对硝基苯基-β-D-葡萄糖醛酸苷钠盐的合成及在鉴定大肠埃希氏菌中的应用

作者以葡萄糖醛酸内酯和对硝基酚为原料经过五步反应制得对硝基苯基─β─Ｄ─葡萄糖醛酸苷钠盐（ＰＮＰ－ＧＵＡ）。用比色法测定─β─Ｄ─葡萄糖醛酸酶（ＧＵＡ酶）活性，从而快速定量标本中的大肠杆菌。当底物浓度为１ｇ／Ｌ，反应时间１ｈ，溶液ｐＨ为７时，其最低检出限可达５０ＣＦＵ／ｍｌ。产生Ｖｅｒｏ细胞毒素的肠出血性大肠杆菌（ＥＨＥＣ）对此酶为阴性。本法敏感、特异、省时，不仅对快速坚定和定量大肠杆菌有实用价值，而且为快速检出ＥＨＥＣ提供了新的手段。     

CPB-ST融合基因的构建及表达研究

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲＩ和ＳａｌⅠ双酶切含有大肠杆菌耐热性肠毒素ＳＴ１前体蛋白基因的质粒ｐＸＳＴ１，回收３２５ｂｐ的ＳＴ基因片段，然后，通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶将其定向连接于事先经同样的双酶切处理的带有产气荚膜梭菌β－毒素基因（ＣＰＢ）的重组质粒ｐＥＣＢ２中ＣＰＢ基因的下降，转化受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中，经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ酶切反应鉴定重组质粒，得到了理想重组质粒ｐＥＣＢ－ＳＴ１。重组菌株Ｂｌ２１（ＤＥ３）（ｐＥＣＢ－ＳＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ及ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以表达ＣＰＢ－ＳＴ融合蛋白，而且该融合蛋白无天然β－毒素和ＳＴ１的生物毒性。     

MUG－EMB快速检定大肠杆菌的方法研究

通过对不同来源的５９１株大肠杆菌的测试，其β－葡萄糖醛酸酶阳性反应占菌株总数９４．８％。与部颁法比较，对１２０个样品进行大肠杆菌检测，两法均检出大肠杆菌的有１０个样品，未检出大肠杆菌的有１０９个样品，符合率为９９．１％；对２０５株阳性对照菌在样品中检测，两法同时检出大肠杆菌１９９株，未检出６株，符合率为９７．１％。改进的ＭＵＧ－ＥＭＢ法与部颁法的准确度、灵敏性完全一致。革兰氏阳性杆菌、球菌、芽胞菌属一些菌株亦有β－葡萄糖醛酸苷酶。     

GUD荧光法快速检测大肠杆菌初试

４－甲基伞酮－β－Ｄ葡萄糖苷酸（４－Ｍｅｔｈｙｌｕｍ－ｂｅｌｌｉｆｅｒｙｌ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｕｒｏｎｉｄｅ简称ＭＵＧ）由荧光物质４－甲基伞酮与β－葡萄糖苷酸共价结合而成，可作为酶底物用于测定β－Ｄ－葡萄糖苷酸酶（β－Ｄ－ｇｌｕ－ｃｕｒｏｎｉｄａｓｅ简称ＧＵＤ）活性。近年来的研究发现，在肠杆菌科中，除少数志贺氏菌、沙门氏菌等细菌外，９４％～９７％大肠杆菌产生β－Ｄ－葡萄糖苷酸酶［１］。据此，以ＭＵＧ作为酶底物检测ＧＵＤ活性建立的大肠杆菌检测方法具有高度的特异性，并且简单快速，可在１８～２４ｈ做出结…     

MUG－EMB快速检定大肠杆菌的方法研究

通过对不同来源的５９１株大肠杆菌的测试，其β－葡萄糖醛酸酶阳性反应占菌株总数９４．８％。与部颁法比较，对１２０个样品进行大肠杆菌检测，两法均检出大肠杆菌的有１０个样品，未检出大肠杆菌的有１０９个样品，符合率为９９．１％；对２０５株阳性对照菌在样品中检测，两法同时检出大肠杆菌１９９株，未检出６株，符合率为９７．１％。改进的ＭＵＧ－ＥＭＢ法与部颁法的准确度、灵敏性完全一致。革兰氏阳性杆菌、球菌、芽胞菌属一些菌株亦有β－葡萄糖醛酸苷酶。     

