核糖体蛋白基因在胃肠道肿瘤中的表达

目的 探讨核糖体蛋白(RP)基因在胃肠道肿瘤中的表达.方法 对NCBI网站中的基因表达系列分析(SAGE)数据库公布的80个癌和癌旁正常组织RP基因进行对比分析(包括结肠癌和胃癌)后,取胃癌、结肠癌标本各30例,通过逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)对RP L13(RPL13)、RPL37、RPS2和RPS19基因的表达进行检测.结果 SAGE数据库分析表明: RPL13、RPL37、RPS19、RPS2和RPLP2在胃癌中表达比正常胃组织中表达平均分别高6.25、2.40、3.86、2.22和3.15倍,在结肠癌中的表达比正常结肠组织中表达平均分别高(3.22)、7.10、2.55、5.87和2.84倍;RT-PCR结果 显示胃癌和结肠癌组织中RPL13、RPL37、RPS2和RPS19 mRNA的表达均高于正常组织(P<0.05).结论 胃肠道肿瘤中存在着共同高表达RP基因,这些共同高表达RP基因可能与消化道肿瘤的发生、发展密切相关.     

胃癌组织中MTLC基因表达研究

目的研究MTLC(c-myc target from laryngeal cancer cells)基因在胃癌组织中的表达规律，探讨其在胃癌发生与发展中的作用。方法用反转录-聚合酶链反应法和免疫组织化学法分别检测MTLC mRNA及蛋白在胃癌组织及配对对照组织中的表达情况；用cDNA阵列分析正常胃组织中MTLC基因的表达差异。结果25份胃癌组织中有19份(76％)MTLC mRNA表达下调；免疫组织化学检测结果表明，MTLC蛋白在胃癌细胞中表达阴性，但在正常细胞中表达阳性；cDNA阵列分析显示，癌旁／正常组织、癌／癌旁组织、转移淋巴结／癌组织比值分别为0．527、0．277和0．466，表明正常胃组织中与癌旁组织中无差异，但癌旁组织、胃癌组织、转移淋巴结组织中MTLC mRNA水平依次递减。结论MTLC基因在胃癌组织中表达下调，其表达水平与胃癌的发展进程相关，提示MTLC基因可能在胃癌发生、发展及转移过程中起重要作用。     

肾细胞癌中Wif-1基因的甲基化状态及表达

目的检测肾细胞癌(RCC)中Wnt抑制因子-1(Wif-1)基因的甲基化状态及表达水平,探讨其在肾细胞癌发生发展中的可能机制。方法分别应用甲基化特异性PCR(MSP)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测56例肾细胞癌及相应癌旁正常肾组织中Wif-1基因的甲基化状态及表达水平。结果 Wif-1基因在RCC组织中的甲基化率显著高于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。Wif-1基因在RCC组织中的相对表达量显著低于相应癌旁正常肾组织(P<0.05)。在RCC组织中,Wif-1基因甲基化阳性组mRNA的相对表达量与甲基化阴性组mRNA的相对表达量比较无显著差异(P>0.05)。结论 Wif-1基因启动子区的高甲基化在肾细胞癌的发生中是一个频发事件。     

Anxa2基因在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨Anxa2基因表达在胃癌发生、发展中的作用及其与临床病理特征的相关性。方法应用实时荧光定量PCR方法检测50例胃癌及癌旁组织中Anxa2基因mRNA的表达水平;用Western blot方法检测20例胃癌及癌旁组织中Anxa2蛋白的表达水平;制作组织芯片,通过免疫组化染色分析139例胃癌Anxa2蛋白表达与临床病理特征的关系。结果 Anxa2 mRNA在胃癌和癌旁组织中的表达水平分别为2.072±1.477和1.271±0.907,两组差异显著(P0.01);胃癌组织中Anxa2蛋白的表达量(2.144±1.226)高于癌旁组织(1.269±0.736),差异显著(P0.001)。免疫组化显示Anxa2定位于肿瘤细胞膜,在胃癌组织中的阳性率为49.6%(69/139),高于癌旁组织18.7%(26/139),两者差异显著(P0.001),且Anxa2过表达与胃癌组织分化、淋巴结转移和临床分期密切相关(P0.05)。结论 Anxa2过表达与胃癌的发生、发展密切相关,可能是新的治疗靶点或预后评估指标。     

