胎儿有核红细胞在产前诊断中的应用

根据国外近5年对妊娠妇女外周血中胎儿有核红细胞应用于产前诊断的研究进展,总结胎儿有核红细胞的特点;简述胎儿有核红细胞在妊娠妇女外周血中出现规律及其富集分离方法;重点介绍采用聚合酶链反应和荧光原位杂交技术分析胎儿有核红细胞,以此对胎儿性别、血型及其可能存在的各种疾病,如21三体、13三体、18三体、地中海贫血、杜氏肌营养不良及巨细胞感染等进行诊断,同时可以对病理性妊娠提前筛查;为优生优育和妊娠期健康提供保障。     

母体外周血中胎儿有核红细胞在产前诊断中的应用

目前,对胎儿染色体非整倍体及单基因疾病的产前诊断,主要通过羊膜腔穿刺或绒毛膜取样的侵入性方法获取胎儿遗传物质,运用各种细胞遗传学和分子遗传学方法进行检测。这些侵入性临床操作,对孕妊娠妇女和胎儿具有一定的风险^[1]。因此,有必要探索胎儿染色体非整倍体及单基因疾病等非侵入性诊断方法,     

孕妇外周血分离胎儿有核红细胞与FISH分析技术在无创性产前诊断中的应用

目的:应用流式细胞仪从孕妇外周血中分离胎儿有核红细胞(NRBCs),通过荧光原位杂交(FISH)分析进行无创性产前诊断。方法:对15例妊娠11～24周的高危孕妇外周血按常规密度梯度方法分离单个核细胞,选用红细胞特异性抗体CD71、HbF结合流式细胞术(FACS)分选富集NRBCs,并进行FISH分析。结果:所有标本均分选出NRBCs,分选率为100%,CD71和HbF双阳性细胞含量为(3.43±1.62)×10-2。经FISH成功分析13例,未发现异常结果。结论:从孕妇外周血中分离富集得到的胎儿有核红细胞,通过FISH分析检测胎儿特定的染色体,可进行无创性产前诊断遗传性疾病。     

孕妇外周血中单个胎儿有核红细胞产前诊断胎儿ABO血型

目的:探讨母血中单个胎儿有核红细胞(NRBCS)产前诊断胎儿ABO血型的可行性。方法:从154例孕妇外周血中分离单个NRBCS,应用引物延伸扩增(PEP)法扩增单个NRBCS的基因组,用PCR法检测扩增产物中的SRY基因以判断NBRCS的来源。再用特异性序列-聚合酶链反应(PCR-SSP)法测胎儿ABO血型基因型。抽取新生儿脐血提取淋巴细胞,应用PCR-SSP法测胎儿ABO血型基因型。用常规血清方法测新生儿血型。结果:用PCR-SSP法检测出154例中的152例血型,2例未测出,检出率98.7%。检测出的152例胎儿基因型与脐血淋巴细胞所测ABO血型基因型完全相符。常规血清学方法测新生儿ABO血型,检测率为85.7%。结论:用单个NRBCS结合PCR-SSP法检测胎儿ABO血型方法可靠。     

利用母血中胎儿有核红细胞结合血清筛查和三维超声无创性产前诊断唐氏综合征

目的:利用母外周血中胎儿有核红细胞结合血清三联筛查及三维超声,建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式。方法:早、中期孕妇共670例,采取血清三联筛查结合三维超声和病史选取唐氏高危孕妇,抽取高危孕妇的外周血,流式细胞术富集母血中的胎儿有核红细胞(Fetal Nucleated Red Blood Cells,FNRBCs);次日进行多重引物原位杂交(muti-primed in situ labeling,multi-PRINS)检测胎儿细胞21号染色体与Y染色体。结果:通过血清三联筛查和三维超声结合病史筛选出高危孕妇24例,高危孕妇在两日内即可确诊,24例中诊断23例染色体正常胎儿,包括男胎12例、女胎11例;诊断1例男性唐氏综合征胎儿。24例标本检测结果和实际胎儿核型符合。结论:血清三联筛查、超声检查结合病史筛选出高危孕妇,然后利用母血中胎儿有核红细胞进行多重引物原位杂交检测细胞染色体,可作为快速、无创性产前诊断唐氏综合征的有效模式,并可为其他胎儿染色体基因异常或者宫内感染的无创性产前诊断提供参考。     

母血循环胎儿DNA在无创性产前诊断中的应用

孕妇外周血中游离胎儿DNA的发现为无创性产前诊断开辟了崭新的途径.随着有关研究的深入和检测手段的发展,母血循环胎儿DNA被越来越多地应用到对病理性妊娠和胎儿疾病的研究中,为预防和控制新生儿发病率及死亡率提供了一条快速、安全、灵敏度高、特异性强的非损伤性产前诊断方法,对优生优育、提高人口素质具有明显的社会意义.     

