乙型肝炎患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的分子表达研究

目的:分析乙型肝炎患者外周血Tregs水平并探讨其在HBV感染者中发病机制的作用.方法:采用流式细胞术检测不同类型乙型肝炎患者及健康对照组外周血Tregs的水平及应用荧光定量PCR技术测定其血清中HBvDNA载量.结果:①慢性乙型肝炎组(CHB)Tregs表达率较急性乙型肝炎组(AHB)有明显差异(P＜0.05),与无症状携带者组及健康对照组则有显著差异(P均＜0.01);②AHB组较健康对照组的稍低,但无统计学意义(P>0.05),且明显低于CHB组(P＜0.01);③无症状携带者组与健康对照组相比无显著差异(P＞0.05).④CHB组外周血HBVDNA载量较其他三组明显偏低(P＜0.01);AHB组与无症状携带者组、健康对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05).⑤不同类型HBV感染患者外周血Tregs表达率与HBVDNA载量呈正相关.结论:①外周血Tregs表达的水平与乙肝患者病情轻重有一定关系,它在乙型肝炎持续感染中可能发挥了重要作用.②不同类型HBV感染患者外周血Tregs表达率与HBVDNA载量呈正相关.     

抗CCP抗体与RF联合检测对类风湿性关节炎RA的诊断应用

目的:探讨抗CCP抗体与RF联合检测对类风湿性关节炎RA诊断的临床意义.方法:对103例RA患者,55例其他疾病患者和50例健康对照组血清用ELISA法检测抗CCP抗体,速率散射比浊法检测RF,比较两种抗体单独和联合检测对诊断RA的敏感性,特异性,阳性预测值,阴性预测值.结果:抗CCP抗体对RA诊断有较高的特异性,优于RF,抗CCP抗体与RF联合检测的阳性率明显高于单项检测的阳性率(P＜0.01)结论:抗CCP抗体对RA有较高的诊断价值,和RF联合检测对诊断RA有重要意义.     

反复自然流产患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的检测

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)在反复自然流产发病机制中的作用。方法:应用流式细胞术检测29例原因不明的反复自然流产妇女(URSA组)和20例正常妊娠妇女(正常对照组)外周血中CD4+CD25+Tr的比例。结果:URSA组外周血中CD4+CD25brightTr百分率[(1.98±0.96)%]显著低于正常对照组[(3.21±1.25)%,P<0.05],而2组间CD4+CD25+总百分率、CD4+CD25dim细胞百分率以及CD4+CD25bright/CD4+比值均无显著性差异(P均>0.05)。结论:URSA的发生可能与患者CD4+CD25brightTr比例下降有关,CD4+CD25brightTr在母胎免疫耐受中发挥重要作用。     

CD4+CD25+调节性T细胞与免疫耐受的研究进展

CD4＋CD25＋调节性T细胞的主要功能是抑制自身反应性T细胞,对于维持机体T细胞内环境的稳定,调节和保持对自身抗原耐受之间的平衡以及移植免疫耐受具有重要作用。本文主要就CD4＋CD25＋调节性T细胞的功能和作用机制以及免疫抑制药物对其的影响等研究进展进行综述。     

CD4+CD25+调节性T细胞与免疫耐受的研究进展

CD4 CD25 调节性T细胞的主要功能是抑制自身反应性T细胞,其在维持机体T细胞内环境稳定,调节和保持对自身抗原耐受之间的平衡以及移植免疫耐受方面具有重要作用。本文主要就CD4 CD25 调节性T细胞的功能、作用机制以及免疫抑制药物对调节性T细胞的影响等研究进展进行综述。     

