急性呼吸窘迫综合征患儿气道吸出物中HGF、KGF和IL-1β水平的研究

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)、角化细胞生长因子(KGF)和白细胞介素-1β(IL-1β)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)发生、发展中的作用.方法 用酶联免疫吸附方法 (ELISA)检测25例ARDS患儿(ARDS组)及23例同期ICU收治的危重非ARDS患儿(对照组)气道吸出物(TA)中HGF、KGF和IL-1β的浓度,并对所有患儿进行肺损伤评分(LIS).结果 ARDS组TA中HGF、KGF和IL-1β含量较对照组显著增高(P<0.01);两组中死亡患儿(死亡组)TA中HGF、KGF和IL-1β水平显著高于存活患儿(存活组)(P<0.01);LIS评分与TA中HGF、KGF和IL-1β水平呈显著正相关(P<0.01).结论 HGF、KGF和IL-1β参与了ARDS发病过程,早期测定肺内HGF、KGF和IL-1β水平可判断ARDS患儿肺损伤严重程度和预后.     

角质细胞生长因子对上皮细胞损伤的防护作用

角质细胞生长因子（KGF）属于成纤维细胞生长因子家族,由成纤维细胞和其他来源的基质细胞合成分泌,可特异性地促进上皮细胞的增殖分化，在多种组织器官中发挥着重要功能,尤其是在上皮细胞损伤的修复中起重要作用。KGF防护作用的机制可能是通过调节促细胞增殖、抗氧化蛋白等相关基因的表达来实现的。     

小鼠角质化细胞生长因子及其受体的重组腺病毒表达载体的构建

【论文特点介绍】既往研究表明角质化细胞生长因子（KGD对急性起病的ALI／ARDS，以及慢性进展的PF均有预防作用。因此，构建KGF、KGFR的重组腺病毒载体对于探索肺部疾病的治疗，探讨KGF，乃至其他生长因子在肺损伤免疫进程中的作用都是一个有力的工具。     

角质细胞生长因子及其防护作用的研究

角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor, KGF)是在1989年由Rubin等[1]从人胎肺成纤维细胞的培养上清中分离并纯化的,并发现具有促进小鼠角质细胞有丝分裂的作用,故将其定名为角质细胞生长因子.KGF是具有肝素结合特性的成纤维细胞生长因子超家族中的成员,又称为FGF-7[2].     

角质细胞生长因子和肝细胞生长因子在肺感染及损伤修复中的作用

自从角质细胞生长因子（KGF）和肝细胞生长因子（HGF）被发现后，它们在肺的感染和损伤修复中的作用被广泛探讨。在过去10年的研究中表明，KGF、HGF在急性肺损伤（ALI）和其他肺病的发病机制中起着重要的作用，而且有治疗肺部疾病的前景。本文仅就最新的生物学知识对KGF和HGF在肺的感染和损伤修复中的作用综述如下。     

重组人角质细胞生长因子-2涂膜剂促进大鼠皮肤烫伤的修复

角质细胞生长因子-2(Keratinocyte growth factor-2，KGF-2)又称成纤维细胞生长因子-10(Fibroblast Growth Factor-10，FGF-10)，是FGF家族成员之一。KGF-2生理作用主要承担间质细胞-上皮细胞之间的信号传递。KGF02能促进角质上皮细胞的增殖，刺激伤口周围上皮细胞的再生、分化和迁移，     

重组人KGF基因减毒沙门氏菌菌株的构建及鉴定

目的 构建携带人角质细胞生长因子(KGF)基因真核表达载体的减毒沙门氏菌,并进行稳定性检测及体外表达鉴定,为探索制备针对高原急性肺损伤的细胞因子保护剂提供理论和实验依据.方法 采用RT-PCR法从正常人皮肤组织总RNA扩增出KGF cDNA全长,测序正确后将其定向插入到pcDNA3.0(+)质粒BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ之间;以电转化法将构建成功的质粒转化入减毒沙门氏菌Ty21a中,获得重组减毒沙门氏菌菌株TPK,并将其在卡那霉素(+)和卡那霉素(-)的LB培养板上分别传代培养40代,每隔10代提取质粒进行PCR及酶切鉴定;TPK菌株转染A549细胞,转染24 h及48 h后以RT-PCR及ELISA法检测KGF基因及蛋白表达水平.结果 成功构建了携带KGF基因的重组减毒沙门氏菌TPK,其可稳定遗传,不因无选择性压力而使质粒丢失,并能在体外稳定表达KGF基因及蛋白.结论 携带KGF基因减毒沙门氏菌TPK的成功构建和体外稳定表达为进一步研究角质细胞因子KGF对肺损伤的保护作用提供了实验依据.     

