"针灸血清"对乳腺癌MCF-7细胞凋亡及细胞周期的影响

目的观察针灸对乳腺癌细胞凋亡及细胞周期的影响。方法针灸刺激雌性Wistar大鼠双侧足三里、三阴交、内关穴,抽取大鼠“针灸血清”分别与MCF-7细胞混合培养,分为电针组、艾灸组和对照组。MTT法检测细胞生长情况,72h后流式细胞技术检测细胞凋亡率及Fas表达率。结果MCF-7细胞Fas表达率明显增高,72h达57.70%;MCF-7细胞生长受到明显抑制,12h、24h、72h抑制率分别达17.55%、24.71%和31.85%;作用72h后的细胞凋亡率分别为1.07%、8.72%、10.18%,与艾灸组相近,均明显高于对照组(P<0.05)。结论“针灸血清”作用于MCF-7细胞可能通过增加Fas的表达率来诱导细胞凋亡。     

异硫氰酸苯乙酯诱导胆管癌细胞凋亡和细胞周期阻滞的实验研究

目的:探讨异硫氰酸苯乙酯(PEITC)对人胆管癌QBC-939细胞凋亡和细胞周期的影响。方法:PEITC处理QBC-939细胞后,采用MTT法检测细胞活力;运用流式细胞技术检测细胞凋亡率;Hoechst33342染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞的形态;使用流式细胞技术检测细胞周期。设置对照组:加入和药物等体积的DMSO。结果:20、30、40、50μmol/L的PEITC作用于QBC-939细胞24 h后,细胞活力分别为(88.07±2.40)%、(68.02±4.04)%、(52.57±1.91)%、(36.37±3.42)%,较对照组明显降低(P<0.05);30μmol/L的PEITC处理QBC-939细胞12、18、24、48 h后,细胞活力分别为(90.74±2.96)%、(78.22%±4.85)%、(69.67±4.58)%、(40.48±2.59)%,较对照组明显降低(P<0.05)。QBC-939细胞经30μmol/L和50μmol/L的PEITC作用处理24 h后,细胞凋亡率分别为(30.51±2.77)%、(58.62±3.75)%,较对照组显著升高(P<0.05);G2/M期的细胞比例从(5.06±1.86)%上升到(16.96±2.71)%、(26.68±1.85)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PEITC可通过诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞而发挥抗胆管癌作用,并具有时间-剂量依赖性。     

姜黄素诱导雄激素非依赖性前列腺癌PC3细胞周期阻滞和凋亡研究

目的观察姜黄素对雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3细胞的生长抑制作用。方法10～100μmol姜黄素作用PC3细胞5～24h后,溴化二甲噻唑二苯四氮唑(MTT)比色法检测细胞生长活性,流式细胞仪检测细胞周期时相及细胞凋亡变化,透射电镜观察细胞超微结构变化,Western印迹法检测细胞内IκBα的表达。结果姜黄素能显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞株PC3细胞的体外生长(P<0.05),呈时间与剂量依赖性;姜黄素将PC3细胞周期阻滞于G2/M期;不同浓度姜黄素诱导PC3细胞凋亡率分别为(6.33±0.88)%、(7.53±2.32)%、(12.74±3.02)%、(18.09±2.51)%与(27.54±2.63)%(P<0.05);细胞内IκBα的表达随姜黄素剂量的增加而逐步升高(P<0.05)。结论姜黄素通过抑制PC3细胞增殖、诱导细胞凋亡等机制,显著抑制雄激素非依赖性前列腺癌细胞的体外生长。     

维生素K3诱导乳腺癌细胞凋亡作用及调控因素的观察

目的：观察维生素K3（VitK3）对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡诱导作用,探讨其可能机制.方法：采用噻唑蓝比色实验（MTT法）检测不同浓度VitK3对MCF-7细胞增殖的影响,观察过氧化氢酶（Catalase）对VitK3作用的影响;采用流式细胞技术（FCM）检测细胞的凋亡;应用RT-PCR检测VitK3作用前后核转录因子RelA、凋亡相关基因Bcl-2、Bax和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物p21 CIP1/WAF1、p27KIP1 mRNA表达的变化.结果：（1）VitK3对MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用,Catalase能降低VitK3的生长抑制作用;（2）VitK3能够诱导MCF-7细胞发生凋亡并随浓度的增加而增强;（3）VitK3作用后,Rcla、Bax、p21 CIP1/WAF1在mRNA水平表达增强.结论：VitK3能够诱导MCF-7细胞发生调亡,细胞周期停滞和Bax表达增加是其可能的作用机制.     

