生长抑制因子AcSDKP对转化生长因子β1促活化肝星状细胞合成和分泌细胞外基质的影响

目的:观察生长抑制因子N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对转化生长因子β(1TGF-β1)促活化肝星状细胞(HSC)合成和分泌细胞外基质(ECM)的影响,探讨其抗纤维化作用机制。方法:大鼠HSC经原代分离培养活化后,分为空白对照组、TGF-β1组(5μg.L-1)、AcSDKP组(1nmol.L-1)、混合处理组(AcSDKP1nmol.L-1+TGF-β15μg.L-1),每组6个复孔,加入相应药物培养72h后,观察各组HSC形态学变化,检测其中Ⅰ型胶原(ColⅠ)mRNA、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白的表达及HSC上清液中玻璃酸(HA)的含量。结果:与空白对照组比较,TGF-β1组HSCColⅠmRNA表达、HA含量均明显升高(P<0.05),AcSDKP组ColⅠmRNA表达、HA含量、α-SMA蛋白表达均明显降低(P<0.05);与TGF-β1组比较,混合处理组ColⅠmRNA表达、HA含量、α-SMA蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:AcSDKP可能通过抑制TGF-β1介导的活化HSC合成和分泌ECM,从而发挥其抗肝纤维化作用。     

特异性NF-kB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用

目的探讨特异性NF-kB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其可能机制。方法应用特异性NF-kB抑制剂PDTC治疗单侧输尿管梗阻大鼠模型，常规HE、PASM染色观察肾间质病理变化，电泳迁移率变动分析法检测肾组织中NF-kB的活性，免疫组化法检测TGF-β、MCP-1的表达，并采用图像分析系统进行半定量分析。结果治疗组较模型组大鼠梗阻侧肾脏病理变化明显减轻，肾皮质NF-kB活性及小管间质TGF-β1、MCP-1表达明显降低（P〈0．01）。结论特异性NF-kB抑制剂通过抑制NF-kB激活并进一步减少下游炎症和致纤维化细胞因子的表达以达到治疗肾间质纤维化的作用。     

阿魏酸钠对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的研究阿魏酸钠（SF）对梗阻性肾病大鼠肾小管间质纤维化的防治作用,探讨其抗纤维化作用的可能机制。方法采用单侧输尿管梗阻（UUO）诱导肾间质纤维化的动物模型,以血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）作为阳性对照,将大鼠随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（UUO组）、阿魏酸钠组（SF组）、洛汀新组（ACEI组）。术后第9天处死大鼠,肾组织用Masson染色后进行图像分析以评定各组肾小管间质损害程度,免疫组化半定量法检测各组肾间质的α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、肝细胞生长因子（HGF）的表达。结果在肾小管间质损伤指数、α—SMA及HGF的表达方面,UUO组明显高于SHAM组,SF组、ACEI组均明显低于UUO组,且两治疗组间差异无显著性;肾小管间质损伤指数与肾间质的α—SMA、HGF的表达均呈正相关。HGF的表达在SF组和ACEI组较高,与UUO组比较有显著差异。结论在单侧输尿管梗阻诱导的肾间质纤维化大鼠模型中,SF的防治作用与ACEI相似,可能是通过减少肾间质肌成纤维细胞（MyoF）的数量、上调HGF的表达,进而减少细胞外基质合成,从而减轻肾间质纤维化。     

特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用

目的探讨特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其可能机制。方法应用特异性NF-κB抑制剂PDTC治疗单侧输尿管梗阻大鼠模型,常规HE、PASM染色观察肾间质病理变化,电泳迁移率变动分析法检测肾组织中NF-κB的活性,免疫组化法检测TGF-β1、MCP-1的表达,并采用图像分析系统进行半定量分析。结果治疗组较模型组大鼠梗阻侧肾脏病理变化明显减轻,肾皮质NF-κB活性及小管间质TGF-β1、MCP-1表达明显降低(P<0·01)。结论特异性NF-κB抑制剂通过抑制NF-κB激活并进一步减少下游炎症和致纤维化细胞因子的表达以达到治疗肾间质纤维化的作用。     

厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化干预作用

目的:观察血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织结缔组织生长因子(CTGF)、骨形成蛋白-7(BMP-7)表达的影响,探讨厄贝沙坦保护肾脏的机制。方法:36只雄性Wistar大鼠随机分为厄贝沙坦治疗组、模型组、假手术组,每组12只。厄贝沙坦治疗组、模型组结扎大鼠左侧输尿管建立UUO模型,假手术组仅分离不结扎左侧输尿管,治疗组给予厄贝沙坦20mg/kg·d,假手术组、模型组每天给予相同剂量的生理盐水。每组分别于14d和28d各处死6只大鼠,并留取左侧肾脏组织做HE、MASSON染色,免疫组化法测定CTGF、BMP-7的表达。结果:与假手术组比较,厄贝沙坦治疗组、模型组的CTGF表达升高(P<0.01),而治疗组CTGF的表达低于模型组(P<0.01),治疗组肾间质纤维化程度也低于模型组(P<0.01)。与假手术比较,治疗组、模型组BMP-7表达降低(P<0.01),且治疗组BMP-7表达高于模型组(P<0.01)。结论:肾间质纤维化进展过程中厄贝沙坦治疗组CTGF表达逐渐减少,BMP-7表达逐渐增加。厄贝沙坦对肾脏的保护作用可能是通过减少CTGF的表达和增加BMP-7的表达。     

福辛普利钠 缬沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的观察联合应用福辛普利钠和缬沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响及其对肾组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用单侧输尿管梗阻模型(UUO),健康雄性SD大鼠68只,随机分为假手术组、模型对照组和治疗组,前2组用蒸馏水1ml灌胃,早晚各1次,治疗组上午用福辛普利钠(0.5mg/100g)、下午用缬沙坦(4mg/100g)灌胃。假手术组20只,1、2、3、4周后各处死5只,模型对照组和治疗组各24只,每隔1周处死6只,采用免疫组织化学法检测各组肾组织中bFGF蛋白的表达。结果bFGF蛋白在各组肾组织中均有表达,与假手术组相比,治疗组肾组织中bFGF蛋白的表达明显增加,但较模型对照组表达较弱(均P<0.05)。结论福辛普利钠和缬沙坦联合治疗有效,能减缓肾脏纤维化进程,可能是通过降低肾组织中bFGF蛋白的表达来发挥作用。     

厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响

目的 观察厄贝沙坦对单侧输尿管梗阻（UUO） 大鼠肾间质纤维化的影响并探讨其可能机制. 方法 采用UUO肾间质纤维化模型. 将24只大鼠随机分为3组,即假手术组、模型组、厄贝沙坦组,每组8只. 厄贝沙坦组给予厄贝沙坦10 mg&;#8226;kg^-1&;#8226;d^-1. 模型组与假手术组给予等量0.9%氯化钠溶液. 术后2周处死大鼠, 光镜下观察Masson和苏木精-伊红（HE）染色肾间质纤维化指数,观察肾组织病理改变,并应用免疫组织化学 方法 检测肾组织结缔组织生长因子（CTGF）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达. 结果 与假手术组比较,模型组尿素氮（BUN）和血肌酐（Scr）水平均显著增加,厄贝沙坦组较模型组呈下降趋势. 与假手术组比较,模型组肾组织行HE染色可见弥漫的肾小管上皮细胞空泡变性、扩张、部分萎缩,偶见坏死,肾间质增宽,大量的炎细胞浸润和间质纤维化,肾小球病理改变不明显,厄贝沙坦组上述改变均有所减轻. 与假手术组比较,模型组Masson染色 结果 显示肾间质增宽、有大量胶原纤维增生,肾小球病变不明显,厄贝沙坦组上述改变均有所减轻. 假手术组大鼠肾间质有少量CTGF表达,染色为颗粒状,着色稀疏;模型组CTGF表达明显增多,呈不均匀棕黄色颗粒状,肾小球表达不明显;厄贝沙坦组CTGF表达较模型组明显降低. MMP-2在假手术组大鼠肾间质中呈棕黄色颗粒状表达,模型组中大鼠肾间质仅有少量表达且着色稀疏,厄贝沙坦组MMP-2表达较假手术组减轻,但其表达仍高于模型组. 结论 厄贝沙坦可抑制CTGF的过度表达和增强MMP-2的表达,从而减缓肾纤维化的病程进展.     