母血中胎儿细胞的研究现状及展望

母血中主要存在三种胎儿细胞，即滋养层细胞、胎儿白细胞及胎儿红细胞。其中胎儿有核红细胞被认为最有前途的可用于进行产前诊断的胎儿细胞。目前富集和分离胎儿细胞的方法主要有荧光激活细胞分离技术和磁性细胞分离技术两种。利用母血中的胎儿细胞可进行胎儿性别预测和一些遗传性疾病的产前诊断。研究表明，母血中胎儿细胞的数量与一些妊娠并发症和产后自身免疫性疾病有关。     

孕妇外周血胎儿细胞的分析及在产前诊断中的应用

孕妇外周血中存在胎儿细胞共四种“滋养叶细胞、有核红细胞、粒细胞和淋巴细胞，胎儿有核红细胞最适合富集、纯化及用于产前诊断。利用有核红细胞特异性抗原标记ＣＤ７１、ＣＤ３６、及抗ＧＰＡ、抗珠蛋白阳性选择及白细胞抗原ＣＤ４５阴性选择分离胎儿有核红细胞，用ＦＩＳＨ及ＰＣＲ技术进行遗传学分析，已能在产前诊断出胎儿性别，一些染色体异常及血红蛋白等疾病。     

应用磁激活细胞分选法从母血中分离胎儿有核红细胞做FISH行无创性产前诊断的研究

目的:尽管胎儿有核红细胞在母血中含量甚微,但它的存在却为无创伤性产前基因诊断提供了潜在资源。本研究意在建立一种利用从母血中分选出的胎儿有核红细胞进行无创伤性产前基因诊断的方法。方法:抽取14例妊娠18~32周的拟行产前诊断的孕妇外周血20m l,分别进行单梯度密度离心、用CD14、CD45、CD71标记的阴性和阳性免疫磁珠分选、K le ihaur-Betke(K-B)染色和荧光原位杂交(FISH)。结果:所有标本均分选出胎儿有核红细胞(nuc leated red b lood cell,NR-BC),并经K-B染色和FISH鉴定。由FISH确定的胎儿性别,经脐带血培养染色体核型分析鉴定,结果显示该方法判定男胎的敏感度为100%,特异度为92.86%;判定女胎的敏感度为92.86%,特异度为100%。结论:应用磁珠分选母血中的胎儿细胞,并通过FISH标记进一步检测胎儿特定染色体行无创性产前诊断的方法有重要的临床应用价值。     

母血中胎儿细胞的研究现状及展望

母血中主要存在三种胎儿细胞 ,即滋养层细胞、胎儿白细胞及胎儿红细胞。其中胎儿有核红细胞被认为是最有前途的可用于进行产前诊断的胎儿细胞。目前富集和分离胎儿细胞的方法主要有荧光激活细胞分离技术和磁性细胞分离技术两种。利用母血中的胎儿细胞可进行胎儿性别预测和一些遗传性疾病的产前诊断。研究表明 ,母血中胎儿细胞的数量与一些妊娠并发症和产后自身免疫性疾病有关。     

培养母体外周血中胎儿细胞用于产前诊断的研究新进展

从母体外周血中分离富集胎儿细胞用于产前诊断是当前国际医学遗传学和生殖医学研究的热点。但母血中胎儿细胞极少,这是应用于产前诊断的瓶颈。通过细胞培养富集母体外周血中的胎儿细胞被认为是一种很有前景的方法,该方法可以大大提高胎儿细胞在母体外周血中的相对数量与绝对数量,为产前分子细胞遗传学诊断提供充足的实验材料。现对该领域最新研究进展进行综述。     

培养母体外周血中胎儿细胞用于产前诊断的研究新进展

从母体外周血中分离富集胎儿细胞用于产前诊断是当前国际医学遗传学和生殖医学研究的热点.但母血中胎儿细胞极少,这是应用于产前诊断的瓶颈.通过细胞培养富集母体外周血中的胎儿细胞被认为是一种很有前景的方法,该方法可以大大提高胎儿细胞在母体外周血中的相对数量与绝对数量,为产前分子细胞遗传学诊断提供充足的实验材料.现对该领域最新研究进展进行综述.     

染色体荧光原位杂交在产前诊断中的应用

染色体ＦＩＳＨ在产前诊断中的应用刚刚起步，但研究得比较广泛。本文就其在孕早期中期诊断、母亲外周血找胎儿细胞及植入前产前诊断四个方面的应用做简要介绍。     

母体血循环中胎儿细胞的分离及在产前诊断中的应用

近年来，随着单克隆抗体技术、流式细胞技术、离心技术、聚合酶链反应及荧光原位杂交技术的日臻完善并应用于临床。一种非侵入性产前诊断方法──从孕妇外周血富集分离胎儿细胞进行基因诊断成为可能。本文就国外这方面研究的历史及目前进展作简要介绍。     