凋亡素基因诱导乳腺癌细胞株凋亡的体内外实验研究

目的构建凋亡素基因(vp3)重组真核表达质粒(pcDvp3),观察vp3基因在人乳腺癌细胞435中的表达及诱导凋亡作用,探讨其诱导肿瘤细胞凋亡的作用机制。方法(1)克隆vp3基因并与pcDNA3.1质粒连接构建pcDvp3重组真核表达载体,测序鉴定;(2)用脂质体将pcDvp3和pcDNA3.1转染人乳腺癌细胞435,48h后分别用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测肿瘤细胞的凋亡;(3)建立人乳腺癌细胞435的裸鼠模型,分组给药后测定抑瘤率,并用原位凋亡(TUNEL法)检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果(1)核酸序列分析表明已构建成重组质粒pcDvp3;(2)pcDvp3转染肿瘤细胞48h后,电镜下可见明显形态改变及凋亡小体形成;琼脂糖凝胶电泳出现典型梯形条带;流式细胞仪检测出现凋亡峰,其凋亡百分率高达14.42%;(3)裸鼠实验可见pcDvp3组抑瘤率分别为65.52%和68.23%,明显高于pcDNA3.1组(t=4.06,P<0.01),TUNEL检测可见pcDvp3组肿瘤细胞凋亡。结论vp3基因在体内外均能够有效地诱导人乳腺癌435细胞凋亡。     

维生素E琥珀酸酯诱导MCF 7乳腺癌细胞的凋亡

目的检测维生素E琥珀酸酯（VES）对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，并分析凋亡诱导分子Fas表达的变化。方法人乳腺癌细胞株MCF-7[雌激素受体阳性，ER（＋）]以VES刺激12，24h和48h，VES浓度为5μg／mL，10μg／mL和20μg／mL，用MTT法测定VES对细胞增殖的抑制作用；以流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面Fas的表达；Western蛋白印迹法检测VES作用后Fas蛋白水平的变化。结果VES对MCF-7乳腺癌细胞具有显著的抑制作用，并表现为时间和剂量依赖关系。MCF-7乳腺癌细胞的自然凋亡率为1．2％；5μg／mL，10μg／mL和20μg／mL的VES作用48h后凋亡率分别升高至11．2％，16．4％和41．2％。VES作用后乳腺癌细胞Fas蛋白水平和细胞表面Fas表达升高。结论VES对ER（＋）乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用，并诱导细胞凋亡，其机制与细胞表面Fas表达上调有关。     

丹参酮ⅡA诱导瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡及细胞周期阻滞的实验研究

目的观察丹参酮ⅡA对人瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法体外培养人瘢痕疙瘩成纤维细胞,予含有不同浓度丹参酮ⅡA的培养液(分别为0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL)进行干预。不同时间点以CCK-8检测细胞增殖活力,流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期的变化。结果不同浓度丹参酮ⅡA干预和不同时间干预,对瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖活性、早期凋亡率、细胞周期G0/G1期比例的影响,均具有统计学意义(P<0.001),其中200μg/mL组干预效果最明显。结论丹参酮ⅡA具有抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖,诱导凋亡并阻滞细胞周期的作用,且干预效果存在浓度依耐性及时间依耐性。     

瘦素对三苯氧胺诱导的乳腺癌MCF-7细胞的凋亡抑制作用及相关机制

目的 探讨瘦素在体外对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡抑制作用及其抑制MCF-7细胞凋亡的相关机制.方法 将MCF-7细胞接种于48孔板中.分组处理48 h后,ELISA测定不同浓度瘦素对不同浓度三苯氧胺引起的MCF-7细胞凋亡.实时荧光定量PCR方法检测各组细胞中Survivin、BCL-2、BAX的mRNA的相对表达水平改变.结果 103 ng/mL和104 ng/mL瘦素可以有效抑制TAM诱导的MCF-7细胞凋亡.104 ng/mL明显上调了乳腺癌MCF-7内Survivin mRNA的表达,而BCL-2、BAX mRNA改变无统计学意义.结论 瘦素可以有效抑制TAM诱导的MCF-7细胞凋亡,其机制可能与瘦素上调Survivin mRNA的表达有关.     

