复方α-酮酸片中氨基酸的柱前衍生化-HPLC法测定

采用柱前衍生化法同时测定复方α酮酸片中——L-醋赖氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-组氨酸、L-酪氨酸五种氨基酸的含量。采用ODS柱，以流动相乙腈-水（1：1）和0．14mol／L磷酸盐缓冲液（pH8．2）梯度洗脱，检测波长360nm。衍生化试剂为2，4-二硝基氯苯。五种氨基酸的平均回收率为99．6％～100．9％，RSD小于1．1％。     

HPLC法测定L-肌肽中的游离氨基酸的含量

目的采用柱前衍生高效液相色谱法对L-肌肽原料药中的游离氨基酸进行测定。方法采用异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)柱前衍生高效液相色谱法,使L-肌肽中游离的β-丙氨酸和L-组氨酸衍生物达到完全分离,并测定其含量。色谱柱为DiamonsilTM C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠溶液(体积比为13∶87),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果HPLC法测定β-丙氨酸和L-组氨酸的线性范围分别为2.01～20.10 mg.L-1(r=0.999 7)和2.00～20.00 mg.L-1(r=0.999 3);平均回收率分别为110.6%和98.2%。结论HPLC法无需专业的氨基酸分析仪,可用于L-肌肽中游离氨基酸的检查。     

HPLC法测定复方醋酸棉酚片中维生素B1和B6的含量

目的建立高效液相法同时测定复方醋酸棉酚片中维生素B1和B6含量的方法。方法采用C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相:庚烷磺酸钠溶液(取庚烷磺酸钠0.4 g,加三乙胺3 mL,加水至1 000 mL,用磷酸调pH值至3.5)-甲醇(75∶25);流速:1.0 mL.min-1;检测波长:275 nm。结果维生素B1在10.05～200.92 mg.L-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系Y=13 744.72X+44 526.49(r=0.999 9),回收率为99.4%,RSD=1.1%(n=9)。维生素B6在10.43～208.60 mg.L-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系Y=120101.31X-14766.07(r=0.999 9),回收率100.1%,RSD=1.2%(n=9)。结论该方法简便、准确,可同时测定复方醋酸棉酚片中维生素B1和B6的含量。     

HPLC法同时测定复方茶碱麻黄碱片中4组分的含量

目的:用高效液相色谱法同时测定复方茶碱麻黄碱片中可可碱、盐酸麻黄碱、茶碱和咖啡因的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05 mol·L-1磷酸二氢钾溶液-三乙胺(25:75:0.1);流速:0.8 ml·min-1;检测波长:210nm。结果:可可碱进样量在0.06～0.39μg(r=0.999 6)、盐酸麻黄碱进样量在0.03～0.16μg(r= 0.999 6)、茶碱进样量在0.06～0.38μg(r=0.999 6)、咖啡因进样量在0.04～0.23μg(r=0.999 6)范围内呈良好的线性关系。平均回收率分别为100.3%(RSD=0.3%);100.2%(RSD=0.6%);100.2%(RSD=0.6%);100.7%(RSD=0.5%)。结论:本方法简便、准确、重现性好,可用于同时测定复方茶碱麻黄碱片中4组分的含量。     

复方氨苄西林分散片中二组分含量的HPLC测定

目的建立高效液相色谱法测定复方氨苄西林分散片中氨苄西林与丙磺舒含量的方法。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱,流动相为磷酸盐缓冲液(含0.05 mol.L-1磷酸二氢钾,0.01 mol.L-1十二烷基硫酸钠,1%醋酸和0.4%三乙胺,以磷酸调pH值至3.0)-甲醇(50∶50),检测波长为235 nm。结果氨苄西林和丙磺舒分别在0.1～2.0 mg.mL-1(r=0.999 2)和0.028～0.56 mg.mL-1(r=0.999 9)浓度范围内线性关系良好,平均回收率分别为101.2%和99.1%。结论本法简便、准确,重复性好。     

