Neuropilin-1基因在急性非淋巴细胞白血病骨髓基质细胞中的表达

目的 :了解neruophlin 1(NP 1)基因在急性非淋巴细胞白血病 (ANLL)骨髓基质细胞中的表达情况。方法 :收集 12例ANLL和 2 0例正常对照骨髓标本 ,分离单个核细胞。进行体外长期培养 ,收集贴壁细胞 (骨髓基质细胞 )。利用逆转录 -聚合酶链反应扩增两组骨髓基质细胞中的cDNA ,了解NP 1基因表达情况。结果 :建立了ANLL和正常人骨髓基质细胞培养方法 ,NP 1基因在ANLL骨髓基质细胞中的表达率为 (4 7.1% ) ,明显低于正常对照 (85 % )P <0 .0 5。结论 :参与调控骨髓基质细胞的NP 1基因可表达于部分ANLL和大部分正常人的骨髓基质细胞中 ,NP 1在ANLL患者骨髓基质细胞中的低表达 ,可能与其调节造血功能异常有关。     

p73基因在成人急性淋巴细胞白血病中表达的研究

目的:研究p73基因在急性淋巴细胞性白血病(ALL)发病机制中的作用及临床意义。方法:收集32例ALL患者及30例正常对照组骨髓样本,DNA和RNA抽提后用RT-PCR检测p73基因的表达、甲基化特异性PCR(MSP)检测p73基因第一外显子甲基化状态,并结合临床资料进行分析。结果:11例p73基因阴性表达,阴性表达率为34.38%,其中9例第一外显子区域均发生甲基化(81.82%);21例p73基因阳性表达,32例ALL患者中,仅1例发生甲基化(4.76%);正常对照组30例,均为p73基因阳性表达,阳性表达率为100%。p73基因的阴性表达与ALL患者的高年龄(≥60岁)、高白细胞数(≥30×109/L)及对治疗时间延长(4周取得完全缓解)有关。结论:p73基因异常表达与成人ALL的发病机制有关,具有一定的诊断及判断预后的价值;其甲基化可能是p73基因在ALL中表达沉默的主要机制。     

干细胞白血病基因在急性淋巴细胞白血病的表达与预后

目的 探讨干细胞白血病（SCL）基因在急性淋巴细胞白血病（ALL）中的表达情况及临床意义。方法 采用RT－PCR技术检测SCL及其融合基因SIL－SCL在ALL细胞系和患者的表达情况，并观察其临床预后关系。结果 （1）SCL基因在ALL的表达率为51．2％，SIL－SCL基因仅在T－ALL中表达，占10．5％。（2）SCL阳性表达的ALL患者完全缓解率和生存率减低。结论 （1）SCL基因对ALL的发生有一定作用，其阳性表达是ALL预后不良因素之一。（2）SCL异常激活的方式以过量表达常见，基因重排较少见，染色体易位罕见。     

发育相关基因在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的:探讨发育相关基因在儿童急性淋巴细胞白血病(Acutelymphoblasticleukemia,ALL)患者中的表达及其与临床特征的关系.方法:采用实时荧光定量RT-PCR方法检测125例初发ALL患儿(ALL组)骨髓样本中Notch1、Wnt3a和β-catenin的mRNA表达量,并与临床特征进行相关分析.对...     

PCR-SSCP分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变及意义

目的研究急性淋巴细胞白血病（ALL）患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复（ITD）突变情况.方法采用多聚酶链反应（PCR）联合单链构象多态性（SSCP）方法检测63例不同免疫分型ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变.结果63例ALL患者经PCR扩增发现41例（65.1%）FLT3基因检测阳性,其中前前B细胞ALL、前B细胞ALL、成熟B细胞ALL及T细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率分别为93.3%（14/15）,77.8%（14/18）,41.7%（5/12）和28.6%（4/14）;前前B细胞ALL和前B细胞患者ALL FLT3基因检测阳性率84.8%,显著高于成熟B细胞ALL（41.7%,P＜0.005）;B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率为73.3%,显著高于T细胞系ALL患者（28.6%,P＜0.001）.63例ALL患者中仅有2例（3.2%）出现FLT3/ITD基因突变,均为伴有两种髓系抗原表达、免疫学检查诊断为急性混合细胞白血病患者,均伴有外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例,预后较差.结论B细胞系ALL和T细胞系ALL患者DNA水平均可检测出FLT3基因,但B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于T细胞系ALL;B细胞系ALL中细胞分化越成熟则FLT3基因检测率阳性越低.ALL患者一般不出现FLT3/ITD基因突变,FLT3/ITD基因突变检测可能有助于急性白血病基因分型及预后判断.     

