山羊颞下颌关节盘细胞肌动蛋白骨架的研究

目的:通过激光扫描共聚焦显微镜(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)研究原代及传代山羊颞下颌关节盘细胞骨架(Cytoskeleton,CSK)蛋白-肌动蛋白的形态及蛋白量的改变,以说明关节盘细胞随着传代的发生,细胞骨架蛋白-肌动蛋白的差异。方法:原代(P0)山羊颞下颌关节盘细胞及传代1、2、3、4(P1、P2、P3、P4)代的关节盘细胞,分别接种在有方形盖玻片的6孔板中制作细胞爬片。对各代关节盘细胞肌动蛋白骨架进行免疫荧光染色,利用激光共聚焦显微镜获取各代关节盘细胞肌动蛋白的形态,同时利用荧光强度测定软件对各代关节盘细胞肌动蛋白荧光量进行测定。结果:丝状的肌动蛋白主要沿着细胞膜外围均匀排列,随着传代丝状结构逐渐清晰,且逐渐增粗,P4代时形成较粗的纤维束。荧光强度整体趋势是随着传代荧光量表达是递增的,P3代以内没有统计学差异,而在P4代时统计学差异明显。结论:肌动蛋白骨架随着传代过程形态学上发生了改变,在P4代时可见骨架蛋白形成较粗的纤维束,荧光量表达同其他代细胞差异明显,这为以后工程化颞下颌关节盘种子细胞的选择提供了依据。     

山羊颞下颌关节盘细胞透射电镜观察

目的 用透射电镜的方法对两只1月龄健康山羊四只颞下颌关节盘的细胞及胶原结构进行了观察.方法 切取山羊双侧颞下颌关节盘,经组织学处理后行透射电镜观察细胞和胶原超微结构特征.结果 颞下颌关节盘由不均分布的细胞和胶原纤维组成,细胞有成纤维细胞样细胞和软骨细胞样细胞两种,其中成纤维细胞样细胞较软骨细胞样细胞占优势.成纤维细胞样细胞表现有细长的突起,核大,梭形或不规则形,细胞器较少.软骨细胞样细胞胞核呈圆形或椭圆形,周围少有电子透射区,细胞膜不明显,胞突少见.胶原纤维由平行排列的有周期性横纹特征的胶原原纤维组成.结论 颞下颌关节盘细胞有成纤维细胞样和软骨细胞样细胞两种,前者占优势,胶原原纤维表现有周期性横纹特征.这为颞下颌关节盘组织工程研究中细胞来源及表型分析奠定了一定基础.     

山羊颞下颌关节盘细胞体外培养研究

目的:研究山羊颞下颌关节盘纤维软骨细胞体外培养的生物学特性及其损伤修复的细胞学基础.方法:切取1 月龄山羊颞下颌关节盘, II型胶原酶消化获得关节盘纤维软骨细胞.逐日观察细胞的形态变化, 测定其生长曲线,甲苯胺蓝染色、I型胶原免疫组化染色鉴定.透射电镜观察细胞超微结构.结果:原代培养的关节盘纤维软骨细胞以长梭形为主, 部分多角形, 7 d即可传代.甲苯胺蓝染色阳性, I型胶原免疫组化染色胞质内可见棕黄色颗粒.超微结构显示细胞分为2 种,软骨细胞样细胞和成纤维细胞样细胞;线粒体、内质网发达.结论:体外分离培养的山羊颞下颌关节盘纤维软骨细胞具有较强的增殖能力,1～3代细胞可作为颞下颌关节盘组织工程的种子细胞.     

人体颞下颌关节盘拉伸力学特性研究

通过对４具新鲜尸体的５个颞颌关节盘共８０个试件进行不同应变水平下的应力松弛试验和等应变速度下的拉伸破坏试验，测定了关节盘的横向拉伸力学性质，用拟线性粘弹性理论和二相理论对实验结果进行分析并建立了组织的本构方程。结果表明：关节盘的生理二相区在５％应变内；盘前带的横向拉伸强度、拉伸模量和破坏能量大于中间带和后带，中、后带差异不大；盘的应力松弛程度较低，初始应力松弛率在８％～１５％左右。同时证明，在较低应变下可以用获取的本构方程模拟关节盘的流变学特性     