高效液相色谱法测定复方尿囊素片中的尿囊素含量

目的建立HPLC法测定复方尿囊素片中尿囊素含量。方法色谱柱:Waters C18柱,流动相:甲醇-水(10∶90);柱温:35℃;检测波长:210 nm;流速:0.5 m L·min-1。结果尿囊素在12.5²50μg·m L-1与峰面积线性关系良好(r=0.999 9)。低、中、高平均回收率分别为99.9%(RSD=0.6%),100.2%(RSD=1.3%),100.1%(RSD=0.7%)(n=3)。结论该方法简便、灵敏、专属性强,能检测复方尿囊素片中尿囊素的含量。     

鹿茸药材中14种氨基酸的含量测定

目的建立用于测定鹿茸药材中14种氨基酸的柱前衍生化-高效液相色谱方法。方法采用异硫氰酸苯酯-乙腈对鹿茸药材中的氨基酸进行衍生化,色谱条件为:Venusil ASB C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相A:乙腈-水(体积比为7∶3),流动相B:0.1 mol·L~(-1)醋酸钠缓冲溶液-乙腈(体积比为93∶7,pH=6.5),柱温:45℃,流速:0.8 mL·min~(-1),检测波长:254 nm,进样量:5μL。结果 14种氨基酸包括丝氨酸、甘氨酸、组氨酸、苏氨酸、精氨酸、丙氨酸、脯氨酸、酪氨酸、缬氨酸、甲硫氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸在4.052～64.832、20.030～320.482、2.222～35.525、4.683～74.881、8.119～129.924、7.482～119.679、10.985～175.760、2.521～40.336、4.228～67.648、0.702～11.232、1.922～30.752、6.012～96.191、4.523～72.368、7.352～117.632 mg·L~(-1)质量浓度内与峰面积具良好的线性关系,r≥0.999 0,加样回收率在99.1%～101.6%内,实验方法的精密度、重复性和稳定性的RSD均小于2.0%。结论经方法学验证显示,所建立的实验方法适用于鹿茸药材中14种氨基酸的含量测定。     

基于液相色谱-质谱联用技术同时测定乌灵胶囊多组分含量

目的:建立基于液相色谱-质谱联用技术同时测定乌灵胶囊多组分含量的方法.方法:采用液相色谱-质谱联用技术,同时检测乌灵胶囊中30种组分的含量,包括腺苷、鸟苷、尿苷、腺苷酸、染料木素、甲基蜂蜜曲霉素、胆碱、左旋肉碱、多巴胺和21种氨基酸(甘氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、组氨酸、苏氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、色氨酸、赖氨酸、天冬...     

反相高效液相色谱法测定乳块消片中芍药苷的含量

目的建立测定乳块消片中芍药苷含量的高效液相色谱法。方法色谱柱:D iamonsiltm C18柱;检测波长:230 nm;流动相:甲醇-0.05 mol.L-1磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇(67∶173∶4∶4)。结果芍药苷在0.008 06~0.516 00 mg.mL-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为102.09%,RSD=1.62%(n=5)。结论该法操作简便、准确、专属性强,可作为乳块消片中芍药苷的含量测定方法。     

柱前衍生化HPLC法分析沙参多糖中单糖组成

目的建立北沙参多糖中单糖的组成和含量的检测方法。方法以三氟乙酸水解沙参多糖,水解产物加入衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑酮(PMP)生成衍生化产物,采用RP-HPLC法,色谱柱:C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:体积分数为19%的乙腈溶液-醋酸铵缓冲液(醋酸铵-冰醋酸,pH5.5,体积比为100∶1),等度洗脱,流速:1.0 mL.min-1,检测器:紫外检测器,检测波长:250 nm,柱温:35℃。结果沙参多糖由D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-(+)-阿拉伯糖等8种单糖(有2种未鉴定出的单糖)组成。D-甘露糖、D-鼠李糖、半乳糖醛酸、D-葡萄糖、D-半乳糖、L-(+)-阿拉伯糖的线性分别为4~80μmol.L-1(r=0.999 0)、12~240μmol.L-1(r=0.999 0)、5.6~1.12×103μmol.L-1(r=0.999 4)、1.54×103~30.80×103μmol.L-1(r=0.999 0)、80.0~1.6×103μmol.L-1(r=0.999 0)、64.00~1.28×103μmo.lL-1(r=0.9992);平均加样回收率分别为94.0%、88.5%、93.9%、95.9%、89.2%、90.8%。含量分别为0.22%、0.61%、8.55%、72.88%、4.79%、2.71%。结论该方法可以准确的测定出北沙参多糖中含有的各种单糖和含量。     