孕妇外周血胎儿细胞的分析及在产前诊断中的应用

孕妇外周血中存在胎儿细胞共四种 :滋养叶细胞、有核红细胞、粒细胞和淋巴细胞。胎儿有核红细胞最适合富集、纯化及用于产前诊断。利用有核红细胞特异性抗原标记CD71、CD36、及抗GPA、抗γ珠蛋白阳性选择及白细胞抗原CD45阴性选择分离胎儿有核红细胞 ,用FISH及PCR技术进行遗传学分析 ,已能在产前诊断出胎儿性别 ,一些染色体异常及血红蛋白等疾病     

胎儿超声检查在产前诊断胎儿畸形中的应用

目的探讨胎儿超声检查在产前诊断胎儿畸形中的应用价值。方法回顾性分析2006年4月～2012年4月在我院产科住院引产或产后证实先天性胎儿畸形63例患者常规二维产前超声检查及三维产前超声检查结果。结果 63例胎儿畸形中超声检出畸形56例,漏诊7例,超声诊断符合率88.89%,漏诊率11.11%。63例胎儿畸形中单发畸形44例(69.84%),复合畸形19例(30.16%);单发畸形中神经系统畸形13例(20.63%),颜面部畸形5例(7.94%),心脏畸形4例(6.35%),十二指肠梗阻1例(1.59%),泌尿系统畸形2例(3.17%),腹壁畸形3例(4.76%),单脐动脉4例(6.35%),肢体畸形2例(3.17%),尿道下裂1例(1.59%),胎儿水肿综合症9例(14.29%)。结论超声检查产前诊断胎儿畸形,并给予及时的处理与治疗,降低出生缺陷率,对提高人口素质及优生优育具有重要意义。     

培养孕妇外周血中胎儿有核红细胞在性连锁疾病产前诊断中的应用

目的 本文旨在建立一种利用孕妇外周血中分选出的胎儿有核红细胞应用于性连锁疾病无创伤性产前诊断的有效方法.方法 10例妊娠8～12周孕妇各取外周血5 mL,淋巴细胞分离液分离外周血、取上层细胞培养后固定、透化、血红蛋白ε链免疫荧光抗体染色.显微操作取阳性细胞,采用单细胞多重置换扩增技术(MDA)进行全基因组扩增,利用全基因组扩增产物为模板,常规PCR检测Alphoid基因片段确定胎儿性别,与B型超声性别诊断比较.结果经培养后所有标本均观察到血红蛋白ε链阳性细胞,即胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cell,FNRBC).分选出的阳性细胞经全基因组扩增和后续常规PCR检测,结果 显示10例中有6例诊断为男胎,与B型超声结果完全符合.3例为女胎,1例全基因组扩增失败,B型超声诊断4例为女胎.该方法诊断男胎的正确率为100%,诊断女胎的正确率为75%.结论 应用淋巴细胞分离液从孕妇外周血中富集单个核细胞、培养后以ε-血红蛋白抗体为分选标志,结合显微操作技术从母血中挑选出ε-血红蛋白阳性细胞,并通过全基因组扩增可以有效地获取足够量的研究模板,保证后续分析的准确性,且简单、经济、易行,在临床上可应用于性连锁遗传疾病的无创性产前诊断.     

FISH技术在产前诊断中的应用

荧光原位杂交(FISH)是一种具有高度灵敏性和特异性的染色体和基因分析技术,目前广泛用于产前诊断各种染色体异常,不仅可以用于羊水或绒毛细胞来筛查非整倍体,同时可以用于母亲外周血分离胎儿有核红细胞及宫颈冲洗收集滋养细胞等细胞数少、不适合常规染色体分析的染色体异常的检测.FISH技术还发展到植入前遗传学诊断对单个细胞进行染色体检查选择适宜的胚胎植入官腔从而避免患儿的出生.     

非侵入性产前诊断方法的研究进展

非侵入性产前诊断方法包括超声检查、母体血清标记物筛查、母体外周血中胎儿细胞的富集和分析、母体外周血中游离胎儿DNA的提取和分析等。各类技术近年发展很快,本文就其研究进展和临床应用加以综述。     

FISH技术在产前诊断胎儿染色体数异常中的应用

目的 探讨荧光原位杂交(FISH)技术在快速产前诊断胎儿染色体非整倍体异常中的价值.方法 使用荧光原位杂交技术,选用荧光素标记的双色13/21染色体位点特异性探针和三色18/X/Y染色体着丝粒探针,检测760例胎儿羊水细胞.结果 采用双色13/21号和三色18/X/Y染色体荧光探针检测间期未培养羊水细胞,发现8例21三体综合征,1例13三体综合征,1例45,XO,1例47,XXX,3例性染色体嵌合体.荧光原位杂交检测结果 和常规细胞遗传学检测结果 相比,两者符合率为99%.结论 荧光原位杂交技术在产前快速诊断胎儿染色体非整倍体异常有很高的临床价值.