嗅鞘细胞移植治疗帕金森病动物模型的相关研究

目的 利用大鼠同种异体嗅鞘细胞移植的方式对帕金森病模型大鼠进行治疗,初步探究在PD模型大鼠脑内移植嗅鞘细胞能否成为治疗帕金森病的一种有效手段。方法 提取和培养原代OECs,利用6-OHDA两点注射法建立帕金森病动物模型,通过APO诱导方式验证模型及检测治疗效果,通过HE染色进行大鼠黑质细胞形态学观察,利用抗TH荧光染色细胞计数对比治疗前后TH阳性神经元表达情况差异。结果 从嗅鞘细胞移植后的第4周开始,PD模型的行为学诱导旋转圈数明显减少。HE染色结果示:PD模型大鼠毁损侧的黑质致密部的神经元变性明显,且TH阳性神经元数量降低,经OECs治疗后的帕金森大鼠的患侧黑质部位神经元变性改善,且TH阳性神经元含量明显增高。结论 嗅鞘细胞能够改善帕金森模型大鼠的行为学变化。嗅鞘细胞能够提高帕金森模型大鼠患侧黑质部位多巴胺神经元含量。     

帕金森病模型大鼠丘脑底核神经元电生理活动的研究

目的：建立6-羟多巴胺（6-OHDA）诱导的帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）大鼠模型,研究丘脑底核（subthalamicnucleus,STN）神经元电生理活动的改变,探讨PD的病理生理学机制。方法：采用立体定向技术将6-0HDA两点法注入大鼠左侧黑质致密部（substantia nigra pars compacta,SNc）建立帕金森病大鼠模型,对诱发成功的大鼠模型和对照组均采用玻璃微电极细胞外记录法记录STN神经元放电。结果：分别观察和分析了对照组大鼠STN中的20个神经元和PD组大鼠STN中的37个神经元。两组神经元的放电频率无显著差异（P〉0．05）。但PD组大鼠STN神经元中爆发放电的神经元多于对照组,而不规则放电的神经元少于对照组（P〈0．05）。结论：PD状态下STN神经元放电频率与对照组无显著差异,但放电形式发生了改变,爆发放电的神经元显著增多,说明STN神经元的活动增强。     

帕金森病模型大鼠腹内侧前额叶皮层神经元的活动变化

目的:观察和分析帕金森状态下腹内侧前额叶皮层中神经元的活动变化.方法:以6-羟多巴胺(6-OHDA)毁损黑质致密部(SNc)建立的PD模型大鼠为研究对象,采用玻璃微电极细胞外记录方法,记录和分析了PD状态下腹内侧前额叶皮层中神经元的电活动变化.结果:对照组与PD组大鼠腹内侧前额叶皮层神经元的放电频率分别为(2.3±0.9) Hz和(4.2±2.0) Hz.与对照组相比,PD模型大鼠腹内侧前额叶皮层神经元的放电频率显著增高(P《0.001).结论:6-OHDA单侧毁损SNc的DA能神经元后,腹内侧前额叶皮层神经元的放电频率显著增高,表明正常大鼠中黑质对腹内侧前额叶皮层起抑制性作用.     

丘脑底核电刺激对6-羟基多巴胺致帕金森大鼠黑质神经元线粒体神经的保护作用及其机制

目的 探讨丘脑底核电刺激对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森大鼠黑质神经元的保护作用及其机制.方法 将32只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、假刺激组及电刺激组,每组8只.模型组、假刺激组及电刺激组于左侧前脑内侧束注射6-OHDA制备大鼠偏侧帕金森(PD)模型,电刺激组大鼠左侧丘脑底核区植入刺激电极进行高频...     