高效液相色谱法同时测定复方咽炎喷雾剂中3种药物含量

目的:建立HPLC法同时测定喷雾剂中的地塞米松磷酸钠、醋酸氯己定、甘草酸二铵含量的方法。方法:色谱柱为Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.01 mol.L-1磷酸溶液(用三乙胺调pH 2.8)-乙腈(68∶32)。柱温30℃,检测波长为250 nm。结果:地塞米松磷酸钠、醋酸氯己定、甘草酸二铵的分离度均>1.5,理论塔板数均>2 000;回归方程依次分别为:y=43 811x+180 553(r=0.999 5);y=23 956x+107 969(r=0.999 6);y=16 423x-56 524(r=0.999 5);线性范围分别为10～200μg.mL-1,10～200μg.mL-1,25～500μg.mL-1。结论:本法操作方便,结果准确可靠,可用于复方咽炎喷雾剂中的地塞米松磷酸钠、醋酸氯己定、甘草酸二铵含量测定。     

HPLC法测定复方α酮酸片中五种氨基酸的含量

目的建立复方α酮酸片中5种氨基酸的含量测定方法。方法以2,4-二硝基氟苯(FDNB)为衍生化试剂,将片剂中的氨基酸定量衍生化,衍生化条件为在碱性溶液中60℃暗处反应1 h,制得5种DNP-氨基酸。色谱柱为Luna C18(250 mm×4.6mm,5μm);以甲醇-醋酸盐缓冲液系统梯度洗脱;检测波长为360 nm。结果衍生化产物性质稳定;5种氨基酸在各自的浓度范围内线性关系良好(r>0.999 0);加样回收率为97.2%~102.8%,相对标准偏差均小于2.0%。结论该方法准确,简便,重现性好,专属性强,可用于该产品的质量控制。     

RP-HPLC法同时测定复方盐酸二甲双胍片中盐酸二甲双胍和格列美脲的含量

目的建立同时测定复方盐酸二甲双胍片中格列美脲和盐酸二甲双胍含量的方法。方法采用RP-HPLC法。色谱柱为Diamonsil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-20 mmol.L-1磷酸氢二钠溶液(含8 mmol.L-1十二烷基硫酸钠,磷酸调pH值7.5)(体积比为33∶67),流速为1 mL.min-1,检测波长为228 nm。结果格列美脲和盐酸二甲双胍的线性范围分别为0.1～0.6 mg.L-1(r=0.999 1,n=6)和25.0～150.0 mg.L-1(r=0.999 6,n=6);平均回收率分别为99.4%(RSD=1.0%,n=9)和99.8%(RSD=0.39%,n=9)。结论本方法简便、准确,可用于复方盐酸二甲双胍片的质量控制。     

高效液相色谱法测定复方替硝唑凝胶中两组分的含量

目的:采用高效液相色谱法测定复方替硝唑凝胶中替硝唑和醋酸地塞米松的含量.方法:采用Kromasil C18色谱柱,以甲醇-0.01 mol·L-1磷酸二氢钾(73:27,用磷酸调pH值至2.8)为流动相,流速1.0 mL·min-1,检测波长240 nm.结果:替硝唑的线性范围为20～120 mg·L-1,r=0.999 7,平均回收率为98.33%,RSD为0.91%(n=5);醋酸地塞米松的线性范围为4～24 mg·L-1,r=0.999 7,平均回收率为100.30%,RSD为1.69%(n=5).结论:该法结果准确,方法精密度和重现性良好,可作为该制剂质量控制的方法.     

HPLC法测定复方氨酚烷胺片中对乙酰氨基酚的含量

目的探讨复方氨酚烷氨片中的对乙酰氨基酚的含量的测定方法.方法采用C18柱以水-甲醇(65:35)为流动相,流速为1 ml·min-1,检测波长为249 nm.结果对乙酰氨基酚在40～200 mg·L-1线性良好(r=0.999 9)平均回收率为100.1%,RSD=0.50%.结论该方法简便快速,结果准确.     

