转染IKK2dn的受者树突状细胞回输延长同种异体肾移植大鼠的存活时间

目的 探讨IKK2dn基因转染并负载供者抗原的受者未成熟树突状细胞(imDC)延长同种异体肾移植大鼠的存活时间及其机制.方法 获取和培养Lewis大鼠骨髓源性DC,转染IKK2dn并负载BN大鼠可溶性抗原进行体外实验,检测CD86和主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ的表达及DC刺激T淋巴细胞增殖的能力.肾移植受者为Lewis大鼠,用随即数字表法分DC组、空转染组、转染组、对照组,术前7d分别输注1×10~7个D、Adv-0-DC、负载BN抗原的Adv-IKK2dn-DC和等量生理盐水,供者均为BN大鼠.另设第三方供者组,术前处理同转染组,供者为Wistar大鼠.移植后检测各组受者T淋巴细胞的增殖能力及血清白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ)的表达水平,观察各组大鼠的存活时间和发生排斥反应情况.结果 DC的体外实验结果显示:与转染IKK2dn前相比,转染后DC仍能低水平表达CD86和MHC Ⅱ,负载供者抗原后CD86和MHCⅡ表达均增加,而转染IKK2dn后再负载供者抗原,CD86和MHC Ⅱ的表达未发生明显变化;DC负载供者抗原后,刺激T淋巴细胞增殖的能力明显增强(P<0.05),而转染IKK2dn并负载供者抗原后不能有效刺激T淋巴细胞增殖.肾移植术后的检测结果显示:转染组T淋巴细胞的增殖能力明显低于其他4组(P<0.05或P相似文献   

小鼠CD4+CD25+T调节细胞的分离、纯化及其功能检测

目的 探讨小鼠CD4+CD25+T调节细胞(Treg)的分离培养、纯化及其部分功能检测.方法 采用免疫磁珠分离法(MACS)对分离小鼠的脾淋巴细胞进行分选CD4+CD25+Treg细胞,锥虫蓝细胞染色检测其活性,流式细胞仪检测分选所得活性细胞的纯度,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清液中白细胞介素(IL)-2、IL-10水平的浓度.结果 MACS分离的CD4+CD25+Treg细胞的纯度达83%～96%.体外培养中Treg组、T组和混合组IL-2和IL-10的平均水平分别为:(10.25±2.31)、(40.32±8.05)ng/L;(5 8.21±13.05)、(11.52±3.01)ng/L;(39.54±12.82)、(31.25±4.36)ng/L,数据差异有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).结论 采用MACS系统两步法,可获得高纯度、具有免疫抑制功能的Treg细胞,该细胞对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用可能是通过IL-10对IL-2的调节作用实现的.     

CD4+CD45RClowTreg在大鼠肝移植免疫耐受中的调节作用研究

目的 探讨CD4+CD45RClow调节性T细胞(Treg)在肝移植免疫耐受诱导中的作用.方法 建立急性排斥反应(AR)[Lewis→Brown Norway(BN),AR组]与自发耐受(BN→Lewis,耐受组)大鼠肝移植模型,每组6只.并设立假手术组(对照组),Lewis大鼠和BN大鼠各3只.对各组大鼠肝组织进行病...     

调节性CD4~+CD25~+T细胞的分离纯化及免疫功能研究

目的 制备调节性CD~+ CD25~+T细胞(Treg)分析其免疫功能,诱导局部免疫耐受防治同种异体复合组织移植(CTA)排斥反应.方法 采用免疫磁珠法(MACS)从雄性大鼠脾脏细胞分离CD4~+CD25~+Treg(1×10~6),2%锥虫蓝染色检测活性、流式细胞术分析其纯度,在5 mg/L抗CD3的刺激下观察其反应性、增殖及其与200 U/ml细胞介素(IL)-2的关系.结果 从8只雄性大鼠脾脏分选出的CD4~+CD25~+Treg活性平均为(97.90±0.36)%及纯度为(96.05±0.41)%,CD3刺激呈低反应,按比例培养抑制率为89%,IL-2可使CD4~+CD25~-抑制逆转.结论 MACS能快速分选出较高纯度的CD4~+CD25~+Treg,并且活性良好在体外具有免疫无能及免疫抑制作用,能满足动物CTA排斥反应研究的需要.     