人体颞下颌关节盘抗力结构超微研究

目的：研究离体环境下人体颞下颌关节盘的抗力表现。方法：将新鲜颞下颌关节盘分区围限压缩,在不同时间观察其扫描电镜表现。结果：短时压缩使关节盘表面波纹状结构变浅、模糊;过长时间压缩可使其凝胶层脱落,胶原纤维束暴露或洞样缺损,尤其在关节盘中带。结论：关节盘中带最易破坏,凝胶层是关节盘的薄弱环节。     

人体颞下颌关节盘弹性模量的测定

目的：了解颞下颌关节盘的生物力学性质。方法：采用软组织拉伸力学实验方法,对4具鲜尸体的颞下颌关节盘进行了等应变速度（0．05mm/s)下的拉伸试验,测定了关节盘横向拉伸弹性模量值。结果：关节盘弹性模量分为二类,初始段模量范围为3．80－4．80MPa,各区段无明显差异,结论：二类弹性模量代表了关节盘在缓冲关节压力过程中的生物力学弹性响应特性,关节盘不同区带对外部载荷具有良好的适用应能力。     

山羊颞下颌关节盘生物力学的多维测量及定量分析

目的:从压缩、拉伸、循环压缩、循环拉伸、蠕变、摩擦等多维度测量分析颞下颌关节盘的生物力学性能,完善颞下颌关节盘的力学检测体系。方法:在市场统一购置新鲜羊头15只（2.5~3.0 kg）,均为普通饲养山羊（9~12个月龄,体质量18~21 kg）,雌雄不限,于处死后30 min内解剖出双侧关节盘（共计30枚）。参照黏弹性...     

山羊颞下颌关节盘胶原构筑和生物力学性能研究

目的 为工程化颞下颌关节盘组织建立客观的生物力学标准。方法 从4只健康1月龄山羊头中完整分离8个颞下颌关节盘,用直径3 mm的冲子在前、中、后带取圆柱状试样,预处理压缩速度为0.025 mm•s-1,结束条件为最大载荷小于4.9 N,压缩位移1.5 mm,循环3次,在预处理基础上完成压缩实验,获取各区带的应力应变关系图和弹性模量值。扫描电子显微镜和偏振光显微镜观察各区带的超微结构和胶原纤维走向。结果 1）关节盘组织的生理应变范围在10%以内,关节盘组织的拟线性本构方程可以用多项式y=ax+bx2+cx3进行拟合。2）关节盘中间带的弹性模量值最大,其与前带和后带均有统计学差异（P<0.05）,前带与后带之间无统计学差异（P=0.361）。3）颞下颌关节盘内部呈现环形胶原网状结构,中间带胶原排列致密,呈前后向排列;前带和后带主要呈内外走向,伴有前后方向的纤维。结论 环形胶原网状结构是山羊颞下颌关节盘抗力性能的基础,中间带抗压性能高于前带和后带。     

颞下颌关节盘及软骨结构与力学特性

ＴＭＪ盘及关节软骨是ＴＭＪ的重要组成部分，它们的力学特性对ＴＭＪ的正常生理功能及病理变化有着重要的意义。国内外已有一定的研究报告，本文就ＴＭＪ盘及软骨构成与生物力学特性的关系研究进展作一综述。     

细胞松弛素B对山羊颞下颌关节盘细胞及细胞骨架肌动蛋白的影响

目的:肌动蛋白作为细胞骨架的重要结构蛋白,其与细胞形态和功能有着密切关系。因此本实验通过肌动蛋白抑制剂-细胞松弛素B检测细胞骨架完整性与山羊颞下颌关节盘细胞功能变化的关系。方法:检测不同浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖及形态的影响并得出最适浓度;观察最适浓度作用后细胞凋亡、粘附及肌动蛋白形态和mRNA表达的变化。结果:2 μmol/L浓度的细胞松弛素B对关节盘细胞增殖活性具有明显抑制作用,但随培养时间延长抑制率明显降低,无促进凋亡作用;细胞粘附率明显下降;与对照组相比,处理组细胞突起结构逐渐消失,形态变圆,肌动蛋白纤维丝明显的断裂,荧光强度降低;肌动蛋白mRNA表达降低。结论:细胞松弛素B可能是通过破坏肌动蛋白的结构抑制了颞下颌关节盘细胞形态及功能。     

自组装山羊颞下颌关节盘组织工程纤维软骨模型的构建

目的 构建山羊颞下颌关节盘纤维软骨自组装模型,观察自组装组织工程纤维软骨的生物学特征,为颞下颌关节盘及其他组织工程纤维软骨的进一步研究创造条件.方法 分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,按每井5.5×106个接种到预制的直径5 mm×深10 mm琼脂糖井内,每天换液,培养2周,观察和检测颞下颌关节盘形态和成分的变化.结果 ...     