PCR-SSCP分析急性淋巴细胞白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变及意义

目的 研究急性淋巴细胞白血病(ALL)患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复(ITD)突变情况。方法 采用多聚酶链反应(PCR)联合单链构象多态性(SSCP)方法检测63例不同免疫分型ALL患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果 63例ALL患者经PCR扩增发现41例(65.1%)FLT3基因检测阳性,其中前前B细胞ALL、前B细胞ALL、成熟B细胞ALL及T细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率分别为93.3%(14/15),77.8%(14/18),41.7%(5/12)和28.6%(4/14);前前B细胞ALL和前B细胞患者ALLFLT3基因检测阳性率84.8%,显著高于成熟B细胞ALL(41.7%,P<0.005);B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率为73.3%,显著高于T细胞系ALL患者(28.6%,P<0.001)。63例ALL患者中仅有2例(3.2%)出现FLT3/ITD基因突变,均为伴有两种髓系抗原表达、免疫学检查诊断为急性混合细胞白血病患者,均伴有外周血高白细胞数、骨髓中高白血病细胞比例,预后较差。结论 B细胞系ALL和T细胞系ALL患者DNA水平均可检测出FLT3基因,但B细胞系ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于T细胞系ALL;B细胞系ALL中细胞分化越成熟则FLT3基因检测率阳性越低。ALL患者一般不出现FLT3/ITD基因突变,FLT3/ITD基因突变检测可能有助于急性白血病基因分型及预后判断。     

免疫球蛋白重链T细胞受体γ基因重排在急性淋巴细胞白血病中的表达

目的：探讨初诊急性淋巴细胞白血病（ALL）患者免疫球蛋白重链（IgH）、T细胞受体γ（TCRγ）基因重排情况。方法：应用多聚酶链反应（PCR）检测19例初发ALL患者骨髓IgH、TCRγ基因重排。结果：19例标本中10例发生单一IgH基因重排，5例发生单-TCRγ基因重排，2例同时出现IgH/TCRγ基因重排。结论：ALL患者IgH基因重排几率高于TCRγ基因重排，且存在着交叉重排现象。     

老年急性淋巴细胞白血病细胞中c—myc基因的表达及其临床意义

目的：探讨c-myc基因在老年急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义。方法：采用免疫细胞组织化学染色方法,检测28例老年急性淋巴细胞白血病病人化疗前后及26例非白血病的c-myc基因的表达水平。结果：急性淋巴细胞白血病组c-myc基因表达较非白血病明显增高,两者呈显著性差异（P＜0．01）,急性淋巴细胞白血病组中,化疗后完全缓解与不缓解病人c-myc基因的表达有显著差异（P＜0．05）,结论：c-myc基因在老年急性淋巴细胞白血病细胞中高表达,而且与化疗疗效密切相关,提示c-myc基因对于老年急性淋巴细胞白血病的诊断,疗效评价及预后估计均有一定意义。     

bcl—2蛋白表达在急性淋巴细胞白血病中的意义

目的 探讨ｂｃｌ－２蛋白在急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及其临床意义。方法 采用免疫细胞组织化学染色方法，检测２８例急性淋巴细胞白血病病人化疗前后及２６例非白血病ｂｃｌ－２蛋白的表达水平。结果 白血病组ｂｃｌ－２蛋白表达较非白血病明显增高，两者呈显著性差异（Ｐ〈０．０１）；白血病组中，化疗后完全缓解与不缓解病人ｂｃｌ－２蛋白表达有显著差异（Ｐ〈０．０５）。结论 ｂｃｌ－２蛋白在急性淋巴细胞白血病细     

