二至丸提取物对体外肝细胞损伤的保护作用

 目的：研究二至丸乙酸乙酯提取物(ethyl acetate extractsof Erzhi pill,EAEP)对体外肝细胞损伤的保护作用及其机理。方法：培养L-O2型肝细胞,采用CCl4和H2O2体外分别诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶(AST)和丙氨酸氨基转换酶(ALT)水平,测定上清液中丙二醛(MDA)的含量和过氧化物岐化酶(SOD)活力及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果：① EAEP(0.32～40 μg?mL-1)剂量组可明显降低由CCl4所致肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量的升高,还可提高由H2O2所致肝细胞存活率和SOD活力及GSH-Px活性的降低。② EAEP(0.32～40 μg?mL-1)剂量组可使H2O2升高的肝细胞培养上清液中ALT和ALT水平及MDA含量明显降低或恢复,还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和SOD活力及GSH-Px活性。结论：提示AEEP对体外肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

二至丸水提物对体外肝细胞损伤的保护作用

目的研究二至丸水提物（aqueous extract of Erzhi Pill,AEEP）对体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。方法培养L-O2型肝细胞,采用H2O2和CCl4体外分别诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中天门冬氨酸转换酶（AST）和丙氨酸氨基转换酶（ALT）水平,测定上清液中丙二醛（MDA）的含量和过氧化物岐化酶（SOD）活力,MTT法检测细胞存活和增殖活性。结果①AEEP（0.32~40μg/ml）剂量组可明显降低由H2O2升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量,还可提高H2O2降低的肝细胞存活率和SOD活力;②AEEP（0.32~40μg/ml）剂量组可使CCl4升高的肝细胞培养上清液中ALT和ALT水平及MDA含量明显降低或恢复,还可提高CCl4降低的肝细胞存活率和SOD活力。结论提示AEEP对体外肝细胞损伤有直接保护作用,该作用可能与其抗氧化作用有关。     

二至丸保肝活性成分群对体外肝细胞损伤的保护作用

<正>二至丸出自明代吴旻辑的《扶寿精方》[1],由女贞子(蒸)和墨旱莲等量组成,用于治疗肝肾阴虚、眩晕耳鸣等症。通过前期二至丸乙酸乙酯部位对体外肝细胞损伤保护作用的研究表明了该部位的保肝活性[2],本实验进一步通过聚酰胺柱层析对乙酸乙酯部位分离得到50%乙醇洗脱活性成分群(AIEP),采用体外培养L-O2型肝细胞,用四氯化碳(CCl4)和过氧化氢(H2O2)分别诱导肝细胞损伤模型。观察AIEP对体外肝细胞损伤的保护作用及其机制。     

二至丸保肝有效部位群对体外肝细胞损伤的保护作用

目的 研究二至丸保肝有效部位群(50％乙醇部位)(EFEP)对体外肝细胞损伤的保护作用及机理.方法 培养L-O2型肝细胞,采用四氯化碳(CCl4)和过氧化氢(H2O2)体外诱导肝细胞损伤,检测培养上清液中AST和ALT水平,测定上清液中丙二醛(MDA)的含量、过氧化物岐化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,MTT法检测细胞存活和增殖活性.结果 EFEP0.32-40 μg/ml明显降低由CCl4所致肝细胞培养上清液中AST和ALT水平和MDA含量的升高,也显著提高由CCl4所致肝细胞存活率和SOD活力及GSH-Px活性的降低.EFEP 0.32-40 μg/ml使H2O2升高的肝细胞培养上清液中AST和ALT水平及MDA含量明显降低,还显著提高由H2O2降低的肝细胞存活率和SOD活力及GSH-Px活性.结论 EFEP对体外肝细胞损伤有较强的保护作用.该作用可能与其抗氧化作用有关.     