Bcl 2和Caspase 3调控他莫昔芬诱导的ER阴性乳腺癌细胞凋亡

目的研究Bcl-2和Caspase-3在他莫昔芬（TAM）诱导ER阴性乳腺癌细胞凋亡中的调控作用。方法在体外培养条件下，用浓度为10μmol／L的TAM作用于雌激素受体（ER）阴性的MDA-MB-231人乳腺癌细胞株12，24，36，48，60h；流式细胞仪检测细胞凋亡率及Bcl-2和Bax的蛋白表达，荧光分光光度仪检测Caspase-3活性，以及加入Caspase-3活性抑制剂Ac—DEVD—CHO后凋亡百分率的变化。结果TAM作用ER阴性乳腺癌细胞后，Bcl-2表达下调，Caspase-3活性增强，细胞凋亡率增加．且有时间依赖性，细胞凋亡在48h达高峰。Bcl-2表达水平与Caspase-3活性变化成负相关（r=-0．921，P〈0．05），但Bax蛋白在药物处理前后无明显变化。加入Ac—DEVD—CHO后，能阻断Caspase-3活化而抑制TAM诱导细胞凋亡。结论TAM通过下调Bcl-2表达而经线粒体途径诱导ER阴性乳腺癌细胞凋亡，Caspase-3的激活在此过程中发挥重要作用。     

鲑鱼降钙素对人乳腺癌细胞生长作用的实验研究

目的：观察鲑鱼降钙素（sCT)在体外对人乳腺癌细胞生长的影响。方法：体外培养人乳遥癌细胞系MCF－7，细胞计数法观察sCT对细胞生长的影响，透射电镜和DNA电泳法观察凋亡，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率。结果：sCT实验组乳腺癌细胞的数量较对照组减少（P＜0．05），透射电镜观察到凋亡小体，DNA电泳出现梯状条带，细胞凋亡率由3．72％升高至23．37％，G2期细胞比例由0．88％升高至4．13％，结论：sCT体外能抑制人乳腺癌细胞生长，诱导乳腺癌细胞凋亡和调节细胞周期。     

过表达核心蛋白聚糖基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响

目的 观察过表达核心蛋白聚糖(DCN)基因对胆管癌细胞周期及凋亡的影响.方法 脂质体介导真核表达质粒pEGFP-DCN和空载体pEGFP-N1转入人胆管癌细胞株QBC939,Westernblot检测DCN蛋白的表达,实时定量反转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测DCN mRNA的表达,克隆形成实验计算克隆形成率,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,流式细胞术检测细胞周期及凋亡.结果 RT-qPCR示过表达DCN相对空载体上调32.34倍;Western blot结果示过表达组DCN上调2.00倍.pEGFP-DCN转染组细胞克隆形成数[(210.9±19.3)个]显著低于空质粒转染组[(608.7±56.3)个],差异有统计学意义(P＜0.05).转染pEGFP-DCN细胞与空载体比较,细胞增殖能力显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞周期检测显示,胆管癌细胞转染pEGFP-DCN后G1～ Go期细胞比例明显升高,而G2～S期细胞减少,细胞周期被阻滞在G1～Go期,凋亡分析转染pEGFP-DCN的QBC939细胞较转染空载体细胞凋亡显著增加,半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3明显增高,而B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的表达水平明显降低(0.787±0.068比1.276±0.157).结论 转染DCN能够显著抑制胆管癌细胞的增殖,明显促进胆管癌细胞凋亡,而DCN促进胆管细胞凋亡与上调Caspase-3和下调bcl-2蛋白相关.     

