乳腺癌细胞中Her-2介导p27~(Kip1)高表达的分子机制

0 引言 原癌基因Her-2也称C-erbB-2或Her-2/neu,是人类表皮生长因子受体(EGFR)家族的第二个成员,位于染色体17q21,编码1255个氨基酸的具有跨膜酪氨酸激酶活性的生长因子,包括能与配体结合的细胞外功能区和细胞内部的具有酪氨酸激酶活性部分以及跨膜区,受体分子量约为185KD,因此又被称为p185[1].     

乳腺癌中细胞周期依赖性蛋白激酶抑制蛋白p27Kip1表达水平

目的探讨p27Kip1蛋白在乳腺癌中的表达水平与乳腺癌生物学行为的关系和对预后的影响.方法用免疫组化法检测了132例乳腺癌和16例正常乳腺组织中p27Kipl蛋白的表达水平,对其中有完整随访资料的90例乳腺癌进行了临床病理学特征和生存时间关系的分析.结果p27Kip1蛋白在正常乳腺组织中高表达率为100%(16/16);在乳腺癌中高表达率为40.15%(53/132),低表达率为59.85%(79/132),差异有显著性(P＜0.005).不同类型的乳腺癌中p27Kip1蛋白的表达水平差异无显著性(P＞0.1).乳腺癌组织p27Kipl蛋白表达水平与病理组织学分级、肿瘤内坏死、核分裂数、腋淋巴结转移情况、局部复发和远处转移显著相关(P＜0.005),与肿块大小、年龄、ER水平、月经状况无显著关系.生存关系分析显示p27Kip1蛋白低表达的乳腺癌患者生存率明显低于p27Kipl蛋白高表达者(P＜0.001).Cox模型则显示p27Kip1蛋白是乳腺癌的一个独立的预后标志物.结论①p27Kip1蛋白的表达水平与乳腺癌的组织学类型无关;②p27Kip1蛋白是检测乳腺癌预后有价值的独立指标,有助于临床选择高危复发病例;③p27Kip 1蛋白表达水平可做为术后进一步治疗的参考指标.     

乳腺癌组织p27Kip1的表达及其与细胞增殖的关系

目的:研究乳腺癌组织中细胞周期抑制剂p27Kip1的表达及其意义,并探讨其与细胞增殖的关系.方法:应用免疫组化SP法检测80例乳腺癌和20例癌旁正常组织中p27Kip1和增殖细胞核抗原(pro-liferative cell nuclear antigen,PCNA)的表达.结果:乳腺癌组织中p27Kip1高表达率为53.75%(43/80),明显低于癌旁正常组织(P<0.01).p27Kip1表达与组织学分级、TNM分期及淋巴结转移均相关,P<0.05.乳腺癌组织中p27Kip1的表达与PCNA LI呈负相关,r=-0.372,P<0.05.p27Kip1高表达的乳腺癌术后5年无病生存率(DFS)明显高于p27Kip1低表达者(P<0.05).结论:p27Kip1表达缺失可促进肿瘤细胞增殖,是判断乳腺癌发生、发展及预后的有效生物学指标.     

p27Kip1在胃癌中的表达及意义

目的研究p27蛋白在胃癌中的表达及其与临床病理学特征的关系.方法应用SP免疫组化法,对20例胃良性病变标本及62例胃癌组织p27的表达及其与临床病理学特征的关系进行分析.结果p27在胃良性病变中的阳性率为100%(20/20),而在胃癌中的阳性率为41.9%(26/62),p27在两组织中的表达差异有显著性(P＜0.05);p27的阳性表达在未累及浆膜及淋巴结未转移者显著高于累及或穿透浆膜及有淋巴结转移者(P＜0.05).结论p27参与胃癌的进展,可能是一个预测胃癌预后的重要因素.     