免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞

目的探索利用磁性细胞分离(MACS)系统高效、快速地分离大鼠脾脏CD4+CD25+调节性T细胞.方法采用免疫磁珠两步法分离大鼠脾脏内的CD4+CD25+调节性T细胞, 首先采用"鸡尾酒"抗体和抗IgG磁珠阴性分选CD4+ T细胞,再用抗CD25-PE抗体和抗PE磁珠阳性分选获得CD4+CD25+T 细胞.分离后的细胞经流式细胞仪检测分离纯度; 台盼蓝染色检测细胞存活率; 体外增殖实验检测其对CD4+CD25-T细胞的免疫抑制作用.结果阴性分选获得的CD4+T细胞纯度为(83.6±2.5)%(79%～87%), 阳性分选后获得的CD4+CD25+T细胞纯度为(90.2±1.8)%(86%～93%), 细胞存活率为(92.8±3.4)%(92%～95%), 体外增殖实验表明,CD4+CD25+T细胞能明显抑制CD4+CD25-T 细胞的增殖(P＜0.01). 结论采用MACS系统阴性加阳性分选可以高效、快速地获得理想纯度和有免疫抑制功能的大鼠CD4+CD25+调节性T细胞.     

CD4+CD25+Treg细胞对肿瘤特异性CTL杀伤效果的影响

目的 探讨CD4+CD25+Treg细胞对肿瘤特异性细胞毒T细胞(CTL)杀伤效果的影响及机制.方法 将C57BL/6小鼠80只随机分为4组,每组20只.A组:树突状细胞(DC)与T细胞共同培养前删除CD4+CD25+Treg;B组:DC与T细胞共同培养后删除CD4+CD25+Treg;C组:DC与T细胞共同培养时不删除CD4+CD25+Treg;对照组:无DC诱导的T细胞.应用脾脏来源DC细胞诱导T细胞制备CTL,在CTL形成的不同时期采用MACS法删除CD4+CD25+Treg.应用噻唑蓝(MTY)比色法检测不同组别CTL对B16黑色素瘤细胞的杀伤效果.同时应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养液中白细胞介素(IL)-2、干扰素(IFN)-γ含量变化.结果 3组实验组CTL杀伤率明显高于对照组(P<0.05).删除CD4+CD25+Treg的A组、B组CTL杀伤率明显高于未删除的C组(P<0.05).但CTL形成的不同时期删除CD4+CD25+Treg对CTL杀伤率的影响无统计学意义(P>0.05).IL-2、IFN-γ含量变化与杀伤率呈现相同的变化趋势.结论 删除CD4+CD25+Treg细胞可明显提高CTL的杀伤效果,是消除肿瘤免疫耐受机制的新途径.     

高迁移率族蛋白B1对小鼠调节性T细胞与CD4+CD25-T细胞相互作用的影响

目的 观察高迁移率族蛋白B1(HMGB1)对调节性T细胞(Treg)与CD4+CD25-T细胞相互作用的影响,并初步探讨其影响Treg抑制功能的机制.方法 免疫磁珠法分离正常BALB/c小鼠脾脏CD4+CD25+Treg及CD4+CD25-T细胞.采用固相包被抗CD3/可溶性抗CD28进行辅助活化,以不同时间及浓度HMGB1刺激Treg,ELISA法分析HMGB1刺激对Treg分泌IL-10的影响.将HMGB1(1000μg/L)刺激后的Treg与CD4+CD25-T细胞共培养,MTT法观察其对Treg抑制CD4+CD25-T细胞反应的作用,并分析HMGB1刺激后的Treg对CD4+CD25-T细胞IL-2生成及细胞功能极化的影响.结果 经抗CD3/CD28辅助活化的CD4+CD25+Treg在HMGB1作用下IL-2生成无显著差异(P＞0.05),但随时间延长及剂量增加,IL-10生成明显减少(P＜0.05).经HMGB1刺激的Treg对CD4+CD25-T细胞增殖的抑制反应减弱,同时诱导CD4+CD25-T细胞IL-2产生及细胞功能极化的能力均下降(P＜0.05).结论 HMGB1可通过诱导Treg抑制功能的下调,从而影响CD4+CD25-T细胞功能,进而调节炎症反应过程.     

