HPLC法测定射干合剂中多指标成分的含量

目的建立能同时检测射干合剂样品中5种黄酮类化合物及麻黄碱含量的HPLC法。方法样品用超声提取法,用Inertsi PODS-3色谱柱分离样品,流动相为乙腈与1‰磷酸（pH=2．25）,梯度洗脱,流量为1mL·min^-1,柱温为室温,用紫外检测仪215am测定;外标法定量。结果对于待测组分的r均〉0．998;黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、麻黄碱的线性范围均为0．05—50mg·L^-1.方法加样回收率为94．5％-103．2％;相对标准偏差（RSD）低于4．7％（n=3）。结论本法可用于射干合剂中多指标成分的含量测定,方法简便、准确、灵敏度高,也可用于制剂及体内指标成分的研究。     

高效液相色谱质谱联用法测定射干合剂中8种中药成分的含量

目的:建立一种高效液相色谱质谱联用法同时测定黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩素、咖啡酸、麻黄碱、射干苷、次野鸢尾黄素、黄芩素等8种中药成分的含量及其在我院自有制剂射干合剂中的应用。方法:色谱条件:色谱柱为ZORBAX SB-C18(2.1 mm×50 mm,1.8μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为0.3 ml·min-1,柱温:35℃;质谱条件:采用电喷雾离子源(ESI),多反应离子监测(MRM),结合正负离子扫描切换,其中咖啡酸、野黄芩苷、射干苷采用负离子模式检测,黄芩苷、汉黄芩素、次野鸢尾黄素、黄芩素、麻黄碱采用正离子模式检测。结果:黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩素、咖啡酸、麻黄碱、射干苷、次野鸢尾黄素、黄芩素的定量限分别为1.44×10-4,4.20×10-3,2.95×10-4,7.80,4.90×10-3,4.6×10-2,3.18×10-4,4.85 ng·ml-1,检测限分别为4.32×10-5,1.3×10-3,8.84×10-5,0.77,2.90×10-4,3.33×10-4,9.5×10-5,1.46 ng·ml-1;在相应的线性范围内R2>0.992 3;日内和日间精密度(RSD)均小于5%,平均回收率均在80%~120%。结论:本方法在20 min内实现这8种化合物的分离和测定,简单、快速、灵敏、准确,可用于射干合剂多成分含量测定。     

一测多评法测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量

目的 建立一种一测多评法（QAMS）同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。方法 采用高效液相色谱法,以黄芩苷为内参物,建立黄芩苷与芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子（f）,再通过f计算出止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。同时采用外标法（ESM）测定6种黄酮类成分的含量,并比较二者的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果 芦丁、甘草苷、黄芩苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素在一定范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系（r>0.997）;精密度、稳定性、重复性均符合方法学要求;平均加样回收率范围为95.72%～100.43%,RSD范围为1.97%～3.22%。芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子分别为6.426、3.939、3.215、41.140、0.555,且重现性良好。一测多评法的计算结果与外标法测定结果差异无统计学意义（P>0.05）。结论 以黄芩苷为内参物建立的一测多评法,同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量,方法操作简便,准确可靠,可用于止血化痔合剂的质量评价。     

LC-MS/MS法测定动物血清中射干合剂多指标成分的浓度

目的:建立测定动物血清中射干合剂多指标成分的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）方法。方法:血清样品中加入内标（硫利达嗪）,甲醇直接沉淀;用Capcell C₁₈MGⅢ（2.0 mm×100 mm,5μm）;流动相为水:乙腈（95:5）梯度洗脱,流量为0.3 ml·min^-1,扫描方式为正离子多离子反应监测（MRM）,黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、盐酸麻黄碱和内标硫利达嗪的离子选择通道分别为m/z 447.2→271.2、271.2→123.2、285.2→270.2、463.2→301.2、387.1→357.1、166.2→148.2、371.2→126.2。结果:黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、盐酸麻黄碱的线性范围为0.01～500.00μg·L^-1,定量下限为0.01μg·L^-1,提取回收率均大于90%,批内、批间RSD均小于10%。结论:本法操作简便,特异性强,灵敏度高,取血量少,符合生物样品的分析要求,可用于射干合剂中多指标成分在动物体内的药动学研究。     