星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩的影响

目的 探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法 单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ⁶个细胞在不同浓度（0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1）星孢菌素的完全培养基中分别接种于三维柱状琼脂糖井;每天每井换液,培养1周后观察自组装基体的形态变化;冰冻切片染色显示自组装基体细胞外基质及α-平滑肌动蛋白（α-SMA）的分布;酶联免疫吸附测定（ELISA）和Blyscan试剂盒检测基体细胞外基质含量的变化。结果 山羊颞下颌关节盘细胞接种4 h后,星孢菌素组和对照组细胞均在琼脂糖井内自组装,形成一圆盘状基体,之后变成球形。各组自组装基体在1周时天狼星红染色可见基体内大量胶原纤维分布;番红染色显示基体内纤维软骨样细胞明显分泌糖胺多糖（GAGs）;Ⅰ型胶原（ColⅠ）在免疫组织化学染色中呈强阳性;α-SMA免疫组织化学染色为弱阳性。星孢菌素组自组装基体内ColⅠ和GAGs较高,其中10 nmol·L ^-1组最明显（P<0.01）。结论 星孢菌素对自组装基体的收缩有一定干预效果,但不是非常突出;它更有利于细胞外基质的合成。     

星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞 自组装基体收缩的影响

目的 探索不同浓度星孢菌素对山羊颞下颌关节盘细胞自组装基体收缩性及细胞外基质合成的影响。方法 单层培养山羊颞下颌关节盘细胞至P3代,将5.5×10 ⁶个细胞在不同浓度（0、0.1、1、10、100 nmol·L ^-1）星孢菌素的完全培养基中分别接种于三维柱状琼脂糖井;每天每井换液,培养1周后观察自组装基体的形态变化;冰冻切片染色显示自组装基体细胞外基质及α-平滑肌动蛋白（α-SMA）的分布;酶联免疫吸附测定（ELISA）和Blyscan试剂盒检测基体细胞外基质含量的变化。结果 山羊颞下颌关节盘细胞接种4 h后,星孢菌素组和对照组细胞均在琼脂糖井内自组装,形成一圆盘状基体,之后变成球形。各组自组装基体在1周时天狼星红染色可见基体内大量胶原纤维分布;番红染色显示基体内纤维软骨样细胞明显分泌糖胺多糖（GAGs）;Ⅰ型胶原（ColⅠ）在免疫组织化学染色中呈强阳性;α-SMA免疫组织化学染色为弱阳性。星孢菌素组自组装基体内ColⅠ和GAGs较高,其中10 nmol·L ^-1组最明显（P<0.01）。结论 星孢菌素对自组装基体的收缩有一定干预效果,但不是非常突出;它更有利于细胞外基质的合成。     

不同体积分数氧气对山羊颞下颌关节盘细胞骨架改建的影响

目的 探讨不同体积分数的氧气对山羊颞下颌关节盘细胞3种细胞骨架蛋白改建的影响。方法 体外分离、培养山羊颞下颌关节盘细胞,传代至第2代,分别于常氧21%O₂及低氧8%O₂、4%O₂、2%O₂下培养。甲苯胺蓝、天狼星红及Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色观察不同氧体积分数下细胞显型的变化。细胞免疫荧光染色和实时定量逆转录聚合酶链反应检测细胞骨架蛋白,包括肌动蛋白、微管蛋白和波形蛋白的表达情况。结果 不同氧体积分数下关节盘细胞仍然具有成纤维特性,3种细胞骨架蛋白有规律地排列。4%O₂时,肌动蛋白和波形蛋白荧光强度最低（P<0.05）;2%O₂时,微管蛋白荧光强度最高（P<0.05）,其他各组间差异无统计学意义（P>0.05）。检测肌动蛋白mRNA表达,21%O₂组最高,而2%O₂组和4%O₂组最低（P<0.05）;微管蛋白mRNA表达在2%O₂组最高,8%O₂组最低（P<0.05）;波形蛋白mRNA表达,在4%O₂组最低,21%O₂组最高,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 在不同氧体积分数条件下,细胞骨架蛋白有不同程度的改建,2%O₂可能是适合颞下颌关节盘细胞扩增的最佳氧体积分数。     

