钩端螺旋体外膜菌苗的研究：Ⅴ,多价外膜菌苗人群接种后免疫效果观察

本文报道了钩端螺旋体外膜菌苗和普通菌苗对人体接种后反应和血清学效果的比较。钩体外膜菌苗组除局部中反应(12.5％)高于普苗组(5.1％)之外,其余与普苗组相似,均较轻微。以抗体水平来看,免疫后1、3及6个月时,钩体外膜菌苗组1针次的GMT均高于普苗组2针次的2～3倍,且有显著性差异(t=2.58,P<0.01)。钩体外膜菌苗较普通菌苗为优。     

钩端螺旋外体膜菌苗不同剂量的接种反应与免疫效果观察

本文报告了含有赖型和七日热型抗原的钩端螺旋体（简称钩体）外膜菌苗免疫４００余人，其中１００μｇ组免疫２００余人，２００μｇ组免疫２００余人，同时设菌体菌苗和安慰剂组各２００余人作为对照，结果反应轻微，仅个别对象出现轻微的体温升高和局部红肿反应，无强反应发生。一针免疫后抗体显著升高，阳转率黄闰出血群赖型达９８．１３％以上，七日热群七日热型达９６．２６％以上，ＧＭＴ分别为２２７．０９和５０．８３以上，     

钩端螺旋体菌苗大面积接种的流行病学效果

钩端螺旋体菌体菌苗(菌体苗)和外膜菌苗(外膜苗)的血清效果早已被证实。已有报道显示菌体苗的流行病学效果也是很理想的,外膜苗能保护实验动物免受钩体野毒株的攻击,但那都是在严格控制实验条件下得出的小范围的试验结果。在大面积人群接种的情况下,菌体苗和外膜苗的流行病学效果如何,值得评价。荆州区1985年出现钩体病暴发流行,自1986     

微量钩端螺旋体菌苗穴位注射效果观察

接种钩端螺旋体菌苗(钩体茵苗)是预防钩端螺旋体病(钩体病)的有效措施之一。但因注射剂量大、次数多,局部肿胀较重,群众不易接受。为此,我们根据中医“足三里是强身固本之穴”的原理,于1987年5月和1988年5月对醴陵市黄哒嘴乡等村民515人进行微量钩体菌苗足三里注射和400人皮下常规法注射,以免疫前后血清抗体测定一个流行季节作为比     

多价钩端螺旋体外膜疫苗的安全性及免疫效果研究

对国内首次研制的多价钩端螺旋体外膜疫苗接种人体安全性和免疫效果进行研究。 10 73名易感青少年随机接种钩端螺旋体三价 (含黄疸出血群赖型、七日热群七日热型、流感伤寒群流感伤寒型 )外膜疫苗、五价 (含黄疸出血群赖型、七日热群七日热型、流感伤寒群流感伤寒型、秋季热群秋季热型、犬群犬型 )外膜疫苗、菌体疫苗和安慰剂 ,分组进行全身和局部的反应观察 ,并以显微镜凝集试验测定各型抗体。结果显示各疫苗组局部和全身反应轻微。三价和五价外膜疫苗免后 1个月和 3个月抗体滴度高于同期相应菌体疫苗诱导的同型抗体滴度 ;且免后 3个月抗体阳转率也较高。提示外膜疫苗较菌体疫苗有更好的免疫原性。     

福建省新丙五价钩端螺旋体菌苗接种后反应与免疫效果的观察

目的对观察对象接种“福建新丙五价”钩体菌体苗基础免疫和一年后加强免疫的反应及效果进行观察。方法观察记录各针次疫苗接种后的反应并采集观察对象免疫前及免疫后20d,90d,180d,360d及再加强免疫后20d的6份血清,用显微镜凝集试验(MAT)测定各群抗体滴度,以抗体滴度≥1∶10为阳性判别标准,计算疫苗接种前后各次各群抗体阳转率和几何平均滴度GMT。结果观察对象均未出现全身反应,局部反应以复种为多,女性复种后反应比男性更严重,差异具有显著性意义。免疫后血清抗体阳转率及几何平均滴度(GMT)均比免疫前有显著的增长,且在免疫后3个月阳转率达高峰为95%以上,一年后维持50%左右,几何平均滴度(GMT)在基础免疫后1个月为1∶:60左右,半年后降为1∶20,一年后为1∶10。再次强化免疫,抗体阳转率迅速上升,高达100%,几何平均滴度(GMT)上升到1∶100。结论“福建新丙五价”钩体菌体苗的安全性及免疫效果是肯定的,只要加强钩体病的监测,菌苗的菌型与当地流行菌群吻合并按照规定程序免疫接种,完全可以预防钩体病的流行。     