角质细胞生长因子在卵巢癌细胞迁移和侵袭中的作用

目的研究角质细胞生长因子（KGF）在卵巢癌细胞系侵袭和迁移过程中的作用,进一步探讨其在卵巢癌转移和侵袭过程中的分子学机制。方法选用人类卵巢癌细胞系HO-8910PM（高转移）及小鼠NIH3T3成纤维细胞系,采用细胞划痕实验和四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）分别检测不同浓度KGF对卵巢癌细胞系迁移和增殖的影响,用Western Blot和免疫荧光法研究KGF在活化的NIH3T3中的表达,并验证IL-1β、TGF-β1以及卵巢癌细胞系的条件培养基（CM）对其表达产生的活化和诱导作用。结果细胞划痕实验结果显示,KGF对卵巢癌细胞系的迁移能力有促进作用,其中KGF 100 pmol/L组、30 pmol/L组和300 pmol/L组与对照组相比,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。MTT实验显示,KGF对卵巢癌细胞系的增殖有促进作用,其中KGF 100 pmol/L组与对照组相比,差异有高度统计学意义（P〈0.01）。Western Blot证实IL-1β、TGF-β1及CM对KGF在成纤维细胞上的表达有诱导作用,而免疫荧光验证了IL-1β、TGF-β1及CM对成纤维细胞的活化作用。结论 KGF对卵巢癌细胞系的增殖、迁移和侵袭有促进作用,而IL-1β、TGF-β1以及CM对成纤维细胞的活化及KGF在成纤维细胞上的表达有不同程度的诱导作用。     

角质细胞生长因子及其受体在Hela细胞中的表达及其作用

目的 确定角质细胞生长因子(KGF)及其受体(KGFR)在Hela 细胞中的表达及KGF对Hela 细胞增殖的影响.方法 取对数增长期的Hela细胞,采用RT-PCR在基因水平确定KGF及KGFR在Hela细胞中的表达;Western blot及ELISA在蛋白水平确定KGF及KGFR 在Hela细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF对Hela细胞增殖的影响.结果 ①从基因水平和蛋白水平证实KGF及KGFR在Hela细胞中有表达.②人重组KGF因子对Hela细胞有明显的增殖作用.③用KGF抗体中和Hela细胞自分泌的KGF后,Hela细胞的增殖与对照组相比减弱(P＜0.05).结论 Hela 细胞中有KGF和KGFR的表达;KGF对Hela细胞有明显的增殖作用.     

角化细胞生长因子在食管鳞状细胞癌中的表达

目的研究食管鳞状细胞癌(ESCC)中角化细胞生长因子(KGF)的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系。方法选择2013年1月至2014年6月新乡医学院第一附属医院胸外科行ESCC根治切除术的患者56例,其手术切除食管病变部位的食管癌组织为ESCC组,同时选择其中25例ESCC切除标本上、下断端(距肿瘤边缘>5 cm)的正常食管上皮作为对照组。采用免疫组织化学方法观察、评定2组KGF表达的阳性率及表达强度,并进行比较。分析KGF表达与标本来源患者临床病理参数的关系。结果 ESCC组KGF的阳性表达率(57.1%)显著高于对照组(4.0%)(P<0.05)。ESCC组织中KGF蛋白的表达与有无淋巴结转移和分化程度有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、浸润深度、TNM分期及大体分型无关(P>0.05)。结论 KGF可能在ESCC的发生、发展中起重要作用,检测KGF表达对食管鳞状细胞癌的诊断、判断预后有重要参考价值。     

Omega-3多不饱和脂肪酸对角化细胞及成纤维细胞的作用

目的 观察Omega 3多不饱和脂肪酸对人表皮角化细胞增殖和人皮肤成纤维细胞分化的作用.方法 体外培养人表皮角化细胞和人皮肤成纤维细胞,用不同浓度Omega-3多不饱和脂肪酸(EPA)干预角化细胞,BrdU法测角化细胞增殖;不同浓度EPA干预成纤维细胞,ELISA法检测a-平滑肌肌动蛋白(a-SMA)及人胶原蛋白1的表达;MTT法观察EPA对成纤维细胞活性的影响.结果 EPA浓度在200 μmol/L时,对人表皮角化细胞有明显的促增殖作用,显著提高成纤维细胞培养液中a-SMA的表达,降低人胶原蛋白1的表达.结论 EPA可能通过促进角化细胞增殖、诱导成纤维细胞分化改善伤口愈合.     

