金雀异黄素对IL-1α刺激破骨样细胞的组织蛋白酶K表达的影响(英文)

目的:探讨金雀异黄素对白细胞介素1α(IL-1α)刺激破骨样细胞组织蛋白酶K(CK)表达的作用。方法:从人骨巨细胞瘤组织中纯化出破骨样细胞(OCLs),用不同浓度的金雀异黄素或17β-雌二醇(17β-E2)孵育,并设空白对照组和阳性对照组,采用RT-PCR和Western blot方法,观察IL-1α刺激后CK的表达。结果:与空白对照组相比,IL-1α刺激CK表达显著增加(P<0.01);金雀异黄素在转录水平下调IL-1α刺激后CK的表达,且呈剂量依赖关系(r=0.68,P<0.01);金雀异黄素下调IL-1α刺激后CK的蛋白表达,且呈剂量依赖关系(r=0.61,P<0.01)。雌激素受体拮抗剂ICI 182.780可以部分抑制金雀异黄素的上述作用。结论:金雀异黄素可通过破骨样细胞的雌激素受体部分抑制IL-1α刺激后CK的表达。     

金雀异黄素对CIA大鼠促炎和抗炎因子分泌的影响

目的研究金雀异黄素对Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠促炎和抗炎因子分泌的影响。方法建立Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠模型,通过50、100和200μm的金雀异黄素治疗,以0.1 mg/mL每周甲氨蝶呤(MTX)作为阳性对照,治疗后每周检测Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠关节炎指数评分和后肢容积,第5周取膝关节进行关节滑膜组织病理检测;取静脉血分离出血清后,用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清中白细胞介素-4(IL-4)、IL-6、IL-8、IL-10、转化生长因子-β1(TGF-β1)、淋巴毒素-α的水平。结果关节炎指数评分、后肢容积以及关节滑膜组织病理结果显示造模成功。模型组大鼠血清中的炎症因子IL-6、IL-8和淋巴毒素-α的表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);金雀异黄素能下调IL-6、IL-8、淋巴毒素-α的分泌,200μm金雀异黄素对IL-6、IL-8的抑制作用与MTX相当,而各金雀异黄素治疗组对淋巴毒素-α的抑制作用均弱于MTX。模型组大鼠血清中的细胞因子IL-4、IL-10、TGF-β1的表达水平低于空白对照组(P<0.05);金雀异黄素能上调IL-4、IL-10、TGF-β1的分泌。100μm金雀异黄素对IL-4的上调作用与MTX相当;200μm金雀异黄素对IL-10的促进作用与MTX相当,对TGF-β1的上调作用强于MTX。结论金雀异黄素抑制Ⅱ型胶原诱导型关节炎大鼠炎症因子的释放,促进抗炎因子的表达,改善关节炎大鼠滑膜炎症。     

金雀异黄素对白介素-6诱导下SKOV3人卵巢癌细胞的抑制作用

目的探讨不同剂量金雀异黄素对白介素-6(IL-6)诱导的SKOV3人卵巢癌细胞增殖作用及其机制。方法将SKOV3人卵巢癌细胞分为5组,即对照组、IL-6组(25 ng/ml IL-6)、低(25 ng/ml IL-6+80μmol/L金雀异黄素)、中(25 ng/ml IL-6+120μmol/L金雀异黄素)和高剂量金雀异黄素组(25 ng/ml IL-6+160μmol/L金雀异黄素)。然后检测各组细胞增殖抑制率、凋亡率、迁移能力和侵袭能力,Western blot检测细胞CDK4和G1/S-特异性周期蛋白-D1(CyclinD1)表达情况。结果低、中和高剂量金雀异黄素组卵巢癌细胞增殖抑制率明显高于IL-6组(P0.05),凋亡率明显高于IL-6组(P0.01),低、中和高剂量金雀异黄素组卵巢癌细胞增殖率随金雀异黄素剂量上升明显降低(P0.05),而卵巢癌细胞凋亡率随金雀异黄素剂量上升明显增高(P0.01),上述差异均有统计学意义。低、中和高剂量组金雀异黄素和对照组卵巢癌细胞迁移率和穿膜细胞数明显低于IL-6组,低、中和高剂量金雀异黄素组卵巢癌细胞迁移率和穿膜细胞数随金雀异黄素剂量上升而降低,差异均有统计学意义(P0.01)。对照组、低、中和高剂量组卵巢癌细胞CDK4和CyclinD1蛋白表达明显低于IL-6组,低、中和高剂量组卵巢癌细胞CDK4和CyclinD1蛋白表达随金雀异黄素剂量上升明显降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论金雀异黄素可抑制IL-6诱导的SKOV3细胞增殖,其使用剂量越高,抑癌效果越好,机制可能是通过抑制CyclinD1/CDK4信号通路实现。     

