冷冻保存对卵母细胞影响的研究进展

随着辅助生殖技术的发展,人卵母细胞的冷冻技术受到了广泛关注并被广泛应用。但与早期胚胎的冷冻保存相比,卵母细胞的冷冻保存具有复苏后成活率低、受精率低、胚胎发育潜力差、妊娠率低、流产率高等特点。冷冻和解冻过程以及冷冻保护剂等均会对卵母细胞造成一系列形态学、细胞学以及生理、生化方面的影响。如:冷冻保护剂、冻融过程等可对卵母细胞的纺锤体、细胞骨架、细胞内钙离子、蛋白质组、细胞代谢以及卵母细胞的活性和发育潜力造成不同程度的影响。研究卵母细胞特殊的生物学特性以及冷冻对其造成的影响,有助于改进卵母细胞的冷冻方法,提高成功率。     

左归丸和右归丸对冷冻大鼠卵巢组织存活效果的影响

目的评价左归丸和右归丸对大鼠卵巢组织冷冻效果的影响。方法在大鼠卵巢组织冷冻保存过程中,在冷冻保护剂中分别加入5%、10%、15%左归丸和右归丸含药血清和空白血清,比较各组解冻复苏后卵巢组织结构特点、卵泡正常形态率、卵母细胞凋亡率。结果新鲜卵巢组的卵泡正常形态率高于各冷冻卵巢组,卵母细胞凋亡率显著低于所有冷冻组(P0.05);10%、15%左归丸和右归丸含药血清组的卵泡正常形态率高于5%左归丸和右归丸含药血清组和空白对照组,卵母细胞凋亡率低于5%左归丸和右归丸含药血清组和空白对照组(P0.05)。结论左归丸和右归丸能提高冷冻卵巢组织的卵泡成活率,降低冷冻卵巢组织卵母细胞的凋亡率,为补肾中药成功应用于卵巢组织冷冻保存中提供了实验依据。     

卵子玻璃化冷冻保存生育力的研究进展

随着人类辅助生殖技术的发展,卵子冷冻技术已经成为人们关注的课题,在拓宽目前辅助生殖技术服务的范围和保存女性生育能力方面有重要的价值.近年来玻璃化冷冻被认为是深低温保藏卵母细胞很有前途的选择.玻璃化冷冻卵母细胞冻融后存活率、受精率、卵裂率及移植妊娠活婴率较前有所提高,但迄今为止,人们仍缺少标准的玻璃化冷冻方案,对保护剂和载体的选择及冷冻程序等仍未达成共识.该文就玻璃化冷冻人类卵母细胞意义、卵子玻璃化冷冻的应用现状及冷冻保护剂、低温冷冻复苏对卵子的潜在危害及应用前景等研究作以综述.     

脯氨酸作为细胞冷冻保护剂的研究进展

细胞冷冻保存应用广泛, 但冷冻会损伤细胞导致代谢紊乱, 而冷冻保护剂可缓解该过程。脯氨酸是一种渗透性冷冻保护剂, 可快速透过细胞膜进入细胞内, 与细胞内水氢键结合抑制低温下冰晶形成, 同时可与细胞内水结合减少细胞内水流失, 保护细胞内蛋白质的结构和功能, 保护细胞膜。脯氨酸可提高植物、动物及人类体细胞冷冻复苏后存活率。在生殖细胞冷冻中, 研究表明脯氨酸可用于卵母细胞冷冻, 可提高小鼠卵母细胞冷冻后存活率及保护线粒体功能, 但其对于精子的冷冻效果报道尚不一致。脯氨酸冷冻保护剂涉及多种细胞类型且冷冻效果较强, 其未来可能更广泛应用于低温生物学领域。本文总结了脯氨酸作为天然小分子冷冻保护剂的应用研究进展, 希望能够帮助人们更好地了解生殖细胞冻存的低温生物学机制, 为改良生育力冷冻保存技术提供参考。     

卵母细胞冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术越来越多地应用于人类辅助生殖,但冷冻保存效率和冷冻损伤仍然制约其在临床上的普遍应用.冷冻保存会引起皮质颗粒的提前释放,透明带硬化;还会影响纺锤体和染色体的形态及超微结构.最终降低卵母细胞的发育能力.因此,需进一步研究卵母细胞冷冻损伤的机制,改进冷冻保护剂和冷冻方法.     