一氧化氮等自由基对吸烟者损害效应的研究

检测１２５５例康康吸烟者和５２４例健康非吸烟者血浆一氧化氮（Ｐ－ＮＯ）、维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）含量和红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｅ－ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ）活性，并做６５对配比实验，结果表明，与非吸烟组比较，吸烟组的Ｐ－ＮＯ平均含量显著升高（Ｐ＜０．００１），Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ平均含量和Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ、Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ平均活性皆显著降低（Ｐ＜０．００１）。随吸烟时间和吸烟量的增加，其Ｐ－ＮＯ含量也增高，Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ含量和Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ、Ｅ－ＧＳＨ－ＰＸ活性降低，并均呈一定程度的的直线相关（Ｐ＜０．００１）。提示吸烟者体内的氧化和抗氧化平衡严重失调，氧自由基反应明显加剧。     

不稳定心绞痛与急性心肌梗死血脂变化比较

目的：探讨不稳定心绞痛（ＵＡＰ）和急性心肌梗死（ＡＭＩ）之间血脂变化。方法：对１０９例ＵＡＰ和１４３例ＡＭＩ病人血脂值进行统计学处理分析。结果：ＵＡＰ组ＴＧ（１７１．２±１４６．９）ｍｇ／ｄｌ高于ＡＭＩ组（１３６．９±８４）ｍｇ／ｄｌ（Ｐ＜０．０１）及ＴＧ／ＨＤＬ－Ｃ（５．５±６．２）比（４．１±３．３）和ＬＤＬ－Ｃ／ＨＤＬ－Ｃ（４．０±１．９）比（３．６±１．６）高于ＡＭＩ组（两者均Ｐ＜０．０５）。结论：ＵＡＰ病人ＬＤＬ－Ｃ／ＨＤＬ－Ｃ比值增高可能与其血管病变严重性相关     

O157：H7血清型大肠杆菌的基因和表型特征

1　引言Ｏ157:Ｈ7血清型大肠杆菌(ＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉｓｅｒｏｔｙｐｅＯ157:Ｈ7,ＥＣＯＨ)能引起腹泻、出血性肠炎(ＨＣ)、溶血性尿毒综合征(ＨＵＳ)等一系列人类疾病,该菌毒力因子包括志贺毒素(Ｓｈｉｇａｔｏｘｉｎｓ,Ｓｔｘ)、溶血素(ｈｌｙｓ)、编码与附着抹平肠上皮微绒毛有关称为ＬＥＥ的致病岛的ｉｎｔｉｍｉｎ(ｅａｅＡ)蛋白质。ＥＣＯＨ菌株与大多数大肠杆菌分离株相异的是不发酵山梨醇(ＳＯＲ-)且无β-葡萄糖醛酸酶活性(ＧＵＤ-)。ＥＣＯＨ与Ｋ-12大肠杆菌(ＥＣｏｌｉ)编码ＧＵＤ的基因(ＵｉｄＡ)几乎相同,二者间具…     

慢性镉接触者肾损伤早期诊断指的评价

选择尿酶Ｎ－乙酰－β－Ｄ－葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、γ－谷胺酰转肽酶（γ－ＧＴ）、尿镉（Ｃｄ）、尿低分子蛋白（β２－ＭＧ）、尿总蛋白（ＴＰ）、尿钙（Ｃａ）为检测项目，分析、评价其作为镉致肾损伤早期效应指用价值。研究表明尿ＮＡＧ和尿Ｃｄ有明显的剂量－反应关系。当尿Ｃｄ在０．０５μｍｏｌ／Ｌ（５μｇ／Ｌ）时尿ＮＡＧ异常率增高，其反应比β２－ＭＧ敏感，表明肾小管细胞损伤先于功能损伤。因此，推荐二联指标尿Ｃｄ     

慢性镉接触者肾损伤早期诊断指标的评价

选择尿酶Ｎ－乙酰－β－Ｄ－葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）、γ－谷胺酰转肽酶（γ－ＧＴ）、尿镉（Ｃｄ）、尿低分子蛋白（β２－ＭＧ）、尿总蛋白（ＴＰ）、尿钙（Ｃａ）为检测项目，分析、评价其作为镉致肾损伤早期效应指标的实用价值。研究表明尿ＮＡＧ和尿Ｃｄ有明显的剂量－反应关系。当尿Ｃｄ在０．０５μｍｏｌ／Ｌ（５μｇ／Ｌ）时尿ＮＡＧ异常率增高，其反应比β２－ＭＧ敏感，表明肾小管细胞损伤先于功能损伤。因此，推荐二联指标尿Ｃｄ＋ＮＡＧ作为镉致肾损伤早期筛检指标。三联指标Ｃｄ＋ＮＡＧ＋β２－ＭＧ特异度高、误诊率低，作为镉致肾损伤早期诊断指标较为合理。     

