新疆伊犁地区马和驴博尔纳病病毒自然感染的调查

目的 调查新疆伊犁地区伊犁马和伊犁驴博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)流行现状,分析BDV种系来源.方法 采用荧光定量巢式实时逆转录聚合酶链反应(fluorescence quan-titative nested RT-PCR,FQ-nRT-PCR),对新疆伊犁地区518匹伊犁马和206头伊犁驴外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cell,PBMC)进行BDV p24基因片段检测.对榆测阳性结果 的标本通过BDV p40和质粒标准品的检测进行进一步验证并测序,对其进行基因同源性、氨基酸序列和系统发生分析.结果 5例伊犁马和4例伊犁驴血标本BDV p24榆测阳性,阳性率分别为0.97%和1.94%;9例标本BDV tn0片段检测均阳性,质粒标准品榆测均阴性;BDV p24扩增产物序列与He/80株的同源性为100%.结论 新疆伊犁地区伊犁马和伊犁驴中可能存在BDV的自然感染,该地区BDV流行株与He/80株存在同源性.     

新疆伊犁地区动物脑组织博尔纳病病毒p24基因片段的检测

目的 了解新疆伊犁地区动物脑博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染现状,分析该病毒的种系来源,预防我国BDV大规模暴发流行.方法 采用巢式逆转录实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)的方法,对新疆地区200匹马、75头驴和100只牧羊犬脑组织标本进行BDVp24基因片段的检测.并对阳性标本进行BDV p40基因片段扩增电泳,同时排除GFP-p24和pMD-19质粒污染,最后克隆测序,进行基因同源性和氨基酸序列分析并分析BDV种系发生.结果 3例伊犁马、4例伊犁驴和9例牧羊犬的脑组织标本BDV p24检测阳性,阳性率分别为1.5%、5.3%、9.0%;BDV p40基因片段检测和质粒标准品GFP-p24、pMD-19检测均为阴性;BDV p24扩增产物序列与He/80株的同源性为100%.结论 新疆伊犁地区马、驴和狗可能存在BDV脑内的自然感染,该地区BDV流行株与He/80株存在同源性.     

临床病毒性脑炎标本的博尔纳病病毒核酸检测

目的 探讨临床病毒性脑炎(viral encephalitis,VE)患者与博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染的关系,分析BDV感染的病毒性脑炎患者临床特征.方法 用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)方法检测病毒性脑炎患者及非感染性疾病施行蛛网膜下腔阻滞麻醉的手术患者脑脊液单个核细胞(cerebrospinal fluid mononuclear cell,CSFMC)中BDV p24基因片段,同时用β-肌动蛋白(β-actin)作为内参照,脑脊液(CSF)阳性标本基因测序分析并总结出临床特征.结果 32例病毒性脑炎脑脊液标本BDV p24基因片段检出率为12.5%(4/32),拷贝数＞102/μl.对其中一份CSF阳性标本测序后,与BDV标准病毒株Ⅴ和马源的BDV病毒株H1766序列比较同源性分别为95.35%和98.84%.在4个位点出现基因突变(nt1649 T→C、nt1656 G→A、nt1670 C→T、nt1676 C→T).该目的基因片段与马源的BDV病毒株亲缘关系最近.阳性脑炎患者主要以精神行为异常为临床特征.结论 贵州省遵义市部分病毒性脑炎的发生与BDV感染有关,主要以精神行为异常为临床特征.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

精神分裂症患者血液标本检测博尔纳病病毒核酸

博尔纳病病毒（Boma disease vires，BDV）是一种高度嗜神经的RNA病毒。近年研究发现BDV可能与精神分裂症（schizophrenia，SCH）的发病有关，但对此存在较多争论。本研究通过检测SCH患者外周血单个核细胞（PBMC）中BDV p24核苷酸片段来探讨BDV感染与SCH发病的关系。     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

多发性硬化患者博尔纳病病毒p24基因片段的检测

博尔纳病病毒(Boma disease virus,BDV)是引发神经系统感染性疾病病原体的一种.我国重庆、哈尔滨、贵州等地区在病毒性脑炎、抑郁症、精神分裂症、帕金森病等部分疾病患者血液和脑脊液中检出过BDV,但多发性硬化(multiplesclerosis,MS)患者中未见报道.我们在13例MS患者外周血单个核细胞(PBMC)中检测BDV-p24基因片段,2例阳性,报道如下.     

