白细胞间介素-T mRNA的诱导和在卵细胞中的表达

白细胞间介素-1(interleukin-1,IL-1)是一种巨噬细胞分泌的活性蛋白,它可以刺激T细胞合成IL-2,通过IL-2介导下列反应:增强体外T细胞对丝裂原或抗原的增生反应,刺激抗体形成细胞、增强胞毒性T细胞的产生。此外,IL-1还可刺激肝细胞合成急性期蛋白如血清淀粉状蛋白A,可能还与内源性致热原相似。在家兔发现有两种IL-1,一种分子量为11,600～14,000,等电点pI7.3～7.4,另一种为分子量14,000～16,000,等电点为4.5～5.2;在小鼠仅发现有一种IL-1,其分子量为12,000～18,000,PI为4.7～5.4。一些建立的细胞系如小鼠组织细胞源性肿瘤细胞系P388D,可产生IL-1,产生的主要IL-1种类的pI为5左右,但分     

白细胞介素13抑制肾小球系膜细胞增殖及白细胞介素6表达

目的:探讨白细胞介素13(IL-13)对体外培养的大鼠系膜细胞的增殖及其产生白细胞介素6(IL-6)的影响。方法:用四甲基偶氮唑(MTT)法测定系膜细胞增殖,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及酶联免疫吸附法(ELISA)测定系膜细胞IL-6mRNA表达及其蛋白水平。结果:IL-13在1、10、100μg/L浓度范围呈剂量依赖性地抑制系膜细胞的增殖;5%FCSRPMI1640培养条件下系膜细胞IL-6mRNA表达及IL-6分泌水平较低,脂多糖(LPS)可刺激系膜细胞IL-6mRNA的表达及提高IL-6分泌水平,而IL-13可抑制LPS诱导的系膜细胞IL-6分泌及其mRNA表达。结论:IL-13抑制体外培养的系膜细胞增殖及LPS诱导的系膜细胞IL-6的产生,IL-13可能对于肾小球肾炎的系膜细胞炎症反应具有拮抗作用。     

未成熟树突状细胞对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响

目的:探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞活化及其IFN-γ和IL-12表达的影响。方法:通过诱导Lewis大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)两种状态的DC;将两种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,观察T细胞增殖情况并测定T细胞IFN-γ、IL-12的表达水平。结果:(1)AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。(2)与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显抑制T细胞IFN-γ和IL-12的表达。结论:iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与Th1细胞因子IFN-γ和IL-12的抑制有关。     

重组白细胞介素-2直接增强人单核细胞的胞毒活性

白细胞介素-2(IL-2)过去认为主要是一种T细胞生长因子,后来发现对B细胞、大颗粒淋巴细胞(LGL,即NK细胞)也起反应。本文作者发现:重组产生的IL-2可直接增强人单核细胞的胞毒活性。这是IL-2的一种新功能,提示了单核细胞-T细胞相互作用的可能途径。Rosenberg等人已报道IL-2可以激活淋巴细胞活化的杀伤性T细胞(LAK)。活化的LAK可以裂解新鲜自身和同种异体     

唑来膦酸刺激健康人和骨肉瘤PBMCs体外扩增γδT细胞

目的:探讨唑来膦酸(Zol)联合IL-2对健康人和骨肉瘤患者末梢血γδT细胞的扩增和细胞毒性作用的影响。方法:取健康人和骨肉瘤患者外周血来源的单个核细胞,分别使用IL-2和Zol联合IL-2刺激体外扩增,流式细胞技术检测γδT细胞的纯度,并计算其扩增倍数。以Daudi细胞作为阳性对照、Raji细胞为阴性对照,并以人成骨细胞系hFOB细胞作为正常对照,用LDH法检测扩增后γδT细胞的细胞毒活性的变化。结果:健康人和骨肉瘤患者外周血单核细胞经过体外14 d的培养,Zol联合IL-2组可高度选择性扩增γδT细胞,并且扩增后γδT细胞具有杀伤活性,而对正常细胞无杀伤活性。结论:健康人和骨肉瘤患者PBMCs经唑来膦酸联合IL-2刺激后,可获得高纯度具有较强的杀伤作用的γδT细胞。     

