧化应激,抑制JNK通路的激活,从而改善其结构破坏和细胞凋亡.     

内源性硫化氢参与缺血后处理减轻离体大鼠心脏缺血/再灌注损伤

目的探讨内源性硫化氢是否参与缺血后处理减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤。方法Sprague Dawley(SD)大鼠离体心脏Langendorff灌流,平衡20min,全心缺血30min,复氧灌注60min,在复灌即刻给与短暂停灌15s/复灌15 s循环4次造成心肌缺血后处理模型。预先给予胱硫醚-γ-裂解酶(cystanthionine-γ-lysase,CSE)抑制剂炔丙基甘氨酸(L-propargylglycine,PAG),以及给予PAG后加用外源性硫化氢供体NaHS后处理,观察它们对缺血后处理的影响。记录心率(HR)、左室发展压(LVDP)、冠脉流出量(CF);检测灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、心肌组织CSE活性、硫化氢的含量以及心肌梗死面积。结果缺血/再灌注组LVDP下降、冠脉灌流液中LDH活性明显增加、心肌梗死面积增加(vsControl组,P<0.05)。缺血后处理组LVDP升高、冠脉灌流液中LDH活性下降、心肌梗死面积缩小(vsIR组,P<0.05)。PAG加缺血后处理组心肌CSE活性及H2S生成下降、并且逆转了缺血后处理的作用,而外源性硫化氢供体NaHS后处理组H2S生成回升、LVDP升高、心肌梗死面积缩小(vsIR组,P<0.05)。结论内源性硫化氢参与大鼠心肌缺血后处理减轻缺血/再灌注损伤。     

无创性延迟肢体缺血预适应对大鼠脑缺血再灌注皮层的保护作用

目的：研究无创性延迟肢体缺血预适应（NDLIP）对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法：通过连续3d,每天1次3个循环左后肢无创性5min缺血、5rain再灌注,建立NDLIP模型。实验分4组：假手术组（sham）、缺血再灌注组（I／R）、早期脑缺血预适应＋I／R组（ECIP＋I／R）、NDLIP＋I／R组。观察其对脑缺血／再灌注的神经缺损症状,脑梗死范围,超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）活力,黄嘌呤氧化酶活力（XOD）,丙二醛（MDA）含量影响。结果：与I/R组相比,ECIP＋I／R组及NDLIP＋I／R组缺血1h,再灌注24h后评分有非常显著的降低;脑梗死范围显著减小。与I／R组比较,ECIP＋I／R组和NDLIP＋I／R组的T-SOD和Mn—SOD活力、GSH—PX活力均升高;XOD活力明显降低,MAD含量明显减少;ECIP＋I／R组和NDLIP＋I／R组间差异无统计学意义。结论：NDLIP可降低I／R对神经的损伤、减小脑梗死范围、提高脑组织抗氧化能力,减少I／R对脑组织的损伤。