儿童急性B淋巴细胞白血病致癌基因FGFR3表达对预后的影响研究

目的分析急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）患儿成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）基因的表达情况,探讨其在疾病预后判断中的意义。方法采用实时定量PCR法检测52例B-ALL患儿（B-ALL组）与12例对照儿童（对照组）骨髓血中B淋巴细胞FGFR3基因表达水平;并以B-ALL组患儿FGFR3基因表达水平的中位数为界,将B-ALL组患儿分为FGFR3基因高表达组和FGFR3基因低表达组。比较FGFR3基因高表达组和FGFR3基因低表达组患儿的各项临床指标;随访36个月,比较两组患儿的无事件生存（EFS）率。采用流式细胞术检测B淋巴细胞免疫分型、巢式PCR法检测B淋巴细胞融合基因,比较不同B淋巴细胞免疫分型及融合基因的B-ALL组患儿FGFR3基因表达水平。结果B-ALL组患儿FGFR3基因表达水平高于对照组儿童（1.637±0.903vs0.645±0.559,P＜0.05）。FGFR3基因高表达组与FGFR3基因低表达组患儿性别、年龄、外周血WBC、肝脾有无肿大、有无髓外浸润、B淋巴细胞免疫分型及染色体核型等临床指标比较均无统计学差异（均P＞0.05）。FGFR3基因高表达组患儿EFS率低于FGFR3基因低表达组患儿（49.97%vs76.17%,P＜0.05）。B-ALL组患儿中,CD34+患儿FGFR3基因表达水平高于CD34-患儿（P＜0.05）,BCR/ABL+患儿FGFR3基因表达水平高于BCR/ABL-患儿（P＜0.05）。结论FGFR3基因高表达与肿瘤发生、发展有关,有望成为辅助评价儿童B-ALL预后的指标。     

Wnt3基因在急性髓系白血病中的表达及意义

目的研究Wnt3基因在急性髓系白血病（AML）患者中的表达及其意义。方法应用实时定量PCR（real—timePCR）方法检测10名正常人、40例AML患者中Wnt3基因的表达。结果10例正常人中检测到较低水平Wnt3基因的表达;Wnt3基因在AML患者中的表达水平增高,AML缓解后Wnt3基因的表达水平较初诊时明显降低;Wnt3的表达与AML患者年龄、性别以及初诊白细胞数等临床特征无关;Wnt3低表达组完全缓解率高于高表达组。结论Wnt3在AML发病中可能起重要作用,可作为判断AML预后的一个指标。     

P-gp在急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义

目的探讨P-糖蛋白（P-gp）在急性淋巴细胞白血病的表达，评估P-gp与急性淋巴细胞白血病预后的关系。方法用流式细胞仪，采用直接免疫荧光法，检测40例急性淋巴细胞白血病患者抗P-gp单克隆抗体UIC2及CD3、CD5、CD7、CD10、CD19、CD13、CD14、CD33、CD34的表达，被检患者外周血或骨髓中幼稚细胞数≥50％，并设非耐药细胞系K562为阴性对照。结果40例ALL患者中16例P-gp表达阳性，P-gp阳性表达率为40％。髓系抗原表达阳性者P-gp阳性率为33．3％，髓系抗原表达阴性者P-gp阳性率为45．5％，P〉0．05。4例急性T淋巴细胞白血病CD7表达阳性，且P-gp表达皆阳性。P-gp阳性组16例患者中10例治疗有效，P-gp阴性组24例中20例治疗有效，P-gp表达阳性者中3例6个月内复发。结论急性淋巴细胞白血病P-gp阳性表达率为40％；P-gp表达与髓系抗原表达无相关性，与CD7表达有关；P-gp表达阳性与急性淋巴细胞白血病化疗效果有相关性，P-gp表达阳性者易早期复发。     