金雀异黄素通过调控miR-27a及其靶基因对卵巢癌细胞SKOV3生长的影响

目的：研究金雀异黄素对卵巢癌细胞株SKOV3生长的抑制作用及其可能的机制。方法：收集卵巢癌组织及良性组织,应用RT-PCR法检测miR-27a的表达。用不同浓度的金雀异黄素处理细胞,通过SRB法检测金雀异黄素单用或加入miR-27amimics后对细胞株生长的抑制作用;经RT-PCR和Western blot检测miR-27a及靶基因Sprouty2表达的变化。结果：miR-27a在卵巢癌组织中的表达高于良性组织（P〈0.05）。金雀异黄素可呈浓度和时间依赖的方式抑制卵巢癌细胞SKOV3生长;金雀异黄素浓度依赖性地下调miR-27a,上调Sprouty2的表达,且miR-27amimics能够部分拮抗金雀异黄素抑制细胞生长的作用。结论：金雀异黄素可能通过下调致癌miR-27a的表达,发挥抑制卵巢癌细胞生长的作用。     

金雀异黄素和槲皮素对人类乳腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨金雀异黄素(genistein,Gen)和槲皮素(quercetin,Que)对人类乳腺癌细胞株增殖的影响。方法采用噻唑蓝(MTT)比色法测定槲皮素对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7、T47D和非雌激素依赖性乳腺癌细胞MDA-MB231的细胞增殖作用,并以雌激素受体拮抗剂ICI182780为工具药来评价金雀异黄素、槲皮素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系,流式细胞术对MCF-7细胞的增殖情况进行分析。结果Gen和Que在一定剂量范围内能促进T47D和MCF-7细胞的增殖,而对雌激素受体阴性MDA-MB231细胞未见增殖作用,并将MCF-7细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数,且Gen和Que促进MCF-7细胞增殖作用被雌激素受体拮抗剂所拮抗。结论金雀异黄素和槲皮素具有雌激素活性,此作用可能是通过雌激素受体(ER)介导的。     

金雀异黄素对胃癌细胞增殖的影响及对microRNA-27a和FOXO1的调控

目的 探讨人微小RNA-27a(microRNA-27a,miR-27a)及其靶基因FOXO1在胃癌组织、癌旁组织中的变化及其在金雀异黄素抑制胃癌细胞增殖中的作用.方法 利用Real Time PCR方法检测10对胃癌癌旁/癌组织中microRNA-27a及其靶基因FOXO1 mRNA的表达.不同浓度(5、10、20、40 μmol·L-1)的金雀异黄素作用于胃癌细胞SGC 7901 72 h后,用噻唑兰比色法(MTT)检测细胞增殖,并采用Real Time PCR方法检测细胞中miR-27a及其靶基因FOXO1 mRNA的表达.结果 胃癌组织较癌旁组织miR-27a表达升高(1.566±0.206 5),其靶基因FOXO1 mRNA表达降低(0.298±0.156 6).Pearson线性分析表明:miR-27a与FOXO1 mRNA呈负相关(r=-0.701 8).金雀异黄素作用于SGC-7901细胞后,细胞增殖得到了抑制,尤其在20与40μmol·L-1浓度下,细胞抑制率明显降低.不同浓度的金雀异黄素处理72 h后,miR-27a表达与对照组比较明显降低;其靶基因FOXO1mRNA表达水平较对照组增加(均P＜0.05).结论 金雀异黄素可能通过抑制miR-27a表达,促进FOXO1 mR-NA的表达,进而抑制胃癌细胞增殖,发挥抗肿瘤的作用.     