真武壮肾汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化防治的实验研究

目的：探讨中药真武壮肾汤对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化防治的效果及机制。方法：将36只大鼠随机分为：假手术组、模型组、中药组,采用单侧输尿管梗阻（UUO）制作动物模型,术后7、14d检测肾组织TGFβ1及FN的表达。结果：中药组较模型组大鼠肾组织TGFβ1表达减弱,而FN生成减少。结论：真武壮肾汤可抑制TGFβ1表达。对抗肾间质纤维化。     

伊贝沙坦抑制大鼠单侧输尿管梗阻模型肾间质纤维化

目的探讨伊贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠模型肾间质纤维化的影响。方法制作大鼠肾间质纤维化模型,随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)和伊贝沙坦治疗组(C组),术后第7、14天分别处死各组中6只大鼠,用免疫组化方法测定肾间质中血小板衍生生长因子(PDGF-BB)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达和CD68(巨噬细胞标记物)阳性细胞浸润,观察肾脏病理变化。结果与B组相比,C组肾间质纤维化明显减轻,肾间质中α-SMA、PDGF-BB表达明显减少(P<0.05),CD68阳性细胞浸润无明显减少(P>0.05)。结论伊贝沙坦可通过下调肾间质PDGF-BB表达减轻肾间质纤维化。     

ERK1/2及JNK通路在AcSDKP抑制PDGF诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用

目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)及C-Jun氨基末端激酶(JNK)通路在N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)抑制血小板源性生长因子(PDGF)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达中的作用。方法将新生Wistar大鼠心脏成纤维细胞分为对照组(A组)、10ng/ml PDGF刺激组(B组)、10-9 mol/L AcSDKP+10ng/ml PDGF干预组(C组)、25μmol/L PD98059+10ng/ml PDGF干预组(D组)和10nmol/L SP600125+10ng/ml PDGF干预组(E组)。MTT法检测心脏成纤维细胞代谢活性的变化,Western blot法检测大鼠心脏成纤维细胞中ERK1/2、JNK及磷酸化-ERK1/2、磷酸化-JNK蛋白表达和Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果与A组相比,B组心脏成纤维细胞代谢活性、Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白表达、磷酸化-ERK1/2及磷酸化-JNK蛋白表达均增强(P<0.05);而C、D、E组能明显逆转B组上述各观察指标的增加过程(P<0.05)。结论 AcSDKP能够通过阻断PDGF介导的ERK1/2及JNK通路的激活,进而抑制大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原蛋白表达。     

丹参多酚酸盐对肾间质纤维化模型大鼠的改善作用及机制研究

目的:研究丹参多酚酸盐对肾间质纤维化(RIF)模型大鼠的改善作用及可能机制.方法:将50只雄性SD大鼠按体质量随机分为正常组、模型组、氯沙坦组(阳性对照组,9 mg/kg)和丹参多酚酸盐低、高剂量组(18、36 mg/kg),每组10只.除正常组外,其余各组大鼠均灌胃腺嘌呤250 mg/kg建立RIF模型.造模结束后,...     