BRD-2基因在急性淋巴细胞白血病中表达的临床研究

目的检测急性淋巴细胞白血病(ALL)患者BRD-2基因的表达情况和预后的关系。方法采用半定量RT-PCR技术检测了78例ALL患者及35名健康对照BRD-2基因的表达。结果 ALL患者BRD-2 mRNA表达阳性率为75.31%,明显高于健康对照组(37.14%,P<0.05)。半定量分析结果示,ALL患者BRD-2 mRNA表达水平为0.912±0.137,也高于健康对照组(0.466±0.209,P<0.05)。结论 BRD-2基因异常表达在ALL的发生、发展中可能起重要作用,检测该基因可作为临床诊断及预后评估指标。     

47例急性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的探讨免疫分型在急性淋巴细胞白血病（ALL）诊断及预后判断中的价值。方法采用流式细胞术对47例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫表型检测和分析。结果 （1）47例ALL中,B-ALL36例（76.6%）,T-ALL9例（19.1%）,T/B-ALL2例（4.3%）。B-ALL中cCD79a和CD19表达率均为100.0%,明显高于CD20（83.3%）和CD10（77.8%）（P〈0.01）;9例T-ALL cCD3和CD7的表达率均为100%,明显高于CD5（77.8%）（P〈0.01）;47例ALLcMPO表达均阴性。（2）伴髓系抗原表达阳性者（My＋ALL）完全缓解（CR）率为66.7%,低于髓系抗原表达阴性者（My-ALL）（87.0%）,但无统计学意义（P〉0.05）;14例CD34＋的患者CR率为64.3%,18例CD34-的患者CR率94.4%,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论免疫表型分析有助于ALL的诊断和预后判断。     

人细胞周期蛋白C在儿童急性淋巴细胞性白血病中的表达及对白血病细胞增殖的影响

目的：探讨人细胞周期蛋白C(Human cyclin C,CCNC)在儿童急性淋巴细胞性白血病（Acute Lymphocyte Leukemia, ALL）中的表达,并初步研究CCNC在体外对白血病细胞增殖的影响。方法：实时荧光定量PCR法检测CCNC在初治ALL、白血病细胞系及正常对照组中的表达,利用基因重组技术构建含有CCNC的全长的真核表达载体PCMV-2B-CCNC,用脂质体Lifefectamine2000将真核表达载体转染至人急淋细胞系6T-CEM细胞株中,Western-blot检测转染后的细胞CCNC蛋白的表达量,流式细胞分析CCNC对白血病细胞增殖的作用。结果：CCNC在对照组小儿、初治小儿ALL骨髓及6T-CEM细胞系中均有表达,在初治ALL中表达强度降低（P<0.05）。基因测序及重组质粒酶切后鉴定成功构建了PCMV-2B-CCNC真核表达载体,将其转染至6T-CEM细胞中,Western-blot检测到转染后的白血病细胞CCNC蛋白表达量增高,流式细胞结果表明在转染了CCNC基因的白血病细胞中,在细胞的Go/G1峰前出现一个亚二倍体峰,细胞凋亡指数有所增高（P<0.05）。结论: CCNC在初治小儿ALL中出现较低的表达强度,在转染人白血病细胞后,具有诱导白血病细胞凋亡作用,有可能与儿童ALL的发病相关。 关键词：儿童急性淋巴细胞性白血病,细胞周期蛋白C     

72例儿童急性淋巴细胞白血病免疫表型分析

目的：探讨儿童急性淋巴细胞白血病（ acute lymphoblastic leukemia ,ALL）免疫表型特点。方法：应用流式细胞术（ flow cytometry ,FCM）分析72例儿童急性淋巴细胞白血病患者骨髓或外周血标本的免疫表型。结果：72例儿童ALL患者中, B－ALL（88．9％,64／72）发病率较T－ALL（11．1％,8／72）高。64例儿童B－ALL患者中普通型B－ALL（ common B－ALL）（52例,72．2％）发病率较前B－ALL （ Pre－B－ALL ）（6例,9．4％）、早B－前体－ALL（ Pro－B－ALL）（6例,9．4％）高。髓系抗原阳性率B－ALL（62．5％）较T－ALL（25％）高,但两者并无统计学差异（p＞0．05）。 CD13是ALL中最常见的髓系抗原（55．6％）,其次为CD33（13．9％）,CD15（2．8％）、CD117（1．4％）的表达率极低,说明其髓系特异性优于CD13和CD33。结论：免疫表型对ALL的诊断、分型与预后判断至关重要。     