9-硝基喜树碱及其脂质体对HepG2、L02细胞周期和凋亡作用的研究

目的 研究9-硝基喜树碱及其脂质体对人肝癌细胞株HepG2和人正常肝细胞L02细胞周期、凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 HepG2、L02细胞用含不同浓度9-硝基喜树碱及其脂质体的培养液孵育后,利用MTT法测定细胞活性,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡,WesternBlot验证周期相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达变化.结果 9-硝基喜树碱及其脂质体对两种细胞生长呈时间和剂量依赖性抑制.药物处理后S期和G2/M期细胞明显增多,浓度大于0.1 μmol/L时24 h后HepG2细胞完全阻滞于S期;0.1 μmol/L孵育72 h后,超过95%HepG2细胞阻滞于G2/M期.药物对细胞凋亡的诱导作用也呈明显的剂量和时间依赖关系.Western Blot显示:Bax、Caspase3表达增高,Cyclin A、Cdk2、Cyclin E、Bcl-2表达减低.与L02相比,HepG2细胞对药物更加敏感.结论 9-硝基喜树碱及其脂质体可以通过调控细胞周期和诱导凋亡有效抑制细胞生长,其对肿瘤细胞的抑制作用强于正常肝细胞.9-硝基喜树碱脂质体体外抗肿瘤效果略强于9-硝基喜树碱单体.

Abstract：

Objective To investigate the modulating effects and explore their mechanism of 9-nitrocamptothecin and its liposomes to induce apoptosis and inhibit cell cycle in HepG2 and L02 cell lines. Methods Cells were incubated with 9-nitrocamptothecin(9NC) or with 9-nitrocamptothecin liposomes for 24 h, 48 h and 72 h, then, the cell viability was measured via MTT assay; cell cycle and apoptosis was evaluated by flow cytometry after stained by PI and Annexin V-PE/7AAD. Additional, Western Blot was used to evaluate the expression of cell cycle and apoptosis related protein. Results Both cells viability were apparently inhibited by the 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes, the inhibitory effect showed a time-dependent and dose-dependent manner. Both S and G2/M phases arrest were observed after incubated with drugs. HepG2 cell was completely arrested in S phase when 9NC concentration over than 0. 1 μmol/L after incubation for 24 h, while more than 95% cells arrested in G2/M phase when 9NC concentration is 0. 1 μmol/L after incubation for 72 h. Apoptosis induction effect also showed a time-dependent and dose-dependent manner. Western Blot results showed the expression of Bax and Caspase-3 were upregulated while Cyclin A, Cdk2, Cyclin E and Bcl-2 were downregulated. More importantly, the compounds were more cytotoxic to the cancer cell lines than to the normal liver cell. Conclusions 9-nitrocamptothecin and 9-nitrocamptothecin liposomes can potently inhibit cell growth via regulation of cell cycle and induction of apoptosis, and this effect was preferentially in cancer cell. Inhibitory of 9-nitrocamptothecin liposomes was slightly better than the 9-nitrocamptothecin.     

YAP 基因干扰对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的：探讨干扰YAP基因的表达对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响。 方法：通过逆转录病毒介导的方法,分别用YAP shRNA（实验组）或阴性对照shRNA（对照组）转染MCF-7乳腺癌细胞,用qRT-PCR和Western blot方法检测干扰效率;溴脱氧核苷尿嘧啶（BrdU）结合实验和MTT法检测细胞增殖活性;流式细胞术和DAPI染色检测细胞凋亡情况。 结果：干扰效率检测显示,转染72 h后,实验组MCF-7细胞YAP mRNA表达量明显降低（P<0.05）,同时YAP蛋白表达也明显下调;细胞增殖检测显示,与对照组比较,实验组MCF-7细胞BrdU结合与OD值明显降低（P<0.05）,转染后24、48、72 h增殖抑制率分别为19.1%、38.5%、53.5%;凋亡检测显示,实验组细胞凋亡率与凋亡细胞数较对照组明显增加（均P<0.05）。 结论：干扰YAP基因的表达能有效抑制乳腺癌细胞的增殖并促进凋亡,YAP可能是乳腺癌潜在治疗靶点。     

