乳胶增强比浊法胱抑素C测定试剂的临床应用评价

目的评价浙江伊利康生物技术有限公司生产的乳胶增强比浊法胱抑素C(CysC)测定试剂盒。方法通过试剂的精密度、线性范围、回收率、干扰试验等进行系统评估。结果低、高值样本日内精密度(CV)分别为1.98%和1.01%,日间CV分别为3.79%和2.03%。与散射比浊法相比,相关方程为Y=1.115 2 X-0.7593,r2=0.991,测定结果明显相关,差异有统计学意义(P<0.05)。当三酰甘油浓度小于或等于10mmol/L,血红蛋白浓度小于或等于5g/L,维生素C浓度小于或等于2 540μmol/L,胆红素浓度小于或等于342μmol/L时对本法无明显干扰。结论该试剂完全符合临床应用要求,能适用于全自动生化分析仪。     

循环酶法测定同型半胱氨酸的性能验证

目的评价循环酶法检测同型半胱氨酸(Hcy)的分析性能。方法参考美国临床和实验室标准化协会(CLSI)系列文件和有关文献,对Hcy试剂盒测定血清Hcy的精密度、正确度、分析测量范围、临床可报告范围等方面进行验证和评价,并将实验结果与厂家(宁波美康生物科技股份有限公司)(NingBo Medical System Biotechnology Co.,Ltd)提供的分析性能或公认的质量指标进行比较。结果循环酶法检测血清Hcy批内CV分别为1.26%、0.84%,总CV分别为1.36%、1.32%,低于厂家声明的允许总不精密度(10%);两个浓度校准品检测结果与靶值的相对偏倚分别为3.69%、0.69%,均符合相关的质量要求(小于10%);分析测量范围为3.38~51.81μmol/L,厂家线性范围为小于50μmol/L;最大稀释度为1∶3,临床可报告范围为3.38~155.43μmol/L。结论宁波美康生物科技有限公司生产的Hcy试剂盒的主要分析性能达到了厂商声明的性能和有关的质量要求,适合临床应用。     

循环酶法同型半胱氨酸试剂的分析性能验证

目的对应用于全自动生化分析仪的同型半胱氨酸(Hcy)试剂进行分析性能验证,并应用于临床。方法在日本Olympus AU-640全自动生化分析仪上对四川新成公司生产的循环酶法测定Hcy试剂进行性能验证,参考CLSI EP6-A、EP15-A、EP-7方案对检测方法的精密度、线性范围、干扰因素(胆红素、血红蛋白、乳糜)进行评估,与传统的高效液湘色谱法(HPLC)进行了比对,并对分析前质量控制影响因素进行实验分析。结果精密度实验为批内:CV2.37%(低值)、3.58%(高值),总CV:4.52%(低值)、4.85%(高值);该法与HPLC法相关性良好(r2=0.996,P0.05);线性范围为2.0~50.0μmol/L,线性相关良好;试验浓度内的3种干扰物(胆红素小于或等于20mg/dL,三酰甘油小于或等于1 000mg/dL,Hb≤150mg/dL)对试剂无显著干扰;采血体位对结果有影响;全血标本1h内分离血清,血清4℃12h内及-20℃15d内结果无明显变化;EDTA与肝素防凝血结果无差异。Hcy水平与心脑血管病发生呈正相关,其阳性检出率高于传统的血脂指标。结论应用于全自动生化分析仪的循环酶法Hcy试剂具有较高的精密度和灵敏度,与HPLC测定相关良好,可满足临床测试要求,适合血清(浆)Hcy的常规和自动化分析。     

