蒙药忠伦阿汤对胶原诱导性关节炎大鼠白细胞介素17的影响

目的探讨蒙药忠伦阿汤对胶原诱导性关节炎大鼠白细胞介素17（IL-17）的作用机制。方法以牛Ⅱ型胶原（CⅡ）诱导建立胶原诱导性关节炎（CIA）模型,以雷公藤多甙片为阳性对照药,通过观察大鼠的一般情况、局部关节炎表现,测量关节肿胀程度、关节炎指数、组织病理学来探讨蒙药忠伦阿汤高、中、低剂量组的疗效;采用ELISA法测定大鼠血清中IL-17含量的动态变化,免疫组化法检测IL-17的表达强弱,RT-PCR法测定滑膜软骨中IL-17的基因表达相对量。结果蒙药忠伦阿汤高、中、低剂量组均可使大鼠的一般情况和局部关节炎症状得到改善,使关节肿胀程度和关节炎指数减少,病理滑膜炎症减轻,与模型组比较差异显著（P〈0.05）;同时发现模型组大鼠血清中IL-17的含量和滑膜软骨中IL-17基因的表达明显升高、免疫组化中IL-17呈高表达,而忠伦阿汤高、中、低剂量组和与雷公藤组均起下调作用,与模型组比较差异显著（P〈0.05）,且忠伦阿汤高剂量组与雷公藤组在降低IL-17水平方面作用相近。结论模型组IL-17含量明显增高,表明与CIA大鼠的发病有关。忠伦阿汤通过降低CIA大鼠血清和滑膜软骨中IL-17水平,从而控制CIA大鼠病情发展,发挥干预类风湿关节炎的作用,并且存在量效关系。     

复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎大鼠滑膜细胞白介素-6mRNA表达的影响

目的研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型(CIA)滑膜细胞白介素-6mRNA(IL-6mRNA)表达的影响。方法用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型,以逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)半定量法测定模型大鼠滑膜细胞IL-6mRNA的表达,以及复方丹参对其的影响。结果复方丹参可以明显下调CIA大鼠滑膜细胞IL-6mRNA表达的水平。结论复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL-6mRNA的表达水平有关。     

异种双份脐血干细胞移植对胶原诱导性关节炎小鼠IL-4及TNF-α mRNA表达的影响

目的 观察异种、异基因双份人脐血间充质干细胞(MSCs)移植对Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠白细胞介素(IL)-4及肿瘤坏死因子(TNF)-α mRNA表达的影响.方法 先进行脐血CD34+细胞分选,然后采用弗氏完全佐剂和Ⅱ型胶原诱导C57BL/6(H-2b)小鼠,建立CIA小鼠模型,并随机分为正常对照组、模型组、单份MSCs移植治疗组、双份MSCs移植治疗组、甲氨蝶呤阳性治疗对照组,每组10只小鼠.采用尾静脉注射,除模型组、正常对照组用生理盐水,两个MSCs移植治疗组给予的脐血所含的CD34+细胞数均为2×105.移植后第42天处死动物、取脾组织,采用反转录PCR(RT-PCR)法检测IL-4、TNF-α mRNA的表达,收集数据并做统计分析.结果 双份MSCs移植治疗组IL-4、TNF-α mRNA的表达,与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 双份MSCs移植治疗CIA小鼠能显著抑制TNF-α mRNA的表达,上调IL-4 mRNA表达,具有免疫调节作用,可能有助于类风湿关节炎的治疗.     

复方丹参注射液对关节炎模型大鼠滑膜细胞白细胞介素1β mRNA表达的影响

目的研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型(CIA)滑膜细胞白细胞介素1β(IL-1β)mRNA表达的影响.方法用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型,以反转录-多聚酶链反应(RT-PCR)半定量法测定模型大鼠滑膜细胞IL-1βmRNA的表达.结果氯化钠注射液组、地塞米松组、小剂量丹参组IL-1βmRNA的表达均高于大剂量丹参组,差异有非常显著性意义(P＜0.01).结论复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL-1βmRNA表达的水平有关.     

