海南省2008年手足口病样本核酸检测分析

目的 了解2008年海南省手足口病(HFMD)暴发的病原及主要的病毒型别,为HFMD病例诊断和防控措施提供科学依据.方法 依据卫生部<手足口病预防控制指南>提取HFMD临床诊断病例各种样本中的病毒核酸,用肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)特异性引物进行逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),检测基因片段大小.结果 274例临床诊断手足口病病例中EV71型核酸阳性、柯萨奇病毒A16核酸阳性、其他型别肠道病毒核酸阳性分别有102,12,35例;样本中疱疹液阳性检出率最高,为72.0%,肛拭子为40.0%,鼻咽拭子为34.8%,其余样本均阴性;54份直接提取病毒核酸进行RT-PCR检测,结果阴性但细胞培养出现细胞病理改变(CPE)的分离物;肠道病毒、EV71型、CoxA16型阳性分别有48,29,4份,阳性率分别为88.89%,53.70%,7.40%;其中1份样本EV71型和CoxA16型均为阳性.结论 引起海南省2008年手足口病暴发流行的主要病原是肠道病毒71型,其次为CoxA16型.     

2010年济南地区重症手足口病肠道病毒基因特征

目的了解2010年发生的重症手足口病(HFMD)病原及流行特征,为济南地区重症HFMD的防控提供科学依据。方法对辖区哨点医院送检的40例重症手足口病病例样本,应用RT-PCR技术检测肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)、非EV71和CoxA16的其他肠道病毒(EV);选取10例阳性病例样本进行VP1基因的扩增和核苷酸序列测定。结果 40例重症手足口病病例中,有38例感染了肠道病毒,其中感染EV71的有30例,占78.95%;感染CoxA16的有3例,占7.89%;感染其他肠道病毒的5例,占13.16%。手足口病重症病例呈散发,主要集中于5～8月份,病例人群男性高于女性(3.44∶1),其中2岁以下幼儿是重症病例发生主要年龄段,占77.50%;10株EV71阳性扩增产物经基因测序,证实均为C4b基因亚型。结论 EV71是引起2010年济南地区手足口病重症及死亡病例的主要病毒类型,且主要为C4b基因亚型。     

厦门市2011—2014年手足口病病原监测分析

目的了解厦门市手足口病病原特征。方法采用实时RT-PCR对手足口病标本进行总肠道病毒通用核酸及EV71、Cox A16特异性核酸检测。结果共报告手足口病12 010例,总阳性率为58.5%,其中EV71占38.1%,CoxA16占20.9%,EV71和CoxA16同时阳性0.1%,其他肠道病毒占41.0%,优势病原呈动态变化。2岁儿童阳性率最高(63.2%)。EV71重症病例发生率最高,死亡5例均为EV71阳性;重症病例92.0%为5岁以下儿童。发病高峰为5~6月。结论厦门市手足口病主要由EV71引起,其他肠道病毒的作用越来越重要,5岁以下儿童仍是重症病例的主要人群。建议继续加强手足口病病原监测,并对其他肠道病毒鉴定型别。     

2009年山东省手足口病病例的病原学检测分析

目的了解2009年引起山东省手足口病（HFMD）的病原体型别及分布特征。方法采集HFMD临床诊断病例的粪便、咽拭子、疱疹液等标本,应用肠道通用引物和EV71、CoxA16特异性引物对其进行RT-PCR鉴定;使用RD、Hep-2细胞对部分肠道通用引物阳性的粪便标本进行病毒分离。结果共收集1604份HFMD临床诊断病例标本,实验室检测阳性标本990份,其中EV71阳性标本589份,CoxA16阳性标本29份,EV71和CoxA16同为阳性标本2份,EV71和CoxA16的检出率分别为36.72%和1.81%。从80份肠道通用引物阳性的粪便标本中分离出肠道病毒32株,其中EV71型病毒23株,CoxA16型病毒4株。结论引起山东省HFMD的病原体主要为EV71型肠道病毒,EV71感染占EV阳性标本数的59.50%。全省17个地市均有EV71感染的HFMD病例检出。     