金雀异黄素对肾小管间质纤维化模型大鼠肾组织DDR1、bFGF表达的影响

目的 探讨DDR1在肾小管损伤及间质纤维化过程中的表达以及金雀异黄素在肾小管损伤及间质纤维化过程中对肾脏的保护作用及可能机制.方法 采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型,将45只大鼠随机分为三组:假手术组、模型组、金雀异黄素干预组,分别于术后7d、14d、21d每组各处死5只大鼠,收集血清测定尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平,结扎侧肾组织行HE染色观察肾脏病理变化,Masson染色分析肾间质纤维化程度,免疫组化半定量检测各组大鼠肾组织DDR1、bFGF的表达.结果 模型组DDR1、bFGF表达及肾间质纤维化程度明显高于假手术组,BUN、Scr水平显著升高(P＜0.01);金雀异黄素干预组DDR1、bFGF表达及肾间质纤维化程度较模型组明显降低(P如.01或0.05),部分时间段BUN、Scr水平有所下降(P＜0.05).结论 金雀异黄素可能通过降低DDR1及bFGF的表达而减轻肾小管损伤及间质纤维化程度.     

金雀异黄素对MCP-1诱导人脐静脉血管平滑肌细胞增殖及c-fos mRNA转录的影响

目的研究金雀异黄素对单核细胞趋化蛋白1(MCP1)诱导的人脐静脉血管平滑肌细胞(hUVSMC)增殖及cfosmRNA转录的影响。方法用不同浓度(10,30,90μmol·L-1)金雀异黄素预作用hUVSMC2h后加入终浓度为10μg·L-1的MCP1作用30min;采用逆转录聚合酶链反应检测细胞中cfos基因的表达;作用48h,用细胞计数检测细胞增殖的情况。结果金雀异黄素在低剂量(10μmol·L-1)即能抑制平滑肌细胞的增殖(P<0.05),在高剂量(30,90μmol·L-1)才能抑制细胞内cfosmRNA的表达(P<0.01,P<0.01)。结论金雀异黄素能抑制MCP1诱导的hUVSMC增殖,其机制可能与降低cfos的表达有关。     

槲皮素、补骨脂素对乳腺癌细胞株MCF-7增殖的影响

目的探讨槲皮素(quercetin,Que)和补骨脂素(psor-alen,Pso)对人类乳腺癌细胞株增殖的影响。方法采用流式细胞术和蛋白印迹法检测槲皮素和补骨脂素对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7的影响,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价槲皮素和补骨脂素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系。结果①槲皮素、补骨脂素在10μmol.L-1可使MCF-7细胞增殖指数明显升高,增加S期细胞的比例,与10-3μmon.L-1E2阳性对照组的变化趋势一致。当ICI182,780分别与E2、金雀异黄素、槲皮素、补骨脂素共孵育48 h后,E2、金雀异黄素、槲皮素、补骨脂素的增殖效应被抑制,细胞周期S期细胞数比例下降,G0/G1期细胞数比例上升。②10μmol.L-1槲皮素和10μmol.L-1补骨脂素均上调MCF-7细胞ERα蛋白水平,而对ERβ蛋白表达没有影响;当分别与ICI182,780共孵育MCF-7细胞ERα蛋白表达被拮抗。结论槲皮素和补骨脂素具有雌激素活性,此作用是通过雌激素受体(ER)介导的;产生的类似金雀异黄素促进MCF-7细胞增殖的作用是通过增加ERα表达实现的。     

