脑缺血海马CA1区5-HT变化的免疫组织化学研究

目的：观察脑缺血及缺血再灌流海马ＣＡ１区５－ＨＴ的变化，探讨脑缺血海马ＣＡ１区神经元损伤与５－ＨＴ变化的关系。方法：用免疫组织化学ＡＢＣ法及图像分析技术对沙土鼠脑缺血海马ＣＡ１区５－ＨＴ含量变化进行研究。结果：（１）脑缺血１０ｍｉｎ时，沙土鼠海马ＣＡ１区５－ＨＴ免疫反应阳必纤维的平均光密度值（ＯＤ）与对照组比较无显著性差异。而缺血３０ｍｉｎ时，ＯＤ值则下降，４ｈ时下降得更多，Ｐ〈０．０５。（２）脑     

大脑5－HT的变化及5－HT_2受体拮抗剂赛庚啶对沙土鼠脑缺血的影响

本文研究大脑组织５－ＨＴ及其代谢产物变化以及５－ＨＴ＿２受体拮抗剂赛庚啶对脑缺血损伤的防治作用。实验共分三部分，结果是：（１）在沙土鼠急性前脑缺血模型证明，缺血１０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，及缺血３０ｍｉｎ再灌２ｈ，可见脑组织５－ＨＴ减少，说明脑缺血时脑组织释放５－ＨＴ增加而摄取减少，５－ＨＴ代谢产物５ＨＩＡＡ缺血后也见减少，但再灌后明显增加。（２）５－ＨＬ＿２受体拮抗剂赛庚啶可减轻沙土鼠缺血５ｍｉｎ再灌７天后海马ＣＡ＿１区神经元迟发性损伤，给赛庚啶组ＣＡ＿１区神经元数为１６８．７９±６２．５／ｍｍ，而生理盐水对照组为８４．７２±８７．３１／ｍｍ。（３）赛庚啶对沙土鼠单侧脑缺血能减少脑组织水及钠含量改善脑水肿及减少脑组织Ｃａ￣（２＋）含量。从５－ＨＴ＿２受体拮抗剂的作用说明，５－ＨＴ可通过５－ＨＴ＿２介导加重脑缺血时神经元损伤，加重脑水肿和脑组织Ｃａ＿（２＋）聚积，５－ＨＴ＿２受体拮抗剂可减轻缺血性脑损伤。     

大脑5—HT的变化及5—HT2受体拮抗剂赛庚啶对沙土鼠脑缺血…

本文研究大脑组织５－ＨＴ及其代谢产物变化以及５－ＨＴ２受体拮抗剂赛庚啶对脑缺血损伤的防治作用。实验共分三部分，结果是：（１）在沙土鼠急性前脑缺血模型证明，缺血１０ｍｉｎ，３０ｍｉｎ，及缺血３０ｍｉｎ再灌２ｈ，可见脑组织５－ＨＴ减少，说明脑缺血时脑组织释放５－ＨＴ增加而摄取减少；５－ＨＴ代谢产物５ＨＩＡＡ缺血后出见减少，但财灌后明显增加。（２）５－ＨＴ２受体拮抗剂赛庚啶可减轻沙土鼠缺血５ｍｉｎ再灌７     

抑制一氧化氮合成酶对大鼠睡眠及5－羟色胺神经元免疫反应的影响

采用多导描记及免疫组化方法，观察了侧脑室和腹腔给予硝基左旋精氨酸（Ｌ－ＮＮＡ）对慢性植入电极大鼠睡眠量及中缝背核５－羟色胺（５－ＨＴ）神经元免疫阳性反应的影响。结果表明：Ｌ－ＮＮＡ显著抑制慢波睡眠和快眼动睡眠，与对照相比较，觉醒时间延长。脑室给予Ｌ－ＮＮＡ使中缝背核５－ＨＴ神经元阳性细胞增多。提示一氧化氮合成抑制所致的睡眠抑制可能与中缝背核５－ＨＴ神经元免疫阳性反应增强有关。     

大鼠孤束核内5－羟色胺能纤维的来源──HRP逆行追踪与5－羟色胺免疫组织化学双标记洁研究

用ＨＲＰ注入孤束核逆行追踪和５－羟色胺（５－ＨＴ）免疫组织化学相结合的双标记法，观察大鼠孤束核内的５－ＨＴ能纤维和终末的来源。结果在脑干内见到许多ＨＲＰ单标、５－ＨＴ单标和ＨＲＰ／５－ＨＴ双标细胞，其中ＨＲＰ／５－ＨＴ双标细胞主要分布于脑桥被盖核（２６．５７％）、脑桥网状核（２４．１９％）、中缝大核（２１．１７％），其次为中缝隐核（１２．７４％）、中缝苍白核（７．７８％），少数见于中缝背核、中脑导水管周围灰质和中缝脑桥核等处。而在结状神经节内仅见到ＨＲＰ单标细胞，未见到５－ＨＴ单标和ＨＲＰ／５－ＨＴ双标细胞。以上结果表明，大鼠孤束核的５－ＨＴ能纤维和终末主要来源于脑桥与延髓的５－ＨＴ神经元的投射。本研究提示脑桥与延髓内上述核团的５－ＨＴ神经元通过向孤束核的直接投射参与孤束核内脏功能的调控。     