改良酶法肌酐测定试剂的研制

目的探讨建立一种改良酶法肌酐(Cr)测定试剂,并考察其与进口Cr测定试剂(日本东洋纺公司酶法Cr试剂)对血清测定的可比性及偏倚。方法采用酶法测定Cr反应前后吸光度的变化,探讨试剂各成分和浓度对检测性能的影响,并在同一台全自动生化分析仪上同时测定两种试剂的空白吸光度(A值)、分析灵敏度,对自主研发试剂的精密度、线性范围及方法学指标进行评价。结果自主研发试剂的空白A值为0.009,分析灵敏度的A值变化率为0.13,优于进口试剂。自主研发试剂高、低值血清测定变异系数分别为1.5%和1.1%;线性范围为0~2 850μmol/L;方法学比对回归方程为Y=0.98 X+1.15,r=0.999;估计偏倚低于允许误差。以相对偏差不小于10%作为有明显干扰的评判指标,结果显示35mmol/L肌酸、3.42mmol/L胆红素、0.03g/L维生素C、5g/L血红蛋白、1 450浊度乳糜对高、低值浓度标本检测结果均无干扰。结论自主研发的Cr测定试剂性能良好,与进口试剂之间具有良好的相关性,符合临床应用基本要求。     

同型半胱氨酸循环酶法自动分析仪测定及临床应用

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)循环酶法在自动分析仪测定的方法评价及在脑血管疾病中的临床意义。方法应用循环酶法测定112例高血压组、102例脑梗死组、80例健康人群血浆Hcy水平,并对结果进行分析。结果该法Hcy在3.0~50.0μmol/L范围内线性良好;批内CV≤3.3%,批间CV=4.6%;回收率94.4%~109.1%,平均101.2%。102例脑梗死组血Hcy水平为(14.8±5.6)μmol/L,明显高于高血压组的(11.7±5.3)μmol/L,其差异有统计学意义(P<0.01);高血压组又高于健康对照组的(7.9±1.6)μmol/L,两者之间差异有统计学意义(P<0.01)。结论该方法简便、重复性好,适合全自动生化分析仪常规检测,Hcy水平的检测对脑血管疾病危险性的监测是1个敏感指标,对脑梗死的预后诊断具有实际应用价值。     

颗粒增强免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸的方法学评价

目的：对胶乳颗粒免疫比浊法测定血清同型半胱氨酸（HCY）的方法学进行初步评价。方法：应用胶乳颗粒免疫比浊法测定HCY的精密度、标准曲线、干扰实验、稳定性实验、并与循环酶法测定血清HCY的结果进行相关性分析。结果：颗粒增强免疫比浊法测定HCY的精密度（批内CV为1.87%、0.75%,批间CV为2.29%、5.35%）较高;HCY浓度在0μmol/L～50μmol/L范围内线性良好;当抗坏血酸浓度1107mg/L、胆红素浓度445 umol/L、血红蛋白浓度6.7 g/L;甘油三酯浓度14.6 mmol/L、氨离子浓度75 umol/L时均未对测定结果产生干扰;试剂开瓶后稳定周期也可达到25天;颗粒增强免疫比浊法和循环酶法测定HCY相关性良好（y =0.9904x ＋0.0813,r=0.9981）。结论：颗粒增强免疫比浊法测定血清HCY具有较高的精密度,结果准确可靠,适合临床实验室推广。     

克拉玛依地区健康人群血清同型半胱氨酸参考范围的建立

目的建立健康人群血清同型半胱氨酸(Hcy)的参考范围。方法采用循环酶法技术对1 067例健康体检人员的血清Hcy进行检测,将检测结果以性别、年龄、民族分组进行比较以确定参考范围。结果检测结果呈偏态分布,以百分位数法(P≤95%)统计计算Hcy的参考范围,≥50岁男性参考范围为小于或等于27.42μmol/L,50岁男性为小于或等于25.07μmol/L,女性为小于或等于19.09μmol/L。结论参考范围与性别、年龄有关,与民族无关,应按性别和年龄分组建立Hcy的参考范围。     

循环酶法测定同型半胱氨酸的临床研究

目的对循环酶法测定同型半胱氨酸方法进行临床评价。方法依据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)评价方案对循环酶法同型半胱氨酸测定方法进行了精密度、线性和抗干扰试验评价。结果批内精密度CV小于3.45%,总精密度小于3.78%。线性范围:在0~50.0 mol/L范围内呈线性。胆红素在700μmol/L、TG在8.0 mmol/L、抗坏血酸在30 mg/dL以内,对试验无明显的干扰,干扰相对偏差小于4%。血红蛋白在150 g/L内,干扰偏差小于5.2%。结论循环酶法同型半胱氨酸检测试剂盒在测定精密度、线性范围、抗干扰等方面的性能可以满足临床检测的需要。     