金雀异黄素对K562细胞的生长抑制和诱导凋亡作用

目的探讨金雀异黄素对人红白血病细胞系K562细胞的生长抑制、诱导凋亡作用。方法不同浓度的金雀异黄素处理K562细胞后,用MTT比色法检测细胞生长增殖作用,Wright-Gimesa法观察细胞的形态学变化,FCM检测K562细胞凋亡峰。结果金雀异黄素对K562细胞具有与时间、浓度呈正相关的生长抑制作用。形态学显示金雀异黄素高浓度组细胞发生核固缩、核碎裂,并有凋亡小体出现。细胞周期显示对照组K562G2／M期细胞8．9％,金雀异黄素75gmol·L^-1时升高到60．6％（P〈0．05）;金雀异黄素75gmol·L^-1时K562细胞亚G1期细胞为27．3％,对照组为0．4％（P〈0．05）。结论金雀异黄素对K562细胞具有很强的生长抑制作用,K562细胞可发生明显G2／M期阻滞,金雀异黄素诱导了K562细胞发生凋亡。     

不同剂量钙敏感受体抑制剂对磨损颗粒诱导小鼠骨溶解及炎症因子表达的影响

目的 观察不同剂量钙敏感受体抑制剂对磨损颗粒诱导的骨溶解及炎症因子表达的影响,从而探讨其防治人工关节无菌性松动的作用。方法 将40只8～10周龄C57BL/6J雄性小鼠采用随机数字表法分成空白对照组、颗粒组、低剂量组、高剂量组,每组10只。颗粒组、低剂量组、高剂量组小鼠建立磨损颗粒诱导骨溶解颅骨模型,空白对照组进行假手术处理。术后第2天开始,低剂量组、高剂量组小鼠分别隔日给予0.2、2.0 mg/kg钙敏感受体抑制剂NPS2390腹腔注射进行干预;空白对照组、颗粒组给予等量生理盐水替代。14 d后,取颅骨标本,比较各组间颅骨骨矿物质密度、骨体积分数、骨孔隙率、颅骨骨面积、破骨细胞数量及炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)表达量。结果 颗粒组破骨细胞数、骨孔隙率、炎症因子TNF-α和IL-1β表达量高于空白对照组,而颅骨骨矿物质密度、骨体积分数及骨面积低于空白对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。低剂量组骨矿物质密度高于颗粒组,破骨细胞数、炎症因子TNF-α和IL-1β表达量低于颗粒组,差异有统计学意义（P<0.05）。高剂量组颅骨骨矿物质密...     

连续股神经阻滞对兔膝骨关节炎模型疼痛的疗效与作用机理初步研究

目的 探究连续股神经阻滞对兔膝骨性关节炎(KOA)模型的疼痛治疗效果及可能的作用机制.方法 建立KOA兔模型.观察空白组、模型组和实验组(A、B、C、D和E组)动物行为学的变化,比较疼痛反应,然后使用ELISA法检测各组兔滑膜液中TNF-α、IL-1和IL-6的表达,HE染色观察KOA兔滑膜软骨组织形态学变化,最后使用免疫组化的方法测定滑膜和软骨组织中基质金属蛋白酶-3 (MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达.结果 相比于模型组,连续股神经阻滞能显著缓解KOA兔的疼痛(P＜0.05或P＜0.01);滑膜软骨组织损伤及周围炎性反应明显减轻;实验组兔滑膜液中TNF-α、IL-1和IL-6的表达也显著下降(P＜0.05或P＜0.01),其中C组、D组和E组更为明显(P＜0.01);另外,连续骨神经阻滞处理使KOA兔滑膜和软骨组织中MMP-3和TIMP-1的表达显著下调(P＜0.05或P＜0.01),改善了MMP-3/TIMP-1的失衡.结论 连续骨神经阻滞可以显著缓解KOA兔的疼痛反应,改善滑膜软骨损伤,其机制可能与下调滑膜液中TNF-α、IL-1和IL-6的表达以及改善滑膜和软骨中MMP-3、TIMP-1的异常表达有关.     