UPLC法测定脏连丸中6个生物碱和4个黄酮成分的含量

摘要：目的:建立UPLC法同时测定脏连丸中小檗碱、药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀6个生物碱类成分和黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素4个黄酮类成分的含量。方法:采用Waters AcquityBEH C18（2.1 mm×100 mm,1.7μm）色谱柱,柱温:35℃,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速:0.2 ml·min-1,检测波长:278 nm、345 nm。结果:在一定浓度范围内,脏连丸中10个成分均呈良好线性关系（r> 0.999）,平均加样回收率为99.41%～102.90%（RSD <3.0%,n=9）。12批样品中小檗碱、药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素质量分数分别为4.022 0～4.955 0 mg·g-1,0.991 0～1.338 0 mg·g-1,1.002 0～1.614 0 mg·g-1,0.641 0～1.133 0 mg·g-1,1.255 0～1.966 0 mg·g-1,0.859 0～1.336 0 mg·g-1,5.036 0～7.011 0 mg·g-1,0.987 0～1.314 0 mg·g-1,0.415 0～0.901 0mg·g-1,0.201 0～0.345 0 mg·g-1。结论:经方法学验证,所建立的UPLC法可同时测定脏连丸中10个成分的含量。     

基于黄酮类成分含量构成特征和体外抗病毒活性的不同产地黄芩的质-效评价研究

目的:评价黄芩道地药材与非道地药材中主要黄酮类成分含量构成特征及其抗病毒活性,以探讨黄芩药材的质-效关系及药效物质基础。方法:制备8批不同产地黄芩(S1~S8)的水提物冻干粉,采用超高效液相色谱法测定水提物中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素等4种黄酮类成分的含量并计算其含量构成比。按不同产地黄芩的黄酮类成分含量构成比,制备上述4种成分混合物作为对应的黄酮类成分模拟样品(E1~E8)。以利巴韦林为阳性对照,采用MTT法和细胞病变程度法,考察8批黄芩水提物样品及其对应的模拟样品对人喉癌细胞Hep-2的半数有毒浓度(TD50)和对呼吸道合胞病毒(RSV)的半数抑制浓度(IC50),并计算治疗指数(TI)。采用SPSS 17.0软件对黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量与其抗RSV活性(IC50值)进行Pearson相关性分析。结果:样品S4(产地为河北承德)的黄芩苷、汉黄芩苷含量最高,样品S6(产地为内蒙古-2)的黄芩素、汉黄芩素含量最高;上述4种成分含量最低的分别为样品S6、S6、S7(产地为北京)、S4。样品S4中黄酮苷类成分含量较高,相应的苷元类成分含量较低,其黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量构成比为1∶0.224∶0.111∶0.013;样品S6中黄酮苷类成分含量较低,相应的苷元类成分含量较高,上述4种成分的含量构成比为1∶0.241∶0.713∶0.106。不同产地黄芩水提物对Hep-2细胞的TC50均高于50μg/mL,对RSV的IC50为11.11~51.74μg/m L,TI为1.86~5.20;其对应的黄酮类成分模拟样品的TC50为23.11~52.23μg/mL,对RSV的IC50为4.87~14.61μg/mL,TI为1.85~4.75。道地产区(河北承德)黄芩(S4)的水提物及其对应模拟样品(E4)的抗RSV作用最强。相关性分析显示,4种黄酮类成分的含量与其抗病毒活性的相关系数均小于0.5,两者无显著相关性。结论:当黄芩中4种主要黄酮类成分的含量构成比为1∶0.224∶0.111∶0.013时,其对RSV的抑制作用较强。道地产区黄芩样品具有较优的黄酮类成分构成特征,该特征可能是道地药材发挥最佳抗病毒疗效的重要物质基础。     