胃癌组织中Fas/FasL表达及T淋巴细胞亚群分析

目的探讨Fas/FasL和T淋巴细胞亚群在肿瘤免疫逃逸中的作用。方法采用流式细胞术对经病理检查确诊为胃癌的癌组织、癌旁组织、转移性淋巴结进行Fas/FasL表达测定和T淋巴细胞亚群分析。结果 CD4+细胞在癌组织中的表达低于癌旁组织及转移性淋巴结,差异有统计学意义(P<0.01),癌旁组织与转移性淋巴结两者间差异无统计学意义(P>0.05);CD8+细胞在癌组织中的表达均高于癌旁组织及转移性淋巴结,差异有统计学意义(P<0.01),癌旁组织与转移性淋巴结两者间差异无统计学意义(P>0.05)。Fas在癌旁组织及转移性淋巴结中呈高表达,两者间差异无统计学意义(P>0.05),但在癌组织中呈低表达,癌组织与癌旁组织及转移性淋巴结之间比较差异有统计学意义(P<0.01)。FasL在癌组织及转移性淋巴结均呈高表达,两者间差异无统计学意义(P>0.05),与癌旁组织比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃癌患者FasL诱导激活的T淋巴细胞凋亡,使肿瘤细胞可能逃逸机体免疫系统攻击。     

MMP-2，TIMP-2，MMP-9的表达与胃癌侵袭转移的关系

目的检测胃癌组织以及癌旁胃组织中MMP．2、TIMP．2、MMP．9的表达差异,并分析其对胃癌侵袭转移能力的影响及其可能机制。方法将97例胃癌组织以及89例癌旁胃组织制作成组织芯片,用免疫组织化学半定量的方法检测MMP-2、TIMP-2、MMP-9在胃癌组织及癌旁胃组织中的表达程度并分析其与临床病理参数的关系。结果MMP-2、TIMP-2、MMP-9在89例胃癌组织和配对的癌旁胃组织中的表达均有显著差异（P〈O．01）,其中MMP-2在胃癌组织的表达大于其在癌旁非肿瘤胃组织,而TIMP．2、MMP．9在胃癌组织的表达小于其在癌旁非肿瘤胃组织。MMP-2的高表达率与胃癌组织的临床分期,浸润深度,淋巴结转移显著正相关（P〈0．01）;TIMP．2与胃癌组织的临床分期,浸润深度（P〈0．01）,淋巴结转移（P〈0．05）显著负相关。MMP．9在肠型胃癌的表达要显著高于弥漫型胃癌（P〈O．05）。MMP-2的高表达与TIMP-2的高表达显著负相关（P〈O．01）。结论MMP-2可促进胃癌的侵袭转移,在胃癌组织高表达;TIMP-2抑制胃癌的侵袭转移,在胃癌组织低表达;MMP-2的表达与TIMP-2的表达显著负相关。MMP-9在胃癌组织表达低,．在肠型胃癌中的表达显著高于弥漫型胃癌,与TIMP-2的表达无显著相关性。     

胃癌组织中DEC1的表达及其临床意义

目的:探讨分化型胚胎软骨发育基因1 (DEC1)在胃癌组织中表达的临床意义.方法:应用组织芯片方法检测162例胃癌组织和32例癌旁组织中DEC1蛋白的表达;采用实时定量逆转录聚酶链反应(RT-PCR)方法检测11例胃癌组织和12例癌旁胃正常组织中DEC1 mRNA的表达水平.结果:DEC1在胃癌组织中表达的阳性率为11.11％(18/162),而在癌旁组织中的阳性率为3.13％(1/32),两者差异无统计学意义(P＞0.05);DEC1 mRNA在胃癌组织和癌旁胃正常组织中的表达水平极低,无法定量检测.结论:DEC1在胃癌组织中的表达较低,其在胃癌中的临床价值尚有待于进一步研究.     

结肠癌转移相关基因1在胃癌组织中的高表达及与肿瘤细胞侵袭、转移的关系

目的探讨结肠癌转移相关基因1(MACC1)在胃癌组织中的表达情况及与肿瘤细胞侵袭、转移的关系。方法收集2017年7月-2020年2月在我院行胃癌切除术治疗的90例患者的临床资料以及胃癌组织标本,随机选取癌旁组织标本61例,采用免疫组织化学法检测MACC1表达情况,并分析与患者临床病理参数的关系。结果MACC1在胃癌组织中的阳性表达率68.89%显著高于癌旁组织阳性表达率16.39%,差异有统计学意义(P<0.05),且MACC1的高表达与患者浸润深度、组织分化程度、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05)。结论在胃癌组织中,MACC1呈现异常高表达,与肿瘤细胞的侵袭、转移显著相关,可以作为患者病情以及预后的检测指标。     