胃癌患者手术前后CD4+CD25+调节性T细胞的变化

目的 研究胃癌患者手术前、后调节性T细胞(Treg)及FoxP3表达的变化.方法 采用流式细胞术检测20例胃癌患者术前及其中15例接受了手术者术后1周(简称术后)以及15例因胃部不适接受胃镜检查的自愿者(正常对照组)外周血中Treg数量的变化,用RT-PCR法检测Treg的特异性分子标志物FoxP3的转录水平,同时用免疫组织化学法检测胃癌组织中FoxP3蛋白的表达情况.结果 胃癌患者术前外周血中CD4+T细胞中的CD4+ CD25+比例明显高于正常对照组[(19.39±5.58)%比(9.91±3.23)%,P＜0.01],而术后CD4+ CD25+比例较术前明显下降[(13.50±5.93)%比(19.39±5.58)%,P＜0.05].胃癌患者术前外周血中FoxP3转录水平明显高于正常对照组(0.86±0.03比0.64±0.02,P＜0.01),而术后较术前明显下降(0.73±0.04比0.86±0.03,P＜0.05),提示FoxP3转录水平与Treg变化一致.胃癌患者外周血中CD4+T细胞在单个核细胞中的比例与正常对照组相比明显下降(P＜0.01),而手术前、后变化不明显.20例胃癌患者中13例胃癌癌细胞的细胞浆中有不同程度的FoxP3蛋白表达(强阳性2例,中阳性6例,弱阳性5例),7例胃癌患者的胃癌细胞中不表达.结论 Treg可能通过免疫抑制作用在胃癌的发生、发展中发挥作用,肿瘤组织本身可能是引起Treg变化的重要始动因素.     

CD4+CD25+调节性T细胞与移植免疫耐受

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是一类具有特殊免疫调节功能的T细胞亚群,它所介导的免疫抑制在移植免疫耐受的诱导和维持中起关键作用。本文对近年来CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的作用机制及免疫耐受等方面的研究进行了综述。     

肝癌患者外周血CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及其意义

目的 探讨应用流式细胞术检测肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞的变化及意义.方法 应用三色免疫荧光流式细胞仪测定37例肝癌患者及30例肝硬化患者外周血T细胞亚群CD4~+CD25~+/CD~+比值.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测外周血中转化生长因子β1(TGF-B1)的表达水平.结果 肝癌患者外周血CD4~+CD25~+/CD4~+比值较肝硬化患者显著增高,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+T细胞水平与肝癌原发肿瘤的大小、TGF-βl呈正相关(P<0.05).结论 肝癌患者外周血中CD4~+CD25~+调节性T细胞增多,对肝癌患者具有免疫抑制作用.     

动脉粥样硬化患者外周血CD4 T 细胞及CD4+CD25highCD127- 调节性T 细胞的变化

目的：探讨动脉粥样硬化（AS）患者外周血CD4 T细胞及调节性T细胞（CD4+CD25highCD127- Treg）比例及功能的变化。 方法：选择AS患者（AS组）及健康体检者（健康对照组）各40例,抽取外周静脉血,用流式细胞术测定CD4 T细胞、CD8 T细胞、IFN-γ+ CD4 T细胞、IFN-α+ CD4 T细胞和CD4+CD25highCD127- Treg细胞比例,以及各自的CD4+CD25highCD127- Treg细胞与CD4 T细胞共培养后,CD4 T细胞增殖能力以及CD4 T细胞分泌炎症因子能力的变化。 结果：与健康对照组比较,AS组外周血CD4 T细胞比例及CD4 T/CD8 T比值明显升高、IFN-γ+ CD4 T及IFN-α+ CD4 T细胞比例明显升高（均P<0.05）,而CD8 T细胞比例与CD4+CD25highCD127- Treg细胞比例差异无统计学意义（均P>0.05）。健康对照组CD4 T细胞的增殖能力、IFN-γ及IFN-α分泌能力在与CD4+CD25highCD127- Treg细胞共培养后较其单独培养均明显降低（均P<0.05）,而AS组CD4 T细胞的以上指标在与CD4+CD25highCD127- Treg细胞共培与单独培养间差异均无统计学意义（均P>0.05）。 结论：AS患者外周血CD4+CD25highCD127- Treg细胞功能的丧失,导致外周血CD4 T细胞比例升高、分泌炎症因子能力增强,从而引发AS的炎症状态。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞与肿瘤免疫的研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)是一类具有免疫调节功能的T细胞亚群,可通过直接接触和细胞因子依赖等方式下调机体免疫反应,维持自身免疫耐受。近年来,Treg细胞已成为自身免疫、肿瘤免疫及移植免疫等领域的研究热点。本文就该类细胞的研究现状及其在肿瘤治疗方面的作用进行简要综述。     

