心肌缺血再灌注损伤亚细胞Ca~(2 )反常与ATP酶泵功能抑制

目的　研究心肌缺血再灌注损伤亚细胞Ca2 分布、含量及ATPase活性变化 ,探讨Ca2 反常与ATP酶泵功能抑制的关系。方法　采用离体心脏灌注模型 ,电子探针显微分析测定心肌缺血再灌注原位亚细胞Ca2 变化 ;电镜酶细胞化学及生化方法测定ATPase分布及活性变化。结果　心肌缺血 30min再灌注 30、6 0min肌浆网及肌膜Ca2 明显减少 (P <0 .0 1) ,而胞浆及线粒体内Ca2 明显增加 (P <0 .0 1)。再灌注肌浆网及肌膜Ca2 减少与胞浆及线粒体Ca2 增加呈负线性相关 ,r分别为- 0 .96 4和 - 0 .994,胞浆与线粒体Ca2 变化呈正线性相关 ,r为 0 .997。心肌缺血 30minATPase活性明显降低 ,缺血 30min再灌注 30及 6 0min进一步加重。结论　心肌缺血再灌注Ca2 超载发生在亚细胞水平 ,即亚细胞Ca2 的重新分布。ATPase泵功能抑制是心肌缺血再灌注亚细胞Ca2 紊乱的直接原因之一。     

辛伐他汀对大鼠局灶性脑缺血的线粒体保护作用

目的：探讨辛伐他汀对局部脑缺血损伤大鼠的保护作用及其线粒体机制。方法：96只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和辛伐他汀处理组，每组32只。建立大鼠大脑中动脉闭塞（MCAO）模型，观察大鼠神经功能、梗死体积、脑组织线粒体超微结构的改变；检测线粒体细胞色素c氧化酶（COX）、琥珀酸脱氢酶（SDH）活性，Ca^2＋含量，以及血清降钙素基因相关肽（CGRP）含量。结果：与假手术组相比较，缺血再灌注组各项指标均有显著改变；与缺血再灌注组比较，辛伐他汀能明显提高脑缺血大鼠的神经功能评分（P〈0．01），缩小梗死体积（P〈0．01），改善脑组织线粒体结构，并提高脑组织线粒体SDH活性（P〈0．05），提高COX活性（P〈0．01），降低脑组织线粒体Ca^2＋的含量（P〈0．01），提高血清CGRP水平（P〈0．05）。结论：辛伐他汀可能通过其抗氧化效应，提高脑组织线粒体SDH、COX活性及血清CGRP水平，减轻钙超载，缩小梗死体积，改善神经功能，从而对大鼠局灶性脑缺血起保护作用。     

低能量氦氖激光血管内照射对缺血再灌注心肌超微结构的影响

目的：探讨低能量氦氖激光血管内照射（ILIB）对缺血再灌注心肌组织超微结构的影响。方法：通过结扎冠状动脉阻断冠状动脉血流，复制家兔急性心肌缺血-再灌注损伤动物模型。将家兔随机分为4组：假手术组、心肌缺血30min组、缺血30min再灌注30min组、缺血30min再灌注30min＋ILIB组。在透射电镜下观察各组心肌超微结构的变化。结果：假手术组心肌纤维呈阶段性收缩、间质水肿、线粒体轻度肿胀、间质可见闭塞的毛细血管；心肌缺血组心肌纤维排列紊乱、肌浆水肿、线粒体水肿、血管扩张、血管结构破坏、血管内可见白细胞镶嵌；缺血再灌注组心肌纤维排列相对整齐、线粒体水肿不明显、肌浆水肿较轻、心肌间质可见轻度毛细血管扩张淤血；缺血再灌注＋ILIB组心肌纤维排列整齐、线粒体无肿胀、间质毛细血管内可见红细胞、无毛细血管内白细胞镶嵌现象、毛细血管管腔通畅、血管壁较完整。结论：ILIB可使缺血再灌注心肌超微结构基本恢复正常，对心肌有保护作用。     