血清肌酐二步酶法检测新技术研究

目的探讨二步酶法测定肌酐的实验方法。方法以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐。通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰。采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围。结果患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6)μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6)μmol/L,t=32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t=0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法=1.042XHPLC法-0.182 1,r2=0.982 4)。二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0μmol/L)、中(206.0μmol/L)、高(900.0μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%。二步酶法试剂至少能稳定180 d。健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132μmol/L,女性为41～109μmol/L。结论以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定。     

血清钙偶氮胂Ⅲ测定法的一点改进

在刘倩予等建立的碱性条件下偶氮胂Ⅲ测定血清钙的方法基础上,减低了偶氮胂Ⅲ浓度,使试剂空白吸光度降低,更适合分光光度计比色。方法评价试验结果线性范围0～5mmol/L,批内CV1.66%,批间CV2.08%,回收率范围96%～104%。血红蛋白17　g/L、胆红素103　μmol/L对该法测定血清钙无明显干扰。该方法试剂稳定,操作简便快速、精密度、准确度好,值得推广应用。     

OLYMPUS全自动生化分析仪性能鉴定

目的探讨全自动生化分析仪的性能鉴定方法和技术要素。方法对OLYMPUS AU2700生化仪进行温度准确度与波动、杂散光、吸光度线性范围、吸光度稳定性、吸光度重复性、吸光度准确度、加样误差、加试剂误差、样品携带污染率、项目准确性、项目的批内精密度和批间精密度等指标进行检查,并与行业标准和厂家说明书标准进行比对。结果孵育温度为(36.84±0.07)℃,波动度0.11℃,5只比色杯杂散光均大于4.10。吸光度线性范围不小于2.5时,各测定值相对偏倚在±5%以内。340、380、480、600 nm 4个波长的吸光度变化均远小于0.01。吸光度重复性CV值为0.450%。2 mL样品分配的精确度整体CV≤1.5%;5 mL样品分配精确度整体CV≤0.8%。内、外圈试剂分配精确度CV分别为0.40%和0.32%。5组测定的平均携带污染率为0.241 1%。ALP、Mg、P、AMY、Ca、AST、TP、ALB 8个项目定值质控的测定结果均在质控靶值±2sd范围之内。批内精密度与批间精密度介于0.953%～4.713%之间。ISE单元电极选择性[Na]=150 mmol/L,[K]=4 mmol/L。结论 OLYMPUSAU2700生化仪的性能符合最新的行业推荐标准,生化仪的性能鉴定应进一步完善与规范。     

新型化学氧化法测定胆红素试剂的研制

目的 探讨建立一种新型化学氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素的新方法.方法 采用化学氧化法测定血清胆红素反应前后吸光度的变化,与标准品相比较,求得标本中总胆红素和直接胆红素的浓度.结果 TBIL精密度试验批内高低浓度CV值为0.65%-1.56%;DBIL为0.82%～1.93%.批问TBIL为3.5%、1.71%及1.24%;DBIL批间为4.38%、2.77%及1.60%.线性范围:TBIL可达686μmol/L:DBIL可达400μmol/L;总胆回收率101.8%～107.6%,平均104.5%.DBIL回收率为99.1%～100.5%,平均为100.2%.与其他相关试剂比较TBIL γ=0.9973～0.9992;DBIL γ=0.9962～0.9994.溶血、脂浊和维生素C干扰试验表明:标本中Hb小于2.7g/L,TG小于5.94mmol/L.VitC小于0.1g/L,对TBIL和DBIL的测定基本无干扰.结论 本试剂方法简便,结果准确、线性范围宽,试剂稳定,价格低廉.完全可用于检测临床标本.     