腺病毒载体转染人未成熟树突状细胞对其成熟特性的影响

目的观察重组腺病毒载体AdEASY-增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转染人未成熟树突状细胞(imDC)后,其表型特征及免疫学功能的变化,并探讨白细胞介素(IL)10对腺病毒转染诱导imDC成熟的抑制作用。方法贴壁法分离人脐带血来源的单核细胞,利用重组粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4诱导分化imDC。对照组为常规培养的imDC,转染组用AdEASY-EGFP转染imDC,IL-10组用IL-10处理转染后细胞。流式细胞仪检测细胞表面成熟标志[CD86、CD83和人类白细胞DR抗原(HLA-DR)],混合淋巴细胞反应(MLR)检测其刺激同种异体未致敏T淋巴细胞的增殖能力。结果腺病毒转染imDC后,转染组细胞成熟表型表达率分别为CD86:46±10、CD83: 38±7、HLA-DR:82±10,均较对照组(10±7、8±3、68±8)显著上调,且刺激T淋巴细胞增殖的能力显著加强(SI>2．0)。IL-10组处理的imDC上述表型表达率分别为CD86:8±5、CD83:9±3、HLA-DR: 63±12,与对照组比较差异无统计学意义(P>0．05),其刺激T淋巴细胞增殖的能力也明显下降。结论腺病毒能有效转染imDC,但在转染后有促进其成熟的趋势;用IL-10能有效抑制该成熟状态。     

CD4+CD25+调节性T细胞对同种胰岛移植免疫耐受的影响

目的 观察体外分离的CD4+CD25+调节性T细胞对同种胰岛移植免疫耐受的影响.方法 免疫磁珠法分离CD4+CD25+调节性T细胞,体外试验观察其对CD4+CD25-T细胞增殖的影响.将数量达1×106的CD4+CD25+调节性T细胞回输胰岛移植受体,对比其对移植物存活的影响.结果 分离的CD4+CD25+调节性T细胞体外试验可明显抑制CD4+CD25-T细胞的增殖.单纯胰岛移植组移植物物存活期为(5.57±0.79)d,回输受体CD4+CD25+调节性T细胞数量1×106、2×106时,胰岛移植物存活时间分别为(15.29±2.29)d和(25.43±2.30)d(P《0.01).CD4+CD25+调节性T细胞回输胰岛移植受体可显著延长移植物存活期,诱导免疫耐受的作用为剂量依赖性.结论 CD+CD25+调节性T细胞体外、体内试验可抑制效应性T细胞功能,诱导胰岛移植免疫耐受.     

CD4+CD25-T淋巴细胞转化为CD4-CD8-调节T细胞的体外实验研究

目的 探讨体外诱导和纯化CD4+ CD25-T淋巴细胞(effector T cell,Teff)转化为CD4-CD8-双阴性调节T细胞(double negative regulatory T cell,DN Treg)的最适条件.方法 采用免疫磁珠分选方法提取C57BL/6小鼠的CD4+ CD25-T淋巴细胞、DBA/2小鼠的成熟树突状细胞共培养,加入不同剂量的IL-2,通过流式细胞检测CD4-CD8-T细胞的转化比例并确定最适条件,免疫磁珠阴性选择分选提纯转化的CD3+ CI4-CD8-T细胞,流式细胞仪检测转化的CD4-CD8-调节T细胞对CD4+ CD25-效应T细胞增殖抑制情况.结果 CD4+ CD25-T淋巴细胞与DBA/2小鼠的树突状细胞共培养6d后检测CD4-CD8-调节T细胞的转化比率为6.21％ ±2.03％,实验组加入不同浓度IL-2的转化率:A组(25 ng/ml)为14.77％±2.15％,B组(50 ng/ml)为21.29％±2.68％,C组(75 ng/ml)为43.45％ ±4.45％,D组(100 ng/ml)为28.59％±3.05％,IL-2浓度在75 ng/ml时,转化获得率最高(C组与对照组、实验A、B、D组比较分别t=10.700,8.288,6.158,3.932,均P＜0.05);分离提纯CD4-CD8-双阴性调节细胞纯度达到98.10％,CD4-CD8-双阴性调节细胞与CFSE染色的CD4+ CD25-T淋巴细胞、小鼠树突状细胞共培养6d,实验组增殖指数为1.15明显低于对照组2.07.结论 小鼠CD4+ CW25-T淋巴细胞在体外,成熟树突状细胞刺激下可转化为CD4-CD8-双阴性调节T细胞,IL-2可显著提高其转化率.     

DNT细胞在肿瘤中的作用

近年来,通过细胞免疫治疗肿瘤的方法可以使肿瘤患者的愈后及生存质量得到很大提高和改善,细胞免疫治疗成为研究的热点.免疫细胞可以通过免疫调节或直接杀伤作用于肿瘤细胞.DNT细胞(CD4CD8 double-negative T cells)是新近发现的一类细胞表面既不表达CD4分子同时也不表达CD8分子的T细胞群.本文主要介绍DNT细胞的两个亚群中的双阴性调节T细胞(DN Tregs)在肿瘤中作用的进展情况.     