HPLC法同时测定柴胡-黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类的含量

目的建立高效液相色谱测定柴胡—黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类含量的方法。方法采用MERCK PUROSPHERC18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇—0.05%磷酸,梯度洗脱;流速:1.0 mL.min-1;柱温:35℃;检测波长为210 nm。结果皂苷成分(柴胡皂苷a)、3个黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)达到了完全分离,4个成分的峰面积与进样量线性关系良好。柴胡皂苷a、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素线性范围分别为0.219 6～17.568μg、0.214 75～17.18μg、0.093 1～7.448μg、0.107 6～8.608μg,(r≥0.999 8);平均回收率分别为97.71%、102.43%、101.16%、97.50%;RSD分别为0.52%、1.96%、1.55%、0.75%。结论该方法可同时测定柴胡—黄芩药对水煎液中皂苷和黄酮类成分的含量,并能有效表征水煎液中其他成分差别,也为建立柴胡—黄芩药对水煎液特征指纹图谱奠定了基础。     

红外光谱三级鉴别法联合高效液相色谱-质谱法研究不同采收期黄芩药材的质量

目的:研究不同生长期春秋两季采收黄芩药材中有效成分种类及含量的差异,为确定黄芩的最佳采收期提供技术支持。方法:对赤峰产黄芩不同采收期药材样品(一年、二年、三年生长期,在各年份的春季和秋季分别采挖),应用红外光谱三级鉴别技术(IR-TL)分析其整体成分构成变化,以高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)分析药材中6种黄酮类成分(千层纸素A、白杨素、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷)含量的变化。结果:IR-TL分析结果显示,不同生长期黄芩所含黄酮类、苷类、糖类、酯类等成分均有所不同,其中二年生黄芩中的苷类物质含量最高、药材质量更稳定;6种黄酮类成分含量测定结果显示,不同采收期对上述指标成分含量有较大影响,其中二年生春季采收样品的整体含量高于同年份秋季采收样品。结论:本研究可为黄芩药材质量的控制提供可靠的分析方法;二年生长期春季采收可能为黄芩的最佳采收时间。     

HPLC法测定百咳静颗粒中8个成分的含量

目的:建立HPLC法同时测定百咳静颗粒中盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素8个成分的含量。方法:采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙醇-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,柱温45℃,检测波长为215 nm(麻黄碱、伪麻黄碱、苦杏仁苷)、280 nm(甘草苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素),进样量10μL。结果:盐酸麻黄碱、盐酸伪麻黄碱、苦杏仁苷、甘草苷、橙皮苷、黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素8个成分的含量测定结果分别为0.312～1.018、0.321～1.175、0.315～0.723、0.876～1.735、0.982～2.604、0.824～9.999、1.635～2.888、0.812～1.661 mg·g-1;8个成分均可实现较好的分离,在拟定的浓度范围内,各成分均有良好的线性关系(r≥0.999);平均回收率97.4%～99.7%,RSD为0.65%～1.5%。结论:本方法简便准确,重复性好,可用于百咳静颗粒的质量控制与评价。     

8种黄酮类成分的LC-MS/MS分析

目的：为了探讨液相色谱-质谱联用（LC-MS）技术在天然产物成分分析中的应用,以黄芩苷、野黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素、射干苷、次野鸢尾黄素、芦丁、金丝桃苷等8个黄酮类化合物为研究对象,采用超高压液相色谱-三重四级杆串联质谱分析该8个黄酮类化合物的色谱、质谱特性.方法：色谱柱为ZORBAX SB-C18（2.1 mm×50 mm,1.8 μm）,流动相为0.1％甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱,流速为0.3 ml·min-1,柱温为35℃,质谱离子源采用电喷雾离子源（ESI）.结果：8个黄酮化合物在色谱柱上的色谱保留行为与取代羟基及苷化的数目具有相关性,在质谱中野黄芩苷、射干苷、金丝桃苷在负离子模式下具有较好的响应,而黄芩苷、汉黄芩素、黄芩素、次野鸢尾黄素、芦丁在正离子模式下具有较好的响应.苷元的裂解以RDA裂解为主.结论：该8个黄酮化合物的色谱和质谱行为对于未知结构的黄酮化合物的结构解析具有一定的指导意义.     