兔肺VX2肿瘤手术切除模型中外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化和意义

目的 观察外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平在兔肺VX2肿瘤手术切除模型中的变化.方法 将30只纯种新西兰白兔随机分成3组.A组:建立兔肺VX2肿瘤手术切除模型;B组:建立兔肺VX2肿瘤模型,不进行肿瘤切除术;C组:不建立兔肺VX2肿瘤模型,仅行兔肺叶切除术.3组实验兔在相同的时间点抽取外周血,经流式细胞仪分析测定外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平.结果 兔在种植肿瘤后外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平增高(P＜0.01);手术切除兔肺VX2肿瘤后15 d和30 d,实验兔外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平较术前下降(P＜0.05),而不进行肿瘤切除的实验兔外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平持续增高(P＜O.05).结论 外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平升高可能与肿瘤的发生发展相关;手术切除肿瘤可减少肿瘤负荷,有利于机体抗肿瘤免疫功能的恢复.

Abstract：

Objective To analyze the change of CD4+ CD25 + regulatory T cells in peripheral blood in rabbit' s lung VX2 tumor resection model. Methods Thirty New Zealand rabbits were divided into 3 groups: group A, 10 rabbits with lung VX2 tumor receiving lobectomy; group B, 10 rabbits with lung VX2 tumor receiving no operation; group C, 10 rabbits without lung VX2 tumor receiving lobectomy only.The peripheral blood of rabbits was drawn. All the samples were analyzed by flow cytometry (FCM). Results The proportion of the CD4 + CD25 + regulatory T cells in peripheral blood of the rabbits was increased after the implantion of VX2 tumor ( P ＜ 0. 01 ), that in the rabbits with VX2 lung tumor receiving tumorectomy was obviously decreased at the 15th and 30th day after the operation (P ＜ 0. 05 ), but that in the rabbits with VX2 lung tumor receiving no operation did not have the same change ( P ＜ 0. 05 ). Conclusion The increase of the proportion of CD4 + CD25 + regulatory T cells in peripheral blood is related to immunosuppression. The functional disorder of immune system recovers in a certain extent after resection of the tumor.     

肝癌病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节性T淋巴细胞表达水平的临床研究

目的 了解CD4+CD25+FOXP3+T调节性T细胞在肝癌病人外周血中的表达水平并探讨其临床意义.方法 应用流式细胞术测定18例肝癌病人外周血CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞占CD4+T淋巴细胞百分比,并与26例l临床对照者和24例健康对照者进行比较.结果 肝癌病人外周血中CD4+CD25+T细胞占CD4+T细胞百分比(4.25%±3.98%)明显高于临床对照组(1.34%±1.14%)及健康对照组(1.29%±0.95%)(P＜0.01),而两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌病人外周血所占CD4+T细胞比率(2.94%±0.91%)也较临床对照组(0.76%±0.34%)及健康对照组(0.81%±0.29%)显著升高(P＜0.001),且升高幅度强于CD4+CD25+T细胞水平,两个对照组之间并无显著性差异(P＞0.05).结论 CD4+CD25+FOXP3+T细胞是更为准确的调节性T细胞,其在肝癌病人外周血中表达水平明显升高,检测CD4+CD25+FOXP3+T水平对肝癌的预防治疗具有重要临床意义.     

信号转导和转录激活因子5在小鼠CD4+CD25+调节性T细胞中的表达

目的:观察信号转导和转录激活因子5(STAT5)在小鼠CD4+CD25+调节性T细胞中的表达情况.方法:免疫磁珠法分离C57BL/6J小鼠脾脏中的CD4+CD25+调节性T细胞,共聚焦荧光法检测细胞内STAT5的分布并进行初步定位,进一步采用Western blot技术从蛋白水平检测细胞内STAT5的表达.结果:激光共...     