复方丹参注射液对关节炎模型大鼠滑膜细胞白细胞介素1βmRNA表达的影响

目的：研究复议丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性大鼠关节炎模型（CIA）滑膜细胞白细胞介素1β（IL-1β）mRNA表达的影响。方法：用Ⅱ型胶原蛋白诱导大鼠关节炎模型，以反转录-多聚酶链反应（RT-PCR）半定量法测定模型大鼠滑膜细胞IL-1βmRNA的表达。结果：氯化钠注射液组、地塞米松组、小剂量丹参组IL-1βmRNA的表达均高于大剂量丹参组，差异有非常显著性意义（P&;lt;0.01)。结论：复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL-1βmRNA的表达的水平有关。     

复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎大鼠滑膜细胞白介素—6mRNA表达的影响

目的：研究复方丹参对Ⅱ型胶原蛋白诱导性关节炎模型（CIA）滑膜细胞白介素－6mRNA（IL－6mRNA）表达的影响。方法：用Ⅱ型胶原蛋白诱导大关节类型，以逆转录－多聚酶链反应（RT－PCR）半定量法测定模型滑膜细胞IL－6mRNA的表达，以及复方丹参对其的影响。结果：复方丹参可以明显下降CIA大鼠滑膜细胞IL－6mRNA表达的水平。结论：复方丹参治疗类风湿性关节炎的机制可能与下调滑膜细胞IL－6mRNA的表达水平有关。     

芍药苷对胶原诱导型关节炎模型的治疗作用及机制

目的 探讨芍药苷（paeoniflorin）对胶原诱导型大鼠关节炎（CIA）滑膜增殖和治疗的影响.方法 采用完全弗氏佐剂和Ⅱ型胶原诱导大鼠CIA模型,计数方法测定多发性关节炎指数（AJ）,称重法比较大鼠的体重变化,HE染色法光镜观察关节病理形态学变化,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测巨噬细胞分泌的白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子（TNF）-α,免疫组化检测滑膜细胞凋亡水平.结果 芍药苷对CIA大鼠的关节炎指数和关节病理评分都有改善,芍药苷组的各炎症因子的表达较模型组降低,芍药苷治疗后滑膜细胞凋亡较对照组增加,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 芍药苷可以增加CIA大鼠关节炎滑膜细胞凋亡,降低CIA大鼠的关节炎指数和炎症因子含量.     

针刺治疗鼠胶原性关节炎的免疫学研究及其与Cx43基因的关系

目的探讨针刺治疗Cx43基因敲除鼠胶原性关节炎（CIA）的疗效及免疫学机制。方法以Cx43基因敲除小鼠杂合型和野生型为研究对象，用牛Ⅱ型胶原诱导CIA模型。在初次免疫后第4周开始针刺治疗，连续3周。观察关节炎分数，流式细胞术检测脾淋巴细胞中Th细胞亚群含量。结果Cx43基因敲除杂合型小鼠CIA发病率及关节炎分数明显低于野生型小鼠；针刺抑制野生型CIA小鼠Th1细胞分泌，降低Th1／Th2比值，对Th2细胞的分泌无明显影响；而针刺对Cx43基因敲除杂合型CIA鼠无明显影响。结论针刺治疗野生型CIA小鼠疗效明显优于Cx43基因敲除杂合型CIA小鼠，提示针刺疗效与Cx43基因密切相关，其疗效可能是通过调节Th1／Th2平衡起作用的。     

溃疡性结肠炎患者外周血T-bet/GATA-3基因平衡的检测

目的研究溃疡性结肠炎(UC)患者Th1、Th2类细胞因子和转录因子T-bet和GATA-3的相关性,探讨它们在UC患者发病机制中的作用。方法选择40例UC患者,分离外周血单核细胞,分别用酶联免疫吸附实验和RT-PCR技术检测UC患者血清中的IFN-γ、IL-4和外周血单核细胞转录因子T-bet和GATA-3的表达状态,同时以40例健康人作对照。结果 UC患者血清中IL-4水平较健康人降低,IFN-γ的水平升高;GATA-3mRNA表达水平下降,T-betmRNA表达水平升高。结论 UC患者外周血Th1/Th2比例失衡,可能与外周血中GATA-3基因表达下降、T-bet基因表达升高相关;T-bet/GATA-3的表达失调可能引起UC患者的细胞免疫紊乱。     