PAPP—A检测对孕早期DS胎儿筛查的应用

ＰＡＰＰ－Ａ是孕早期ＤＳ筛查的有效母体血清标志物，时间分辨荧光免疫分析是目前检测ＰＡＰＰ－Ａ的有效检测技术。单项ＰＡＰＰ－Ａ测定结合年龄对孕早期ＤＳ的检测效果上档甚或要好于β－ｈＣＧ（分别为４１％～５２．５％、２５％～４１．８％）。ＰＡＰＰ－Ａ、β－ｈＣＧ、ＡＦＰ和ｕＥ３等血清标记物的多联检测有助于提高检出率，ＰＡＰＰ－Ａ＋β－ｈＣＧ双联检测被认为是孕早期ＤＳ筛查的最佳血清标记物组合，检出率为５５～６９．１％，血清标记物多联检测加ＮＴ检出率明显提高，其中以ＰＡＰＰ－Ａ＋β－ｈＣＧ＋ＮＴ实际临床应用价值最大，检出率高达７５．８％～８６．４％。     

国外求购信息

国外求购信息１．法国求购消毒剂ＤＩＳＩＮＦＥＣＩ－ＡＮＩ－ＳＦＯＲＭＥＤＩＣＡＬ＆ＣＯＳＭＥＩ－ＩＥＣＳＦＩＥＬＤ，ＤＩＳＩＮＦＥＣＩ’ＡＮＴＳＦＯＲＦＯＯＤＩＮＤＵＳＴＲＹＭＲ．ＧＡＵＴＨＩＥＲ　ＰＬＯＵＶＩＥＲ　ＣＯＭＥＦＩ４０ＲＵＥＥＵＧＥＮＥ...     

矽肺与抗氧化剂、抗氧化酶关系的探讨

目的：探讨矽肺与抗氧化剂、抗氧化酶的关系。方法：检测了７３例矽肺患者和６０例健康对照者的血浆维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）含量及红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｅ－ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（Ｅ－ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果：与对照组比较,患者组的Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ、Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ、Ｅ－ＧＳＨ－Ｐｘ平均值均显著降低（Ｐ＜０．００１）;各检测值与患者病程、病情、肺功能状态均有相关;逐步回归表明患者病程、病情、肺功能状态与Ｐ－ＶＥ、Ｅ－ＳＯＤ值相关最为密切。结论：矽肺患者体内氧化抗氧化平衡严重失调,氧自由基反应病理性加剧。     

干扰素治疗丙型肝炎疗效相关因素分析

目的：探讨预测干扰素治疗慢性丙型肝炎（ＣＨＣ）疗效的临床上适用、简便、易行的指标。方法：对采用干扰素（ＩＦＮα－１ｂ）治疗３２例ＣＨＣ临床资料进行观察,包括治疗前后肝功能（ＡＬＴ、ＳＢ、ＧＧＴ）、抗－ＨＣＶＯＤ水平、ＨＣＶ基因型、ＨＣＶＲＮＡ、ＳＩＬ－２Ｒ、β２－ＭＧ等,治疗结束时有效者为肝功能复常同时ＨＣＶＲＮＡ阴转,其余反应模式均为无效者。结果：ＨＣＶ基因型为Ⅲ型患者疗效（５／１０）明显高于Ⅱ型（２／１９）（Ｐ＜０．０５）,有效者治疗前血清抗—ＨＣＶＯＤ明显低于无效者（Ｐ＜０．０５）,治疗后有效者β２－ＭＧ升高水平（３．４５±１．０８）ｍｇ／Ｌ明显高于无效者（１．３３±０．９５）ｍｇ／Ｌ（Ｐ＜０．０５）,而两者治疗前ＡＬＴ、ＳＢ、ＧＧＴ、ＩｇＭ、β２－ＭＧ患者的年龄无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结论：感染ＨＣＶ基因型,治疗前抗—ＨＣＶＯＤ水平及治疗后β２－ＭＧ变化对预测ＩＦＮ治疗ＣＨＣ疗效有一定参考价值。     