2008年广西手足口病病原体检测分析

目的了解2008年引起广西手足口病的病原体型别及分布特征,为制定预防控制措施提供实验依据。方法采集手足口病临床诊断病例的疱疹液、咽拭子、肛拭子、粪便等样本,应用RT-PCR方法检测EV、EV71和CoxA16病毒核酸。结果共检测753例手足口病临床诊断病例1 286份样本,422例(56.0%)检测到肠道病毒核酸,其中EV71阳性176例(41.7%),CoxA16阳性36例(8.5%),非EV71、CoxA16肠道病毒阳性210例(49.7%)。全区14个市送检的病例标本均检测到EV71,来宾市等5市EV71检出率大于50%,钦州市和百色市EV71检出率小于20%。25例(89.2%)重症死亡病例中检测到EV71病毒核酸。结论手足口病在广西分布广,病原体组成复杂,引起广西2008年手足口病的主要病原体为EV71。应加强HFMD病原图谱监测,为手足口病防控提供实验依据。     

2011年龙岩市手足口病例肠道病毒通用引物核酸阳性未分型样本病原分析

目的 了解龙岩市大量判定为其他肠道病毒（EV）感染的手足口病（HFMD）样本的病原组成。方法 对龙岩市2011年经Real-time RT-PCR检测判为未分型EV感染的104份HFMD咽拭子样本经RD细胞分离培养后以RT-PCR法检测EV、EV71、CoxA16,对仍不能分型的样本以187/222引物进行扩增,对扩增产物进行纯化回收、克隆、测序,并用Blast程序在线比对判定型别。同时对培养物进行Real-time RT-PCR检测EV、EV71、CoxA16。任一法检出培养物阳性即判为阳性。结果 104份样本中检出EV阳性88份（84.62%）,包括29份EV71,4份EV71＋CoxA16,3份CoxB5,2份CoxA10,50份仍未能分型。结论 Real-time RT-PCR检测未能分型的HFMD病例中,相当部分（37.18%）还是由EV71所致,临床不应该随意排除该类病例EV71感染的可能,同时还包含CoxB5和CoxA10病毒。     

惠州市手足口病病原学流行特征研究

目的 分析手足口病病原学的流行特征,为预防和控制肠道病毒感染提供科学依据.方法 通过哨点监测医院收集全市手足口病病例标本进行肠道总病毒、肠道病毒71型(human enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)等肠道病毒核酸检测.结果 2008-2010年共收集手足口病患者835份标本,肠道病毒通用型核酸、EV71和CoxA16核酸检出率分别为66.95%、35.57%、23.11%.手足口病发病以幼儿为主,尤其是散居儿童,发病人群主要集中在5岁以下儿童,占87.43%,肠道病毒阳性检出率男性高于女性;重症病例和非重症病例感染的主要病原体型别有差异.结论 手足口病的主要病原体是EV71和CoxA16,但每年病原谱在不断变化,5岁以下儿童为高危人群.应根据手足口病高危人群和高发季节制定相应的预防控制策略.     

沈阳市328例手足口病临床标本的病原学分析

目的了解沈阳市手足口病(HFMD)的病原学特点,为HFMD的临床诊断和防控提供实验依据。方法采用实时荧光定量PCR法,对2013年5~7月临床诊断为HFMD的患儿的粪便标本进行肠道病毒通用型、EV71型、CoxA16型和CoxA6型核酸检测。结果共检测328例HFMD患儿,肠道病毒通用型阳性277例(84.5%),EV71型阳性124例(37.8%),CoxA16型阳性73例(22.3%),CoxA6型阳性53例(16.2%)。结论沈阳地区2013年引起HFMD的病原除EV71和CoxA16外,还有CoxA6型。今后在对HFMD病原体检测时,应进一步确定其它肠道病毒的型别。     