HPLC法测定导赤丸中黄芩苷和大黄素的含量

目的:建立测定导赤丸中2种有效成分黄芩苷和大黄素的含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Chroma-trex C18柱;测定黄芩苷的流动相为甲醇-水(加入磷酸调pH=3.5,43:57),检测波长为280nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为30℃;测定大黄素的流动相为甲醇-水(加入冰醋酸调pH=2.0,80:20),检测波长为245nm,流速为1.0mL·min-1,柱温为25℃。结果:黄芩苷和大黄素的检测浓度分别在0.626～1.044mg·mL-1(r=0.9996)和5～25μg·mL-1(r=0.9998)范围内线性关系良好;平均回收率(n=9)分别为100.18%(RSD=0.75%)和99.30%(RSD=1.5%)。结论:本方法操作简便、准确度高、专属性强,适用于导赤丸的质量控制。     

HPLC法同时测定黄连羊肝丸中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定黄连羊肝丸中黄芩苷和盐酸小檗碱含量的方法。方法:采用Chromatrex C182(2605 0n mmm,×柱4.6温m为m25,5℃μm,进)色样谱量柱为,20流μ动L相。为结甲果醇:-黄1%芩三苷乙和胺盐(酸加小入檗磷碱酸检调p测H浓值度至3分.0别,3在8∶166.20)～,8流0.0速μ为g1..0m Lm-L1.(rmi=n0-.199,9检9测)波、1.长1为～9.9μg.mL-1(r=0.999 9)范围内线性关系良好;平均加样回收率(n=9)分别为100.16%和100.86%,RSD分别为0.31%、1.86%。结论:该方法简便、准确、重复性好,可用于同时测定黄连羊肝丸中黄芩苷和盐酸小檗碱的含量。     

HPLC法测定小儿肺热平胶囊中黄芩苷的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定小儿肺热平胶囊中黄芩苷含量的方法。方法:色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.60m.1m60,5 3μ～m1.)2,8流2 6动μ相g为范乙围腈内-线0.2性%关磷系酸良(3好0∶;7平0均),回检收测率波为长99为.28890%nm,RS,D流=速0.为381.0%(mnL=.6mi)n。-1结,柱论温:本为3方5法℃可。靠结、简果单:黄可芩行苷,可进用样于量在小儿肺热平胶囊质量控制。     

RP-HPLC双波长法测定清热解毒软胶囊中栀子苷和黄芩苷的含量

目的:建立同时测定清热解毒软胶囊中栀子苷和黄芩苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C18柱;流动相为乙腈(B)-0.2%磷酸水溶液(C)(梯度洗脱,0～9min,15%B～85%C,流速为0.4mL·min-1;10～20min,25%B～75%C,流速为1.0mL·min-1);柱温为30℃,检测波长栀子苷为240nm,黄芩苷为278nm,进样量为10μL。结果:栀子苷、黄芩苷的进样量分别在0.044～0.22μg(r=0.9998)、0.56～2.8μg(r=0.9999)范围内与其峰面积积分值呈良好的线性关系。栀子苷和黄芩苷的低、中、高平均加样回收率分别为98.55%、98.54%、98.56%,98.40%、98.41%、98.42%,RSD分别为0.9197%、0.8323%、0.8596%,0.8653%、0.8058%、0.8693%(n=9)。结论:该方法操作简便、准确度高、重复性和精密度均良好,可用于清热解毒软胶囊质量控制和评价。     