Trastuzumab联合丁酸钠对人乳腺癌细胞株SKBR3细胞增殖和p27Kip1表达的影响

目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACIs)丁酸钠(NaB)及曲妥珠单抗Trastuzumab对人乳腺癌细胞株SKBR3细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨NaB及Trastuzumab调控乳腺癌细胞增殖的分子机制.方法:乳腺癌SKBR3细胞经NaB、Trastuzumab单独或联合作用后,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡,Western Blot方法检测p27Kip1的表达.结果:NaB单独用药显著抑制SKBR3细胞增殖,促进细胞G0/G1期阻滞,增加细胞凋亡和p27Kip1蛋白的表达,P<0.05;20 μg/mL Trastuzumab单独用药,对细胞有增殖抑制和细胞周期阻滞作用(P<0.05),但对细胞凋亡及p27Kip1蛋白表达无明显影响,P>0.05.Trastuzumab可协助NaB 增加对SKBR3的抗肿瘤作用及p27Kip1蛋白表达,P<0.05.结论:Trastuzumab联合NaB抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞周期阻滞及细胞凋亡的发生,以上过程可能是通过增加p27Kip1的蛋白表达来实现.     

p27Kip1表达提示胃癌病人预后

意大利罗马天主教大学Ａｌｅｓｓａｎｄｒｏ等报告 ,免疫组化检测ｐ２７Ｋｉｐ１有助于确定无淋巴结转移但死亡危险大的胃癌患者。另外 ,它还有助于判断哪些病人可以从手术后的辅助化疗中得到益处。Ａｌｅｓｓａｎｄｒｏ及其同事在９６例无淋巴结转移的胃癌病人用免疫组化方法检测ｐ２７Ｋｉｐ１和ｐ５３的表达。结果显示 ,６７例（６９ ８ %）病人ｐ２７Ｋｉｐ１表达减少 ,９例（９%）病人核ｐ５３聚集。他们发现 ,ｐ２７Ｋｉｐ１或ｐ５３的表达与肿瘤的组织学或大小无关 ,但 ｐ２７Ｋｉｐ１表达减少与预后呈显著相关。Ｋａｐｌａｎ Ｍｅｉ…     

肿瘤细胞p27kip1蛋白错位分布和低表达的分子机制

p27kip1(p27)蛋白是一种调控细胞周期并抑制细胞分裂的重要因子,p27是细胞周期依赖性激酶抑制因子(CDKI),参与细胞周期的负性调控,在细胞增殖、分化和凋亡等活动中扮演重要角色,p27被认为是人类多种肿瘤独立的预后因子和未来可能的肿瘤治疗靶点。在多种肿瘤细胞内存在p27蛋白低水平表达,p27蛋白的功能异常与多种肿瘤的发生密切相关。除了低丰度表达以外,在多种肿瘤细胞中p27蛋白主要分布在细胞核外,导致p27在肿瘤细胞内错位分布和低丰度表达的分子机制并不清楚。p27蛋白是一种功能广泛的细胞周期调节因子,除了可以和已知几乎所有的细胞周期素(cyclin)和细胞周期激酶(CDK)结合以外,还可以和包括CRM1、Nup50、Jab1和Skp2等在内的细胞核内外多种分子相互作用。推断p27发挥其抑制细胞增殖、促进细胞凋亡等生物学作用是受到以上多种相互作用的蛋白因子调控,这些因子在细胞周期不同的结合顺序和状态是发挥其广泛的生物学效应的分子基础,p27与适当的底物结合后,才能在适当的时间到达适当的细胞内位置并且发挥其生物学活性。因此认为,在肿瘤细胞p27存在和正常细胞不同的相互作用蛋白谱,并且由此决定了p27蛋白错位分布和低表达的可能机制,但是确切调控机制仍需进一步阐明。     

p27~(Kip1)在宫颈癌中的表达及其临床意义

[目的]研究子宫颈癌手术标本中p27Kip1 的表达在肿瘤预后判断中的临床意义。[方法]应用免疫组化SP法 ,检测宫颈癌手术标本中p27Kip1 的表达 ;[结果]p27Kip1 的表达与癌组织病理分期呈负相关 ,与肿瘤的预后呈正相关。[结论]子宫颈癌组织中 ,p27Kip1表达缺失的肿瘤组织恶性程度更高 ,并且直接影响肿瘤患者的术后生存期 ,是影响肿瘤预后的有效参考指标。检测癌组织中p27Kip1 的表达情况 ,有助于估计患者的预后 ,指导患者术后的综合治疗。     

p27Kip1与消化系肿瘤关系的研究进展

p27Kipl定位于染色体12p13,含2个外显p27-方面抑制CDK激活,另一方面尚可抑制激活后的cyclin-CDK的活性,p27不仅在细胞周期增殖调控中起关键作用。而且与细胞的分化发育及凋亡也有关系。p27蛋白缺失或低表达在消化系恶性肿瘤中是一个较为普遍的现象。且低表达预示不良结局。     