“更年健”对老年雌性大鼠中缝背核5—羟色胺的影响

应用免疫组织化学和计算机图像分析技术,观察中药“更年健”Ｃ地老龄雌性大鼠中缝背核５－ＨＴ的影响。结果表明：“更年健”和苯甲酸雌二醇用药后,中缝背核５－羟色胺含量明显增高,与用药相比,相关显著。提示“更年健”能增强老年雌性大鼠中缝背核５－ＨＴ神经元活性。     

大鼠中缝背核向缰核投射的5—羟色胺能神经元对躯体伤害性刺激的fo …

用ＷＧＡ－ＨＲＰ逆行追踪与抗ＦＯＳ和抗５－羟色胺免疫组化的三重标记方法，观察向大鼠一侧有前跖部皮下注射８％福尔马林５０μｌ后，中缝背核与缰核５－羟色胺神经元的ＦＯＳ表达，光镜下发现中缝背核内有七种阳性神经元，即ＨＲＰ，ＰＯＳ，５－ＨＴ单标细胞，ＦＯＳ／ＨＲＰ，ＦＯＳ／５－ＨＴ，ＨＲＰ／５－ＨＴ，双标细胞ＦＯＳ／ＨＲＰ／５－ＨＴ三标细胞，结果表明中缝背核至缰核的５－ＨＴ能投射神经元对躯体的伤害性刺激     

脑缺血和再灌注时Ca^2＋／CaM PKⅡ活性的变化及苄丙咯的影响

本文以蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成脑缺血模型，研究了脑缺血和再灌注时大脑Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性变化及苄丙咯对其活性的影响，实验结果：（１）Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性随脑缺血时间的延长而逐渐降低，脑缺血１０分钟，酶活性显著低于正常组（Ｐ＜０．０１）；（２）脑缺血１０分钟再灌注２０分钟，酶活性部分恢复，与缺血１０分钟组相比，酶活性有明显上升（Ｐ＜０．０１），但缺血２０分钟再灌注，其活性不     

羟色胺能神经对横断损伤脊髓的再支配—脊髓内移植研究

用成年ＳＤ大鼠２０只在脊髓的低位胸髓完全横断损伤，分别在１周和１月后，用富含５－羟色胺（５－ＨＴ）神经元的胚鼠脑干中缝组织悬液植入损伤尾侧的脊髓内，动物存活２个月，脊髓作５－ＨＴ免疫组化观察。结果：（１）胚５－ＨＴ能神经元能在成年大鼠脊髓内存活，５－ＨＴ纤维大多在灰质中延伸并向靶区分布，（２）损伤后１周移植组的５－ＨＴ能神经元存活量，５－ＨＴ纤维在宿主脊髓内延伸距离，以及５－ＨＴ末梢再分布的密度都     

脑缺血和再灌注时Ca~（2＋）／CaMPKII活性的变化及苄丙咯的影响

本文以蒙古沙土鼠双侧颈总动脉结扎造成脑缺血模型，研究了脑缺血和再灌注时大脑Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性变化及苄丙咯对其活性的影响，实验结果：（１）Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性随脑缺血时间的延长而逐渐降低，脑缺血１０分钟，酶活性显著低于正常组（Ｐ＜０．０１）；（２）脑缺血１０分钟再灌注２０分钟，酶活性部分恢复，与缺血１０分钟组相比，酶活性有明显上升（Ｐ＜０．０１），但缺血２０分钟再灌注，其活性不再恢复；（３）缺血前２０分钟腹腔注射苄丙咯，在缺血１０分钟时酶活性明显高于对照组（Ｐ＜０．０ｌ）。结果提示Ｃａ￣２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性对缺血非常敏感；苄丙咯对该酶活性有一定保护作用。     