调节性CD4~+CD25~+T细胞的分离纯化及免疫功能研究

目的 制备调节性CD~+ CD25~+T细胞(Treg)分析其免疫功能,诱导局部免疫耐受防治同种异体复合组织移植(CTA)排斥反应.方法 采用免疫磁珠法(MACS)从雄性大鼠脾脏细胞分离CD4~+CD25~+Treg(1×10~6),2%锥虫蓝染色检测活性、流式细胞术分析其纯度,在5 mg/L抗CD3的刺激下观察其反应性、增殖及其与200 U/ml细胞介素(IL)-2的关系.结果 从8只雄性大鼠脾脏分选出的CD4~+CD25~+Treg活性平均为(97.90±0.36)%及纯度为(96.05±0.41)%,CD3刺激呈低反应,按比例培养抑制率为89%,IL-2可使CD4~+CD25~-抑制逆转.结论 MACS能快速分选出较高纯度的CD4~+CD25~+Treg,并且活性良好在体外具有免疫无能及免疫抑制作用,能满足动物CTA排斥反应研究的需要.     

关节置换患者外周血调节T细胞水平变化及其临床意义

目的探讨调节性T细胞(Treg)与关节置换假体植入的关系及临床意义。方法 2009年1月至2009年6月将人工髋关节置换手术患者及同期无假体植入的关节镜手术患者分为两组,用流式细胞仪检测术前及术后3 d外周血Treg水平并进行统计学分析。结果关节置换组术前外周血中Treg的水平为(2.99±1.33),术后为(4.66±1.96),两者比较差异有统计学意义(P0.01);非假体植入组术前为(3.36±1.61),术后为(3.47±1.83),两者比较差异无统计学意义(P0.05);术后关节置换组与非假体植入组对比,两组间Treg水平的差异有统计学意义(P0.01)。结论假体植入体内可使患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞水平显著升高,提示关节置换假体感染引起的免疫反应与单纯组织感染时的免疫反应不同,T细胞能否成为假体感染的病情进展及疗效评估的指标有待进一步研究。     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞水平的检测及意义

目的：探讨乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Treg）水平检测的意义。 方法：流式细胞术检测74例乳腺癌患者与30例健康对照者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞百分比,分析CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与乳腺癌患者临床病理特征及相关免疫组化指标的关系。 结果：乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg占CD4+T细胞的百分比高于健康对照者[（9.15± 2.24）% vs.（2.29±1.36）%],差异有统计学意义（P<0.05）。统计分析显示,乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与肿瘤组织学分级、淋巴结转移、pTNM分期以及HER-2、pS2、nm23的表达有关（均P<0.05）,而与肿瘤大小、病理类型以及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、p53、Ki-67表达无关（均P>0.05）。进一步相关性分析显示,CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平与肿瘤组织学分级、淋巴结转移数、pTNM分期、HER-2的表达呈正相关（r=0.583,r=0.333,r=0.919,r=0.604,均P<0.05）而与pS2、nm23表达呈负相关（r=-0.229,r=-0.401,均P<0.05）。 结论：乳腺癌患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平升高,并与与乳腺癌的进展、转移密切相关,对其检测可能有助于患者预后及治疗效果的评估。

     

血栓闭塞性脉管炎与调节性T细胞的关系

【摘要】〓目的〓探讨CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)与血栓闭塞性脉管炎(TAO)的关系。方法〓收集35例TAO患者,以35例动脉硬化性闭塞症(ASO)患者作为阳性对照组,35例健康人作为阴性对照组。采用流式细胞术检测外周血Treg及其转化生长因子β1(TGF-β1)及白介素10(IL-10)百分含量;采用ELISA法检测胞浆型抗中性粒细胞胞浆抗体(CANCA)和核周型抗中性粒细胞胞浆抗体(PANCA),并分析其相关性。结果〓与正常对照组比较,TAO组患者Treg及TGF-β1均显著升高(P<0.05),而ASO组患者Treg及TGF-β1则显著低于正常对照组,三组间Treg及TGF-β1两两差异具有统计学意义(P<0.05)。与Treg及TGF-β1不同,TAO及ASO组患者IL-10组间无统计学差异,且均显著低于正常对照组(P<0.0)。与正常对照组比较,TAO及ASO组患者CANCA及PANCA均呈不同程度升高,且TAO患者CANCA及PANCA均显著高于正常对照组,而ASO组患者与正常对照组之间并无统计学差异(P<0.05)。Pearson相关性分析显示Treg、TGF-β1及IL-10三者任意一者均与CANCA及PANCA呈显著正相关性(P<0.05)。结论〓Treg及TGF-β1升高可能参与TAO的发病机制。     