环孢菌素A对慢性再生障碍性贫血患者T-bet、GATA-3、相关信号分子、细胞因子及Th1/Th2的影响

本研究探讨转录因子T-bet、GATA-3及相关信号通路在慢性再生障碍性贫血(CAA)免疫发病中的作用,从Th细胞失衡、转录因子及相关信号通路水平研究环孢菌素(CsA)治疗慢性AA的免疫调节机理。采用实时荧光定量PCR(real-time FQ-PCR)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血单个核细胞(PBMNC)T-bet、GATA-3及STAT4、STAT6mRNA表达;采用流式细胞术、酶联免疫吸附法(ELISA)检测慢性AA患者治疗前和CsA治疗6月后外周血Th1、Th2比例及PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12、IL-4水平,并与正常人进行比较。结果表明:慢性AA患者PBMNC T-bet、STAT4mRNA表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、Th1/Th2比值、PBMNC培养上清IFN-γ、IL-12表达均明显高于正常组(p0.01),经CsA治疗6月后,患者T-bet、STAT4表达、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ、IL-12表达均有所下降,但T-bet、STAT4、T-bet/GATA-3比值、Th1比例、IFN-γ表达仍未达到正常水平,GATA-3、STAT6mRNA表达、Th2比例、IL-4表达在治疗前后与正常人比较均无明显差异(p0.05)。结论:IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及Th平衡向Th1型偏移在AA免疫异常的发病过程中起到关键的作用;CsA能通过下调IFN-γ/T-bet、IL-12/STAT4通路的异常活化及纠正Th1过度极化而减轻AA异常亢进的细胞免疫,解除造血抑制。     

IL-18及其受体在特发性血小板减少性紫癜患者Th1类细胞优势应答中的作用

目的 探讨白细胞介素18(IL-18)及其受体(IL-18R)在特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者Th1类细胞因子优势应答中的作用.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测15例活动期和18例缓解期ITP患者外周血单个核细胞(PBMNC)中转录因子T-bet和GATA-3 mRNA的表达;应用ELISA法检测血浆中IL-18的变化;应用流式细胞术检测CD3+细胞和淋巴细胞表面IL-18R的表达.13名健康志愿者为正常对照.结果 ITP活动期患者PBMNC中T-bet mRNA表达水平(0.069±0.013)明显高于对照组(0.019±0.010)(P＜0.05),而GATA-3 mRNA的表达水平(0.002±0.001)明显低于对照组(0.005±0.002)(P＜0.05);血浆IL-18和CD3+细胞表面IL-18R表达水平较ITP缓解期患者和对照组显著增高.ITP缓解期患者T-bet与GATA-3 mRNA表达水平与对照组比较差异均无统计学意义(P值均＞0.05),T-bet/GATA-3比例基本恢复正常,血浆中IL-18和CD3+细胞表面IL-18R的表达水平也基本恢复正常.结论 ITP活动期患者表现为Th1优势应答,T-bet/GATA-3比例明显失衡,T-bet/GATA-3比例可作为ITP患者Th1类细胞极化的敏感指标;ITP活动期患者IL-18和IL-18R表达上调,可能为ITP患者的治疗提供一个新的治疗靶点.     

尖锐湿疣疣体内TLR9表达水平与免疫应答和细胞凋亡的相关性研究

目的研究尖锐湿疣(CA)疣体内Toll样受体9(TLR9)表达水平与免疫应答和细胞凋亡的相关性。方法选择2014年8月至2018年7月期间在葫芦岛市中心医院诊断为初发CA和复发CA的患者、分别作为初发组和复发组,另取同期接受包皮环切术的患者作为对照组。收集CA病灶和正常包皮组织,测定TLR9、Th1/Th2/Th17/Treg转录因子、凋亡基因的mRNA表达水平及Th1/Th2/Th17/Treg细胞因子的含量。结果初发组、复发组CA病灶内TLR9、T-bet、RORγt、增殖细胞核抗原(PCNA)、Survivin的mRNA表达水平及干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-17的含量明显高于对照组,GATA-3、FOXP3、Fas、FasL、Caspase-3的mRNA表达水平及IL-4、IL-10的含量明显低于对照组;且复发组CA病灶内TLR9、T-bet、RORγt、Fas、FasL、Caspase-3的mRNA表达水平及IFN-γ、IL-17的含量明显低于初发组,GATA-3、FOXP3、PCNA、Survivin的mRNA表达水平及IL-4、IL-10的含量明显高于初发组。CA病灶内TLR9的mRNA表达水平与IFN-γ、IL-17的含量及T-bet、RORγt、Fas、FasL、Caspase-3的mRNA表达水平呈正相关,与IL-4、IL-10的含量及GATA-3、FOXP3、PCNA、Survivin的mRNA表达水平呈负相关。结论 TLR9表达水平的改变与尖锐湿疣的发生、复发及免疫应答紊乱、细胞凋亡异常有关。     

