土鳖虫纤溶活性蛋白抗小鼠血栓形成作用研究

目的:研究土鳖虫纤溶活性蛋白的抗凝、纤溶和抗血栓形成作用。方法:小鼠灌胃土鳖虫纤溶活性蛋白后,取血浆测定白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT),测定组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和其抑制物(PAI)的活性;用角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成,测量尾部血栓形成的长度。结果:土鳖虫纤溶活性蛋白能够显著延长小鼠TT,使t-PA活性增强,同时抑制PAI的活性,显著抑制角叉菜胶所致的尾部血栓形成。结论:土鳖虫纤溶活性蛋白能部分抑制凝血途径,激活纤溶系统,抑制血栓形成。     

水蛭不同工艺提取物抗凝与纤溶活性比较及酶解物组成分析

目的:比较水蛭不同提取工艺的抗凝溶栓作用;初步确定水蛭酶解产物的化学成分组成。方法:通过活化部分凝血活酶时间(APTT)试验及纤维蛋白平板试验,比较水蛭胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解、仿生酶解、醇提、水煎提取物的体外抗凝与纤溶活性差异。采用Sephadex G-100凝胶柱色谱法对优选提取物进行进一步分离纯化,并采用MALDI-TOF-质谱法对其组成进行分析。结果:与生理盐水组比较,在相同的剂量下,水蛭胃蛋白酶酶解物可明显延长大鼠APTT,并具有较强的纤溶作用,其余几种提取物的作用不明显。胃蛋白酶酶解物经Sephadex G-100凝胶柱色谱分离纯化的活性部位经MALDI-TOF-质谱法检测为分子量在700～3 200之间的一组寡肽。结论:胃蛋白酶酶解是水蛭较为理想的提取方法,其有效部位的组成为寡肽。     

少棘蜈蚣活性蛋白提取及纤溶作用性质研究

目的 研究少棘蜈蚣活性蛋白的纤溶性及其性质.方法 通过硫酸铵分段盐析、DEAE纤维素柱和Sephadex G-75柱层析从少棘蜈蚣Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch组织分离纯化出纤溶性活性蛋白,纤维蛋白平板法测定其纤溶性,SDS-PAGE测定样品纯度和分子量,温度、pH改变对少棘蜈蚣纤溶性蛋白活性的影响.结果 分离纯化到一种相对分子质量约为48.3 kD的纤溶性蛋白,水解纤维蛋白的比活力为42.36 u/mg.结论 少棘蜈蚣活性蛋白具有纤溶性,该成分在40℃下基本稳定,最适温度35℃,最适pH8.0.     

黄瓜籽蛋白纤溶活性及抗凝溶栓作用研究

目的探讨黄瓜籽蛋白的纤溶酶活性、抗凝血和溶栓作用。方法纤溶酶活性测定采用纤维蛋白平板法;采用目内眦取血法和断尾法考察黄瓜籽蛋白对小鼠凝血和出血时间的影响;通过建立大鼠颈总动脉血栓模型,考察黄瓜籽蛋白的溶栓作用。结果黄瓜籽蛋白纤溶酶活性为:(1 632.26±117.33)IU/g;抗凝血实验对照组、黄瓜籽蛋白中、高剂量组小鼠出血时间和凝血时间均显著延长(p<0.01),表明黄瓜籽蛋白具有良好的抗凝血作用;溶栓实验结果表明,对照组、黄瓜籽蛋白低、中、高剂量组大鼠血栓湿重均显著减轻(P<0.01),对大鼠颈总动脉血栓形成具有明显的抑制作用。结论黄瓜籽蛋白具有较为显著的纤溶、抗凝血和溶解血栓的活性。     

蝎毒纤溶活性肽预处理对缺氧血管内皮细胞抗凝和纤溶功能的影响

目的 应用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧模型,探讨蝎毒纤溶活性肽(SVFAP)对缺氧损伤内皮细胞的保护作用.方法 对培养的HUVECs传代并分组:对照组常规培养;缺氧组将其放入含95% N2、5% CO2混合气体的缺氧环境中培养12 h,制备HUVECs缺氧损伤模型;药物干预组分别将终浓度为2,4,8 mg/L的SVFAP加入细胞培养液中进行培养,1 h后进行缺氧模型复制.观察各组细胞培养上清液中漂浮细胞数、抗凝、纤溶指标等变化.结果 与对照组相比,模型组培养液中的漂浮细胞数显著增高,前列环素(6-keto-PGF1α)和NO水平显著下降,组织型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)活性增高,组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性显著降低; 蝎毒纤溶活性肽在较高剂量组能显著提高6-keto-PGF1α和NO水平、调节PAI-1和t-PA活性.结论 实验制备的HUVECs缺氧损伤模型存在着内皮细胞(EC)受损, 纤溶、抗凝功能失调; 蝎毒纤溶活性肽对缺氧环境下受损EC具有保护作用.     