多西环素对单侧输尿管结扎大鼠肾组织的影响及可能机制

目的：探讨多西环素对肾间质纤维化的影响及可能机制。方法采用单侧输尿管结扎术（ UUO ）致肾小管间质纤维化大鼠模型。将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、多西环素治疗组[8 mg/（ kg·d ）]。手术后7,14,21 d时分别处死各组中6只大鼠,用免疫组化方法观察大鼠肾组织中转化生长因子-β1（ TGF-β1）、基质金属蛋白酶2（ MMP-2）表达情况。行HE及Masson染色评定大鼠肾脏的病理情况。结果模型组各时间点MMP-2表达明显低于同期假手术组（ P〈0.05）,多西环素组各时间点MMP-2表达明显低于同期模型组（ P〈0.05）,多西环素组术后14 d及术后21 d低于术后7 d。模型组各时间点TGF-β1表达明显高于同期假手术组（ P〈0.05）,而多西环素组术后7 d TGF-β1表达明显低于同期模型组,多西环素组术后14 d及术后21 d高于术后7 d。结论多西环素在肾小管间质纤维化的早期对肾脏有保护作用。     

大黄酸对输尿管梗阻大鼠肾组织纤维化的保护机制

目的：观察大黄酸（RH）对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的作用及机制。方法：将雄性SD大鼠随机分成三大组：假手术对照组（Sham组,n=6）,UUO模型组（结扎左侧输尿管制作UUO模型,n=18）,UUO大黄酸干预组（UUO＋RH组,n=18）。除Sham组外,其余2组根据不同的观察时间细分为3,7,14d亚组（n=6）分别测定大鼠左肾皮质匀浆中脂质过氧化物标志物MDA以及抗氧化酶CAT和SOD含量。免疫组织化学用sP法检测肾脏TGF-β,bFGF的表达。结果：大黄酸干预组与UUO模型组相比有显著性差异。大黄酸能减少单侧输尿管梗阻侧肾皮质脂质过氧化物的产生,同时增加抗氧化酶的含量,减少TGF-β1和bFGF表达。结论：大黄酸通过阻止TGF—β信号传导,从而阻断肾间质的纤维化,发挥肾保护作用。     

卡托普利和氯沙坦对关木通所致大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的探讨卡托普利和氯沙坦对关木通所致慢性肾间质纤维化的防治作用，确定肾纤维化的检测指标，为临床诊治肾纤维化提供依据。方法将24只健康雄性大白鼠随机分成4组，每组6只。对照组正常饲养观察；模型组以生药浓度为2 g·mL 1的关木通水煎液灌胃，6 g·kg 1·d 1，qd；实验组1 在模型组给药基础上以0.51 mg·mL 1卡托普利悬液灌胃，1.66 mg·kg 1·d 1，qd；实验组2在模型组给药基础上以0.25 mg·mL 1氯沙坦悬液灌胃，0.83 mg·kg 1·d 1，qd。实验开始前和实验第2，4，6周自大鼠内眦静脉采血，测定血生化、肾功能及放射免疫指标，实验第42天从心脏直接采血后处死大鼠，取肾脏作组织形态学和特殊染色检查。结果给药后模型组、实验组1、实验组2的肾功能和血生化指标明显偏离正常范围。实验第4，6周，模型组血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）与本组实验开始前有明显差异（P＜0.01）；实验组1、实验组2的BUN、Scr 与同时期模型组有明显差异，均P＜0.01，前两者检测指标更接近正常范围。模型组、实验组1、实验组2放射免疫指标均偏离正常范围，但后两组更接近正常值，3组动物肾脏均有纤维化改变，其中模型组、实验组2纤维化程度更严重。结论卡托普利和氯沙坦对关木通所致的肾间质纤维化可能有一定的防治作用，关木通所致的肾间质纤维化导致血液中BUN、Scr 和钾离子变化明显，Ⅲ型前胶原、血清透明质酸、层黏连蛋白可以作为肾间质纤维化的临床放射免疫观察指标。     