miRNA-155在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨miRNA-155在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法收集30例行胃癌手术切除治疗患者的临床资料及胃癌组织,采用基于SYBRGreenI染料荧光分析的茎环real—timeRT—PCR检测胃癌组织及其对应的癌旁组织中miRNA-155的表达水平（以U6作为内参）。结果miRNA-155在胃癌组织中表达量为（O．87±0．28）,显著高于其在配对癌旁组织中（0．33±0．15）的表达量（P〈0．05）;miRNA-155在有淋巴结转移的胃癌组织中表达更为显著（P〈0．05）。结论miRNA-155在胃癌组织中表达较癌旁组织明显上调。miRNA-155与胃癌的增殖、侵袭及转移密切相关,其可能成为胃癌的早期诊断及预后判断的新的生物学标记物。     

PP2a在胃癌及癌旁组织的表达及与幽门螺杆菌感染的相关性

目的研究蛋白磷酸酶2A(PP2a)在胃癌及癌旁正常组织中的表达及幽门螺杆菌(H.pylori)感染与胃癌组织中PP2a表达的相关性。方法入组40例胃癌患者的癌组织(胃癌组)及癌旁组织(癌旁组),2组采用免疫组织化学法检测PP2a蛋白表达情况,TUNEL法检查细胞凋亡,碳14尿素酶呼吸试验检测40例胃癌患者H.pylori感染情况。结果在胃癌组织中PP2a的阳性表达率为70%,明显低于正常胃黏膜组织中PP2a阳性表达率的90%,二者差异有统计学意义(P<0.05);PP2a蛋白表达与胃癌的分化程度、有无淋巴结转移有关;PP2a表达阴性组的胃癌细胞凋亡指数显著低于PP2a阳性组(P<0.05)。胃癌患者H.pylori感染率为57.5%,H.pylori阳性胃癌组织的PP2a蛋白阳性表达率显著低于H.pylori阴性者(P<0.05)。H.pylori感染与胃癌组织中PP2a的表达呈负相关。结论 PP2a可能参与到胃癌的发生发展过程,而H.pylori感染可能通过降低胃黏膜肿瘤抑制基因PP2a蛋白表达水平引起胃黏膜癌变。     

ras、c—erbB—2癌基因蛋白在胃癌及其癌旁组织中的表达及分布特征

目的 探讨不同组织学类型胃癌及其癌旁黏膜不同上皮细胞中ras、c-erbB-2癌基因蛋白的表达和分布特征,以及在胃癌组织发生学上的意义。方法 应用免疫组化ABC法,对46例胃癌及其癌旁黏膜组织中,鼠抗人单克隆抗体ras基因p21、兔抗人c-erbB-2原癌基因产物多克隆抗体p185蛋白进行检测。结果 不同组织类型胃癌及其癌旁伴随病变上皮细胞显示,p21、p185蛋白有不同的分布特征。高、低分化腺癌中,p21、p185蛋白的表达率在癌组织和癌旁肠化生上皮、异型增生上皮均有较高的表达,两者无显著性差异（P＞0.05）,而癌旁形态学显示正常的黏膜中p21、p185蛋白表达率很低或无表达,与癌组织有显著差异（PM＜0.05）。p21、p185蛋白在印戒细胞癌、黏液腺癌、未分化癌的癌 癌旁形态学显示正常黏膜中均有较高表达或表达率接近,无显著性差异（P＞0.05）。结论 从基因表达水平提示胃高、低分化腺癌与癌旁肠化生上皮、异型增生上皮具有某些相同的改变,印戒细胞癌、黏液腺癌、未分化癌与癌旁黏膜腺上皮、黏液腺异常分化具有相同的改变。认为胃黏膜上皮肠化、异型增生以及胃腺颈部干细胞异常分化等多种细胞的基因改变,是向不同组织类型胃癌发展的基础。     

肝细胞肝癌中PED/PEA-15 mRNA及蛋白表达的临床意义

目的:探讨PED/PEA-15 mRNA及蛋白在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的表达情况及其临床意义.方法:应用半定量逆转录.聚合酶链反应检测40例肝细胞肝癌、相应癌旁组织和12例正常肝组织中PED/PEA.15基因的相对表达量.并通过免疫组化检测PED/PEA-15蛋白的表达.结果:半定量RT-PCR显示,PED/PEA-15基因在肝癌组织中均呈高表达,癌旁组织及正常肝组织呈低表达或不表达,相对表达量分别为1.201±0.301、0.64±0.101和0.565±0.077,PED/PEA-15 mRNA在肝癌组织中表达较癌旁组织、正常肝组织显著升高(P<0.01).免疫组织化学显示,肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中PED/PEA-15蛋白的表达率分别为72.5%、32.5%和16.7%.肝癌组织中PED/PEA-15蛋白表达较癌旁组织及正常肝组织显著升高(P<0.01).且PED/PEA-15 mRNA及蛋白的表达与肝癌病理分级、临床分期有关(P<0.05),而与发病年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数目差异无显著性(P>0.05).结论:PED/PEA-15 mRNA及蛋白在肝癌组织中表达水平明显升高,可能在肝癌的发生及发展过程中发挥重要作用.     