柱前衍生RP-HPLC法测定桑叶中16种游离氨基酸的含量

目的:建立柱前衍生法测定桑叶中游离氨基酸的含量。方法:以水超声提取桑叶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯柱前衍生,采用反相高效液相色谱法测定氨基酸的含量。结果:桑叶中含有苏氨酸、缬氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、γ-氨基丁酸、丙氨酸、组氨酸、胱氨酸、色氨酸、异亮氨酸等16种游离氨基酸;其中人体必需氨基酸有7种,人体半必需氨基酸有1种,含量占氨基酸总量的20%左右。结论:本法不需要专门的氨基酸分析仪,操作简便、灵敏度高,结果准确、可靠。桑叶中氨基酸的种类齐全、含量丰富,具有很高的开发利用价值。     

HPLC法同时测定复方鼻膏中2组分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定复方鼻膏中磺胺嘧啶和醋酸地塞米松含量的方法。方法:色谱柱为Inertsil C8-3,流动相为甲醇-乙腈-水(72∶3∶25),流速为1.0mL·min-1,柱温为40℃,检测波长为240nm,进样量:20μL。结果:磺胺嘧啶和醋酸地塞米松检测浓度的线性范围分别为74.65～746.5(r=0.999 9)、1.495～14.95μg·mL-1(r=0.999 7);平均加样回收率分别为100.72%(RSD=1.7%)、100.41%(RSD=1.6%)。结论:本方法简便易行、准确可靠,可用于该制剂的含量测定。     

RP-HPLC波长切换法同时测定消栓通络片中4种成分的含量

目的建立同时测定消栓通络片中芦丁、丹酚酸B、肉桂酸和芒柄花素4种成分含量的RP-HPLC方法。方法采用Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-体积分数为0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱;流速:1.0 mL.min-1;柱温:30℃;采用切换波长的方法:在360 nm下检测芦丁;在288 nm下检测丹酚酸B和肉桂酸;在248 nm下检测芒柄花素。结果芦丁、丹酚酸B、肉桂酸和芒柄花素的质量浓度与峰面积分别在14.3～85.8 mg.L-1(r=0.999 4,n=6)、10.56～63.36mg.L-1(r=0.999 3,n=6)、1.8～10.8 mg.L-1(r=0.999 8,n=6)和0.58～3.48 mg.L-1(r=0.999 6,n=6)内呈良好的线性关系;平均加样回收率依次为98.4%、99.3%、99.2%和98.4%。RSD分别为1.4%、0.9%、1.3%和1.5%。结论该方法适合于同时测定消栓通络片中芦丁、丹酚酸B、肉桂酸和芒柄花素的含量。     

手性固定相HPLC法拆分苏氨酸和赖氨酸对映体

目的建立了柱前衍生结合手性固定相HPLC法拆分了苏氨酸和赖氨酸2种氨基酸对映体。方法利用4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑(NBD-Cl)柱前衍生,采用Sumichiral OA-2500S色谱柱,以甲醇-乙腈(60∶40,含5mmol.L-1柠檬酸)为流动相,检测波长为470nm。结果应用该法检查L-氨基酸原料药中的D-型异构体,D-苏氨酸和D-赖氨酸在2.0～16.0μg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好,回收率均为101.0%,RSD分别为1.7%和0.37%。结论在最佳色谱条件下,2种氨基酸对映体均达到了基线分离。建立的对映体杂质检查方法灵敏度高,重复性好。     

HPLC法测定复方硫酸氢氯Ⅱ比格雷片中硫酸氢氯吡格雷和阿司匹林的含量

目的 建立复方硫酸氢氯吡格雷片中硫酸氢氯吡格雷和阿司匹林含量测定的HPLC法.方法 色谱柱为氰基柱,流动相为甲醇-水-三乙胺(体积比为500∶500∶2,磷酸调节pH值至3.8),流速为1 mL·min-1,检测波长为235 nm,柱温为35℃,进样量为20 μL.结果 在该色谱条件下,硫酸氢氯吡格雷与阿司匹林可达到较好分离,硫酸氢氯吡格雷在12.0～100.0 mg·L-1内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 5).阿司匹林在38.4～320.0 mg·L-1内质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 7).硫酸氢氯吡格雷与阿司匹林的平均回收率分别为(99.7±1.80)%(n=9)和(100.3±0.53)%(n=9).结论 HPLC法适用于复方硫酸氢氯吡格雷片中硫酸氢氯吡格雷和阿司匹林的含量测定.