二至丸的保肝降酶作用研究

目的 探明二至丸在保肝降酶方面的作用。方法 用水煎、醇提等方法得到二至丸不同的制备物，然后观察各制备物对四氯化碳性小鼠肝损伤ALT、AST升高的影响作用；结果 实验数据显示二至丸水煎、醇提等制剂均表现出明显的抑制ALT升高的作用。结论 二至丸具有明显的保肝降酶作用。     

二至丸药理作用研究进展

二至丸由女贞子、墨旱莲两味药材组成,具有补益肝肾、滋阴止血的功效,在妇科疾病、肾病、肝病等领域均有广泛的临床应用基础。现代药理研究发现二至丸在保肝补肾、改善骨质疏松、围绝经期综合征、免疫调节、抗衰老、改善神经系统疾病等方面具有广泛的药理活性,并对二至丸保护肝脏、抗骨质疏松、抗衰老的作用机制与潜在通路开展了研究。对二至丸的药理作用研究进展进行综述,为进一步利用现代药理学手段阐明二至丸治疗肝肾阴虚证的机制、挖掘中药经典方“多成分、多靶点、多通路”的作用特点以及指导二至丸临床应用提供参考。     

二至丸中齐墩果酸的含量测定

本文以乙醚提取，氯仿－甲醇（４０：１）为展开剂，反射法双波长扫描测定二至丸中齐墩果酸的含量，方法简便、灵敏、稳定。     

二至丸治疗更年期骨质疏松症临床疗效观察

目的观察二至丸治疗更年期骨质疏松症的临床疗效。方法将80例患者随机分为两组,各40例。治疗组40例,采用二至丸（1次9g,1日2次）治疗;对照组40例,采用钙天力（1次300mg,1日3次）治疗,两组均以2个月为1疗程,共3个疗程。主要观察治疗前后雌二醇（E2）、骨密度（BMD）水平的变化。结果总有效率治疗组为92.5%,对照组为65.0%,两组比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。治疗组治疗后E2、BMD水平明显升高,与治疗前比较,差异有显著性意义（P〈0.05）,与对照组治疗后比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论二至丸能明显改善更年期骨质疏松征症状,其作用机制可能是升高血E2水平,从而达到改善骨质疏松的目的。     

HPLC法测定二至丸中齐墩果酸的含量

建立HPLC法测定二至丸中齐墩果酸的含量。方法：色谱柱为Hypersil C18（250mm×4．6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（95：5）,检测波长为210nm,柱温为35％,流速为1ml·min^-1。结果：齐墩果酸的进样量在0．18-2．88μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0．999 4）,平均回收率为96．3％,RSD为1．3％（n=6）。结论：方法简便,重复性好。     

大蒜素对溃疡性结肠炎脂质过氧化损伤大鼠的保护

目的：探讨大蒜素(garlicin, Gar)对大鼠溃疡性结肠炎(UC)脂质过氧化损伤的保护作用。方法：用三硝基苯磺酸(TNBS)建立大鼠溃疡性结肠炎模型。将动物随机分为4组：①空白对照(Normal)组；②三硝基苯磺酸＋0.9%氯化钠注射液(TNBS＋NS)组；③三硝基苯磺酸＋大蒜素低浓度(TNBS＋GarL)组；④三硝基苯磺酸＋大蒜素高浓度(TNBS＋GarH)组。分别测定大肠组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量，观察大鼠形态和组织学改变。结果：TNBS＋NS组和TNBS＋GarL组的SOD活性显著低于Normal组(P＜0.01)，MDA含量显著高于Normal组(P＜0.01)；TNBS＋GarH组SOD活性显著高于TNBS＋NS组和TNBS＋GarL组(P＜0.01)，MDA含量显著低于TNBS＋NS组和TNBS＋GarL组(P＜0.01)，TNBS＋GarH组大鼠结肠炎性损伤评分指数明显降低。结论：Gar通过抑制脂质过氧化反应对UC肠黏膜有保护作用。     