谷氨酰胺对急性肺损伤大鼠HGF及KGF的影响

目的 探讨谷氨酰胺对脓毒症大鼠急性肺损伤时的肝细胞生长因子(HGF)及角细胞生长因子(KGF)的作用.方法 采用盲肠结扎穿刺法复制大鼠脓毒症急性肺损伤模型,40只健康SD大鼠,分为3组,即对照组、手术组[采用盲肠结扎穿刺法]、谷氨酰胺治疗组[采用盲肠结扎穿刺法后静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg].实验中手术组死亡6只,治疗组死亡3只,在手术6h后手术组随机处死6只,24 h后处死剩下5只,治疗组药物处理6h后处死6只,24 h后处死剩下的8只,4 000 r/min离心10 min,收集血清,置于-20℃冰箱保存待用.E1isa法测定血清中HGF和KGF的量.并进行各组织的病理学光镜检查.研究谷氨酰胺对血清中HGF和KGF的影响.结果 与手术组比较,谷氨酰胺治疗组血清HGF和KGF浓度明显升高(P＜0.05).结论 静脉给予谷氨酰胺能促进脓毒症大鼠急性肺损伤时HGF和KGF的分泌,促进受损组织的修复.     

急性肺损伤患者肺泡灌洗液及血清中角细胞生长因子和肝细胞生长因子水平变化的意义

目的探讨急性肺损伤(ALI)患者支气管肺泡灌洗液(BALF)及血清中肝细胞生长因子(HGF)和角细胞生长因子(KGF)水平变化的临床意义。方法选择30例ALI患者,其中轻中度损伤16例(A组),重度损伤14例(B组),另选择健康非吸烟的自愿献血者10名作为血清对照组(C组),10名BALF检查无异常的就诊者作为BALF对照组(D组),用ELISA法检测30例ALI患者血清及BALF中HGF和KGF的水平。结果A、B、D3组患者的BALF及血清中HGF、KGF水平比较差异均有统计学意义(P<0.05),B组患者BALF中KGF、HGF水平与A组比较差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组患者BALF中HGF和KGF水平与存活组比较差异有统计学意义(P<0.05),死亡组患者血清中HGF和KGF水平与存活组比较差异亦有统计学意义(P<0.01)。BALF中HGF和KGF水平与肺损伤系数呈正相关(P<0.01)。结论多种炎症细胞及递质参与ALI的病理过程,HGF和KGF在ALI的发生、发展中起重要的作用。BALF及血清中HGF和KGF可作为ALI病情监测和预后判定的参考指标。     

角质细胞生长因子及其受体在CaSki细胞中的表达及其作用

目的 确定角质细胞生长因子(KGF)及受体(KGFR)在CaSki细胞中的表达及KGF对CaSki 细胞增殖、迁移的影响.方法 取对数增长期的CaSki细胞,ELISA和Western blot确定KGF及KGFR在CaSki细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞增殖的影响;Millicell测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞迁移的影响.结果 ①KGF、KGFR 在CaSki细胞中有表达;②人重组KGF因子对CaSki细胞的增殖、迁移有促进作用(P＜ 0.05);③用KGF抗体中和CaSki细胞自分泌的KGF 后,CaSki细胞的增殖、迁移减弱(P＜0.05).结论 KGF和KGFR在CaSki细胞中有表达;人重组KGF及CaSki细胞自分泌KGF对CaSki细胞的增殖、迁移均有促进作用.     

携带KGF基因重组腺病毒载体的构建与鉴定

目的:构建携带角化细胞生长因子(Kemtinocyte growth factor,KGF)的腺病毒载体并观察其在细胞中的表达.方法:通过PCR从pcDNA3-KGFpIRES2-EGFP-KGF质粒中扩增出目的片段KGF,定向克隆至穿梭质粒载体pShuttle-CMV中,构建pShuttl-KGF.经酶切及测序鉴定后...     