丘脑背内侧核损毁对帕金森病大鼠内侧前额叶皮层电活动的影响

目的：探讨丘脑背内侧核（MD）损毁对帕金森病（PD）模型大鼠内侧前额叶皮层（m PFC）锥体神经元电活动的影响,阐明MD在PD病理生理过程中的作用。方法：以6-羟基多巴胺（6-OHDA）脑内注射损毁黑质致密部（SNc）复制PD大鼠模型,在大鼠脑中注射鹅膏蕈氨酸（IBO）损毁MD。将24只雄性SD大鼠随机分为正常组、SNc损毁组（PD模型组）、MD损毁组（MD中注射IBO）和SNc+MD联合损毁组（SNc损毁后1周损毁同侧MD）,每组6只。酪氨酸羟化酶免疫组织化学染色观察各组大鼠SNc和腹侧被盖区（VTA）中多巴胺神经元数量,尼氏染色判断电生理记录点的位置和MD损毁情况。观察各组大鼠m PFC中锥体神经元的放电频率、放电间隔（ISI）的变异系数和放电形式。结果：注射6-OHDA后,PD模型组大鼠损毁侧SNc中多巴胺神经元完全消失,同侧VTA中多巴胺神经元数较对侧明显减少（P<0.01）;与正常组比较,SNc损毁组大鼠m PFC锥体神经元的放电频率明显升高（P<0.05）,放电形式趋于爆发式活动（P=0.001）,平均ISI变异系数增加（P<0.01）;MD损毁2周后,S...     

COX-2对帕金森病小鼠黑质内多巴胺能神经元的毒性作用

目的:观察环氧合酶-2(COX-2)对帕金森病(PD)模型小鼠黑质内多巴胺(DA)能神经元的损害作用.方法:采用Lau法制作PD小鼠模型,通过行为学观察,免疫组织化学和免疫蛋白印记法,观察PD小鼠模型的行为学表现,黑质致密部COX-2免疫反应阳性细胞,DA能神经元数量和腹侧中脑(包括VTA和SN)COX-2,酪氨酸羟化酶(TH)表达水平的变化,并观察给予COX-2抑制剂后对上述变化的影响.结果:与对照组小鼠相比,PD组小鼠出现PD典型的行为学表现,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量分别下降约63%和77%.同时,黑质致密部COX-2阳性细胞和腹侧中脑COX-2含量有大幅升高.经COX-2抑制剂处理的PD小鼠行为表现较轻,黑质致密部DA能神经元和腹侧中脑TH含量仅下降约37%和41%.与单纯PD小鼠比较,黑质致密部COX-2阳性细胞和腹侧中脑COX-2含量明显下降.结论:COX-2对PD模型小鼠黑质内DA能神经元有毒性作用.     

6-OHDA诱导PD大鼠黑质神经细胞凋亡的观察

目的 探讨帕金森病发病过程中黑质神经元的缺失形式。方法 将6-OHDA立体定向微量注射于右侧内侧前脑柬(MFB)制备PD大鼠模型，观察大鼠的行为改变，并运用特殊染色，DNA原位末端标记技术检测黑质内多巴胺(DA)神经元凋亡的发生及其变化规律。结果 成功复制出符合临床特点的PD大鼠模型，且旋转行为与黑质区神经元数目呈反变关系。损伤侧黑质DA神经元存在着细胞凋亡。以术后两周最明显。结论 6-OHDA诱导的PD大鼠SNc中存在以凋亡为主的死亡方式。细胞凋亡在PD发病中可能起关键作用。     

脑深部电刺激治疗帕金森病术后生活质量评估

目的 对给予丘脑底核(STN)电刺激治疗的帕金森病(PD)患者进行生活质量评估,观察STN电刺激治疗对其运动功能和日常生活活动等的改善作用.方法 15例接受双侧或单侧STN深部电刺激(DBS)治疗的PD患者分别于手术前及手术后3,6,12,24个月应用schwab & England日常活动分级、帕金森病联合评分标准(UPDRS)、Zung量表评价PD患者的临床情况及日常活动、运动检查及情感状态等生活质量,并对结果 进行统计分析.结果 帕金森病患者DBS术后日常活动改善率:"开"状态下为66.8%,"关"状态为71.9%;精神、情绪改善率:"开"状态下为19.5%,"关"状态为23.2%;运动功能改善率:"开"状态下为44.4%,"关"状态为66.5%.结论 丘脑底核脑深部电刺激术能明显改善PD患者的运动功能和日常生活活动,从而提高生活质量.     