Decorin提升小鼠脾脏细胞对乳腺癌细胞系4T1的免疫响应性

目的评价高表达核心蛋白聚糖(Decorin)的小鼠乳腺癌细胞系4T1对正常小鼠脾细胞的免疫激活效应,明确Decorin对抗肿瘤免疫的调节作用。方法采用携带Decorin基因的复制缺陷型重组腺病毒Ad.DCN感染小鼠乳腺癌细胞系4T1。与小鼠脾细胞共培养3d后,通过流式细胞术检测小鼠脾细胞的CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、T记忆细胞(Tm)和T调节细胞(Treg)的百分比;利用实时定量PCR(qPCR)技术检测Th1类细胞因子IL-2、IL-12、TNF-α和IFN-γ的表达,Th2类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10和转化生长因子β(TGF-β)的表达,以及与杀伤相关基因穿孔素与颗粒酶B的表达。结果与小鼠乳腺癌细胞系4T1共培养后,小鼠脾细胞CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、Treg细胞比例无明显改变,但Tm细胞比例显著升高;同时,细胞因子、穿孔素和颗粒酶B表达下调。但是,病毒感染的4T1细胞,特别是Ad.DCN感染的4T1细胞可显著抑制Treg细胞,并部分逆转细胞因子表达的下调。结论 Decorin高表达可增强正常小鼠脾脏细胞对乳腺癌细胞系4T1的免疫响应性,从而激活抗肿瘤免疫反应。     

日本血吸虫感染小鼠的髓源抑制细胞对T 细胞的免疫抑制

目的:研究日本血吸虫感染小鼠模型中的髓源抑制细胞(MDSCs)的免疫抑制功能及对T细胞的作用机制。方法:构建日本血吸虫感染BALB/c小鼠模型,流式细胞术检测MDSCs动态比例变化,免疫磁珠分选小鼠骨髓中单核系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G-)和粒系MDSCs (CD11b~+Gr1~+Ly6G~+)亚群细胞,Write-Giemsa染色进行形态学鉴定; CFSE法检测单核系和粒系MDSCs亚群对CD4~+T、CD8+T细胞增殖的抑制作用,Real-time PCR方法检测细胞因子IFN-γ、IL-4、IL-10、IL-13、TGF-β和精氨酸酶(ArgⅠ)、一氧化氮合酶2(NOS2)的表达。结果:血吸虫感染模型小鼠的MDSCs较对照组小鼠明显增多,以粒系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G+)亚群增多为主。两个亚群细胞均能降低CD4+T、CD8+T细胞的增殖活性,粒系亚群MDSCs的抑制作用更显著; Real-time PCR结果显示两个亚群细胞的细胞因子IL-4、IL-10、IL-13、TNF-α、IFN-γ以及ArgⅠ、NOS2的表达水平均不同程度升高。结论:血吸虫感染模型小鼠体内的MDSCs显著增高,单核系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G-)和粒系MDSCs(CD11b+Gr1+Ly6G+)亚群均能抑制CD4~+T、CD8~+T细胞增殖,其作用机制可能与两亚群细胞均能上调相关细胞因子IL-4、IL-10、IL-13和ArgⅠ、NOS2的表达有关。     

细胞因子直接诱导正常人CD4+T细胞产生IL-17和IFN-γ

目的:探讨细胞因子(IL-23、IL-2和IL-15)对正常人外周血单个核细胞(PBMC)和CD4 T细胞IL-17产生的诱导作用和调节因素。方法:将正常人PBMC和纯化的CD4 T细胞在不同条件下与IL-23、IL-2和IL-15进行培养,采用ELISA法检测细胞培养液中IL-17和IFN-γ的水平;采用酶联免疫斑点试验(ELISPOT)在单个细胞水平上检测IL-17和IFN-γ产生细胞的频率。结果:IL-23可诱导PBMC产生IL-17和IFN-γ;Th2细胞因子和抗IL-12受体β1(IL-12Rβ1)mAb可抑制IL-23诱导的IL-17和IFN-γ产生。IL-2和IL-15均可诱导IL-17和IFN-γ产生,并与IL-23具有共同诱导作用。IL-12可诱导PBMC产生大量的IFN-γ,但不产生IL-17。进一步研究表明,IL-23、IL-2和IL-15可直接诱导纯化的CD4 T细胞产生IL-17和IFN-γ。结论:IL-23、IL-2和IL-15可直接作用于正常人CD4 T细胞诱导其产生IL-17和IFN-γ;Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb可抑制IL-23诱导的IL-17和IFN-γ产生。为探讨自身免疫性疾病等的发生机制和治疗提供了新的靶点。     