HPLC法同时测定小儿热速清颗粒中绿原酸和黄芩苷的含量

目的:建立同时测定小儿热速清颗粒中绿原酸和黄芩苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Di-amonsilTM-C18柱,流动相为甲醇-水-磷酸(v/v=52:48:0.1),流速为1mL.min-1,检测波长为323nm,进样量为10μL,柱温为30℃。结果:绿原酸浓度在1.50～40.00μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均回收率为99.22%,RSD=1.45%(n=5)。黄芩苷浓度在0.50～100.00μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系,平均回收率为99.68%,RSD=0.84%(n=5)。结论:本方法灵敏、准确、重复性好,可用于小儿热速清颗粒的质量控制。     

对2005年版《中国药典》小儿热速清口服液中含量测定方法的改进

目的:改进2005年版《中国药典》小儿热速清口服液中含量测定的方法。方法:采用高效液相色谱法测定制剂中黄芩苷含量,色谱柱为Agilent zorbax SB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(45:55:0.2),流速为1.0mL·min-1,检测波长为276nm。结果:黄芩苷进样浓度在0.5～100μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9999);平均回收率为99.83%,RSD=0.99%(n=9)。结论:本方法快速、简便、准确,可为新版《中国药典》中小儿热速清口服液中含量测定方法提供参考依据。     

RP-HPLC法测定甘露扶正口服液中黄芩苷的含量

目的:建立测定甘露扶正口服液中黄芩苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法。色谱柱为Platisil ODS(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(45:55:0.2),检测波长为280nm,流速为0.8mL·min-1,柱温为40℃。结果:黄芩苷检测浓度在2.0～14.0μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9998);平均回收率分别为99.44%、99.77%、99.62%,RSD=0.78%(n=3)。结论:本方法简便、可靠、结果稳定、重复性好,可用于测定甘露扶正口服液中黄芩苷的含量。     

HPLC法测定养咽合剂中黄芩苷的含量

目的:建立高效液相色谱法测定养咽合剂中黄芩苷含量的方法.方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸-三乙胺(60∶40∶0.2∶0.2),进样量为10μl,检测波长为274 nm,流速为1.0ml·min-1,柱温30℃.结果:黄芩苷在2.4～15.0 μg ·ml-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r =0.999 4),平均加样回收率为101.60％,RSD=0.84％(n=9).结论:本方法简便、准确、分离效果好,可用于养咽合剂中黄芩苷的含量测定.     

HPLC法测定毓麟合剂中川续断皂苷Ⅵ的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定毓麟合剂中川续断皂苷Ⅵ含量的方法。方法:色谱柱为Zorbax EcLipse XDB-C18(150mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.01mo·lL-1盐酸溶液(69∶31),流速为1mL·min-1,检测波长为212nm,柱温为20℃。结果:川续断皂苷Ⅵ的检测浓度在0.022～0.23mg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9989);平均回收率为101.33%,RSD=2.35%(n=9)。结论:本方法简便、易行、精密度高、重复性好,可用于毓麟合剂的质量控制。     

不同凉粉草中天然苯甲酸的含量测定

目的：建立不同产地和存放时间的凉粉草中天然苯甲酸的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,以甲醇-0.02 mol·L-1的乙酸铵溶液为流动相（5∶95）;流速：1.0 ml·min-1;柱温：35℃;检测波长：230 nm;进样量：10μl。结果：苯甲酸在0.1~10.0μg·ml-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;平均回收率在99.59%（RSD为1.57%,n=9）。数据表明不同产地凉粉草所含苯甲酸的含量不同;1号凉粉草的苯甲酸含量最多,为141.8 mg·kg-1,3号凉粉草的苯甲酸含量最少,为73.8 mg·kg-1,凉粉草打粉存放两年后苯甲酸的含量均明显下降。结论：该方法操作简单,准确性和重复性良好,为凉粉草资源的进一步深入研究提供依据,同时为其他植物中天然苯甲酸含量测定提供参考。