中药影响纤溶系统活性的实验研究

中药影响纤溶系统活性的实验研究谢文光魏钰书王会信周良玉周承富蒋滋慧(四川川北医学院附属医院南充637000)为了探讨中药对纤溶系统的调节作用,我们分别用尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA),组织型纤溶酶原激活剂(tPA)激活纤溶酶原的纤溶试验,观察了20种常用活血化瘀中药和27种其它类药物对纤溶的影响。1材料与方法1.1材料被测药品均来源于本院药剂科,由本院中药室主管药剂师鉴定,符合《中国药典》规定。6542(5mg/ml)、氨....     

穿心莲提取物增强纤溶活性的初步研究

穿心莲提取物增强纤溶活性的初步研究汪斌，唐锦治，张瑶珍已证实穿心莲提取物（ＡＰＮ）在体内有抑制血小板聚集、降低全血粘度和促进纤溶的作用（１）。我们进一步观察ＡＰＮ在体内对纤溶活性的影响，结果如下。临床资料观察对象（１）健康人１０名，男、女各５名，年龄...     

蝎毒纤溶活性肽对血管内皮细胞分泌纤溶因子的影响

目的　研究蝎毒纤溶活性肽 (SVFAP)对血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂 (t -PA)和纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI - 1)的影响。方法　将不同浓度SVFAP与脐静脉内皮细胞共同孵育 10min及 4h后 ,分别收集培养液 ,以发色底物法测定培养液中t-PA和PAI -1的活性。结果　SVFAP在用药后 10min及 4h各浓度大多使t-PA活性增强 ,PAI - 1活性降低 ,t-PA/PAI - 1比值升高。结论　SVFAP的纤溶作用与抑制内皮细胞分泌PAI - 1和促进t-PA释放有关。     

地龙的纤溶、抗凝、溶栓和血流变作用研究

地龙又名蚯蚓 ,属寡毛纲动物 ,具清热、定惊、通络等功效 ,在我国中医药应用已有数千年历史。国内外自 1983年 ,日本学者Mihara等人发现人口服蚯蚓水提物后外周血纤溶酶活性明显增高〔1〕,对此动物药研究极为关注 ,尤以对血凝系统的药理作用研究最多 ,现就近十余年来这方面的研究文献予以综述如下。1　纤溶、抗凝、溶栓作用1 1　提取液的作用1 1 1　体外试验 :郭丰涛等报道 ,直径 3mm长2 0 0mm的家兔静脉血栓浸于约 1∶1的 37℃地龙液中 ,6 5h后按体外溶解纤维蛋白凝胶活性测定法 ,血栓可全部溶解 ,提示 1∶1的地龙液有明显的纤溶溶栓作用…     

蝉蜕质量标准提升研究

目的:建立并完善蝉蜕质量标准。方法:参照2015年版《中华人民共和国药典》相关方法对12批蝉蜕进行性状、显微和薄层鉴别研究,并分别测定了水分、总灰分、酸不溶性灰分、黄曲霉毒素、重金属及有害元素和浸出物的含量,通过高效液相色谱法测定4种核苷成分含量,建立蝉蜕水溶性成分HPLC指纹图谱。结果:不同批次蝉蜕的性状和显微特征较一致;氨基酸薄层色谱斑点清晰,分离度良好;水分含量为6.99%～11.44%;总灰分为17.98%～28.88%,酸不溶性灰分为13.57%～26.95%;浸出物含量为4.57%～10.59%;铅、镉、砷、铬和汞含量分别为1.730～10.300 mg/kg、0.050～1.300 mg/kg、1.200～5.700 mg/kg、5.200～17.300 mg/kg、0.007～0.115 mg/kg;蝉蜕样品均未检出黄曲霉毒素;4种核苷成分含量低且差异大,暂不纳入质量标准。12批蝉蜕样品的高效液相色谱指纹图谱相似度均大于0.900。结论:本研究所建立的方法操作简单、准确度高、重现性好,可用于蝉蜕的质量控制。     

大孔树脂吸附蝉蜕水提醇沉物有效组分的动力学研究

目的：研究大孔树脂对蝉蜕水提醇沉物有效组分的静态吸附动力学特征。方法：以凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、血凝-纤溶药效为主要筛选指标,通过静态吸附实验确定大孔树脂型号;以考马斯亮蓝为显色剂,检测并绘制吸附动力学曲线,确定NKA-9 型树脂分离纯化蝉蜕有效组分的动力学模型。结果：NKA-9 型树脂对蝉蜕水提醇沉物有效组分分离纯化能力最高,拟二级动力学方程可很好地描述吸附动力学过程。结论：吸附速率主要由颗粒内扩散控制。     

不同加工工艺鹿茸的蛋白成分和活性比较

比较冻干、冷冻和传统热加工工艺制备的鹿茸药材的蛋白成分和活性差异,并探讨加工工艺对鹿茸药效的影响.用Folin-酚法测定冻干鹿茸水溶性蛋白含量最高(126.54 mg/g),为热炸茸的13.1倍;蛋白在SDS-PAGE电泳上分布广,以分子量60.0 kDa～50.0 kDa的蛋白浓度最高.冻干鹿茸水提物促大鼠成骨样细胞增殖活性(MTT法)高达245.25%,是传统热炸鹿茸的2.2倍;IGF-I分泌量也高达66.3 ng/ml,是热炸茸的1.2倍;抑制肝癌细胞活性为47.64%,是热炸茸的1.4倍.冷冻鲜茸的活性虽低于冻干茸,但也远高于热炸茸.结果说明冻干有可能最大限度地保存鹿茸的活性蛋白,有利于提高鹿茸的药效.     