IL-1β和TGF-β参与调节T细胞IL-2及IL-6的产生

IL-2和IL-6是两种对T、B 细胞活性具有潜在调节作用的细胞介素。已知,T 细胞产生IL-2时通常需要抗原和IL-1共同作为活化信号。但是,对T 细胞产生IL-6时所需的活化信号则所知甚少。在免疫反应中,可产生各种细胞介素,它们或促进或抑制T 细胞的活化。其中TGF-β(TransformingGrowth Factor-β,β型转移生长因子)可由活化的B 细胞、T 细胞以及单核细胞产生,能够抑制B 细胞、T 细胞、NK/LAK 细胞、胸腺细胞、单核细胞以及内皮细胞的某些功能。因此,TGF-β可能是一种在免疫反应中自然产生的免疫抑制因子。关于TGF-     

硒对IL—1和IL—2的产生及其反应性的影响

本文报告硒对白细胞介素1(IL-1)和白细胞介素2(IL-2)的产生及其反应性的影响。实验结果显示:T淋巴细胞经低浓度亚硒酸钠预处理后,丝裂原诱导的IL-2活性水平显著升高,表明硒可促进IL-2的产生;在亚硒酸钠存在的条件下,T淋巴母细胞对IL-2的应答增强;硒可明显促进巨噬细胞分泌IL-1,并可促进胸腺细胞对IL-1的应答。提示硒可能通过促进IL-1的分泌和应答而间接促进IL-2的产生和应答,进而促进T细胞及其他免疫细胞的增殖和活性,以增强机体免疫功能。     

低剂量IL-2治疗自身免疫性疾病的研究进展

IL-2是由活化T细胞产生的白介素家族成员之一,可以通过与细胞表面的白介素2受体结合而刺激T细胞的增殖、发育和分化。不同种类的T细胞对IL-2的敏感性不同,调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)对IL-2的敏感性高于其它细胞。所以,低剂量的IL-2可以在不影响效应T细胞(effector T cell,Teff)的情况下,选择性激活Treg信号通路,调节Treg的细胞水平和功能,增强免疫抑制反应,进行免疫调控。目前,低剂量IL-2(low-doses IL-2,LdIL-2)在一些自身免疫疾病治疗研究中得到广泛关注。本文就低剂量IL-2治疗自身免疫性疾病的研究进展作一简要论述。     

未成熟树突状细胞对T细胞功能及其IL-10和TGF-β1表达的影响

目的探讨未成熟树突状细胞(DC)对T细胞功能及其IL-10和TGF-β1表达的影响。方法通过诱导大鼠骨髓前体细胞,获取未成熟(iDC)和成熟(mDC)2种状态的DC;将2种DC用乙酰胆碱受体(AChR)负载后进行T细胞重复刺激、交叉刺激和无关抗原刺激试验,采用MTT法观察T细胞增殖情况,采用RT-PCR方法测定T细胞IL-10 mRNA的表达水平,采用Western blot方法检测T细胞TGF-β1的表达水平。结果①AChR负载的iDC可明显抑制T细胞增殖,且这种被抑制的T细胞对AChR负载的mDC的交叉刺激也不引起增殖,但对无关抗原OVA负载的mDC的刺激可产生明显增殖。②与mDC组比较,AChR负载的iDC初次和重复刺激均明显增强T细胞IL-10和TGF-β1的表达。结论 iDC可诱导抗原特异性T细胞耐受,耐受机制可能与IL-10和TGF-β1的表达增强有关。     