葛根素抑制人成骨样MG-63细胞分泌IL-6的分子机制研究

目的研究葛根素(puerarin)抑制人成骨样MG-63细胞分泌IL-6的分子机制。方法利用兼有两种雌激素受体(estrogen receptor,ER)亚型表达的人成骨样MG-63细胞为研究模型,通过ELISA、RT-PCR、荧光素酶报告基因检测、小RNA干扰等方法,研究葛根素对MG63细胞产生骨吸收调节因子IL-6的作用及作用机制。结果葛根素可明显抑制MG-63细胞IL-6表达和IL-6基因启动子的转录活性,并且该作用可被纯ER阻断剂ICI 182,780部分阻断。采用小RNA干扰技术进一步证明葛根素对成骨细胞的上述作用是ERα依赖的。结论葛根素调节人成骨细胞产生IL-6主要是ERα依赖的。     

RP-HPLC法测定自乳化释药系统中金雀异黄素的含量

目的:建立自乳化释药系统中金雀异黄素含量测定的RP-HPLC法。方法:采用Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-水(65∶35),流速1.0 mL·min-1,检测波长261 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果:在本色谱条件下金雀异黄素与辅料及溶剂峰分离良好,金雀异黄素质量浓度在1.0～100.0μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9999),精密度试验的RSD(n=5)为0.4%～4.1%,重复性试验的RSD(n=5)为3.1%,平均回收率(n=5)为101.3%。结论:该方法简便、易行,可用于自乳化释药系统中金雀异黄素的含量测定。     

雌激素替代治疗对去势大鼠阴道组织雌激素受体表达的影响

目的 研究雌激素对去势大鼠阴道组织ERα与ERβ表达的影响，探讨雌激素治疗老年性阴道炎的分子机制。方法将40只雌性SD大鼠随机分成对照组、假手术组、去势组和雌激素替代治疗组各10只。对照组为空白对照；假手术组去除卵巢周围与卵巢相同大小脂肪组织；去势组行双侧卵巢切除术；雌激素替代治疗组在去卵巢手术3周后行戊酸雌二醇800 μg&#8226;kg 1&#8226;d 1替代治疗8周。免疫组织化学染色检测大鼠阴道组织ERα与ERβ表达情况。结果去势组大鼠ERα、ERβ表达显著低于对照组（均P＜0.01），雌激素替代组ERα、ERβ表达上升，较去势组显著增强（均P＜0.01）。结论雌激素替代治疗可导致雌激素受体表达上升，可能导致雌激素受体效应增强，从而提高阴道局部抵抗力。     

氧化苦参碱对银屑病小鼠模型血清中IL-2、IL-10、TNF-α水平的影响

目的 研究氧化苦参碱对银屑病小鼠模型IL-2、IL-10、TNF-α水平的影响,探讨其保护银屑病小鼠的机制.方法 采用注射雌激素刺激小鼠阴道上皮组织增生的方法复制银屑病小鼠模型,同时给予不同剂量的氧化苦参碱干预,10 d后,取小鼠血清测定IL-2、IL-l0、TNF-α的含量,并观察氧化苦参碱对小鼠阴道上皮细胞有丝分裂的影响.结果 80、40、20mg·kg-1氧化苦参碱均可抑制小鼠阴道上皮的有丝分裂(P＜0.01),并降低雌激素周期小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量(P＜0.01);80、40 mg·kg-1氧化苦参碱可升高雌激素周期小鼠血清中IL-l0的含量(P＜0.0l,P＜0.05).结论 氧化苦参碱对实验性银屑病具有保护作用,可能与其抑制表皮细胞增殖并降低血清IL-2和TNF-α水平,升高IL-10水平有关.     

大豆异黄酮对雄性大鼠生殖系统的影响

大豆异黄酮 (soyisoflavone)是一类植物雌激素 ,主要有金雀异黄素 (染料木黄酮 ,genistein)和大豆苷原(daidzein) 2种 ,其结构与雌激素相似 ,故能够与雌激素受体 (ERs)结合 ,从而表现出 2种重要的生物学活性 :雌激素活性和抗雌激素活性[1 ] 。至于表现为何种活性主要取决于其局部浓度、内源性雌激素含量以及组织器官的ERs水平[2 ] 。大量研究表明 ,大豆异黄酮在心血管疾病、癌症、骨质疏松和更年期综合征等疾病的预防和治疗中起着重要的作用。但大豆异黄酮在发挥这些有益作用的同时 ,其雌激素样作用和抗雌激素样作用是否会对雄性生殖系统…     