异氟醚对PC12细胞株细胞周期与凋亡的影响

目的 探讨异氟醚对PC12细胞株细胞周期与凋亡的影响.方法 经神经生长因子孵育7d的神经元样PC12细胞,培养于25 cm2培养瓶,采用随机数字表法,将其随机分为2组(n=6):对照组(C组)和异氟醚组(Ⅰ组).C组正常培养,Ⅰ组用1.2％异氟醚处理12 h.采用倒置相差光学显微镜观察细胞形态;收集细胞,采用流式细胞术测定细胞凋亡率、细胞周期、线粒体膜电位(MMP)及胞浆钙离子浓度([Ca2+]i).结果 与C组比较,Ⅰ组G0/G1期细胞比例减少,S期和G2/M期细胞比例增加,细胞凋亡率增加,MMP降低,[Ca2+];增加(P＜0.05).Ⅰ组细胞形态发生损伤变化.结论 1.2％异氟醚处理神经元样PC12细胞12 h,可异常启动细胞周期,致细胞发生凋亡.     

Apr-1基因对胆管癌细胞QBC939细胞周期的调节机制研究

目的 研究Apr-1基因对胆管癌细胞的细胞周期调节作用及机制.方法 采用脂质体介导法将Apr-1基因转染胆管癌细胞系QBC939,建立稳定表达Apr-1基因的细胞模型(QBC939-Apr-1).运用RT-PCR检测转染前后QBC939细胞系中Apr-1 mRNA的表达;流式细胞分析以及生长曲线等方法观察目的 基因对该细胞系的细胞周期的影响.采用细胞周期基因芯片,观察Apr-1基因对细胞周期相关基因表达的调节作用.结果 Apr-1基因在QBC939细胞系中呈阴性表达,转染Apr-1基因的QBC939-Apr-1细胞出现了Apr-1 mRNA的表达,成功建立了稳定表达Apr-1基因的细胞模型,该细胞模型表现出细胞生长受抑,细胞周期显示G2期细胞由9%增加至13%(P＜0.01).细胞周期抑制;并且细胞周期基因芯片检测结果发现:Skp2、UBE基因的表达水平出现明显上调,而CDC6、Cyclin H等25种基因的表达下降,其中MRE11A、CKS2、CDK8、CDC45下调在3倍以上.结论 Apr-1基因在体外能够使QBC939细胞的细胞周期在G2期延长,出现细胞周期多种调节基因的表达差异.

Abstract：

Objective To investigate the role and the mechanism of Apr-1 gene on cholangiocarcinoma QBC939 cell lines proliferation and cell cycle regulation. Methods Apr-1 gene was transfected into QBC939 cells by using liposomes to establish a QBC939 cell model ( QBC939-Apr-1 ) stably expressing Apr-1 gene. Apr-1 mRNA expression and the changes in cell cycle and cell growth of QBC939 cells were analyzed by RT-PCR, flow cytometry ( FCM ) and growth curve before and after transfection. The regulatory effect of Apr-1 gene on the expression of cell cycle-related genes was investigated in QBC939 cells before and after Apr-1 transfection using cell cycle gene microarrays. Results Significant suppression of cell growth was observed with the cell model stably expressing Apr-1 gene. Apr-1 over-expression caused cell arrest from 9% to 13% (P ＜0. 01 ) increase in G2 population. Cell cycle gene microarrays demonstrated that the expression of Skp2 、UBE1 was up-regulated, while the expression of MRE11A 、CKS2 、CDK8 、CDC45 was down-regulated by more than 3 folds. Conclusions Apr-1 gene suppresses QBC939 cell proliferation in vitro, QBC939 cells presented with differences in the expression of cell cycle-related genes after Apr-1 gene transfection.     

茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH的抑制增殖及诱导凋亡作用

目的 观察茉莉素对人神经母细胞瘤细胞株SK-N-SH的抑制增殖及诱导凋亡作用,并比较茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用强度差异.方法 1～10mmol/L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸分别处理SK-N-SH细胞后,MTT法检测细胞生长活性;克隆形成实验检测细胞增殖能力;PI单染法流式细胞术检测细胞周期;AO/EB荧光染色法、Hoechst 33258荧光染色法、AnnexinⅤ-FITC/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡.结果 各浓度茉莉素作用后,SK-N-SH细胞呈时间、浓度依赖性生长抑制,其中茉莉酸甲酯作用最强,1～10mmol/L茉莉酸甲酯作用24 h后,细胞生长抑制率为(22.74～88.67)%,IC50为1.44mmol/L;2.5mmol/L茉莉酸甲酯、顺式茉莉酮、茉莉酸作用后,细胞克隆形成能力分别降低87.00%、78.66%、39.00%,细胞周期示S期细胞比率显著增高,G0/G1期细胞比率下降,部分细胞发生典型的凋亡形态学改变;1.5～2.5mmol/L茉莉酸甲酯作用后,细胞凋亡率为(23.77～36.43)%.结论 茉莉素能通过减弱瘤细胞增殖、诱导细胞周期阻滞和凋亡等机制抑制人神经母细胞瘤细胞株的生长活性.     

MK2206 inhibits hepatocellular carcinoma cellular proliferation via induction of apoptosis and cell cycle arrest

Background

Hepatocellular carcinoma (HCC) is commonly diagnosed at an advanced stage and has limited effective treatment options. The aberrant regulation of the phosphoinositide 3-kinase/Akt pathway in HCC makes it an attractive therapeutic target. The effect of MK2206, a novel, allosteric Akt inhibitor, on HCC cells is not yet fully understood. We hypothesized that inhibition of Akt by MK2206 would impact cellular viability.

Materials and methods

Human Huh7, Hep3B, and HepG2 cell lines were treated with 0–2 μM of MK2206 for 96 h. Cell viability was determined by using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay. Western blot analysis was used to examine the expression level of various protein markers to assess the mechanism of drug action and proliferation inhibition.

Results

3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay showed a reduction in cellular viability by ≥55% for all cell lines (control versus 2 μM MK2206; P <0.001). Western blot analysis revealed reduction in the level of phosphorylated AKT-Ser473 with no change in AKT-thr308 expression confirming the specificity of MK2206. There was an observed reduction in caspase-9 and survivin. Importantly, there were increases in p21 and p27 along with decreased cyclinD1 expression after treatment.

Conclusions

This study demonstrates the anti-tumor activity of MK2206 in HCC cells. The observed reduction in survivin and pro-caspase 9 suggests that MK2206 induces apoptosis. However, HCC proliferation is also halted via induction of cell cycle arrest as indicated by the increase in p21 and p27 expression and decrease in cyclinD1. Importantly, the concentration needed to achieve growth inhibition in HCC is lower than that needed for other cancer types.     

肿瘤抑制基因DBC2抑制乳腺癌MDA-MB-435S细胞增殖并诱导凋亡

目的 观察肿瘤抑癌基因DBC2(deletion in breast cancer 2)的过表达在乳腺癌MDA-MB-435S细胞中的功能.方法 野生型DBC2基因的真核表达载体pEBG-DBC2瞬时转染MDA-MB-435S细胞72 h,噻唑蓝(MTT)比色法绘制DBC2转染前后MDA-MB-435S细胞生长曲线;流式细胞术检测DBC2的瞬时过表达对MDA-MB-435S细胞周期的影响,TUNEL方法 原位检测DBC2的过表达诱导MDA-MB-435S细胞凋亡.结果 DBC2基因在MDA-MB-435S细胞中的过表达可显著抑制该细胞的增殖,同时DBC2基因的过表达可诱导该乳腺癌细胞周期的G_1期阻滞(64.05%比71.72%)和细胞凋亡(0.09%比5.29%).TUNEL实验证实DBC2诱导MDA-MB-435S细胞凋亡的百分比为8%.结论 DBC2基因体外抑制乳腺癌细胞生长的功能,可能通过细胞周期G_1期停滞,以及诱导细胞凋亡等机制实现.