手足口病住院患儿的病原学和临床特征

目的了解手足口病(HFMD)病原体分布情况及流行趋势,为HFMD的防治提供依据。方法调查2015年1—12月某院确诊的HFMD住院患儿,采用实时荧光PCR法对HFMD病例标本进行肠道病毒(EV)通用型、肠道病毒71(EV71)型和柯萨奇A16(CoxA16)型核酸检测。分析不同月份、性别、年龄组、感染类型患儿EV阳性检出率及各型别分布情况。结果 2015年共采集837例HFMD患儿咽拭子标本,其中EV阳性标本380份,阳性率为45.40%。病毒分型结果显示:EV71阳性标本110例(28.95%);CoxA16阳性标本7例(1.84%);EV71+CoxA16阳性标本6例(1.58%);其他EV阳性标本257例(67.63%)。该病从4月份开始进入高发期,5~6月达到最高峰,7~12月持续高发。不同月份患儿EV阳性检出率比较,差异有统计学意义(P0.05)。发病年龄主要集中在3岁以下儿童。不同年龄组患儿EV阳性检出率、EV各型别构成比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。重症HFMD病例的EV阳性检出率为65.34%,高于普通病例的27.06%(P0.001)。EV71型感染患儿中重症病例比率为90.00%;由其他EV感染所致的患儿中重症病例比率为60.70%;EV71+CoxA16双重感染的患儿全部为重症病例。不同感染类型患儿EV各型别构成比较,差异有统计学意义(P0.001)。结论 2015年该院收治的HFMD住院患儿的EV感染型别主要以非EV71、非CoxA16的其他EV为主,对高发季节、3岁以下的高发人群及重症病例应高度关注,做好预防和治疗工作。     

扬州市2014—2017年手足口病病原学监测结果

目的分析2014—2017年扬州市肠道病毒的病原学特征。方法采集临床诊断为手足口病病例的咽拭子标本,用荧光定量RT-PCR方法检测通用型肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)。结果 2014—2017年共采集临床手足口标本1 775份,包括1 706份普通病例标本和69份重症病例标本,检出通用型肠道病毒阳性964份,检出率54.31%。病原检出阳性病例4—7月占全年阳性检出总数的42.95%;EV71、CoxA16及其他肠道病毒(EV)阳性分别占24.69%、32.26%和43.05%。2014年以EV71和CoxA16为共同优势株,2015—2017年以其他EV阳性为主,重症病例以EV71感染为主。不同县区肠道病毒阳性率及病原型别构成差异均有统计学意义(P值均<0.05)。结论 2014—2017年扬州市手足口病发病具有明显的时间、地区、人群差异,2015年后其他EV阳性比例大幅上升。应继续加强手足口病监测,尤应关注5岁以下儿童、4—7月发病高峰及其他EV的分型检测工作。     

北京市2010年手足口病死亡危险因素分析

目的探讨北京市手足口病死亡的危险因素,为防制手足口病、减少手足口病死亡提供科学依据。方法收集2010年北京市手足口病重症和死亡病例资料,采用多因素Logistic回归分析对手足口病死亡的危险因素进行分析。结果 2010年北京市报告重症手足口病610例,其中死亡病例18例,重症病例病死率为2.95%。结果显示:患者年龄、户口类型为流动人口、诊断重症病例的医院类型为县医院、到村级(个体)医疗机构就诊和病原检测结果为肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)是重症手足口病死亡的影响因素。结论为减少手足口病死亡病例的发生,应重视1岁以下婴幼儿,流动人口和EV71感染儿童的防控工作,手足口病患者应到正规医院就诊,发现重症早期症状者应立即转诊到具有诊治重症病例能力的医疗机构进行科学规范救治。     