急性淋巴细胞白血病免疫表型的研究及其临床意义

目的 研究急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)免疫表型的特点及其临床意义.方法 应用流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测33例初诊ALL患者的免疫表型.结果 ①33例ALL分为B-ALL(75.76％),T-ALL(12.12％)和T/B-ALL(12.12％).②B-ALL中CD19表达率最高,占100％;T-ALL中CD7与cCD3表达率均为100％;CD20在成人及儿童组B-ALL表达率分别为23.53％、62.5％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);CD22在成人及儿童组B-ALL表达率分别为29.41％、62.5％,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05).③33例ALL中髓系抗原表达阳性率为60.61％,髓系抗原阳性与阴性患者完全缓解率之间的比较无统计学差异(P＞0.05).④33例ALL中CD34阳性表达率为66.67％,CD34阳性与阴性患者CR率之间的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 CD19、cCD79a分别是B-ALL中高敏感性抗原和高特异性抗原,CD7、cCD3分别是T-ALL中高敏感性抗原和高特异性抗原;儿童组CD20和CD22表达率明显高于成人组;髓系抗原和CD34的表达与CR率无相关性.     

以急淋为起始的慢性粒细胞白血病骨髓形态学及分子生物学特点

目的:研究以急性淋巴细胞白血病为起始的Ph1阳性、BCR/ABL融合基因阳性的慢性粒细胞白血病细胞形态学和分子生物学特点。方法:采用细胞形态学、分子生物学、组织化学、流式细胞免疫标记技术及染色体检测法。结果:骨髓象以原始、幼稚淋巴细胞为主,粒细胞比例相对于急性淋巴细胞白血病较高;细胞表面标记以CD19、CD20为主,中性粒细胞碱性磷酸酶积分减低,Ph染色体阳性、BCR/ABL融合基因阳性。结论:在细胞形态学基础上,同时开展Ph染色体和BCR/ABL融合基因检测对以急性淋巴细胞白血病为起始的Ph1阳性、BCR/ABL融合基因阳性的慢性粒细胞白血病的诊断是非常必要的。     

动态观察端粒酶活性在儿童急性淋巴细胞白血病预后判断中的意义

目的 :研究儿童急性淋巴细胞白血病 (ALL)的治疗及其相关预后因素。　方法 :以多药联合化疗方案进行诱导缓解和缓解后治疗 ,以诱导治疗第 1 4天的骨髓原始淋巴细胞比例作为治疗反应敏感性指标 ,以端粒重复序列扩增 银染色技术检测端粒酶活性作为微小残留白血病指标。　结果 :90 % (1 9/ 2 1 )的儿童ALL获完全缓解(CR)。在中位随访时间 5 5 (1 2～ 1 2 0 )个月内 ,6例复发 ,7例已连续完全缓解 (CCR) 2 4～ 5 4个月 ,现仍在连续治疗中 ;6例已停止治疗 1 8～ 6 0个月。全组患儿 5年无复发生存率为 6 5 .5 %。诱导治疗第 1 4天骨髓检查分级为M1(原始细胞为 <5 % )、M2 (原始细胞 5 %～ 2 5 % )和M3 (原始细胞 >2 5 % )型者分别为 6 7%、1 4 %和 1 9%。 1 4例M1 型ALL的 5年无复发生存率明显高于 7例M2 和M3 型 (分别为 84 .6 %和 1 5 .8% ,P <0 .0 1 )。在CR后端粒酶持续阳性或在治疗期间由阴性转为阳性的ALL复发率明显增加。　结论 :诱导治疗第 1 4天骨髓检查结果是判断ALL长期存活的重要预后因素 ;不同治疗阶段检测骨髓细胞端粒酶活性可作为微小残留白血病指标