血液灌流对灭多威中毒兔心肌的保护作用及其机制

摘 要 目的： 观察血液灌流（HP）对灭多威中毒兔损伤心肌的保护作用及其机制。方法: 24只兔随机分为3组：正常对照组（N组）、中毒组（P组）、血液灌流组（HP组）,每组8只,P组灭多威中毒模型,假血液灌流2 h,HP组兔灭多威中毒模型,行血液灌流2h,观察光镜下心肌组织的病理学改变特点,采用比色法检测各组兔心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,应用SPSS 16.0软件对实验所得数据进行统计。结果: 光学显微镜观察下,P组心肌组织可见充血、水肿等病理学改变,HP组与N组心肌组织充血水肿等病理改变不明显;与N组、HP组比较,P组实验兔心肌组织SOD活性明显下降,差异有统计学意义（P<0.05）, P组MDA含量有明显升高,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:早期血液灌流可减轻灭多威中毒所致心肌组织损伤,其机制与血液灌流的抗氧化损伤有关。     

二至丸及其组方药味配伍对兔凝血功能的影响

目的:研究二至丸及其组方药味配伍对兔体外凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)的影响,探讨因配比组方的不同而产生功效的差异性。方法:兔颈动脉取血制备待测血浆,以5%DMSO溶液作为空白对照,在测试杯每个通道中加入10μL样品溶液,空白对照加入等量的5%DMSO,再加不同体积的待测血浆,通过加入不同待测指标的试剂来测定二至丸及其组方药味配伍对PT、TT和APTT的影响。结果:与空白对照比较,女贞子打粉与墨旱莲榨汁配伍具有明显的促凝活性。结论:二至丸及其组方药味不同的配伍所产生促凝作用的不同可能与其功效差异相关。     

葛根素对异丙肾上腺素诱导小鼠心肌纤维化的保护作用

目的探讨葛根素对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌纤维化的保护作用及其可能机制。方法将昆明种小鼠分为溶媒对照组、心肌纤维化模型组、葛根素低、高剂量(0.6、1.2 g.kg-1)组、卡托普利(25 mg.kg-1)组。预先ig给药3 d后,同时皮下注射5 mg.kg-1异丙肾上腺素1 d后,以2.5 mg.kg-1.d-1连续注射30 d。停止注射异丙肾上腺素后,再继续ig给药7 d。称重小鼠,取心脏称重,计算心重指数(CWI);消化法测定心肌羟脯氨酸(Hydro)的含量;Masson染色观察心肌纤维化的程度并计算心肌胶原容积分数(CVF);测定小鼠心肌匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。结果葛根素给药组与模型组比较均能降低CWI和Hydro的含量;Masson染色结果显示:葛根素给药组心肌细胞间的胶原含量明显减少,CVF明显下降;与模型组比较,葛根素给药组心肌匀浆中SOD水平增高,MDA含量下降。结论葛根素对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌纤维化有一定的预防作用,该作用与抑制胶原的形成、抗脂质过氧化及清除氧自由基有关。     

阿霉素肾病鼠肾组织SOD,MDA变化的研究

采用一次性尾静脉注射阿霉素7mg／kg制备大白鼠肾病模型。分为注射后一周、二周、四周三组，同时设立正常对照组，分别测定各组肾皮髓质、血清超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）水平。结果肾病组肾组织、血清SOD活性和MDA水平明显高于对照组血清SOD／MDA比值明显低于对照组，四周组也明显低于一周和二周组。24小时尿蛋白排泄、血肌酐与肾组织MDA、血清MDA水平呈正相关，与血清SOD／MDA呈负相关，说明脂质过氧化反应参与阿霉素肾病的发病。     