2010年济南地区手足口病病原及流行特征

目的 探讨2010年济南地区手足口病的病原及流行特征,为手足口病防控提供科学依据.方法 选取济南地区3家代表性医院临床诊断为手足口病的病例为对象,采集患者(包括40例重症病例)发病1周内的粪便、咽拭子等标本共计808例,采用肠道病毒( enterovirus,EV)通用和肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型( coxsackievirus A16,CoxA16)特异性引物进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR)鉴定;选取7例病例标本进行EV7I-VP1区基因的扩增和核苷酸序列测定.结果 808例患者标本中,581例检测结果为阳性(71.91％),其中190例为EV71阳性(32.70％),267例为CoxA16阳性(45.96％),124例检测到其他肠道病毒(21.34％);40例重症患者的感染病原主要为EV71(75.00％).阳性病例中男女性别比为1.42∶1,发病年龄主要集中在4岁以下儿童(85.15％),尤其是2～3岁年龄段(28.34％);全年均有发病,但发病高峰主要集中于4～5月份(36.14％).7株EV71经基因测序,证实均为C4b基因亚型.结论 济南地区手足口病病原以CoxA16和EV71为主,病例多为4岁以下儿童,重症患者主要由EV71感染引起.     

2009—2012年保定市手足口病病原学分析

目的了解保定市2009-2012年手足病（HFMD）病原学变化,为HFMD防控提供实验室依据。方法采用荧光定量RT—PCR方法对HFMD病例咽拭子标本进行肠道病毒通用型、EV71型以及CoxA16型核酸检测,应用Excel和SPSS11．5对结果进行统计分析。结果2577例临床诊断HFMD病例中,检出肠道病毒阳性病例1140例,其中EV71阳性构成比为52．37％,CoxA16阳性构成比为25．88％,其他肠道病毒阳性构成比为21．75％。2009-2011年病原以EV71为主,2012年EV71和CoxA16构成比相当,同时成为主要病原。全年均有阳性病例检出,4—8月为其高峰,阳性病例集中于5岁以下儿童,男性多于女性;但在病原构成上,女性EV71阳性构成比高于男性;CoxA16和其他肠道病毒阳性构成比无性别差异。结论2009-2012年保定市HFMD主要病原是EV71和CoxA16,发病高峰在4—8月,5岁以下儿童为主要防护对象。     

2007-2010年上海市静安区儿童手足口发病情况分析和病原学研究

目的分析上海市静安区2007-2009年手足口病发病情况,并分析2009-2010年静安区监测点儿童手足口病病原型别及肠道病毒71型（enterovirus 71,EV71）VP1区基因特征。方法分析上海市静安区2007-2009年手足口病流行概况;收集2009年4月～2010年12月辖区内儿童医院、幼托机构手足口病患儿咽拭标本,并进行实时荧光RT-PCR检测,确定手足口病病原型别。选择2010年不同月份共19份（含1份重症病例）EV71 PCR阳性标本,接种Vero细胞进行病毒分离培养,并设计特异引物对EV71 VP1全序列进行核苷酸序列测定、比对,构建系统发生树。结果 2008年静安区手足口病发病率明显增高,2009年发病数稳中略降,病例以发生在幼托机构为主。2009年病例咽拭标本实时荧光RT-PCR检测结果显示,柯萨奇病毒A组16型（coxsackievirus A16,CoxA16）阳性率为51.0%（52/102）,EV71阳性率为15.7%（16/102）,其他肠道病毒属阳性率2.9%（3/102）;2010年CoxA16和EV71阳性率均为31.3%（36/115）,其他...     

三门峡市2009年-2010年度手足口病病原体检测分析

目的:对2009年-2010年三门峡地区临床诊断为手足口病病例进行病原体检测,为该病的预防和诊断治疗提供依据。方法:临床诊断为手足口病病例的260份粪便样本,采用RT-PCR检测病原体核酸,并结合流行病学资料予以分析。结果:共检测260份标本,阳性195份。其中EV71型92例,CoxA16型51例,其他肠道病毒52例。时间分布上病例高发期主要在3月-6月份,4月份达到顶峰,人口密集地区阳性率高,年龄主要在4岁以下,男孩标本数多于女孩,但女孩阳性率高于男孩。结论:2009年-2010年我市发生的手足口病主要由EV71和CoxA16型病毒引起。     