miR-452在肾透明细胞癌中的异常表达研究

目的检测miR-452在肾透明细胞癌组织中的表达差异,探讨miR-452在肾癌发生过程中的作用。方法提取20例肾透明细胞癌及其相应癌旁组织的总RNAs,通过逆转录(RT)方法获得cDNA后,采用实时定量PCR(RT-qPCR)技术检测组织中miR-452的表达差异,并分析其与肾癌患者临床病理特征的关系。结果与相应的癌旁组织相比,miR-452在肾透明细胞癌组织中显著高表达,癌组织较癌旁组织升高约4.69倍,但其异常表达与肾癌患者临床病理特征并无显著相关性。结论 miR-452在肾透明细胞癌组织中明显高表达,其可能作为重要的致癌基因参与了肾癌的发生与发展过程,可能成为潜在的肾癌标志物,为肾癌的早期诊断及治疗提供新靶点。     

TROP2基因mRNA在胃癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨TROP2基因mRNA表达在胃癌发病过程的作用.[方法]Trizol方法常规提取42例放有RNAlater在液氮保存的新鲜胃癌和对应的癌旁组织总RNA.利用DnaseI将残余的DNA去除后,将这些总RNA反转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR的方法检测TROP2 基因在两种组织中的表达情况,分析其与胃癌转移相关的临床病理参数之间的关系.[结果]与癌旁胃黏膜组织相比,TROP2基因在胃癌组织中呈明显高表达.此外,在有转移的癌组织中,TROP2基因表达比非转移的癌组织明显增强.[结论]TROP2基因高表达提示其参与了胃癌的发病过程,并可能与胃癌转移发生相关.     

阻抑素在胃肠癌中的表达情况及其临床意义

目的检测阻抑素(PHB)在胃肠癌中的表达情况,探讨PHB对胃肠肿瘤诊断的价值。方法采用免疫组织化学法检测PHB在胃肠癌癌组织和癌旁组织中的表达情况。结果PHB在胃肠癌组织的表达量明显高于其相应癌旁组织的表达量,差异有极显著性(P<0.01);PHB在低分化胃癌、肠癌组织中的表达量明显高于中分化癌组织,差异有极显著性(P<0.01)。结论PHB在胃肠癌中特异性高表达,检测胃癌、肠癌组织中PHB的表达对胃癌、肠癌及其分化程度具有潜在诊断价值,为胃肠癌的临床诊断和治疗奠定了实验基础。     

流式细胞术定量检测胃癌、癌旁组织中凋亡凋控基因的表达

目的研究胃癌、癌旁组织中线粒体膜蛋白(Apo2.7),Fas和细胞凋亡关键性调控基因Bcl-2蛋白及相互关系,进一步探讨胃癌发病可能的分子机制.方法胃癌患者45例,术中取胃癌组织,癌旁组织各1块,用流式细胞仪定量检测Apo2.7及Fas、Bcl-2基因蛋白的表达.结果胃癌组织的Apo2.7表达(12.89±3.57)%显著低于癌旁组织(19.28±6.16)% (P<0.01) ,而Bcl-2蛋白在胃癌组织中的表达(15.96±5.08)%显著高于癌旁组织(10.46±2.94)%(P<0.001),Fas蛋白在两者中差异无显著性(P>0.05);Apo2.7表达与分化、浸润程度有关(P<0.05),Fas表达与浸润程度、TNM分期有关(P<0.05);Fas与Bcl-2、Fas与Apo2.7表达之间均无显著相关性(P>0.05),而Apo2.7与Bcl-2表达之间存在显著相关性(P<0.05).结论在胃癌的发生发展过程中,细胞凋亡调控异常起着重要作用;Fas、Bcl-2及Apo2.7基因发挥了既独立又协同的作用.     