肿节风不同提取方法的比较研究

目的:对肿节风的不同提取方法进行比较研究.方法:采用冷浸提取、渗漉提取、回流提取、连续回流提取、超声提取、微波萃取六种不同的方法进行提取,并对提取物的收率进行比较,同时以富马酸含量为考察指标进行含量测定.结果:采用六种不同的提取方法提取所得提取物的收率及有效成分的含量有较大的差异,其中回流提取及连续回流提取所得提取物的收率相对较高,而超声提取及微波萃取所得提取物中有效成分的含量相对较高.结论:与其它方法相比,微波提取法具有提取快速,节省时间、溶剂和能源,所提取的有效成分含量较高等优点.     

丹参不同提取工艺比较

通过丹参多种提取工艺的比较（传统水煎法、乙醇回流法、动态温浸法、超声波法、渗漉法等）,以丹参素、原儿茶醛、丹参酮ⅡＡ为指标成分,采用高效液相色谱法测定提取量,为丹参制剂的前处理提供实验依据。     

丹参提取工艺研究

目的优选丹参有效成分最佳提取工艺。方法通过多种提取工艺(传统水煎法、乙醇回流法、超声波法、超临界萃取法)的比较,以丹参素和丹参酮ⅡA为指标成分,优化最佳提取工艺。结果CO2超临界流体萃取法提取具有较高的丹参素和丹参酮ⅡA有效成分含量。结论CO2超临界流体萃取法可以用于丹参有效成分的提取,为丹参制剂的前处理提供实验依据。     

青钱柳黄酮类成分不同提取方法及药理活性研究

青钱柳具有"医学界第三棵树"的美誉,其芽叶加工成的青钱柳茶在治疗"三高症"方面有显著的效果,黄酮类化合物是青钱柳的主要有效成分。青钱柳黄酮具有降血糖、抗氧化、抗菌、抗急性肝损伤等药理作用,其提取方法包括溶剂提取、超声辅助、微波辅助,酶水解等。对青钱柳黄酮化学成分及提取、活性研究等方面进行综述总结,为青钱柳的进一步研究和开发应用提供参考。     

水提取法和仿生提取法研究菲牛蛭不同炮制品的体外抗凝活性

目的:采取不同的提取方法研究菲牛蛭炮制前后抗凝活性变化。方法:分别采用水提取法及模拟胃肠道环境的仿生提取法提取菲牛蛭活体冻干品、清水吊干品、滑石粉烫制品、酒浸闷烘品中的活性成分,测定活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、抗凝血酶活性4个凝血指标,并采用Lorry法测定其蛋白含量,综合评价2种提取方法下的菲牛蛭及其炮制品的抗凝活性。结果:无论是水提取法,还是仿生提取法,APTT、PT、TT均显示炮制后抗凝活性降低,抗凝活性顺序为活体冻干品>清水吊干品>酒浸闷烘品>滑石粉烫制品,此结果与抗凝血酶活性及蛋白含量顺序一致。结论:高温炮制方法会降低菲牛蛭的抗凝活性。     

不同提取方式对舒胸片方化学成分及其药理活性的影响研究

目的 研究微波辅助提取与传统提取对舒胸片方中有效成分、指纹图谱及药效等多个指标的影响,比较两种提取方式对提取舒胸片方的差异,确定微波技术在舒胸片方提取方面的可行性.方法 采用高效液相色谱法,对舒胸片方微波辅助及传统法水提取物进行含量、指纹图谱研究,结合大鼠急性血淤模型,以全血黏度、血浆黏度、红细胞聚集指数、纤维蛋白原含量等为指标,考察不同提取方式的舒胸片方对急性血淤模型大鼠血液流变学、凝血时间的影响.结果 微波辅助提取对舒胸片方中的有效成分(阿魏酸、羟基红花黄色素A)含量高于传统法;两种提取方式的指纹峰成分含量略有差异;微波提取组降低全血黏度、红细胞聚集指数及全血低切相对指数较传统提取组明显.结论 微波辅助提取舒胸片方优于传统提取工艺.     

西洋参中皂苷类成分提取方法对比

目的:选择更好的西洋参提取方法,提高人参皂苷的提取率。方法:以人参总皂苷、人参皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1、Rg2等7种主要单体皂苷收率为指标,用高效液相色谱法进行含量测定,比较热回流提取、超声波提取、罐组式逆流提取、组罐式超声波提取四种方法各自的优劣。结果:组罐式超声波提取是最佳的提取方法,它可以在保证提取效率的前提下,减少溶剂的用量,降低提取温度。结论:组罐式超声波提取法可望广泛地应用在制药工业上。