一种改良帕金森大鼠模型的制作

目的 建立一种改进的帕金森（PD）大鼠模型制作方法，并对模型进行综合评价。方法 选取Wistar大鼠60只，分别制作右侧中脑黑质致密部（SNc）和中脑内侧前脑束（MFB）两点6-OHDA毁损传统PD大鼠模型及中脑内侧前脑束（MFB）单点6-OHDA毁损改良PD大鼠模型；检测大鼠行为及黑质多巴胺（DA）能神经元变化。结果 改良组大鼠死亡率低于传统组和对照组，行为学检测和免疫组化检测与传统组差异无显著性（P〉0．05），与对照组比较注射侧黑质多巴胺能神经元显著减少（P〈0．01）。结论 本实验方法可快速简便地建立稳定的PD大鼠模型．     

光遗传技术对帕金森病大鼠治疗效果研究

目的观察光遗传技术对帕金森病(PD)的治疗效果。方法将健康成年雄性Sprague Dawley大鼠随机分为实验组、病毒组、模型组和空白组,每组20只。模型组和实验组大鼠分别在右侧黑质致密部(SNc)和中脑腹侧被盖区(VTA)注射鱼藤酮建立单侧完全损毁的PD大鼠模型,实验组大鼠造模成功后注射腺相关病毒,病毒组大鼠不建立PD模型,仅注射腺相关病毒,空白组大鼠不给予任何干预措施。然后,各组大鼠在SNc植入光电极进行光刺激,采集各组大鼠光刺激前、中、后的脑电信号,采用LZ复杂度分析脑电信号的变化。结果 PD大鼠与正常大鼠脑电信号各波段LZ复杂度与比较差异较大,光遗传学技术对导入病毒的实验组和病毒组大鼠脑电信号有较明显的影响,对未导入病毒的模型组和空白组大鼠脑电信号无明显影响;实验组大鼠光刺激时脑电信号θ波更趋近于空白组大鼠。结论光遗传技术对PD大鼠有治疗作用。     

囊泡单胺转运体在帕金森病小鼠脑组织中的分布特征

目的：探讨囊泡单胺转运体(VMAT2)在帕金森病(PD)小鼠模型脑组织中的分布特征与帕金森病的关系。方法：使用利血平、MPTP及联合利血平和MPTP分别造成C57BL小鼠的PD模型，应用免疫组织化学方法观察VMAT2和TH在黑质致密部、纹状体、腹侧被盖和蓝斑分布的变化。结果：免疫组织化学分析显示，帕金森病小鼠较对照组小鼠VMAT2和酪胺酸羟化酶(tvrosine hvdmxvlase，TH)阳性神经元细胞数目在黑质致密部明显减少，腹侧被盖和蓝斑中的阳性神经元细胞数无明显变化；VMAT2和TH在纹状体区域阳性神经元纤维明显减少；同时发现在正常对照组中VMAT2在黑质致密部中的分布既少于腹侧被盖也少于蓝斑。结论：这种对多巴胺神经元具有保护作用的VMAT2在黑质致密部中的分布少于腹侧被盖和蓝斑，黑质致密部保护作用薄弱是帕金森病黑质选择性受损的重要原因。     