白细胞介素1在免疫应答反馈调节中的作用

<正> 白细胞介素 1(IL-1)具有多种生物学活性,对许多细胞都有刺激作用。在免疫反应中,IL-1参与抗原或丝裂原对T细胞的激活,可促进白细胞介素2(IL-2)及 IL-2受体的产生;IL-1还可增强B细胞产生抗体的能力,它是促进免疫应答的一种重要因子。此外,IL-1在免疫应答的反馈调节中也起着重     

细胞膜异位表达钙网蛋白的CD4~+T细胞诱导EAE小鼠保护性免疫

目的:研究细胞膜表面异位表达钙网蛋白(calreticulin,CALR)对T细胞疫苗(T-cell vaccine,TCV)诱导的保护性免疫效果的影响。方法:采用小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG_(35-55))免疫C57BL/6小鼠建立实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,分别以MOG_(35-55)特异性T细胞(CALR~+T及CALR~-T)为疫苗,通过尾静脉注射免疫小鼠。检测指标包括EAE小鼠临床评分比较、脾CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞百分比测定及血清中细胞因子干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、IL-10和IL-17A含量测定。结果:射线照射可诱导活化CD4~+T细胞表面异位表达CALR;CALR~+T免疫组症状显著轻于CALR~-T免疫组(P0.01);CALR~+T免疫组小鼠脾CD4~+ CD25~+ Foxp3~+调节性T细胞百分比及血清中IL-4和IL-10含量显著高于对照组(P0.01),而IFN-γ和IL-17A含量显著低于对照组(P0.01),结论:细胞膜表面异位表达CALR与TCV诱导的保护性免疫效果有关。     

添加细胞因子优化人外周血γδ T细胞的体外扩增培养体系

目的从添加细胞因子角度,优化用于肿瘤过继免疫治疗的γδ T细胞体外扩增培养方案。方法在固相化抗TCRγδ抗体加IL-2扩增人外周血γδ T细胞的体系基础上,添加其他的γ链受体家族细胞因子,包括IL-7、IL-15或IL-21,单独或联合使用、长期使用或短时添加,通过流式细胞术检测γδ T细胞纯度、细胞增殖及细胞毒活性相关分子的表达,计算γδ T细胞扩增效率;乳酸脱氢酶法检测γδ T细胞对人Burkitt's淋巴瘤细胞系Daudi的细胞毒活性。结果单独使用IL-7或IL-21不能有效扩增γδ T细胞,但单独使用IL-15可以使γδ T细胞纯度、扩增效率及细胞毒活性均达到与单独使用IL-2相当的水平;IL-2与IL-15联合使用,可促进γδ T细胞表达CD69,从而显著提高其扩增效率(P0.05);而IL-2与IL-21联合使用,可通过促进γδ T细胞颗粒酶A的表达,增强其对Daudi细胞的细胞毒活性(P0.001);IL-2、IL-15和IL-21联合使用可以显著提高γδ T细胞的细胞毒活性,但是会影响其扩增效率;而仅在效应前短时间添加IL-21,同样可以有效增强γδ T细胞对肿瘤细胞的细胞毒活性(P0.05)。结论在用固相化TCRγδ抗体加IL-2体外扩增培养γδ T细胞体系中,使用IL-15,而在回输效应前短时间添加IL-21,显著提高γδ T细胞扩增效率及对肿瘤细胞的细胞毒活性,此为目前最优化的γδ T细胞体外扩增培养方案。     

IL-7是一种T细胞生长因子

IL-7是一种分子量为25KDa 的糖蛋白,对前B细胞具有刺激增殖作用,其相应cDNA已克隆化。Morrisey 等报道IL-7作为联合刺激因子通过诱导产生IL-2而刺激无辅助细胞的T 淋巴细胞的增殖。本文研究证明,IL-7和PMA 通过非依赖性IL-2途径诱导静止T 细胞合成DNA,并且使其对IL-2、IL-7和IL-4产生增殖反应。本实验用C_(57)BL/CT 和BALB/c 雌性大鼠(8～12周)获得高纯化静止T 淋巴细胞和     