3株钩端螺旋体外膜蛋白基因的序列分析

目的 探讨钩端螺旋体外膜蛋白基因在钩体遗传分类中的作用。方法 对我国的2株问号钗体赖型56601株和爪哇型56602株的外膜蛋白基因Ompl1进行PCR扩增,得到外膜蛋白基因并进行了全基因序列分析,测序的2株钩体与流感伤寒型RH52株进行了核苷酸序列比较和推导的氨基酸序列比较。结果 赖型56601和爪哇型56602株钩体Ompl1基因核苷酸序列与流感伤塞型RH52株的同源性分别为89％和80％,的外膜蛋白氨基酸序列的同源性分别为92％和88％。由此可以看出56601株、56602株与RH52株分别属于不同的血清群,这与Yasuda的遗传分类相。结论 我国的赖型56601株和爪哇型56602株及流感伤寒型RH52株Ompl1基因的核苷酸序列存在一定差别,利用Ompl1基因可对钩端螺旋体进行分类和鉴定。     

不同毒力钩端螺旋体属特异性外膜蛋白抗原的分析

目的　了解不同毒力钩端螺旋体株有无属特异性外膜蛋白抗原。方法　TR/ patocⅠ钩体属特异性抗原免疫家兔获得抗血清 ,以显微镜凝集试验检测TR/patocⅠ属特异性抗原抗血清对我国 15群 17型问号钩体和 2群 2型双曲钩体的凝集情况。采用Auran介绍的方法制备问号钩体黄疸出血群赖型 5 6 6 0 1株、波摩那群波摩那型 5 6 6 0 8株和双曲钩体三宝垄群Patoc型patocⅠ株的外膜蛋白 ,用SDS -PAGE及Westernblot分析不同毒力钩体外膜蛋白的电泳特征及与TR/ patocⅠ属特异性抗血清的反应性。结果　钩体TR/ patocI属特异性抗血清能与上述各株钩体发生凝集反应 ,其效价为 1∶2 5 6～ 1∶5 12。三种不同毒力钩体外膜蛋白有相似的SDS -PAGE图谱 ,其主要蛋白组分的分子量约为 6 0kDa ,Westernblot结果证实在约31kDa处有一共同的能与TR/patocI属特异性抗血清发生反应的阳性条带。结论　钩体细胞表面具有属特异性抗原 ,分子量31KDa外膜蛋白可能是属特异性抗原之一。     

伯氏疏螺旋体与苍白密螺旋体、钩端螺旋体的免疫交叉反应抗原研究

目的研究莱姆病螺旋体与梅毒、钩端螺旋体较常出现的交叉反应抗原，明确产生交叉反应的蛋白抗原成分，为精确蛋白免疫印迹法检测莱姆病的阳性判断标准提供参考依据。方法以中国莱姆病螺旋体伽氏疏螺旋体基因型代表菌株PD91作抗原，用蛋白免疫印迹法对梅毒病人和钩端螺旋体病人的血清进行抗体(IgG和IgM)检测。结果共检测梅毒病人血清196份和钩端螺旋体病人血清68份。伯氏疏螺旋体与苍白密螺旋体抗原在75kDa，60kDa，43kDa，41kDa处有交叉，交叉反应阳性率分别为IgG：8．2％、20．4％、9．2％、17．3％，IgM：7．7％、10．2％、8．7％、9．7％；伯氏疏螺旋体与钩端螺旋体抗原的交叉发生在75kDa，60kDa，41kDa，交叉反应阳性率分别为IgG：1．5％、1．5％和13．2％，IgM：8．8％、2．9％、17．6％。结论莱姆病螺旋体蛋白抗原中75kDa，60kDa，43kDa和41kDa蛋白成分与梅毒和钩端螺旋体存在交叉反应。     

少年接种乙肝疫苗的免疫持久性观察

本文以国产血源性乙肝疫苗对98名少年进行了为期4年的观察,结果表明三剂疫苗接种后,T_1抗-HBs阳转率为70.41％,其S/N均值为19.98,于T_3～T_(24)时抗-HBs阳转率达98％,S/N均值分别为65.34、41.75、33.95、23.79。至T_(36)、T_(48)时持续阳性率仍有81.63％、79.59％,S/N均值为12.81、11.18,其中分别有18名、19名抗-HBs转阴。对T_1S/N值>10的47名和<9.9的51名经追踪统计表明,前者的抗-HBs水平、免疫持久性高于后者,而其抗-HBs阴转率高于前者(P<0.05),并对其原因作了分析和讨论。     