IL-1α及ERα在HBV相关肝细胞肝癌中性别差异性的表达

目的 研究白细胞介素(IL) 1α在人类肝细胞肝癌(HCC)发生中的调节作用.方法 收集80例男性和36例女性患者乙型肝炎病毒(HBV)相关的HCC组织、相应的癌旁组织以及正常组织标本.用实时荧光定量PCR方法检测IL-1α、雌激素受体(ER)α、IL-6和MyD88的表达.同时检测二乙基亚硝胺(DEN)诱导的小鼠肝癌模型中IL-1α和IL-6的动态表达水平.结果 与正常组织比较,IL-1α在男性癌旁组织中高表达,ERα在男性HCC患者的肿瘤和癌旁组织中都有明显的减少.并且在男性的癌旁组织中,IL-1α的增加和ERα表达的减少之间存在线性相关(r=-0.61,P ＜0.01).在DEN诱导的小鼠肝癌模型中,IL-1α在新生肿瘤中高表达,并随着HCC的发生发展而逐渐减少.结论 IL-1α是男性HCC发生发展过程中的一个关键因素,可能是HCC诊断和预测复发的一个有价值的指标.     

大豆异黄酮的药理作用Ⅱ

1 抗肿瘤作用 流行病学调查发现与激素代谢密切相关的肿瘤,如乳腺癌、前列腺癌和结肠癌等均和大豆制品的摄入量呈负相关。大豆中许多成份(如大豆皂甙、植酸和蛋白酶抑制剂等)均有抗癌作用,其中所含的异黄酮,特别是金雀异黄素,可能是其抗肿瘤作用的主要活性成份。 Vernon发现喂以含金雀异黄素75和150mg/kg的饲料,能使促癌剂(ADM)诱导的大鼠直肠癌变灶的数量由对照组的85.29±10.22下降到60.2±8.03和56.21±7.63。金雀异黄素对来自人胃癌的细胞株HSC-41E6、HSE-45MZ和SH101-PC等均有强烈的抑制作用;对来源于食管癌和直肠癌的细胞株有中等程度的抑制作用,低浓度(<10μg/ml)表现为抑制细胞生长,高浓度(>20μg/ml)表现为细胞毒作用,出现染色体浓缩、核碎裂和DNA断裂等细胞凋亡的结构变化。大豆甙元10μg/ml不仅使人白血病细胞株HL-60的生长和增殖受到抑制,并且使其向粒细胞系分化。 体外试验证明大豆异黄酮抗癌作用不依赖雌激素受体(ER)的存在。金雀异黄素对ER( )和ER(-)的人乳腺癌细胞株生长均有抑制作用,表明它可以通过非ER途径发挥作用。金雀异黄素和大豆甙元抗肿瘤作用的机制也不完全相同。Yushizumi发现金雀异黄素使胃癌细胞株(HGC-27)停留在G_2-M期,而大豆甙元则使之停留在G_1期。同样大豆甙元     

金雀异黄酮调控miR-27a抑制胃癌细胞生长

目的 探讨金雀异黄酮对胃癌细胞SGC7901生长的作用及可能机制.方法 收集16例胃癌及其相应的癌旁正常组织,通过实时定量PCR分别检测miR-27a及其靶基因ZBTB10的表达水平.用金雀异黄酮0、25、50、100、200 μmol/L处理胃癌细胞SGC7901后,采用磺酰罗丹明B染色法检测细胞的生长情况,实时定量PCR检测miR-27a及ZBTB10表达.结果 与癌旁正常组织相比,胃癌组织中miR-27a表达增加(P＜0.05),而ZBTB10表达降低(P＜0.01).金雀异黄酮可呈浓度、时间依赖的方式抑制胃癌细胞SGC7901的生长,下调miR-27a表达,同时上调ZBTB10表达.结论 金雀异黄酮抑制胃癌细胞的生长.其机制可能与下调癌基因miR-27a的表达有关.