地高辛标记探针原位杂交法检测肝病患者外周血单个核细胞中TTV-DNA

为检测肝病患者外周血单个核细胞(PBMC)中TTV-DNA(输血传播病毒脱氧核糖核酸), 以TTV ORF1为模板, 应用地高辛(Dig)作为标记物, 经聚合酶链反应(PCR)制备探针, 建立原位杂交方法进行检测.结果显示: 血清TTV-DNA阳性组, 双链探针检测PBMC中TTV-DNA, 阳性检出率为58.06%(18/31); 血清TTV-DNA阴性组, 双链探针检测PBMC中TTV-DNA, 阳性检出率为27.59%(8/29).双链探针阳性者, 再以负链探针检测其复制情况, 阳性率为22.2%(4/18). 结论: TTV可感染PBMC并在PBMC中复制.     

感染人体的博尔纳病病毒ORFⅠ基因前部片段的检测

目的感染人体的博尔纳病病毒（ＢＤＶ）第一开放阅读框架（ＯＲＦⅠ）基因前部片段的检测至今尚未见报道。通过对先期实验已证实存在ＢＤＶ感染的人体标本和来源于感染动物的病毒标准品进行检测，拟了解感染人和动物的该病毒片段是否存在差异。方法用套式逆转录／多聚酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＲＴ－ＰＣＲ）同时检测１２例ＢＤＶ感染的精神病人和健康献血者的周围血单核细胞和１００ｐｇ／μｌ的ＢＤＶ－ＭＤＣＫ标准病毒株中ＢＤＶＯＲＦⅠ（ｐ４０）基因前部片段。结果１２例人体标本的检测全部呈阴性，而病毒标准品呈阳性结果。结论该研究结果提示，感染人体的ＢＤＶ与来源于动物的ＢＤＶ相比较可能在病毒ＯＲＦⅠ基因片段的前面部分存在着较大的变异或前部片段缺失。该现象值得今后进一步研究。     

博尔纳病病毒感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响

目的分析博尔纳病病毒(BDV)感染对新生大鼠脑内单胺类受体基因转录的影响。方法选择病毒滴度为2·0×106FFU/ml的BDV病毒液对新生大鼠进行颅内接种,接种量为10μl/只新生大鼠。30d后用RT-PCR和间接免疫荧光方法确定BDV感染情况;并采用半定量RT-PCR方法检测BDV感染大鼠脑组织中多巴胺2(D2)受体和5-羟色胺2α(5-HT2α)受体基因的mRNA转录情况。结果病毒接种后新生大鼠的BDV感染阳性率为88·89%。病毒感染大鼠脑组织中5-HT2α受体和D2受体基因的mRNA转录水平均明显低于对照组,差异有统计学意义。结论BDV感染可以明显抑制新生大鼠脑组织中D2受体和5-HT2α受体基因的mRNA转录,提示单胺类受体基因的转录与表达参与BDV感染的致病过程。     

中国慢性疲劳综合征患者血浆中BDV-p24抗体的检测

目的检测博尔纳病病毒(BDV)对中国慢性疲劳综合征(CFS)患者和健康对照者感染的情况,探讨CFS与BDV感染之间的相关性。方法按美国CDC 1994年标准,搜集来自全国十一省市的CFS患者61例和健康对照73例,使用蛋白印迹法(WB)对其血浆进行BDV-p24抗体检测。结果 病例组有7例为阳性结果(11.48％),对照组均为阴性(0％),统计学处理两组间差异有显著意义(P<0.010)。结论中国CFS患者存在BDV感染,病例组感染率明显高于对照组,CFS与BDV感染存在相关性。     

博尔纳病病毒与慢性格林-巴利综合征

博尔纳病病毒(Bornadiseasevirus,BDV)是单股负链RNA病毒,能引起多种动物持续性中枢神经系统感染,导致免疫介导的脑脊髓炎,并与某些人类神经精神疾病有关。本研究旨在探讨BDV感染与格林 巴利综合征(GBS)发病的关系。疾病组为临床诊断的GBS共15例,男10例,女5例,平均年龄37.2岁。15例GBS中急性12例,慢性3例。对照组112例系健康献血者。荧光定量套式RT PCR试剂盒由本校神经疾病研究所和中山大学达安基因诊断中心合作开发,引物和荧光探针序列见表1,扩增BDVp2 4基因片段为86bp。表1　PCR引物和荧光探针序列外引物:P1:5′TGACCCAA…