丁酸钠对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖及p27Kip1蛋白表达影响的研究

目的:通过观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histon-deacetylase inhibitors,HDACIs)丁酸钠(sodium butyrate,NaB)对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞的增殖影响以及p27Kip1蛋白表达改变,探讨NaB调控乳腺癌细胞增殖的分子机制.方法:乳腺癌MCF-7细胞经不同浓度NaB作用后,相差显微镜观察细胞形态变化和细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期分布,免疫组化检测p27Kip1蛋白表达.结果:NaB对MCF-7细胞有显著的增殖抑制作用,呈时间剂量依赖性,处理后的MCF-7细胞出现凋亡形态变化;细胞周期阻滞于G0/G1期,NaB 2 mmol/L组G0/G1期达(62.2±2.2)%,4 mmol/L组G0/G1期达(78.1±3.8)%,空白组G0/G1期达(53.1±2.4)%,P<0.05;p27蛋白表达水平上调.结论:NaB可抑制乳腺癌细胞的生长,该作用可能与p27蛋白表达增加有关.     

肝细胞癌组织中PTEN和p27Kip1及cyclinD1蛋白表达及临床意义

目的:研究肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中PTEN、p27Kip1和cyclinD1蛋白的表达及相互关系,初步探讨它们在肝细胞癌的发生发展中的生物学意义。方法:应用Elivision免疫纽化方法检测53例肝细胞癌组织及癌旁肝组织中PTEN、p27Kip1和cyclinD1蛋白表达。结果: 53例肝细胞癌组织中p27Kip1和cyclinD1蛋白表达的阳性率分别为65％和53％,均高于癌旁肝组织(x2=34．11,x2=29．05,P值均为0．000),肝细胞癌组织中PTEN蛋白表达的阳性率(57％)明显低于癌旁肝组织中的阳性率(96．2％)(x2=20．94, P=0．000),PTEN和cyclinD1蛋白表达与肿瘤大小、TNM分期和是否伴肝硬化无关;与组织分化程度、有无侵袭性呈显著相关(P值分别为0．014、0．003、0．026和0．042)。p27Kip1蛋白表达与肿瘤大小和是否伴肝硬化无关,与肝细胞癌组织分化程度、TNM分期和有无侵袭性呈显著相关(P值分别为0．000、0．008和0．001)。PTEN蛋白表达与p27Kip1和cyclinD1蛋白表达无相关性。结论: PTEN、p27Kip1和cyclinD蛋白在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用。PTEN、p27Kip1和cyclinD蛋白的联合检测对评估肝细胞癌的恶性程度有参考价值。     

p27kip1高表达乳腺癌细胞株MCF-7基因表达谱的差异分析

目的:利用基因芯片技术筛选p27kip1转染乳腺癌MCF-7细胞的差异表达基因,探讨p27kip1调控肿瘤细胞增殖和细胞周期的分子机制。方法:将含p27cDNA的质粒在脂质体介导下体外转染乳腺癌MCF-7细胞,利用Affy-metrix公司的人类基因组基因芯片U133A分别检测表达p27kip1蛋白和空载体的乳腺癌细胞株的基因表达谱,用生物信息学软件进行比较分析,对差异表达基因进行功能分类。结果:在含22277个基因cDNA的芯片上差异表达的基因有1379条,其中表达谱发生明显变化(2倍以上)的基因173条,占总检测基因的0·78%。157条基因表达明显上升(SLR>1),占总检测基因的0·705%;16条基因表达明显下降(SLR<-1),占总检测基因的0·072%。基因表达差异主要集中在物质代谢、细胞增殖、细胞周期调控、细胞分化与凋亡、免疫反应、信号传导、蛋白转运、调节转录等方面。结论:多基因共同参与了p27kip1抑制肿瘤细胞过度增殖以及促进细胞凋亡的作用。对于p27kip1相关基因群的研究有助于认识p27kip1蛋白在细胞周期调控乃至整个细胞癌变过程中作用的分子机制。     