促性腺激素释放激素类似物对大鼠中缝核簇5-HT样阳性物质表达的影响

研究促性腺激素释放激素类似物 ( Gn RH-A)对大鼠中缝核簇 5 -HT样阳性物质表达的影响 ,采用酶联免疫吸附试验测定血清激素水平 ,用免疫组织化学方法和图像分析技术观察大鼠中缝核簇 5 -HT样阳性物质的表达。结果证明 :( 1) Gn RH-A组大鼠血清 17β-雌二醇 ( E2 )、LH及 FSH水平较正常对照组下降 ,差异显著 ( P<0 .0 5 ) ;与去卵巢组 ( OVX)比较 ,E2 相似 ,差异不显著 ( P>0 .0 5 ) ,但 L H、F SH较低 ( P<0 .0 5 ) ;与 Gn RH-A+E2 组比较 E2 浓度较低 ,差异显著 ( P<0 .0 5 ) ,L H、FSH相似 ( P>0 .0 5 )。( 2 ) 5 -HT样阳性物质在大鼠中缝背核 ,中缝正中核表达较多 ,Gn RH-A组大鼠中缝背核 ,中缝正中核 5 -HT样阳性细胞数及光密度值都低于正常对照组 ( P<0 .0 5 ) ,与去卵巢组相似 ( P>0 .0 5 )。 ( 3 ) Gn RH-A、17β-雌二醇联合用药后 ,大鼠中缝背核 ,中缝正中核 5 -HT样阳性细胞数及光密度值都与正常对照组相似 ,无显著差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :Gn RH-A可改变大鼠中缝背核 ,中缝正中核 5 -HT样阳性物质表达 ,从而影响其神经元的功能 ,此点可能与其副作用类似绝经综合征有关。     

大鼠星形胶质细胞在高血糖脑缺血再灌注损伤中的变化

目的:探讨星形胶质细胞在高血糖脑缺血再灌注损伤中的变化规律。方法:采用链脲佐菌素(STZ)诱导Ⅰ型糖尿病高血糖大鼠模型,通过双侧颈总动脉夹闭联合股动脉放血法建立全脑缺血再灌注模型,应用组织学、免疫荧光、组织化学及Western Blot方法,对比观察糖尿病高血糖脑缺血再灌注组(简称糖尿病组)与正常血糖脑缺血再灌注组(简称正常血糖组)在脑缺血15 min、再灌注1 h和6 h大脑额叶皮质区神经元、星形胶质细胞组织学变化及GFAP的表达。结果:正常血糖组再灌注1 h脑组织出现轻度水肿;再灌注6 h脑水肿加重,出现神经元固缩;再灌注1 h,糖尿病组病变与正常血糖组基本相同,再灌注6 h脑水肿加重,固缩神经元进一步增加。再灌注1 h和6 h,糖尿病组Nissl体平均光密度值明显低于正常血糖组(P<0.05)。脑组织GFAP免疫荧光检查可见,再灌注6 h正常血糖组GFAP免疫阳性细胞明显增加。糖尿病组再灌注1 h和6 h,出现GFAP阳性星形胶质细胞数目增加(P<0.05),胞体显著增大,突起增长、增粗。Western Blot结果可见,糖尿病组GFAP的表达明显高于正常血糖组。结论:糖尿病高血糖脑缺血再灌注能够加重神经元损伤,星形胶质细胞出现更明显的数量增加和GFAP表达。     

The role of serotonin release and autoreceptors in the dorsalis raphe nucleus in the control of serotonin release in the cat caudate nucleus

Using a push-pull cannula technique and an isotopic method for estimating [3H]serotonin continuously synthesized from [3H]tryptophan, the effects of changes in the release of serotonin in the dorsalis raphe nucleus on in vivo release of [3H]serotonin in the cat caudate nucleus were investigated. The increase in the release of serotonin in the dorsalis raphe nucleus caused by local application of parachlorophenylethylamine (10(-6) M) reduced striatal [3H]serotonin release. This inhibition in serotonin release in the striatum was blocked by the prior and continuous local superfusion of the dorsal raphe with methiothepin (10(-6) M), a serotonin autoreceptor antagonist. GABA (5 x 10(-5) M) applied to the dorsalis raphe reduced both local and striatal release of [3H]serotonin. However, picrotoxin (10(-5) M), a GABA A receptor antagonist applied locally in the dorsalis raphe nucleus increased [3H]serotonin release while decreasing striatal [3H]serotonin release. This decrease in serotonin release in the striatum was again blocked by continuous superfusion of the raphe with methiothepin. Furthermore, superfusion of serotonergic cell bodies of the dorsalis raphe nucleus with methiothepin alone never altered local release or striatal release of [3H]serotonin. These data strongly suggest that the release of serotonin from the cell body in the dorsalis raphe nucleus phasically controls release of the amine at the axonal nerve ending through serotonergic autoreceptors located on serotonergic nerve cell bodies in the dorsalis raphe nucleus. The origin of the serotonin released in the dorsalis raphe nucleus and the possibility that this type of regulation could be related to changes in nerve impulse conduction of the serotonergic raphe-striatal system are discussed.     