白细胞介素17和干扰素-γ与胶原诱导性关节炎的研究进展

Thl7细胞是一类独立于Thl、Th2的CD4 T细胞亚群,Th17主要表达IL-23R、IL-17A、IL-17F、IL-6、肿瘤坏死因子、ccL6和a3整合素等,其中IL-17是最重要的效应因子,能介导前炎症反应,参与自身免疫性疾病的发生发展;Thl细胞主要产生IL-2、肿瘤坏死因子和IFN-γ,可引起迟发型超敏反应,活化巨噬细胞及有效的清除细胞内的病原体。文章就IL-17和IFN-γ在胶原诱导性关节炎中发挥的重要作用及作用机制和两种新型自身免疫疾病的治疗方案作一综述。     

加味犀角地黄汤对大鼠CIA急性关节肿胀与滑膜组织中VEGF表达的影响

目的 通过测定大鼠关节滑膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型形成及应用加味犀角地黄汤(XDD)治疗过程中的表达水平,探讨加味XDD对类风湿关节炎(RA)的治疗作用.方法 用SD大鼠制作Ⅱ型胶原蛋白诱导的CIA大鼠模型,实时荧光定量PCR法检测正常组、模型组和实验组大鼠在第42 d关节...     

原发性免疫性血小板减少症患者外周血microRNAs的表达及与Th1/Th2失衡的关系

目的:探讨原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血micoRNAs的表达量与Th1/Th2失衡的关系。方法:纳入30例ITP患者(ITP组)及15例健康人(对照组),采用实时定量PCR(RT-PCR)法检测2组外周血中6种miRNA(miR-107、miR-205-5p、miR-138-5p、miR-326、miR-1827、miR-185-5p)和Th1特异性转录因子T-bet、Th2特异性转录因子GATA-3的表达水平,采用流式细胞术检测Th1、Th2细胞,Aim Plex流式细胞术高通量技术检测Th1细胞因子TNF-α、IFN-γ以及Th2细胞因子IL-4、IL-10含量。比较2组间miRNAs、mRNA、Th1、Th2细胞及其分泌的主要细胞因子的差异,分析ITP患者miRNAs与Th1、Th2细胞及其分泌的主要细胞因子的相关性。结果:与对照组相比,ITP组miRNA(miR-107、miR-205-5p、miR-138-5p、miR-326、miR-1827、miR-185-5p)和Th2细胞特异性转录因子GATA-3的表达水平均显著降低(P0.05); Th1细胞、Th1细胞特异性转录因子T-bet及Th1细胞因子TNF-α表达水平均显著升高(P0.05),T-bet/GATA-3和Th1/Th2比值均显著升高(P0.05)。ITP患者miR-107、miR-205-5p、miR-138-5p相对表达量与Th2细胞均呈负相关(P0.05,r=-0.411; r=-0.593; r=-0.403); miR-1827相对表达量与TNF-α呈负相关(r=-0.390)。结论:ITP患者外周血6种miRNAs表达水平显著降低,导致T-bet mRNA/GATA-3mRNA比值升高,Th1/Th2失衡。     

神经生长因子在哮喘小鼠Th1/Th2失衡中的作用研究

目的 探讨神经生长因子(NGF)在哮喘小鼠Th1/Th2失衡中的作用.方法 30只小鼠随机分为3组:正常对照组、哮喘组、NGF阻断组.卵白蛋白雾化吸入建立小鼠哮喘模型.ELISA法测定血清IL-4及IFN-γ的水平,RT-PCR法检测肺组织GATA-3 mRNA的表达.结果 各组血清IL-4水平(pg/ml)分别为114.23±15.00、151.17±19.04、134.67±13.44,哮喘组IL-4含量显著高于正常对照组,NGF阻断组IL-4含量低于哮喘组,P＜0.05.各组血清IFN-γ水平(pg/ml)分别为29.34±6.84、17.16±4.43、23.34±5.79,哮喘组IFN-γ含量低于正常对照组,NGF阻断组IFN-γ含量高于哮喘组,P<0.05.哮喘组较正常对照组肺组织GATA-3 mRNA表达明显增强,NGF阻断组肺组织GATA-3 mRNA表达较哮喘组减弱,P<0.05,结论 NGF可能通过对GATA-3表达的增强参与Th1/Th2类细胞因子免疫失衡.     