p27Kip1、PLK1在食管鳞癌中表达的临床意义

目的:探讨p27Kip1(p27)、polo-like kinase1(PLK1)在食管鳞癌(ESCC)与其癌旁组织中的差异表达及其相关性,分析其基因表达差异与ESCC的临床病理特点及蛋白表达与预后的关系。方法:RT-PCR和免疫组化检测70对ESCC与其癌旁组织中p27、PLK1的mRNA和蛋白表达情况。结果:比较70对ESCC与其癌旁组织中p27及PLK1的相对表达,p27在46例(66%)癌组织中相对表达下降,24例(34%)癌组织中相对表达增高,比较有统计学差异(P＜0.01);而PLK1在63例(90%)癌组织中相对表达增高,7例(10%)癌组织中相对表达下降,比较有统计学差异(P＜0.01);且癌组织中PLK1及p27相对低表达与患者的病理进展、淋巴结的转移和临床分期相一致(P＜0.05);癌组织中PLK1伴p27胞浆表达阳性的患者与癌组织中PLK1伴p27胞核表达阳性的患者比较,术后生存期明显缩短(P＜0.01)。结论:p27与PLK1在ESCC组织中的差异性表达与患者的临床病理特点密切相关,癌组织中PLK1伴胞浆p27表达阳性的患者预后更差。     

Trastuzumab联合丁酸钠对人乳腺癌细胞株SKBR3细胞增殖和p27~（Kip1）表达的影响

目的：观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂（HDACIs）丁酸钠（NaB）及曲妥珠单抗Trastuzumab对人乳腺癌细胞株SKBR3细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨NaB及Trastuzumab调控乳腺癌细胞增殖的分子机制。方法：乳腺癌SKBR3细胞经NaB、Trastuzumab单独或联合作用后,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡,Western Blot方法检测p27Kip1的表达。结果：NaB单独用药显著抑制SKBR3细胞增殖,促进细胞G0/G1期阻滞,增加细胞凋亡和p27Kip1蛋白的表达,P〈0.05;20μg/mL Trastuzumab单独用药,对细胞有增殖抑制和细胞周期阻滞作用（P〈0.05）,但对细胞凋亡及p27Kip1蛋白表达无明显影响,P〉0.05。Trastuzumab可协助NaB增加对SKBR3的抗肿瘤作用及p27Kip1蛋白表达,P〈0.05。结论：Trastuzumab联合NaB抑制乳腺癌细胞的增殖,促进细胞周期阻滞及细胞凋亡的发生,以上过程可能是通过增加p27Kip1的蛋白表达来实现。     

Spy1和p27Kip1在宫颈癌中表达的相关性及其临床意义

目的:探讨细胞周期样蛋白Spy1与细胞周期调节蛋白p27Kip1在宫颈癌组织中表达的相关性及临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例宫颈鳞癌及50例同期宫颈癌旁组织中Spy1和p27Kip1蛋白表达,分析二者表达的相关性及其与宫颈癌病理分级、临床分期及预后的关系。结果:细胞周期样蛋白Spy1在宫颈癌组织中的阳性率显著高于癌旁组织,而细胞周期调节蛋白p27Kip1在宫颈癌组织中的阳性率低于癌旁组织（P<0.01）。Spy1和p27Kip1在宫颈癌组织及癌旁组织中的表达呈显著负相关（P<0.01)。Spy1在中低分化鳞癌、伴有淋巴结转移以及FIGO III+IV期中表达升高（P<0.05）,而p27Kip1的表达显著降低（P<0.05）。二者的阳性表达均与患者的年龄及肿瘤大小无关（P>0.05）。结论:Spy1在宫颈癌组织中的表达增加,与p27Kip1的表达呈负相关,并且与肿瘤的发生、发展、浸润和转移密切相关。Spy1高表达和p27Kip1低表达是宫颈癌细胞重要的恶性生物学特征,联合检测Spy1和p27Kip1表达情况可能作为判断肿瘤恶性程度、侵袭及预后的重要指标。     