免疫增强比浊法测定β_2-微球蛋白的研究

目的建立免疫增强比浊法测定血清β2-微球蛋白的全自动分析法。方法采用日立7080全自动分析仪,根据美国临床实验室标准化委员会相关文件,对方法进行精密度、线性、准确性等评价及临床初步应用。结果该方法批内CV4.0%,批间CV5.0%。抗干扰性强,Hb小于或等于4.0g/L、胆红素小于或等于400μmol/L、类风湿因子小于或等于2000IU/L、三酰甘油小于或等于12mmol/L对测定无影响;与进口试剂对比,Y=1.021X+0.0043,r=0.9990,二者相关性良好。试剂开瓶稳定性良好。结论免疫增强比浊法测定血清β2-微球蛋白具有方法简便、快速、灵敏的优点,且结果准确,可用自动分析仪测试,适合临床检验应用。     

循环酶法检测血清同型半胱氨酸方法学评价及其在肿瘤诊断中的应用

目的评估循环酶法试剂盒检测血清同型半胱氨酸(Hcy)的分析性能,探讨Hcy在肿瘤诊断中的临床应用价值。方法应用美国临床实验室标准化协会的标准化评价方案评价循环酶法测定血清Hcy的精密度、比对试验、回收试验、线性范围等。同时检测806例肿瘤患者,67例健康体检者(健康对照组)血清Hcy水平。数据分析采用方差分析、两独立样本t检验、相关性分析等。结果精密度:循环酶法测定血清Hcy低、高水平的批内变异系数(CV)分别为2.69%、3.35%,日间CV分别为1.87%、2.80%,精密度良好;Hcy水平2.00~40.00μmol/L,检测线性良好(r~2=0.997 3);比对试验:与西门子ADVIA Centaur XP检测系统比较,Hcy检测结果相关性良好(r~2=0.970 8,n=40),两种检测方法检测结果均值比较差异无统计学意义(P0.05);平均回收率为95.2%~103.1%;肿瘤患者血清Hcy水平较健康对照组明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论循环酶法测定血清Hcy方便、快速、准确可靠,其精密度和线性范围可满足临床需求,适合在临床实验室使用;肿瘤患者血清Hcy较健康对照组显著升高,与多种肿瘤相关,可作为肿瘤标志物用于肿瘤的早期筛查。     

干化学法检测钠离子的实验研究

目的研究基于干化学试剂和微型光谱仪技术快速检测钠离子的方法。方法将所配制的电解质钠离子液体试剂采用干化学法制备,运用速率法的反应原理,测定405 nm处吸光度的变化,并对试剂的性能进行评价。结果电解质钠离子液体试剂冻干后90 d内反应稳定性良好,其批内CV<4%,批间CV<5%,回收率为95%~105%;当血清内胆红素(TB)含量小于或等于290.40μmol/L、血红蛋白含量小于或等于10 g/L,三酰甘油含量小于或等于11.20 mmol/L时,测定结果未见明显干扰;测定结果与全自动生化分析仪具有良好的相关性(r2=0.954 3)。结论以微型光谱仪干试剂法测定电解质钠离子结果准确可靠,检测过程简便,仪器试剂携带方便,符合战地救治、基层医疗的需要。     

血清钙偶氮胂测定法的一点改进

在刘倩予等建立的碱性条件下偶氮胂 测定血清钙的方法基础上 ,减低了偶氮胂 浓度 ,使试剂空白吸光度降低 ,更适合分光光度计比色。方法评价试验结果 :线性范围 0～ 5mmol/L,批内 CV1 .66% ,批间 CV2 .0 8% ,回收率范围 96%～ 1 0 4 %。血红蛋白 1 7g/L、胆红素 1 0 3μmol/L对该法测定血清钙无明显干扰。该方法试剂稳定 ,操作简便快速、精密度、准确度好 ,值得推广应用。     