金雀异黄素对CIA大鼠炎症及细胞因子影响的研究

目的 研究金雀异黄素（Gen）对类风湿关节炎（RA）动物模型CIA大鼠炎症及细胞因子的作用.方法 采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;通过Gen和/或MTX治疗后检测CIA大鼠关节炎指数（AI）评分和后肢容积,摄取大鼠关节X线片;观察大鼠关节病理学改变; Western Blot法检测血清中白细胞介素-1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达.结果 CIA大鼠造模成功; Gen治疗组、MTX治疗组及Gen＋MTX治疗组大鼠炎症反应较模型对照组减轻,血清中IL-1β、TNF-α表达明显降低（P〈0.05）, Gen＋MTX治疗组的效果更佳.结论 Gen能够降低CIA大鼠炎症反应,减缓关节炎病情进展,可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而发挥抗炎作用.     

金雀异黄素对CIA大鼠炎症及细胞因子影响的研究

目的研究金雀异黄素(Gen)对类风湿关节炎(RA)动物模型CIA大鼠炎症及细胞因子的作用。方法采用Ⅱ型胶原建立CIA大鼠模型;通过Gen和/或MTX治疗后检测CIA大鼠关节炎指数(AI)评分和后肢容积,摄取大鼠关节X线片;观察大鼠关节病理学改变;Western Blot法检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果 CIA大鼠造模成功;Gen治疗组、MTX治疗组及Gen+MTX治疗组大鼠炎症反应较模型对照组减轻,血清中IL-1β、TNF-α表达明显降低(P0.05),Gen+MTX治疗组的效果更佳。结论 Gen能够降低CIA大鼠炎症反应,减缓关节炎病情进展,可能是通过抑制IL-1β、TNF-α的表达而发挥抗炎作用。     

肿瘤坏死因子-α与骨桥蛋白在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及其信号转导途径

目的分析肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和骨桥蛋白(OPN)在类风湿关节炎滑膜成纤维细胞中表达的相互影响及可能的信号转导途径。方法采用牛源性Ⅱ型胶原配合不完全弗氏佐剂制造胶原诱导性关节炎(CIA)模型,取正常对照组和模型组膝关节滑膜,胶原酶消化法分别培养滑膜成纤维细胞(SFs),分成正常对照组、模型组、模型组+脂多糖(LPS)、模型组+LPS+p38途径抑制剂(SB203580),观察SFs中OPN mRNA的变化,分析TNF-α与OPN表达的相互影响及可能的信号转导途径。结果模型组细胞加入LPS刺激后OPN mRNA表达较模型组明显增多(P<0.01),予SB203580后,OPNmRNA的表达显著减少,4组间比较差异显著(P<0.01)。结论 TNF-α可诱导OPN的表达,这一过程可能是通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号转导途径而实现的。     

云克对胶原诱导性关节炎大鼠的治疗作用及对血清IL-1β的影响

目的 观察云克（99Tc—MDP）对Ⅱ型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠的治疗作用及对血清IL-18的影响。 方法 建立CIA大鼠关节炎模型,分为正常对照组,模型对照组,云克组,甲氨蝶呤组,后三组分别予以生理盐水,云克和甲氨蝶呤干预。采用关节炎指数评分法评价其关节的炎症程度;观察关节病理组织形态学变化并评分;放射酶联免疫法测定血清IL-1β水平。 结果 ①关节炎指数评分：模型组、甲氨蝶呤组、云克组大鼠随着免疫时间延长,关节炎指数评分增加。36d后模型组持续高于云克组和甲氨蝶呤组（P〈0．05）;44d后甲氨蝶呤组高于云克组（P〈0．05）。②组织病理学评分：模型组关节组织学评分均高于甲氨蝶呤组和云克组（P〈0．05）;炎性细胞渗出评分,云克组与甲氨蝶呤组无显著差异（P〉0．05）;软骨破坏和骨质破坏评分,云克组低于甲氨蝶呤组（P〈0.05）。③模型组鼠血清IL-18水平均明显高于正常组（P〈0．01）;模型组血清IL-1β水平明显高于甲氨蝶呤组、云克组（P〈0．05）;甲氨蝶呤组血清IL-18水平高于云克组（P〈0．05）。 结论 ①云克明显减轻CIA大鼠的关节炎症状,延缓关节破坏的进展。②云克降低血清炎症细胞因子IL-1β的水平,从而阻止关节的破坏,可能是其治疗类风湿关节炎的机制之一。③在延缓CIA大鼠软骨和骨质破坏的病理学改变及降低IL-1β含量方面,云克的近期疗效均优于甲氨蝶呤。