前列地尔对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察前列地尔对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法首先建立大鼠肾缺血再灌注损伤动物模型,并将实验大鼠随机分为3组,即正常对照组(Control)、肾缺血再灌注损伤组(I/R)和前列地尔治疗组(前列地尔+I/R)。实验结束后检测大鼠血浆及肾组织中脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性,并观察大鼠肾脏组织结构的变化。结果大鼠发生肾脏缺血再灌注损伤时,血浆和肾组织中脂质过氧化代谢产物MDA的含量明显升高(P<0.05),而SOD的活性则明显降低(P<0.05)。在大鼠肾脏缺血再灌注损伤前预先给予前列地尔,能够明显抑制上述指标的变化,同时可以减轻大鼠肾脏组织超微结构的损伤。结论前列地尔可以降低大鼠血浆和肾组织中MDA的含量,升高SOD的水平,对大鼠肾缺血再灌注损伤具有明显的保护作用。     

玉郎伞多糖对小鼠急性酒精性肝损伤保护作用的研究

目的:研究玉郎伞多糖对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法:小鼠ig10mL·kg-150%酒精,建立急性酒精性肝损伤模型;测定血清转氨酶、肝组织超氧化物歧化酶活性及甘油三酯含量,并进行病理组织学观察。结果:各剂量玉郎伞多糖能显著降低小鼠血清转氨酶活性和甘油三酯含量,显著提高肝组织超氧化物歧化酶活性,减少肝细胞脂滴数量;高、中剂量玉郎伞多糖可显著减轻酒精性肝损伤小鼠肝细胞的脂肪变性。结论:玉郎伞多糖可减轻酒精对脂肪代谢的影响,对急性酒精性肝损伤有保护作用。     

赛庚啶对异丙肾上腺素诱发整体大鼠心肌损伤的保护作用

异丙肾上腺素(Iso,4mg·kg~1·d~1×2 d,sc)可使整体大鼠心电图J点明显抬高,血清磷酸肌酸激酶活性和游离脂肪酸含量显著增加,心肌组织超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性明显降低,但心肌组织丙二醛含量无明显改变.等剂量的赛庚啶(Cyp)和维拉帕米(2mg·kg~(-1)·d~1×2d,iv)均能有效地保护Iso所致的整体大鼠心肌损伤,其作用强度相近,提示Cyp对Iso诱发心肌损伤的保护作用可能主要与其抑制细胞Ca~(2+)内流和抗氧自由基作用有关     

萝卜硫素对阿霉素诱导的肝细胞损伤保护作用及其与氧化应激关系的研究

目的 探讨萝卜硫素（sulforaphane,SFN）对阿霉素（adriamycin,ADM）诱导的肝细胞损伤保护作用及其与氧化应激的关系。方法 体外培养人正常肝细胞L02和人肝癌细胞株HepG2,加入不同浓度的SFN （6.25,12.5,25,50,100 μg·mL^-1）,培养48 h;另取HepG2细胞中加入3.75,7.5,15,31.25,62.5,125,250,500 μg·mL^-1 SFN,培养24,48 h,MTT法检测培养后细胞抑制率,计算50%抑制浓度（IC₅₀值）。体外培养L02细胞,试验组加入不同浓度的SFN （3.75,7.5,15 μg·mL^-1）,试验组与模型组分别于0.5,1,2,3 h后加入1.25 mg·mL^-1的ADM,通过酶联免疫的方法分别对细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、乳酸脱氢酶（LDH）、葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）、核因子NF-E2相关因子（Nrf2）进行测定评估。结果 SFN能显著抑制HepG2的体外增殖,而且呈一定的药物浓度-效应和时间-效应关系。SFN对L02的抑制作用相对较弱,其IC₅₀为47.7 μg·mL^-1,明显高于其对HepG2的IC₅₀值。另外,与模型组比较,SFN能够明显降低细胞培养上清液MDA、LDH、GLUT4、TNF-α的水平,升高SOD、Nrf2水平。结论 SFN可显著抑制肝癌细胞的体外增殖能力,对其具有一定的选择性抑制作用,而且对于ADM诱导的肝细胞损伤具有一定的保护作用。可能是通过Keap1-Nrf2/ARE通路,诱导二相抗氧化酶清除体内的致癌物质或其他毒物,从而减轻肝脏组织的氧化应激和炎症反应。