细粒棘球绦虫Eg95抗原基因疫苗体外瞬时表达及对小鼠诱导的免疫应答

目的　检测细粒棘球绦虫Eg95抗原基因疫苗(pcDNA3 Eg95)体外瞬时表达,探讨其诱导小鼠的体液和细胞免疫效果。　方法　pcDNA3 Eg95经脂质体转染HeLa细胞瞬时表达。逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测Eg95抗原信使RNA(mRNA)在HeLa细胞中的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)和蛋白质印迹法(Westernblot ting)检测Eg95蛋白的瞬时表达情况。pcDNA3 Eg95基因疫苗肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA检测IgG和IgG2a水平,四甲基偶氮唑盐试验(MTT法)检测免疫小鼠T淋巴细胞增殖反应。　结果　RTPCR检测结果显示,pcD NA3 Eg95瞬时表达组有Eg95抗原基因mRNA表达,ELISA和Westernblotting检测结果表明,可在HeLa细胞中特异性表达Eg95蛋白。用pcDNA3 Eg95基因疫苗免疫BALB/c小鼠,第3周出现特异性IgG免疫应答,持续升高至第10周,显著高于对照组。从第2周开始,小鼠血清IgG2a应答即为阳性,且长时间(至第10周 )维持较高水平,与pcD NA3空质粒组比较,其差异具有非常显著性意义(P<0.01)。用原核表达的Eg95重组蛋白刺激免疫小鼠脾细胞,有明显的T细胞增殖反应。pcDNA3 Eg95基因疫苗免疫组刺激指数明显高于pcDNA3空质粒组(P<0.01)。结论　pcDNA3 Eg95基因疫苗可诱发小鼠产生特异的体液免疫和细     

Exploring the Influence of Hepatitis B Immunoglobulin on the Immune Response to the Hepatitis B Vaccine in a Mouse Model

Background: The extent to which maternal antibodies against the hepatitis B surface antigen (HBsAb) acquired transplacentally affect the immune responses to the hepatitis B vaccine (HBVac) in infants is still uncertain.Objective: To explore the impact of the HBsAb on the immune response to the HBVac in a mouse model.Methods: According to the doses of the HBVac (2, 5 μg) injected, 267 BALB/c mice were divided into two groups. Each group was subdivided into 3 subgroups based on the doses of the hepatitis B immunoglobulin (HBIG) (0, 25, 50 IU) administered. The HBsAb titers were detected 4 weeks after completing the HepB vaccination. Results: Among all the mice, 40 had an HBsAb titer <100 mIU/mL (non- or low-response to the HBVac). The rates of the HBsAb titer <100 mIU/mL in 0, 25 and 50 IU HBIG groups were 1.1%, 23.1%, and 20.7%, respectively. Multivariate logistic regression analysis showed that the risk factors for low- or non-response to the HBVac were injection with the HBIG, low HBVac dose, and hypodermic injection. The mean HBsAb titers (log10) reduced gradually in the 0, 25 and 50 IU HBIG groups (P<0.001).Conclusion: The HBIG administration has negative impacts on the peak level of the HBsAb and the rate of an effective immune response. This implies that the maternal HBsAb acquired transplacentally might inhibit the immune responses to the HBVac in infants.     

问号澳洲型钩端螺旋体复合抗原基因ompL_1/flaB_2表达质粒的构建

目的　为增强澳洲型钩端螺旋体 (简称澳洲型钩体 ) 6 0 7株抗原的免疫原性 ,而构建其外膜蛋白抗原基因ompL1和内鞭毛抗原基因flaB2 的复合抗原基因重组质粒。方法　通过聚合酶链反应扩增ompL1及flaB2 ,将其分别克隆到pcD NA3 1/Myc-His(+)载体T7启动子下游 ,进行序列测定分析 ,在此基础上将ompL1及flaB2 同时克隆至表达载体 pcD NA3 1/Myc -His(+) ,构建成A - pcLMF1复合抗原基因表达质粒。结果　澳洲型钩体 6 0 7株的ompL1及flaB2 与报道的其它株钩体的序列呈很高的同源性。澳洲型钩体重组质粒A -pcLMF1经酶切鉴定证实 :有一 1 8kb片段插入。结论　澳洲型钩体复合抗原基因ompL1/flaB2 融合表达质粒构建成功     

乙型及丙型肝炎DNA疫苗联合重复接种小鼠的免疫应答

目的 :观察由编码 HBs Ag与 HCV- CE2 抗原的两种重组真核细胞表达质粒制备的 DNA疫苗重复联合接种 BAL B/c小鼠后 ,其诱生的特异性免疫应答反应。方法 :应用上述两种 NDA疫苗重复联合免疫小鼠 ,动态观察血中特异性抗体水平、特异性细胞毒性 T淋巴细胞 (CTL )体外杀伤活性 ,并进行 CTL杀伤活性活体诱生实验。结果 :两种 DNA疫苗联合重复免疫小鼠 ,能够诱生机体特异性体液免疫及细胞免疫完全应答。其小鼠荷瘤表达目的抗原的靶细胞后 ,生存率明显高于未免疫鼠 (P <0 .0 5 )。结论 :乙型及丙型肝炎联合 DNA疫苗的重复接种 ,可有效地诱生小鼠机体特异性免疫应答反应。 DNA疫苗诱生的 CTL应答可与体液免疫应答分离存在 ,可能是 DNA疫苗免疫保护的更重要方面。     