乳腺癌组织中转化生长因子β1的表达及其介导乳腺癌侵袭和转移的机制

目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白和mRNA在乳腺痛组织中的表达,及其与明胶酶和明胶酶抑制物的关系.方法 建它组织芯片平台,应用免疫组化SP法检测160例乳腺痛组织TGF-β1、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)-1和TIMP-2蛋白的表达;应用原位分子杂交方法检测乳腺癌组织中TGF-β1 mRNA的表达.结果 160例乳腺癌TGF-β1、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2蛋白表达的阳性率分别为73.7%、96.9%、95.0%、87.5%和89.4%,TGF-β1 mRNA表达的阳性率为56.2%.TGF-β1的蛋白表达与腋窝淋巴结转移、TNM分期和c-erbB-2表达有关(P＜0.05,P＜0.05和P＜0.01),TGF-β1的mRNA表达与腋窝淋巴结转移有关(P＜0.05).TGF-β1蛋白表达阳性组中位总生存期(OS)为60个月,中位无复发生存期(RFS)为59个月;TGF-β1蛋白表达阴性组中位OS为61个月,中位RFS为61个月,两组生存率差异无统计学意义(P=0.090),无复发生存率有统计学意义(P=0.023).TGF-β1的蛋白表达与MMP-2和MMP-9的表达均呈正相关(r=0.170,P＜0.05;r=0.221,P＜0.01).结论 TGF-β1的表达与乳腺癌侵袭和转移密切相关,TGF-β1的蛋白产物通过调控MMP-2和MMP-9促进乳腺癌的侵袭和转移.     

滋养细胞疾病中p27蛋白表达的研究

目的 探讨周期素依赖激酶抑制剂ｐ２７蛋白在滋养细胞中的表达及其与滋养细胞疾病发生、发展和预后的关系。方法 采用免疫组织化学ＳＰ（ＬＳＡＢ）法检测３５例滋养细胞中ｐ２７蛋白的表达情况。结果 ｐ２７蛋白在１０例正常早孕绒毛和１５例良性葡萄胎中的表达阳性率明显高于１１例侵蚀性葡萄胎和９例绒毛膜癌（Ｐ〈０．０５）。正常早孕绒毛和良性葡萄胎ｐ２７蛋白表达阳性率分别为８０．０％（８／１０）和７３．３％（１１／     

乳腺癌中p27表达及其临床意义

真核细胞增殖过程中,细胞周期素和CDK复合物调控分裂周期的转变。p27基因定位于RP13,它的表达产物p27蛋白是细胞周期的负向调控因子,p27蛋白可以通过抑制细胞周期素依赖性蛋白激酶来抑制细胞周期,阻止肿瘤形成。     

乳腺癌中p21WAF1表达的临床意义

[目的]探讨乳腺癌中p21WAF1的表达与细胞增殖活性及预后的关系.[方法]采用免疫组化法检测p21WAF1在58例无淋巴结转移乳腺癌中的表达,采用流式细胞术分析DNA含量.[结果]乳腺癌p21WAF1的阳性率为43%,阳性反应产物见于瘤细胞核,p53阳性者p21WAF1阳性表达率(54%)高于p53阴性者(35%),p21WAF1的表达与S期细胞比例(SPF)和患者预后无关.[结论]乳腺癌中p21WAF1的表达不能作为判断肿瘤细胞增殖活性和患者预后的独立标志物.     

乳腺癌组织中PTEN和p27kip1蛋白的表达及其相互关系

目的:探讨PTEN和p27kip1在乳腺癌组织中的表达规律及其相互关系。方法:采用免疫组化SP法检测64例乳腺癌组织中PTEN和p27kip1蛋白的表达。结果:乳腺癌组织PTEN(34/64)和p27kip1(33/64)蛋白表达显著低于正常乳腺组织(15/15),P值分别为0·0082和0·0078。有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组PTEN表达分别为13/33、3/11和16/38,明显低于无腋淋巴结转移(21/31)、无远处转移(31/53)和ER阳性组(18/26),P值分别为0·0240、0·0063和0·03475。p27kip1在乳腺癌有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组的表达分别为7/33、2/11和8/38,明显低于无腋淋巴结转移(15/31)、无远处转移(20/53)和ER阳性组(14/26),P值分别为0·0230、0·0440和0·0071。两者表达均与肿瘤大小无关。两种蛋白表达水平具有显著的相关性,P=0·0041。结论:PTEN、p27kip1表达异常与乳腺癌转移及恶性程度密切相关,两种基因蛋白表达强度一致,显示其在乳腺癌演进中具有协同作用。