载硒酵母对小鼠化学性肝损伤的影响

观察不同剂量（３０，６０，９０ｍｇ／ｋｇ）载硒酵母（ｓｅｌｍｉｎｍ－ｅｎｒｉｃｈｅｄｙｅａｓｔ，ＳＥＹ）ｉｇ７天对ＣＣｌ４和Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ引起的化学性肝损伤的保护作用。结果发现：ＳＥＹ６０ｍｇ／ｋｇ可降低ＣＣｌ４所致血清ＡＬＴ的升高，各剂量组均可降低Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致血清ＡＬＴ和ＡＳＴ的升高，ＳＥＹ３０ｍｇ／ｋｇ可减轻Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致肝病理损伤，各剂量组ＳＥＹ均可降低Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ所致肝匀浆ＭＤＡ含量升高。提示ＳＥＹ在一定程度上可减轻ＣＣｌ４和Ｄ－Ｇａｌ－Ｎ的化学性损伤，其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

抗河豚毒素单克隆抗体的制备及其特性的初步研究

将用合成的匙孔形虫戚血蓝蛋白－甲醛－河豚毒素（ＫＬＨ－ＨＣＨＯ－ＴＴＸ）连接物免疫的ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞系Ｓｐ２／０融合，经３～４次亚克隆，建立了３个稳定分泌抗河豚毒素的杂交瘤细胞株，分别命名为１Ｇ３、４Ｇ３、６Ｄ９。其中１Ｇ３和４Ｇ３分属ＩｇＧ２ｂ亚类，６Ｄ９属ＩｇＧ１亚类。腹水的抗体稀释度为１∶１０５～１：５×１０６。用竞争抑制性酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）测定三种抗体的最低反应浓度为１×１０－３ｍｇ／Ｌ。     

21-氨基类固醇抗石英细胞毒性及抑制其促成纤维细胞生长的研究

目的 研究２１－氨基类固醇（Ｌazaroid,Ｕ－７５４１２Ｅ）在体外对石英毒性的抑制作用。方法 观察体外培养的肺汔巨噬细胞（ＡＭ）释放Ｈ２Ｏ２、乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和β－Ｎ－乙酰氨基葡萄苷酶（ＮＡＧ）的水平,评价Ｕ７５４１２Ｅ对石英细胞毒性的消除能力;电子自旋共振俘获法评价Ｕ－７５４１２Ｅ清除石英催化Ｈ２Ｏ２产生．ＯＨ的作噻唑蓝比色法比较Ｕ－７５４２１Ｅ对矽肺大鼠肺泡ＡＭ促成纤     

库尔特MD10血球计数仪改MD18的方法

１软件库尔特ＭＤ１０（Ｅ版本）在一张高密小盘上载有：（１）ＤＯＳ５．０系统文件５个：ＩＯ．ＳＹＳ、ＭＳ－ＤＯＳ．ＳＹＳ、ＣＯＭＭＡＮＤ．ＣＯＭ、ＨＩＭＥＭ．ＳＹＳ、ＲＡＭ－ＤＲＩＶＥＲ·ＳＹＳ。其中前三个文件是ＤＯＳ的核心，完成操作系统的基本功能；ＨＩＭＥＭ．ＳＹＳ可以提供上位内存，ＲＡＭＤＲＩＶＥＲ．ＳＹＳ可用建立一个虚拟盘。（２）系统配置、自动批处理文件各１个：ＣＯＮ－ＦＩＧ．ＳＹＳ、ＡＵＴＯＥＸＥＣ．ＢＡＴ。前者为程序的运行提供运行环境，包括用ＨＩＭＥＭ．ＳＹＳ开辟上位内存和用ＲＡＭＤＲＩ…     

维生素A和铁缺乏对大鼠红系造血影响的比较

采用体外培养红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ），观察维生素Ａ缺乏（ＶＡＤ），或铁缺乏（ＩＤ）对断乳期大鼠红系造在的影响，结果发现ＶＡＤ和ＩＤ大鼠ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｅ集落数明显低于正常组，ＩＤ组的ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｅ集落数及每一集落的细胞数均明显低于正常及ＶＡＤ组；补充ＶＡ和铁今日主ＣＦＵ－Ｅ集落数明显增加，提示ＶＡＤ和ＩＤ可能通过不同机制引起骨髓红第祖细胞殖分化抑制。     

大肠杆菌肠毒素ST_1—LT_B融合基因的高效表达

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１，回收０．８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因，再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组质粒ｐＸＥＴ－ＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白，该融合蛋白占菌体总蛋白的３３．２１％，而且无天然ＳＴ１生物毒性