问号钩端螺旋体重要蛋白研究进展

钩端螺旋体(简称钩体)外膜蛋白(outer membrane proteins,OMPs)位于钩体表面,与宿主细胞直接接触,是重要的蛋白抗原。钩体OMPs是抗体和补体的作用部位,在致病和免疫应答过程中起重要的作用。一些钩体的外膜蛋白或外膜脂蛋白被证实有良好的抗原性和高度的基因保守性,其抗体具有广泛的交叉免疫凝集作用,这使得新一代基因工程疫苗开发成为可能。本文主要对钩端螺旋体几种重要OMPs的细胞定位、基因结构、在感染动物中的表达状态、在免疫保护中的作用等进行综述。     

问号钩体鞭毛蛋白相关基因分析

目的 分析问号钩体黄疸出血群赖型赖株鞭毛蛋白相关基因。为进一步实验研究提供信息和线索。方法 使用在线数据库和分析软件NCBI／Blast，ProDom／Blast等对问号钩体全基因组ORF基因进行诠释，对编码蛋白进行在线分析。并将问号钩体的鞭毛蛋白基因与E．coliK-12、伯氏疏螺旋体(BBU)和苍白密螺旋体(TPA)的鞭毛蛋白基因进行了比较。结果 确定了问号钩体黄疸出血群赖型赖株染色体上约55个与鞭毛相关蛋白的基因，同其他3个细菌的鞭毛相关基因进行比较分析，推测出了钩体鞭毛结构模型图及其装配过程。结论 通过比较，不同螺旋体的内生鞭毛形成机制存在差别．但是FlgF蛋白缺失可能是其一个共同机制；尽管为内生鞭毛，问号钩体鞭毛在结构组成和鞭毛装配过程上却与E．coli相似；问号钩体的钩形成调控和鞭毛丝结构与E．coli不同；在鞭毛形成过程中的转录调控机制也存在差异。     

Immune Response after the Fourth Dose of SARS-CoV-2 mRNA Vaccine Compared to Natural Infection in Three Doses’ Vaccinated Solid Organ Transplant Recipients

Solid organ transplant recipients (SOTRs) show higher rates of COVID-19 breakthrough infection than the general population, and nowadays, vaccination is the key preventative strategy. Nonetheless, SOTRs show lower vaccine efficacy for the prevention of severe COVID-19. Moreover, the emergence of new SARS-CoV-2 variants of concern has highlighted the need to improve vaccine-induced immune responses by the administration of repeated booster doses. In this study, we analyzed the humoral and cellular responses in a cohort of 25 SOTRs, including 15 never-infected SOTRs who received the fourth dose of the mRNA vaccine and 10 SOTRs who contracted SARS-CoV-2 infection after the third dose. We analyzed the serum IgG and IgA levels through CLIA or ELISA, respectively, and the Spike-specific T cells by ELISpot assay. We report a significant increase in anti-Spike IgG and no differences in IgA secretion in both groups of patients before and after the booster dose or the natural infection. Still, we show higher IgA levels in recovered SOTRs compared to the fourth dose recipients. Conversely, we show the maintenance of a positive Spike-specific T-cell response in SOTRs who received the fourth dose, which, instead, was significantly increased in SOTRs who contracted the infection. Our results suggest that the booster, either through the fourth dose or natural infection, in vulnerable poor responder SOTRs, improves both humoral and cellular-specific immune responses against SARS-CoV-2.     

钩端螺旋体L型稳定株致病性的实验研究

本文应用广泛性脑梗塞患者分离的、经免疫荧光与免疫酶染色证明为钩端螺旋体（简称钩体）L型的稳定株并以钩体原型为对照，感染豚鼠，感染次日两组动物体温均升高，感染原型组4／5从血液分离出钩体，L型组3／5分离出L型。2月后处死两组豚鼠取血分离，原型组钩体已从血中消失，而L型仍有3只分离出L型。病理切片证明两组病变主要为心、骨骼肌、肺、眼的间质性失，并有肝窦、小动脉狭窄，肺出血明显，脊髓前角神经细胞变性，原型组中有1只在肾曲小管中见有L型。结果表明，钩体L型稳定株可长期在血中存活能引起眼、神经后发症。原型感染后从血中迅速消失，但L型在肾中存在。说明原型在体内可转变为L型，并从尿中排出，成为一重要的传染源。