钙敏感受体与缺血/再灌注损伤诱发心肌细胞凋亡的线粒体途径的关系

目的探讨钙敏感受体（CaR）参与心肌缺血／再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制。方法Langendorff离体灌流的方法复制心脏缺血／再灌注模型。观察缺血／再灌注和加入CaR激动剂时CaR的表达情况。TUNEL染色观察不同组别细胞凋亡,应用激光扫描共聚焦显微镜观察大鼠心肌细胞的线粒体膜电位的变化。Western blot检测心肌组织线粒体中细胞色素C及Bcl-2的表达。结果心肌缺血／再灌注和加入CaR激动剂时CaR的表达明显高于对照组（P均〈0．01）。TUNEL染色发现缺血／再灌注组和激动剂组细胞凋亡率明显增加（P均〈0．05）,同时此两组的线粒体膜电位下降明显（P均〈0．05）,线粒体细胞色素C与Bcl-2的表达也明显下降（P均〈0．05）。结论CaR激活在缺血／再灌注时通过诱发线粒体损伤,促进细胞凋亡。     

亚低温对大鼠缺血再灌注海马区线粒体钙及胞浆游离钙的影响

目的探讨亚低温对脑缺血／再灌注（I／R）损伤的保护作用机制，为临床脑缺血患者亚低温治疗提供理论依据。方法采用改良线栓法建立局灶性大鼠大脑中动脉I／R模型，将健康Wistar大鼠随机分为假手术组、常温（36．0℃～37．0℃）缺血组、亚低温（32．0℃～33．℃0）缺血组，其中后两组又根据观察时间点不同分为缺血2h再灌注2、4、6h三个亚组，观察各时间点大鼠缺血侧脑海马区线粒体钙含量（[MCa]）及胞浆游离钙含量（[Ca^2＋]．）的变化。结果与假手术组比较，常温缺血组和亚低温缺血组各观察时间点缺血侧脑海马区[MCa]显著降低，而[Ca^2＋]；明显增高（P〈0．05）；与常温组比较，亚低温缺血组大鼠缺血侧海马区[MCa]显著增高，[Ca^2＋]；明显降低（P〈0．05）。结论亚低温能有效抑制I／R损伤后海马区神经元细胞的钙超载．恢复线粒体能量代谢，从而稳定线粒体贮钙功能。     

倒卵叶五加总皂甙对大鼠心肌顿抑的作用

目的　探讨倒卵叶五加总皂甙 (SAOH)对大鼠缺血心肌再灌注后心肌顿抑的作用。方法　采用结扎左冠状动脉前降支 30 m in,再灌注复制大鼠心肌缺血 /再灌注损伤 (IRI)的模型 ,结扎前 10 min注射 SAOH,采用左心室插管 ,动态监测左心室心功能 ,并测定心肌再灌注 40 m in时心肌组织三磷腺苷酶 (ATPase)的活性和血浆一氧化氮(NO)。结果　 IRI组、SAOH1 组 (5 0 mg/ kg)及 SAOH2 组 (10 0 m g/ kg)在缺血及再灌注过程中左心室收缩压和室内压上升或下降最大速率 (L VSP和± d P/ dtmax)均呈进行性下降 ,但 SAOH组下降趋势较缓。 SAOH组在整个再灌注过程中 ,L VSP和± d P/ dtmax均较 IRI组明显提高 ,甚至 SAOH2 组的 +d P/ dtmax值在再灌注即刻、再灌注 10 m in时即高于假手术组 (P均 <0 .0 1) ,再灌注 2 0 m in、30 min时与假手术组无明显差异。再灌注 40 min时 ,SAOH1 组、SAOH2 组较 IRI组心肌肌膜 Na+- K+- ATPase、Ca2 +- ATPase、Mg2 +- ATPase活性和血浆 NO水平明显升高 (P均<0 .0 1)。结论　 SAOH对心肌顿抑有明显的改善作用 ,其机制之一可能与其提高心肌组织 ATPase活性和血浆NO含量 ,减少 Ca2 +超载有关。     

心肌缺血再灌注损伤肌浆网Ca^2＋—ATPase活性变化电镜酶细胞化学观察

心肌缺血再灌注损伤肌浆网Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性变化电镜酶细胞化学观察（摘要）谷天祥肖德绵张显清谷春久石玉秀李厚文姜桂娥王天骄应用电镜酶细胞化学技术观测大鼠离体缺血再灌注心肌细胞肌浆网、细胞膜原位Ｃａ２＋－ＡＴＰａｓｅ活性变化，旨在探讨心肌缺血再灌...     