Dynamic compressive properties of porcine temporomandibular joint disc

This study aimed to evaluate the effect of the strain frequency and amplitude on the compressive properties of the porcine temporomandibular joint disc and to determine the time-dependent changes associated with energy dissipation. Seven discs were used for compressive cycle tests, including various frequencies and magnitudes of compressive strain. Each experiment consisted of 25 cycles of loading and unloading. Hysteresis and the instantaneous and steady moduli were calculated. All specimens showed a clear hysteresis and repeatable stress-strain relationships within 19 cycles. The hysteresis at the initial cycle ranged between 35% and 62%, and gradually decreased in subsequent cycles. The instantaneous modulus became larger when the strain frequency and the strain amplitude increased. The steady modulus was approximately one-third of the instantaneous one. It was concluded that the disc has an energy-dissipating function during dynamic compression.     

可复性关节盘前移位患者的关节音特征

目的 比较青年人可复性关节盘前移位者和无颞下颌关节症状者的颞下颌关节音,探讨其关节音频谱图的特征和临床诊断价值.方法 运用BioJVA颞下颌关节振动分析仪记录21例可复性关节盘前移位患者与26例正常青年人节律性大开闭口运动中双侧颞下颌关节音;以临床诊断为标准,计算关节振动总能量,诊断可复性关节盘移位的灵敏度和特异性....     

可复性关节盘前移位患者的关节音特征

目的比较青年人可复性关节盘前移位者和无颞下颌关节症状者的颞下颌关节音,探讨其关节音频谱图的特征和临床诊断价值。方法运用BioJVA颞下颌关节振动分析仪记录21例可复性关节盘前移位患者与26例正常青年人节律性大开闭口运动中双侧颞下颌关节音;以临床诊断为标准,计算关节振动总能量,诊断可复性关节盘移位的灵敏度和特异性。结果病例组两侧颞下颌关节的振动总能量、频率小于300 Hz的振动能量、频率大于300 Hz的振动能量、频率大于300 Hz的振动能量与频率小于300 Hz的振动能量之比、峰振幅、峰频率、中间频率均明显大于对照组（P＜0.05）;病变关节随着关节盘移位程度的增加,各项关节振动参数也随之增加,振动总能量明显增加（P＜0.05）;关节振动总能量对关节盘前移位的诊断灵敏度和特异性分别为0.86和0.85。结论可复性关节盘前移位患者关节音振动的各参数明显高于正常人,不同病变阶段的关节音也不同。     

颞下颌关节盘前移位病因研究进展

颞下颌关节盘前移位(temporomandibular joint anterior disc displacement, TMJ ADD)是临床上常见的一种颞下颌关节紊乱病(temporomandibular disorder, TMD),主要表现为疼痛、关节弹响和下颌运动受限,严重者影响日常生活。但其病因复杂,至今尚无统一结论,对其发病机制也缺乏明确而全面的认识。本文将对ADD的病因以及发病机制作一综述。     

Correlation between direction and severity of temporomandibular joint disc displacement and reduction ability during mouth opening

The most common temporomandibular joint (TMJ) internal derangement is an abnormal relationship of the disc with respect to the mandibular condyle, articular eminence and glenoid fossa‐disc displacement. The aim of our study was to analyse the correlation between partial/complete disc displacement in the intercuspal position (IP) and its reduction in the open‐mouth position (OMP) in both oblique sagittal and coronal planes on magnetic resonance imaging (MRI) in patients with temporomandibular disorders. Multisection MRI analysis of 382 TMJs was conducted in 191 patients with disc displacement according to the RDC/TMD criteria (148 women, 43 men; aged 14‐60 years). The disc position was evaluated on all oblique sagittal and coronal images in the IP and the OMP. Univariate logistic regression analysis showed that the severity of disc displacement in the sagittal plane is a statistically significant predictor of reduction ability during mouth opening (B = 3.118; P < .001). Moreover, the severity of disc displacement in both planes is also a significant predictor of disc reduction in OMP (B = 2.200; P < .05). In conclusion, reduction ability during mouth opening is associated with the severity of disc displacement in IP, in both sagittal and coronal planes. Multisection analysis of all MR images allows distinguishing the correct disc position from disc displacement and can improve the ability to distinguish between various stages of TMJ internal derangement.