苍白球腹侧核毁损对帕金森大鼠旋转行为及纹状体一氧化氮合酶阳性神经元表达的影响

目的 :探讨帕金森病 (Parkinson’sdisease ,PD)大鼠模型苍白球腹侧核 (ventralpallidum ,VP)毁损后对旋转行为变化及对纹状体区一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase ,NOS)阳性神经元表达的影响。方法 :采用 6 羟基多巴 ( 6 hydroxydopamine ,6 OH DA)毁损左侧黑质致密部 (substantianigra ,parscompacta ,SNc)和中脑腹侧被盖 (ventraltegmentalarea ,VTA)以建立PD大鼠模型 ,采用微电极毁损其VP ,观察实验动物旋转行为变化 ,并用NADPH黄递酶 (reducedformofnicotinamide edeninedinucleotidephos phatediaphorase ,NADPH d)组织化学染色显示NOS阳性神经元的表达。结果 :VP毁损后PD大鼠旋转行为明显改善 (P <0 .0 5 ) ,纹状体区NOS阳性神经元数量亦有增加 (P <0 .0 5 )。结论 :VP毁损后 ,PD大鼠旋转行为的减少可能与VP异常放电受抑制有关 ,同时NO的增加又加重了对VP的毒性损伤 ,从而加强了对VP异常放电的抑制作用     

Subthalamic deep brain stimulation for Parkinson＇s disease： correlation of active contacts and electrophysiologically mapped subthalamic nucleus

Background Subthalamic deep brain stimulation （STN-DBS） has been shown to be effective in the treatment of Parkinson＇s disease. The site for permanent stimulation is still in debate. This study aimed to assess the position of active contacts in relation to the subthalamic nucleus. Methods We reviewed the location of 40 electrodes in 34 patients who underwent STN-DBS. The position of electrode was evaluated by postoperative magnetic resonance imaging （MRI）. The position of active contacts was compared with the subthalamic nucleus （STN） determined by intraoperative electrophysiological mapping and postoperative MRI. Results The average position of the 40 active contacts was （11.7±1.2） mm lateral, （0.6±1.3） mm anterior, and （0.7±1.4） mm vertical to the midcommissural point. The dorsal margin of the STN was （11.6±1.1） mm lateral, （0.2±1.1） mm anterior, and （1.3±1.1） mm vertical to the midcommissural point. When compared with the dorsal margin of the STN, the active contacts were located more dorsally （P=0.033） and anteriorly （P=-0.012）, no significant difference was found in the lateral direction （P=0.107）. When compared with the position of the STN, 26 （65%） of active contacts were located in the region dorsal to the STN, only 13 （32.5%） were located in the upper two-thirds portion of STN. Conclusions The site for permanent stimulation appears to be in the subthalamic region dorsal to the STN, close to the dorsal margin of the STN. Besides the dorsal portion of the STN, other structures such as fields of Forel H and zona incerta may also be involved in the therapeutic benefit of deep brain stimulation.     

丘脑底核电刺激改善帕金森病症状的电生理基础

目的探讨丘脑底核（STN）细胞电活动、脑深部刺激（DBS）电极触点位置与帕金森病（PD）症状改善的关系。方法19例PD患者在接受STNDBS治疗的同时采集细胞电活动和肢体EMG。应用单细胞分析、相关性检验探讨不同放电模式细胞活动与症状的关系,PD综合量表进行术前和术后疗效评估。结果在278个STN神经元中发现与震颤相关（12．6％）的放电活动多分布在STN上部,而紧张性（32．7％）和不规则（54．7％）放电活动多分布在STN下部,进一步比较STN上下部各类细胞的分布均有统计学意义（P〈0．05）。对DBS刺激触点的疗效分析发现,上部触点对震颤改善显著,而下部触点对僵直和迟缓的改善明显。结论STN不同放电模式神经元与PD症状有内在联系。     

Effects of bilateral subthalamic nucleus stimulation on resting-state cerebral glucose metabolism in advanced Parkinson’s disease