多重脑震荡大鼠脑干中缝核团内5-羟色胺免疫阳性表达变化的研究

为了探讨多重脑震荡(multiple cerebral concussion,MCC)后大鼠中缝核团内5-羟色胺(5-HT)能神经元的变化规律,本实验采用自制单摆式机械打击装置复制MCC大鼠模型,研究伤后大鼠脑干中缝核团内5-HT及5-HT合成过程中的限速酶-色胺酸羟化酶(TPH)的表达。将56只大鼠随机分为7组:对照组、伤后1、2、4、8、16和24d组(n=8)。用免疫组织化学染色技术及图像分析法定量分析伤后大鼠脑干中缝核团内5-HT和TPH的表达变化。结果显示:(1)TPH免疫反应阳性产物在中缝背核、正中中缝核的表达在伤后2d时达到高峰,与正常对照组相比有显著性差异(P<0.05);中缝大核和中缝苍白核分别以伤后1d组和4d组阳性反应最强;(2)5-HT免疫反应阳性产物在中缝背核、正中中缝核的表达也在伤后2d时达到高峰,16、24d组基本恢复至正常水平;而中缝大核和中缝苍白核内5-HT的免疫反应性在各损伤组与正常对照组之间均无显著性差异(P>0.05)。以上结果表明,多重脑震荡后中缝核团内TPH和5-HT的表达增高,这为研究5-HT对MCC后认知障碍的影响提供了形态学依据。     

树鼩脑局部血栓性缺血的扩布性抑制机制探讨

目的:观察树鼩血栓性脑缺血时,对侧神经元血小板活化因子(PAF)受体活化和神经元线粒体呼吸功能改变,探讨皮层扩布性抑制的可能机制。方法:采用光化学法诱导脑血栓形成,分别观察脑缺血对侧神经元超微结构、脑细胞膜PAF受体、单胺氧化酶(MAO)活性、单胺类递质含量以及神经元线粒体呼吸功能。结果:树鼩脑缺血时对侧皮层淤血,神经元线粒体肿胀;脑缺血4h对侧神经元PAF受体亲和量降低,其变化以24 h最为显著(P<0.01);缺血区线粒体Ⅲ态呼吸速率、呼吸控制率(RCR)及氧化磷酸化效率(P/O)均明显降低;缺血对侧皮层的P/O降低(P<0.05),Ⅲ态呼吸速率明显抑制(P<0.01);伴随着对侧脑组织MAO活性的升高(P<0.01),对侧皮层的去甲肾上腺素(NA)和5-羟色胺(5-HT)含量降低而5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)含量明显升高(P<0.01)。结论:树鼩脑缺血时对侧皮层神经元PAF受体的活化以及MAO活性的增强可能在扩布性抑制的发生中具有重要作用。     

缺血再灌注SD大鼠脑表羟基自由基产生的可视化检测

目的对缺血再灌注SD大鼠脑皮质区域羟基自由基(.OH)的产生进行可视化检测。方法多普勒血流检测脑表血流变化。用HPF(.OH荧光标记探针)标记大鼠脑表区域神经细胞,共焦点激光显微镜活体观察在缺血(10min)再灌注(30min)过程中,脑表区域.OH产生的情况。结果缺血时脑血流下降至基线-的20%,缺血开始3min后,O2,.OH产生开始增加,并一直持续到再灌注后10min,后未继续增加。缺血时HPF.OH荧光强度上升至189%,且动脉附近区域.OH产生量要多于其他区域。结论在缺血期及再灌注早期.OH生成增加,且动脉附近区域.OH产生量要多于其他区域。     

大鼠中缝背核三种递质传入纤维的脑干起源-免疫细胞化学和酶组织化学双重标记法

实验用HRP逆行追踪法和免疫细胞化学ABC法,研究了大鼠中缝背核内5-羟色胺、P物质以及亮脑啡肽三种传入纤维的脑干起源。发现中央上核,中缝大核,中脑导水管周围灰质,脚间核和第Ⅳ脑室中央灰质均有数量不等的5-羟色胺、P物质和亮脑啡肽能神经元向中缝背核投射。结果提示:中缝背核接受脑干许多核团不同性质神经元的调控。     

环磷酸腺苷在心肌缺血／再灌注心律失常中的作用

本文应用放免法测定Ｗｉｓｔａｒ大鼠离体心脏缺血／再灌注期间心脏灌流液中环磷酸腺苷含量变化，并探讨其与心肌缺血／再灌注心律失常的关系，结果表明，冠脉结扎５ｍｉｎ时，ｃＡＭＰ无显著增加，同时未见心律失常，结扎１０－１５ｍｉｎ时，ｃＡＭＰ含量显著增加，并出现各类室性心律失常，再灌注１ｍｉｎ时ｃＡＭＰ较灌注前非常显著增加，而这１ｍｉｎ内，所有心脏均出现再灌注心律失常，１０ｍｉｎ后心律失常显著减少，此时ｃＡ