诱导型一氧化氮合酶和解偶联蛋白-2对心肌缺血预适应的作用

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）和解偶联蛋白-2（uncoupling protein-2,UCP2）对大鼠心肌缺血预适应的保护机制。方法 结扎左冠状动脉复制大鼠心肌缺血再灌注模型。预适应组行3次缺血5min,再灌注10min的预处理,分别于预处理0,6,12,24和48h（分别为0,6,12,24和48h亚组）后行30min缺血及120min再灌注：对照组开胸后不结扎左冠状动脉,电镜观察心肌超微结构,据Rainio评分标准进行心肌超微结构损伤程度的半定量分析。采用Western Blot及比色法检测心肌UCP2活性及iNOS活性。结果 预适应各亚组UCP2活性均增高（P〈0．05）,0h亚组UCP2表达水平最高（P〈0．01）,24小时亚组和48小时亚组心肌iNOS活性显著升高（P〈0．05）。结论 UCP2和iNOS共同参与了大鼠心肌缺血预适应心肌保护作用。     

低能量氦氖激光血管内照射对缺血再灌注心肌超微结构的影响

目的:探讨低能量氦氖激光血管内照射(ILIB)对缺血再灌注心肌组织超微结构的影响。方法:通过结扎冠状动脉阻断冠状动脉血流,复制家兔急性心肌缺血-再灌注损伤动物模型。将家兔随机分为4组:假手术组、心肌缺血30min组、缺血30min再灌注30min组、缺血30min再灌注30min+ILIB组。在透射电镜下观察各组心肌超微结构的变化。结果:假手术组心肌纤维呈阶段性收缩、间质水肿、线粒体轻度肿胀、间质可见闭塞的毛细血管;心肌缺血组心肌纤维排列紊乱、肌浆水肿、线粒体水肿、血管扩张、血管结构破坏、血管内可见白细胞镶嵌;缺血再灌注组心肌纤维排列相对整齐、线粒体水肿不明显、肌浆水肿较轻、心肌间质可见轻度毛细血管扩张淤血;缺血再灌注+ILIB组心肌纤维排列整齐、线粒体无肿胀、间质毛细血管内可见红细胞、无毛细血管内白细胞镶嵌现象、毛细血管管腔通畅、血管壁较完整。结论:IL-IB可使缺血再灌注心肌超微结构基本恢复正常,对心肌有保护作用。     

参附注射液对缺血/再灌注损伤诱导大鼠心肌细胞凋亡的实验研究

目的:通过观察参附注射液对缺血/再灌注损伤时,心肌细胞超微结构及心肌细胞凋亡参数的影响,探讨参附注射液拮抗心肌缺血/再灌注损伤的作用机制。方法:建立心肌缺血/再灌注损伤模型,结扎大鼠左冠状动脉前降支(LAD)30min,再灌注10min。将46只大鼠随机分为5组,(Ⅰ)假手术组;(Ⅱ)对照组心肌缺血30min+生理盐水;(Ⅲ)对照组心肌缺血30min/再灌注10min+生理盐水;(Ⅳ)给药组心肌缺血30min+参附注射液;(Ⅴ)给药组心肌缺血30min/再灌注10min+参附注射液。以上各组分别采集相同部位的心室肌组织;应用透射电镜观察心肌细胞超微结构,通过CIMAS多功能真彩色病理图像分析CIMAS系统对心肌细胞线粒体进行体视学分析。原位标记TUNEL法凋亡的心肌细胞,免疫组化方法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达,病理图像分析系统进行凋亡心肌细胞、Bcl-2及Bax蛋白的表达分析。结果:与假手术组比较,给药组(Ⅳ、Ⅴ)心肌细胞的Bcl-2蛋白表达显著增多(P0.05),Bax蛋白表达略增加(P0.05)和显著降低(P0.05),心肌细胞凋亡明显减少(P0.05);心肌细胞组织结构损害明显减轻;对照组与假手术组比较线粒体有显著变化(P0.01),给药组(Ⅳ、Ⅴ)与假手术组比较线粒体变化程度差异无统计学意义(P0.05)。结论:参附注射液能明显抑制心肌缺血/再灌注损伤引起的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达和保护线粒体相关。