Background The major neuropathological symptoms of Parkinson’s disease (PD) consist of a loss of pigmented dopaminergic neurons in the substantia nigra and the presence of Lewy bodies. This study was to investigate the effects of bilateral subthalamic nucleus (STN) stimulation on resting-state cerebral glucose metabolism in advanced PD, and investigate the mechanism of deep brain stimulation (DBS). Methods Seven consecutive advanced PD patients (4 men and 3 women, mean age 64±4 years, mean H-Y disability rating 4.4±0.65) receiving bilateral STN DBS underwent 18F-fluorodeoxyglucose (18F-FDG)/positron-emission tomography (PET) examinations at rest both preoperatively and one month postoperatively, with STN stimulation still on. The unified PD rating scale was used to evaluate the clinical state under each condition. Statistical parametric mapping (SPM) was used to investigate the regional cerebral metabolic rates of glucose (rCMRGlu) during STN stimulation, and to compare these values to rCMRGlu preoperation. Results STN stimulation clearly improved clinical symptoms in all patients. A significant increase in rCMRGlu was found in the bilateral lentiform nucleus, brainstem (midbrain and pons), bilateral premotor area (BA6), parietal-occipital cortex, and anterior cingulated cortex, and a marked decrease in rCMRGlu was noted in the left limbic lobe and bilateral inferior frontal cortex (P&lt;0.05). Conclusion Bilateral STN stimulation may activate the projection axon from the STN, improving clinical symptoms in advanced PD patients by improving both ascending and descending pathways from the basal ganglia and increasing the metabolism of higher-order motor control in the frontal cortex.     

Deep brain stimulation of the subthalamic nucleus for essential tremor

Essential tremor (ET),characterized by a postural and/or kinetic tremor and primarily manifested in the upper extremities,head,and other parts of the body,is one of the most common neurological disorders.1 The traditional target for the neurosurgical treatment of ET,the ventral intermedius nucleus (Vim) of the thalamus,has confirmed that chronic deep brain stimulation (DBS) is an effective,standard,and primary procedure for ET.However,the loss of tremor suppression due to tolerance of chronic Vim stimulation,accompanied by other adverse effects,such as paresthesias,dysarthria,dysequilibrium,hyperhidrosis,and localized pain,has necessitated changes in the stimulation target in some patients.Therefore,an alternative target for ET stimulation is required.Although targeting the subthalamic nucleus (STN) also has complications,such as dyskinesia,dysarthria,paresthesias,diplopia,mood changes,depression,and restless leg syndrome,in view of the evidence that STN could be the target for patients with tremors associated with Parkinson's disease (PD),STN was elected in two ET patients in our study with positive effects.Our research is reported to have explored the possibilities of STN-DBS in the treatment of ET.     

伴有左旋多巴诱发异常运动的帕金森病患者基底节神经电活动

目的 探讨伴有左旋多巴诱发的异常运动(LID)的帕金森病(PD)患者基底节核团的神经元电活动特点.方法 16例原发性PD患者[其中8例患者伴有严重的LID,帕金森病统一评分量表(UPDRS)Ⅳ平均评分为6.8±1.5]在接受内苍白球(GPi)毁损术(8例)或丘脑底核(STN)电极埋置术(8例)的同时采集核团细胞电活动和肢体EMG.应用单细胞和峰间隔(ISI)及其变异系数(CV)分析方法探讨不同的细胞放电模式和频率.方差分析和Bonferroni检验比较不同放电模式的神经元的ISI和CV.结果 在22个针道(GPi:8;STN:14)中共甄别出238个神经元,其中22.3%为与肢体震颤相关的放电活动,33.2%为快速的紧张性放电活动和29.0%为不规则放电活动,同时还发现8.0%高度不规则的簇状放电活动和7.6%的低频放电活动.方差分析显示不规则放电活动、高度不规则簇状放电活动和低频放电活动的ISI和CV差异均有统计学意义(均P＜0.05).卡方检验表明高度不规则簇状放电活动和低频放电活动主要存在于伴有LID患者的GPi和STN(P＜0.05).结论 基底节GPi和STN细胞放电频率和模式的改变与LID相关.