酶法尿素检测试剂的改进及性能评价

目的建立一种改良酶法尿素测定试剂,并评估其性能。方法采用酶法测定尿素反应前后吸光度(A)值的变化率并对试剂进行改良,评估其性能。同时与现有酶法试剂及进口和光试剂进行比较。结果现有试剂空白A值为1.8,空白A值变化率为-0.001 8;改良试剂空白A值为1.8,空白A值变化率为-0.001 9;和光试剂空白A值为1.6,空白A值变化率为-0.000 4。现有试剂检测限为0.035 mmol/L、改良试剂为0.014 mmol/L、和光试剂为0.075 mmol/L。分析敏感性现有试剂为-0.04,改良试剂为-0.13,和光试剂为-0.05。改良试剂对高、低值血清的批内精密度分别为0.45%和0.85%,批间精密度分别为0.38%和0.71%,线性浓度范围为0~38 mmol/L;改良试剂与和光试剂方法学比对的回归方程为Y=0.93X+0.41(r=0.999),估计偏倚低于允许误差;342μmol/L结合胆红素、342μmol/L非结合胆红素、0.03 g/L维生素C、5 g/L血红蛋白、1 450 FTU乳糜对改良试剂高、低值样本检测结果均无干扰。结论改良酶法尿素试剂具有更加优越的检测限和分析敏感性,并且自身性能良好,符合相关临床应用要求。     

循环酶法测定血浆同型半胱氨酸

目的建立简便的循环酶法,直接检测血浆同型半胱氨酸(Hcy)。方法在H itach i 7170S全自动生化分析仪上,以循环酶法测定血浆Hcy,采用两点速率法,主波长340 nm,副波长405 nm,温度37℃,两点线性校准。结果本法线性范围1.5~50μmol/L;日内不精密度为2.2%~3.0%,日间不精密度为4.0%~5.9%;回收率为94.6%~102.5%。循环酶法(Y)和商品试剂盒(X)比较:Y=1.018X-0.895,决定系数(r2)=0.945。结论循环酶法简便、灵敏,试剂稳定,适用于血浆Hcy的常规和自动化分析。     

F-DAOS色原的酶法测定血清肌酐试剂盒的评价

目的根据美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)相关文件,评价N乙基N(2羟3磺丙)3,5二甲氧4氟苯胺(F DAOS)酶法肌酐(Cr)试剂盒。方法采用F DAOS酶法试剂盒测定血清Cr,并对精密度、线性范围、干扰因素及相关性进行分析。结果精密度批内变异系数(CV)为1.24%～2.15%,批间CV为2.33%～3.95%,总CV为2.52%～4.27%,线性达2870μmol/L,r=0.996。与Roche同类试剂对照,r=0.9894。上海市临床检验中心质控血清测定偏差值≤2.06%。胆红素<684μmol/L、血红蛋白<5.0g/L、维生素C<500mg/L时对本法无干扰。参考值:男性为55.8～136.2μmol/L,女性为36.8～111.2μmol/L。结论采用F DAOS色原的酶法测定血清Cr的方法特异性好,精密度高,结果准确,有一定推广价值。     

新型化学氧化法测定胆红素试剂的研制

目的探讨建立一种新型化学氧化法测定血清总胆红素和直接胆红素的新方法。方法采用化学氧化法测定血清胆红素反应前后吸光度的变化,与标准品相比较,求得标本中总胆红素和直接胆红素的浓度。结果TBIL精密度试验批内高低浓度CV值为0.65%～1.56%;DBIL为0.82%～1.93%。批间TBIL为3.5%、1.71%及1.24%;DBIL批间为4.38%、2.77%及1.60%。线性范围:TBIL可达686μmol/L;DBIL可达400μmol/L;总胆回收率101.8%～107.6%,平均104.5%.DBIL回收率为99.1%～100.5%,平均为100.2%。与其他相关试剂比较TBILγ=0.9973～0.9992;DBILγ=0.9962～0.9994。溶血、脂浊和维生素C干扰试验表明:标本中Hb小于2.7g/L,TG小于5.94mmol/L。VitC小于0.1g/L,对TBIL和DBIL的测定基本无干扰。结论本试剂方法简便,结果准确、线性范围宽,试剂稳定,价格低廉。完全可用于检测临床标本。