卵母细胞玻璃化冷冻损伤相关因素及进展

卵母细胞玻璃化冷冻损伤的机制及影响因素的研究是近年来关于生殖能力贮存的研究热点.近年来随着细胞生物学及分子生物学的迅速发展,对卵母细胞冷冻损伤的影响因素研究取得了巨大进展.综述冷冻保护剂、卵母细胞特点及发育阶段、降温速率、卵母细胞的外围结构、冷冻方法等因素对卵母细胞冷冻损伤的影响机制及降低卵母细胞冷冻损伤的最近进展.     

人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rall和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来,玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注.在人类辅助生殖技术中,囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义,因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存,玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术.在玻璃化冷冻技术中,不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理,都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素.     

慢速冷冻中糖浓度对卵母细胞纺锤体和染色体构型的影响

卵母细胞冷冻是目前人类体外受精（IVF）和生殖科学的前沿技术，人卵母细胞对冷冻有特异的敏感性，与是否实施慢速冷冻法还是玻璃化冷冻法无关。在实施慢速冷冻过程中，细胞内冰晶的形成、冷冻保护剂的毒性、渗透压、pH值、活性氧等因素均可以破坏卵母细胞的发育潜能。由于目前尚不能解决卵母细胞的安全性问题，所以研究旨在比较运用两种不同糖浓度的非渗透性冷冻保护剂进行慢速冷冻对MⅡ期卵的纺锤体形态及染色体构型的影响。     

卵母细胞冷冻保存的研究进展

卵母细胞冷冻保存技术越来越多地应用于人类辅助生殖,但冷冻保存效率和冷冻损伤仍然制约其在临床上的普遍应用。冷冻保存会引起皮质颗粒的提前释放,透明带硬化;还会影响纺锤体和染色体的形态及超微结构,最终降低卵母细胞的发育能力。因此,需进一步研究卵母细胞冷冻损伤的机制,改进冷冻保护剂和冷冻方法。     

人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rail和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来，玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注。在人类辅助生殖技术中，囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义．因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存，玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术。在玻璃化冷冻技术中．不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理。都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.     

卵母细胞玻璃化冷冻损伤相关因素及进展

卵母细胞玻璃化冷冻损伤的机制及影响因素的研究是近年来关于生殖能力贮存的研究热点。近年来随着细胞生物学及分子生物学的迅速发展,对卵母细胞冷冻损伤的影响因素研究取得了巨大进展。综述冷冻保护剂、卵母细胞特点及发育阶段、降温速率、卵母细胞的外围结构、冷冻方法等因素对卵母细胞冷冻损伤的影响机制及降低卵母细胞冷冻损伤的最近进展。     

雄性生殖细胞冷冻保存研究进展

随着单精子及精子细胞卵胞浆内显微受精技术的发展,雄性生殖细胞冷冻保存技术已成为辅助生殖技术的重要内容,为男性因素不育患者的临床助孕提供了物质保障基础。目前,雄性生殖细胞冷冻方法包括程序化冷冻和玻璃化冷冻;冷冻保护剂可有效降低细胞的冷冻损伤,根据其特性分为渗透性保护剂和非渗透性保护剂两大类;冷冻载体中冷冻环、冷冻叶片等应用较广泛。雄性生殖细胞冷冻的效果与冷冻方法、冷冻保护剂和冷冻载体等密切相关。     

卵巢组织玻璃化冷冻的研究进展

冷冻保存胚胎、卵母细胞或者卵巢组织是目前保存女性生殖内分泌功能的可选途径.相比之下,卵巢冷冻的优越性是卵母细胞或胚胎冷冻无可比拟的.传统的冷冻技术已经在临床推广应用,但由于操作过程复杂、医疗仪器昂贵、耗费时间长等,使其在一般的实验室无法推广应用.玻璃化冷冻操作简单、省时省力、且能减小传统慢冻所造成的冰晶组织损伤,注定其必将为人所关注并将渐渐被推广.但迄今为止,玻璃化冷冻尚未形成一个完整的标准体系.综合近几年玻璃化冷冻研究进展,展望其研究前景和目前存在的问题,努力思考如何建立卵巢组织的玻璃化冷冻.     