CD4+CD25+ regulatory T cells mediate acquired transplant tolerance

The Holy Grail of clinical organ transplantation is the safe induction of allograft tolerance. Transplant tolerance has been successfully induced in animal models. Since T cells play a pivotal role in graft rejection, modulating T cell function has been the primary focus of studies aimed at inducing transplant tolerance. Rodent models of transplant tolerance induction include central deletion and peripheral mechanisms involving activation-induced cell death (AICD), anergy, immune deviation, and production of regulatory T cells. These mechanisms are not mutually exclusive. Although clonal deletion and anergy limit self-reactive T cells in the thymus, these mechanisms alone are not sufficient for controlling self-reactive T cells in the periphery. There is now evidence that the adult animal harbors two functionally distinct populations of CD4(+) T cells; one mediates autoimmune disease and the other dominantly inhibits it. The latter cells express CD4, CD25 and CTLA-4. These thymus-derived T cells have recently been shown to mediate the induction and maintenance of transplant tolerance. These CD4(+)CD25(+) T cells are similar in origin, phenotype, and function to those that maintain natural self-tolerance and T cell homeostasis in the periphery. Against this background, is it possible that alloantigen specific regulatory T cells might be generated and expanded ex vivo before organ transplantation and then infused to induce long-term tolerance, perhaps without the need for chronic immunosuppression?     

抗CCP、RF检测中国人群类风湿性关节炎诊断试验Meta分析

目的 采用诊断试验Meta分析综合评价抗环瓜氨酸肽抗体(CCP)和血清学指标类风湿因子(RF)筛查类风湿性关节炎(RA)的效果.方法 通过检索万方、维普、CNKI等数据库,获得有关抗CCP和RF诊断筛查RA的文献,提取相关数据;采用DPS6.5进行诊断试验Meta分析.结果 抗CCP的综合准确度为0.831,诊断优势比为24.154;RF的综合准确度为0.765,诊断优势比为10.540;抗CCP的诊断准确度高于RF(P＜0.01).结论 抗CCP诊断RA能获得较好的特异度,而RF诊断RA能获得较好的灵敏度;若能联合抗CCP和RF,对RA具有较高的诊断价值.     

大肠癌患者外周血调节性T细胞的检测及临床意义

目的观察大肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T（Treg）细胞数量的变化，探讨其与肿瘤临床病理特征的关系。方法应用流式细胞仪分析大肠癌患者和健康对照组外周血单个核细胞的Treg细胞数目，比较Treg细胞百分比变化与大肠癌临床病理特征的相关性。结果结直肠癌患者Treg细胞占CD4^＋T细胞百分比（15±8）％，与健康对照组（6．0±3．5）比较，差异有统计学意义（P〈0．01）；CEA正常的结直肠癌患者Treg细胞占CD4^＋T细胞百分比（13±4）％，与CEA升高的结直肠癌患者Treg细胞（17±10）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；Duke＇s C和D期的结直肠癌患者Treg细胞占CD4^＋T细胞百分比（19±6）％，与A期和B期Treg细胞百分比（12±5）％比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结直肠癌患者外周血TGF-131含量（1．2±0．4）ng／L，与Treg细胞数目呈正相关（r=0．253，P〈0．05）。结论Treg细胞在大肠癌患者中比例升高，可能是产生肿瘤免疫抑制的重要机制，Treg细胞增加可作为大肠癌患者肿瘤进展的重要标志。