胃癌中多基因甲基化状态及其表达的研究

目的了解胃癌中p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因启动子CpG岛的甲基化状态,并探讨基因异常甲基化与mRNA表达的关系及其意义。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测12例胃癌患者癌组织及其相应的癌旁正常组织中5种基因的甲基化状态,以12例胃镜活检的正常胃组织作为对照,采用RT-PCR方法相应检测了5种基因的mRNA表达水平。并分析每种基因甲基化程度与表达水平之间的关系。结果胃癌组织中,p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因的甲基化率分别为41.7%、8.3%、58.3%、33.3%和58.3%,相应的癌旁正常组织中,p16、E-cadherin、Runx3、DAPK和CHFR基因的甲基化率分别为8.3%、0.0%、8.3%、8.3%和16.7%,且75%的胃癌组织中至少有一种基因甲基化,显著高于癌旁正常组织25%(P<0.05),而健康对照组织中无基因甲基化,在甲基化的胃癌组织中均无p16、E-cadherin和DAPKmRNA表达,而癌旁正常组织、非甲基化的癌组织中均有其表达。结论胃癌中多基因启动子CpG岛高甲基化是一个频繁的事件,并且基因启动子高甲基化与其mRNA表达缺失有关,这可能参与了胃癌的发生发展。     

Hec1在胃癌组织中的表达及其在胃癌进展中的临床意义

目的:Hec1(癌高表达蛋白),作为着丝粒蛋白的重要组分及纺锤体检测点调节器,在肿瘤的发生和进展中发挥着重要的作用.因此,本文旨在研究Hec1在胃癌组织中的表达及其在胃癌进展中的临床意义.方法:采用Sybr Green荧光染料法的实时定量逆转录PCR方法检测30例胃癌标本及17例癌旁正常组织中Hec1 mRNA表达情况,其中TBP作为内参照.通过2-△CT法计算经过内源性管家基因标准化处理后的目的基因的表达,以此来比较各比较组之间Hec1 mRNA的表达差异.结果:(1)胃癌组织中Hec1 mRNA的表达(0.272±0.036 9)明显高于癌旁正常组织(0.041±0.023 1).(2)Ⅰ/Ⅱ期(0.286±0.184 3)、Ⅲ/Ⅳ期(0.269±0.0717)胃癌组织Hec1 mRNA表达量明显高于癌旁正常组织;但Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ/Ⅳ期胃癌组织相比较,Hec1 mRNA表达量没有明显差异.(3)Hec1 mRNA在无淋巴结转移组中的表达为0.325±0.2077,在有淋巴结转移组中的表达为0.238±0.0697;两者间无明显差异.结论:Hec1 mRNA在胃癌组织中的表达明显高于癌旁正常组织,但与TNM分期及淋巴结转移情况无明显的相关性.     

Smac和Apollon基因在胃癌中的表达及与细胞凋亡的关系

目的研究Smae、Apollon基因在胃癌组织表达及两者在胃癌发生中的作用关系。方法逆转录．聚合酶链式反应（RT-PcR）检测Smac、Apollon的mRNA在38例胃癌组织，15例癌旁组织和10例正常组织的表达情况。结果38例胃癌标本中表达Smac有20例（52．6％），而除3例癌旁组织外，其他癌旁组织和正常胃组织中均见Smae表达，可见8m8c在胃癌组织中低表达和非胃癌组织中高表达，具有统计学意义（P〈0．05）。Apollon在癌组织、癌旁组织和正常胃组织中分别有29例（76．3％）、4例（26．7％）和0例（0％）表达，Apollon在胃癌组织、癌旁组织和正常组织中Apollon的表达差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论Apollon在胃癌组织中高表达，其表达和Smac呈明显的负相关，两者的互相作用可能是导致胃癌发生、发展的重要因素。     

转录因子7类似物2在胃癌中的表达及其与铂类药物耐药性的关系

目的研究转录因子7类似物2(TCF7L2)基因在胃癌中的表达情况及其与胃癌化疗耐药的关系。方法采用qRT-PCR方法检测15例胃癌及其癌旁组织中TCF7L2的mRNA量,western blot实验检测胃癌细胞株SGC-7901、HSC44、44AS3、N87、MKN45、MGC803与永生化正常胃黏膜上皮细胞GES-1中TCF7L2蛋白表达量。通过基因稳定转染技术构建高表达TCF7L2的SGC-7901/TCF7L2细胞株和SGC-7901/CON(对照组)细胞株,用细胞计数法分别检测两者对顺铂和卡铂的耐药情况。结果 TCF7L2在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在胃癌细胞株中的表达水平也明显高于对照细胞GES-1。高表达TCF7L2的SGC-7901/TCF7L2细胞株对顺铂与卡铂的耐受性明显强于对照细胞株。结论 TCF7L2基因表达与胃癌的发生发展有正相关关系;TCF7L2高表达可能是胃癌对铂类药物化疗耐受的原因之一。