乌司他丁对肺癌患者放疗后急性肺损伤的保护作用及相关分子机制研究

目的:分析乌司他丁对肺癌患者放疗后急性肺损伤的保护作用及相关分子机制。方法:将2013年12月~2015年12月在本院接受放疗并发生急性肺损伤的78例患者随机分为观察组及对照组,对照组接受对症治疗,观察组接受对症+乌司他丁治疗,对比两组治疗后的血清生长因子、炎症因子、病情相关蛋白含量以及肺泡灌洗液中P38MAPK信号通路分子的表达量。结果:治疗10d后,观察组血清肝细胞生长因子(HGF)、角细胞生长因子(KGF)、血管内皮生长因子(VEGF)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-8(IL-8)、白介素-10(IL-10)、白介素-18(IL-18)、白介素-13(IL-13)、降钙素原(PCT)、S100A8、S100A9、肺表面活性蛋白D(SP-D)含量显著低于对照组(P<0.05),Clara细胞蛋白的含量显著高于对照组(P<0.05);肺泡灌洗液中磷酸化p38MAPK、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、MKK3/6、ATF-2的蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论:乌司他丁可缓解放疗后急性肺损伤患者的整体病情,具体机制与P38MAPK信号通路相关。     

纤维母细胞增强HCE16/3细胞IL-1基因表达的研究

目的 :研究纤维母细胞对HPV 16型DNA永生化的人宫颈上皮细胞 (HCE16 /3细胞 )白细胞介素 1(IL 1)基因表达的调节。方法 :应用Northern印迹法分析纤维母细胞、纤维母细胞条件培养液以及纤维母细胞分泌的角质细胞生长因子 (KGF)对HCE16 /3细胞IL 1基因表达的影响。结果 :在正常情况下 ,HCE16 /3细胞IL 1基因表达水平很低 ,但在与纤维母细胞作共同培养时 ,IL 1基因的表达水平明显上调。如使用纤维母细胞条件培养液 ,IL 1基因的表达也呈上调现象 ,上调反应明显与条件培养液所占比例有关。进一步的研究表明 ,条件培养液中刺激IL 1基因表达的物质主要为纤维母细胞分泌的KGF。结论 :在体内 ,间质细胞可影响宫颈上皮性肿瘤的生长     

角化细胞生长因子、磷酸化酪氨酸在慢性化脓性中耳炎中的表达及意义

目的：研究鼓膜穿孔部位邻近皮肤中角化细胞生长因子（keratinocyte growth factor,KGF）、磷酸化酪氨酸表达在慢性化脓性中耳炎不同转归中的作用。方法：应用免疫组化SP染色方法和多媒体图像分析系统,观察20例中耳胆脂瘤患者鼓膜穿孔部位邻近皮肤中的KGF和磷酸化酪氨酸表达,并与其耳道深部正常皮肤和非胆脂瘤型中耳炎鼓膜穿孔部位邻近皮肤比较。结果：胆脂瘤型中耳炎鼓膜穿孔部位邻近皮肤KGF、磷酸化酪氨酸表达的平均光密度值分别为0.374±0.039和0.248±0.009,显著高于耳道深部正常皮肤和非胆脂瘤型中耳炎鼓膜穿孔邻近皮肤。结论：角化细胞生长因子、磷酸化酪氨酸可能在胆脂瘤型中耳炎的发生中起了一定的作用。     

体外循环前后人白细胞基质金属蛋白酶9基因表达及血浆浓度的变化

基质金属蛋白酶(MMP)是参与细胞外基质降解的最主要酶类,对维持细胞外基质的动态平衡、炎症性疾病、胚胎发育、细胞凋亡、组织重建以及肿瘤浸润、转移等生理或病理过程有重要的作用。MMP-9是MMP家族的重要成员,它与肺损伤有关。体外循环常导致急性肺损伤,通过动物实验发现体外循环可引起支气管肺泡灌洗液中MMP-9浓度升高。本研究拟从基因和蛋白质水平观察体外循环对人MMP-9的影响。     

VEGF对胚胎发育的影响

血管内皮生长因子 (VEGF)自问世以来 ,对其性质、作用等进行了广泛深入的研究。现已证实它是一种多功能生长因子和特异性血管生长因子 ,具有特异性促血管内皮细胞有丝分裂 ,强烈诱发活体内新血管形成 ,是唯一的对血管形成具有特异性作用的生长因子 ,其他生长因子如成纤维细胞生长因子、血小板衍生生长因子等能作用于包括血管内皮细胞在内的多种细胞 ,是不具特异性的。目前通过基因工程研究发现血管内皮细胞特异性生长因子包括VEGF的 5个亚型 (VEGF A、B、C、D、E) ,血管生成素的 4个亚型和 1个ephrin家族成员[1 ] 。绝大多数对血管有…