吡非尼酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾小管间质纤维化的影响

［摘要］目地探讨吡非尼酮（PFD）对单侧输尿管梗阻（UUO） 模型大鼠肾小管间质纤维化（TIF）的影响及其可能机制，为临床使用PFD防治肾脏纤维化提供理论依据。方法SD大鼠35只，分为3组、假手术组7只，模型组14只，治疗组14只。治疗组给予PFD 250 mg&#8226;kg 1 &#8226;d 1，疗程14 d。假手术组于手术后14 d处死，后两组于手术后7及14 d分两批处死。行过碘酸希夫染色（PAS）及Masson染色观察病理变化；原位末端标记法（TUNEL）观察肾小管上皮细胞（RTC）凋亡的情况；免疫组化法检测肾小管半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶（Caspase） 3的蛋白表达；比色法测定肾组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果假手术组肾组织无明显病理改变；模型组TIF明显加重，RTC凋亡及Caspase 3表达增加（P＜0.05），且14 d时较7 d时更明显，但治疗组以上指标明显改善（P＜0.05）；与假手术组比较，模型组MDA含量明显增加（7 d较14 d时更明显），SOD活性明显下降（14 d较7 d时更明显）；但与模型组比较，治疗组MDA 7 d时显著改善，14 d时差别不明显，SOD 7及14 d均明显改善，以14 d为甚。结论PFD能明显减少UUO大鼠RTC的凋亡，从而改善TIF，上述作用可能与该药物抑制氧化应激和Caspase 3相关的凋亡途径有关。     

泰脂安胶囊对大鼠肝纤维化模型的影响

目的探讨泰脂安胶囊对肝纤维化的治疗作用。方法用皮下注射四氯化碳的方法建立大鼠肝纤维化模型，治疗组大鼠在造模成功后灌胃给予0.1 g·mL 1泰脂安混悬液1 g·kg 1·d 1治疗8周。测定血清和肝脏匀浆丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶(NOS)的表达，VG染色检测肝脏组织中胶原纤维的表达，免疫组化检测肝组织转化生长因子β1(TGF β1)、血小板源性生长因子(PDGF)和金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP 1)的表达。结果泰脂安能减轻肝纤维化的组织病理改变，降低肝纤维化大鼠肝组织胶原纤维和TIMP 1的表达。肝纤维化中，血清和肝脏匀浆MDA、NO含量和NOS的表达增加，肝脏组织TGF β1、PDGF的表达增加，使用泰脂安可显著降低MDA、NO含量，抑制NOS、TGF β1和PDGF的表达 (P＜0.01)。结论泰脂安对肝纤维化有治疗作用，其作用机制可能与影响MDA、NO含量及NOS、TGF β1和 PDGF的表达水平相关。     

补肾活血法组方中药防治肾间质纤维化的实验研究

目的探讨依据补肾活血法组方对进展性肾间质纤维化的防治作用。方法制作大鼠肾间质纤维化模型，将大鼠分为假手术组，高、低剂量治疗组和模型组。观察肾间质病变的程度及角蛋白、波形蛋白和α- 平滑肌肌动蛋白在肾间质的表达情况。结果治疗组肾间质损害程度明显轻于模型组（P〈O．01）；波形蛋白、α-平滑肌肌动蛋白阳性细胞表达明显少于模型组，角蛋白的表达明显多于模型组（P〈O，01）。结论补肾活血法中药使肌成纤维细胞的表达减少，上皮细胞的表达增强，说明抑制并逆转了肾小管上皮细胞肌成纤维细胞转分化，阻止了肾间质纤维化的进程。     

Notch通路及维甲酸与肾纤维化研究进展

摘要：维甲酸（retinoic acid,RA）对肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)存在着重要的影响,Notch信号途径在肾纤维化中发挥了关键作用,本文就维甲酸对肾纤维化与Notch通路的影响做综述,探索维甲酸干预Notch途径能否成为新的抗肾纤维化策略。