2010年池州地区手足口病病原学分析

目的分析池州地区手足口病的流行病学和病原学特征,为手足口病防控提供科学依据。方法采集2010-03/2010-12池州市各地送检的133例手足口病临床诊断患者的咽拭子,应用RT-PCR技术检测样本中肠道病毒(EV)、肠道病毒71型(EV71)、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)。结果 133例手足口病临床诊断病例咽拭子中,检测到肠道病毒阳性79份,EV71阳性28份,CoxA16阳性24份,EV71和CoxA16的阳性率为21.05%和18.05%。6例手足口病重症病例中,EV71病毒感染病例4例。结论 EV71和CoxA16是2010年池州地区手足口病的主要病原体,而EV71是引起手足口病重症病例的主要类型。     

2007-2010年上海市静安区儿童手足口病情况分析和病原学研究

目的 分析上海市静安区2007 -2009年手足口病发病情况,并分析2009-2010年静安区监测点儿童手足口病病原型别及肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71) VP1区基因特征.方法 分析上海市静安区2007 -2009年手足口病流行概况;收集2009年4月～2010年12月辖区内儿童医院、幼托机构手足口病患儿咽拭标本,并进行实时荧光RT-PCR检测,确定手足口病病原型别.选择2010年不同月份共19份(含1份重症病例)EV71 PCR阳性标本,接种Vero细胞进行病毒分离培养,并设计特异引物对EV71 VP1全序列进行核苷酸序列测定、比对,构建系统发生树.结果 2008年静安区手足口病发病率明显增高,2009年发病数稳中略降,病例以发生在幼托机构为主.2009年病例咽拭标本实时荧光RT-PCR检测结果显示,柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CoxA16)阳性率为51.0％ (52/102),EV71阳性率为15.7％ (16/102),其他肠道病毒属阳性率2.9％ (3/102);2010年CoxA16和EV71阳性率均为31.3％ (36/115),其他肠道病毒属阳性率10.4％( 12/115).19株EV71分离株与2008年安徽阜阳EV71分离株同属C基因型中的C4a亚型,核苷酸同源性达95.0％ ～97.1％,氨基酸同源性为95.1％ ～98.3％.结论 静安区手足口病发病率2008年明显增高,2009年发病数稳中略降.2009-2010年静安区手足口病主要病原体为EV71和CoxA16,其他肠道病毒属引起的手足口病有所增加,需加强对其他肠道病毒属的鉴定.     

2008-2011年惠州市重症手足口病病原学特征分析

目的分析惠州市2008-2011年手足口病重症病例流行病学特征和病原学特征,为制定手足口病预防控制措施提供科学依据。方法选取惠州市2008-2011年手足口病定点收治医院报告的255例重症病例作为研究对象,采集重症患者发病1周内的咽拭子或肛拭子,用RT-PCR法对患者标本进行总肠道病毒、柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)的特异性核酸检测。结果 255例重症手足口病病例中,肠道病毒通用型核酸阳性180份,检出率70.59%(180/255),其中EV71、CoxA16、非EV71和CoxA16的其他肠道病毒(other intestinal virus)核酸分别为144、6、30份,占肠道病毒感染阳性的80.0%(144/180)、3.33%(6/180)、16.67%(30/180),非肠道病毒(NEV)75例占29.41%(75/255)。重症病例以5岁以下儿童为主,EV71阳性者中以3岁以下幼童为多,男性多于女性,以散居儿童居多。结论 2008-2011年引起惠州市手足口病重症的病原体以EV71为主,占80%,CoxA16的检出率为3.33%,非EV71和CoxA16其他肠道病毒的检出率为16.67%。EV71是惠州市近四年引起手足口病重症病例的优势流行毒株。RT-PCR可用于手足口病重症病例的快速诊断,对5岁以下儿童手足口病进行病原学检测,及早发现重症病例、及早治疗,是防止手足口病死亡病例的关键。