玻璃化冷冻卵母细胞及卵巢组织研究进展

玻璃化冷冻技术近年已广泛应用于生殖领域,尤其是在女性生育力的储备方面展示其特有的优势.目前胚胎玻璃化冷冻已较成熟,并应用于临床.首次卵母细胞玻璃化冷冻的成功以及实验动物卵巢组织成功移植并获得分娩给研究带来无限希望,但目前仍处于实验阶段,研究者企图从不同角度解决难题.卵母细胞冷冻后,细胞结构的易损伤性造成的低复苏率.以及对卵巢组织玻璃化冷冻的可行性探索,对生殖领域提出新挑战.由于卵巢组织冻存与卵母细胞的冻存有着密不可分的联系,就两者国内外新进展做综述.     

人类卵母细胞玻璃化冷冻的研究进展

玻璃化冷冻技术已逐渐成为辅助生育技术中重要的应用技术之一，玻璃化冷冻可避免冻融过程中细胞内冰晶的形成，降低细胞损伤，在人类配子、胚胎的冷冻保存中取得了不少进展。近十几年来，玻璃化冷冻技术已成功应用于成熟卵母细胞、未成熟卵母细胞等方面的冷冻保存并取得成功。该技术操作简单、迅速快捷，正逐渐成为人类辅助生殖技术中重要的应用技术之一。本文综述了玻璃化冷冻技术在保存人类不同发育阶段卵细胞方面的研究进展。     

影响人类胚胎冷冻保存结果的因素

自第一次人类胚胎冷冻成功并获妊娠至今已有十多年的历史,探求人类胚胎冷冻保存的影响因素一直是该领域的重要课题之一。影响人类胚胎冷冻保存结果的因素众多,主要有胚胎的质量和分裂阶段、母体年龄及移植时机以及冷冻保护剂和冷冻融解程序等几方面,其中,尤以胚胎质量及母体年龄起重要作用。在多种冷冻方法中,现较多采用慢速冷冻、快速融解方法,但其它方法也有其优势;蔗糖等非渗透性保护剂和渗透性保护剂联合使用常取得较好效果。胚胎质量、分裂阶段、移植数目等也影响最终结果,随着其它技术如胞浆内单精子注射(ICSI)、辅助孵化的不断成熟,进一步提高了冷冻融解胚胎的妊娠率和植入率。母体年龄及选择最佳的胚胎移植时机是决定冷冻胚胎能否发生妊娠的最后关键因素。     

卵子玻璃化冷冻对表观遗传及基因表达的影响

<正>1978年,Louise Brown的出生表示辅助生殖技术(assisted reproductive technologies,ART)的范围已大大拓宽^[1]。虽然胚胎和精子冷冻保存都已经是较为成熟的技术,但因为技术问题和较低的成功率,卵母细胞冷冻领域在很长时间内缺乏进展^[2],1980年代后期,首次使用慢速冷冻和快速解冻冷冻保存技术,冷冻卵母细胞才首次成功受孕^[3-4]。因为卵母细胞的表面积与体积之比较低,并且对细胞内冰晶形成的敏感性很高,卵母细胞被普遍认为是一种难以冷冻保存的细胞^[5]。1994年,     

程序冷冻法、液氮蒸汽法冷冻人类精子的效果比较

目的:比较程序冷冻法和液氮蒸汽法冷冻保存人类精子的效果.方法:用同一批次GYC型冷冻保护剂,分别应用程序冷冻法和液氮蒸汽法对68份精液标本进行冷冻保存,并比较其冷冻复苏率.结果:应用程序冷冻法冷冻的精液标本,其复苏后前向运动精子(a b级)的冷冻复苏率为66.7%±8.1%,应用液氮蒸汽法冷冻的精液标本,其复苏后前向运动精子(a b级)的冷冻复苏率为63.9%±7.9%,两组相比无显著差异(p>0.05).结论:采用程序冷冻法和液氮蒸汽法冷冻人类精子,二者冷冻复苏率无显著差异,两种方法均可以用于人类精子库冷冻保存精液标本.     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射-胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力。根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P>0.05),但是受精率存在显著性差异(P<0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),但受精率存在显著性差异(P<0.05)。成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P<0.05)。程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例,获得1例生化妊娠。结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力。玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势。