白细胞间介素—2受体

白细胞间介素-2(IL-2)是在巨噬细胞分泌的白细胞间介素-1(IL-1)存在下,由抗原/丝裂原活化某些 T 细胞合成和分泌的一种淋巴因子。在体外,IL-2能刺激活化 T细胞克隆的长期生长,增强胸腺细胞的有丝分裂反应,诱导胞毒性 T 细胞活性和增强裸鼠脾细胞培养中的空班形成细胞反应。在体内,IL-2可能用于治疗一些免疫性疾病如获     

IL-7受体衔接刺激人类胎儿胸腺细胞酪氨酸磷酸化、磷脂酰肌醇转换、增殖及定向分化为CD_4细胞

现已闸明,白细胞介素7(IL-7)是一种由骨髓基质细胞来源的可促进淋巴样前体细胞生长的多功能细胞因子,而且发现重组的IL-7具有显著的T细胞刺激活性此同时,有人证实IL-7在胸腺中也可表达,至于IL-7住人类胸腺细胞中及T细胞前体的增殖与分化中究竟起多人作用尚未明晰,本文作者旨在确定IL-7对胎儿胸腺细胞的生物学效应     

IL-2或IL-15协同结核分枝杆菌抗原诱导人外周血单个核细胞体外扩增细胞的特性比较北大核心CSCD

目的分析白细胞介素2(IL-2)或IL-15协同结核分枝杆菌抗原(MTB-Ag)诱导人外周血单个核细胞(PBMC)扩增细胞的生物学特性。方法采用MTB-Ag联合IL-2或MTB-Ag联合IL-15体外分别刺激正常人PBMC,培养至第12天时,经流式细胞术检测扩增细胞中γδT细胞、自然杀伤(NK)细胞和CD4+T细胞所占的比例,以及分析3种淋巴细胞扩增的绝对数量。同时用MTT法检测两组扩增细胞对肿瘤细胞的杀伤活性。结果与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞中γδT细胞所占比例明显高于前者,NK细胞所占比例明显低于前者;而两组扩增细胞中CD4^+T细胞所占比例并无显著性差异。与2个刺激组中3种淋巴细胞数量的分析结果一致。并且MTB-Ag联合IL-15刺激组扩增细胞对不同肿瘤细胞均具有显著的杀伤活性,但与MTB-Ag联合IL-2刺激组相比,并无显著性差异。结论 IL-15协同MTB-Ag可高效诱导人PBMC产生以γδT细胞增殖为主的效应细胞,该扩增细胞在体外对肿瘤细胞具有显著的杀伤活性。     

中国HIV感染长期不进展者T细胞表面IL-7受体表达研究

目的:了解中国HIV感染长期不进展者(Long-Term Non-Progressor,LTNP)T细胞表面IL-7(Interleukin-7,IL-7)受体的表达,分析其与疾病进展的关系。方法:收集LTNP组、HIV组、AIDS组及健康对照组(每组各20例)的抗凝全血,用流式细胞仪检测IL-7受体的表达,并分析IL-7受体表达与血浆中IL-7水平的相关性。结果:LTNP组CD4+T、CD8+T、中枢记忆T细胞(Central memory T cells,Tcm)、效应记忆性T细胞(Effector memory T cells,Tem)表面IL-7受体表达水平明显高于无症状HIV感染组(HIV组)、AIDS病人组(AIDS组)(P<0.05),LTNP组初始T细胞(Na ve T cells,Na ve)、终末分化效应记忆型T细胞(Terminallydifferentiated effector memory T cells,Tem/td)表面IL-7受体表达水平与HIV组、AIDS组间差异无统计学意义。HIV/AIDS患者IL-7受体在CD4+T和CD8+T细胞上表达的百分率与血浆IL-7水平呈明显负相关(P<0.05),与CD4+T细胞数量呈明显的正相关(P<0.05),与病毒载量呈明显负相关(P<0.05)。结论:外周血T细胞表面IL-7受体表达与HIV疾病进展密切相关,LTNP组T细胞保持较高水平的IL-7受体表达,可能是保护因素之一。