慢性乙型肝炎患者外周血调节性T细胞对树突状细胞功能的抑制作用

目的研究慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）对树突状细胞（DCs）免疫功能的抑制作用,探讨治疗CHB的新方法。方法采用密度梯度离心法获得CHB患者和健康对照组（NC组）外周血单个核细胞（PBMC）;部分PBMC体外诱导培养获得DCs,部分PBMCs用特异性免疫磁珠分选获得CD4＋CD25＋Treg和CD4＋CD25-T细胞;不同来源的DCs和正常对照组CD4＋CD25-T细胞混合为反应细胞,将不同来源和不同比例的Treg分别加入到反应细胞中培养3 d,MTT法检测Treg抑制DCs的抑制指数（SI）,并在培养DCs的不同时间加入Treg,应用流式细胞术检测DCs表面共刺激分子CD80和HLA-DR的表达。结果来源于CHB患者及NC组的Treg均可抑制DCs的免疫作用,来源于CHB患者Treg抑制DCs能力显著高于NC,差异具有统计学意义（P ＜0.01）。不同比例的Treg均可抑制DCs的免疫功能,随着Treg比例的增高抑制作用也越明显,抑制指数亦越高。在DCs培养的不同时间加入相同比例的Treg,发现Treg对DCs表面分子CD80、HLA-DR的表达均有抑制作用,与对照组相比,差异具有统计学意义（P＜0.01）,同时发现加入Treg的时间越早,DCs表面分子表达降低越明显。结论 CHB患者Treg可显著抑制DCs免疫功能且呈时间和量的依赖,抑制DCs表面分子CD80和HLA-DR表达,可能是Treg抑制DC免疫功能的机制之一。     

CD4+CD25+ regulatory T cells mediate acquired transplant tolerance

The Holy Grail of clinical organ transplantation is the safe induction of allograft tolerance. Transplant tolerance has been successfully induced in animal models. Since T cells play a pivotal role in graft rejection, modulating T cell function has been the primary focus of studies aimed at inducing transplant tolerance. Rodent models of transplant tolerance induction include central deletion and peripheral mechanisms involving activation-induced cell death (AICD), anergy, immune deviation, and production of regulatory T cells. These mechanisms are not mutually exclusive. Although clonal deletion and anergy limit self-reactive T cells in the thymus, these mechanisms alone are not sufficient for controlling self-reactive T cells in the periphery. There is now evidence that the adult animal harbors two functionally distinct populations of CD4(+) T cells; one mediates autoimmune disease and the other dominantly inhibits it. The latter cells express CD4, CD25 and CTLA-4. These thymus-derived T cells have recently been shown to mediate the induction and maintenance of transplant tolerance. These CD4(+)CD25(+) T cells are similar in origin, phenotype, and function to those that maintain natural self-tolerance and T cell homeostasis in the periphery. Against this background, is it possible that alloantigen specific regulatory T cells might be generated and expanded ex vivo before organ transplantation and then infused to induce long-term tolerance, perhaps without the need for chronic immunosuppression?     

CD4+CD25+调节性T细胞/辅助性T细胞17在脓毒症大鼠中的作用

目的 观察CD4+ CD25+调节T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)细胞在脓毒症大鼠炎性免疫反应中的作用.方法 110只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脓毒症(CLP)组,采用改良的盲肠结扎穿孔术(CLP)制作大鼠脓毒症模型.采用流式细胞术检测CD14+单核细胞表面人类白细胞抗原-DR基因(HLA-DR)表达率、Treg细胞及TH17细胞比例;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、转化生长因子(TGF)-β、白细胞介素(IL)-17炎性因子蛋白表达.结果 与假手术组比较:(1)伴随着脓毒症病情的发展,大鼠出现明显的免疫抑制,CD14+单核细胞HLA-DR表达率＜30％,IL-10/TNF-α比值(27.41 ±7.04比6.63 ±2.60)明显增高(P＜0.01).(2)术后96 h脓毒症大鼠Treg细胞[(11.91±3.88)％比(6.57±2.60)％,P＜0.01]和Th17细胞[(5.14±0.29)％比(2.85±0.07)％,P＜0.01]表达明显增高.(3)术后96 h脓毒症组前炎性细胞因子IL-6[(42.31±15.89) ng/L比(6.32 ±3.18) ng/L,P＜0.01]、IL-10[(69.89 ±20.78) ng/L比(13.58±5.37) ng/L,P＜0.01]、TNF-α[(5.03±3.10) ng/L比(2.77±1.10) ng/L,P＜0.01]、TGF-β[(4.99±2.01) ng/L比(1.88±1.07) ng/L,P＜0.01]、IL-17[(92.77±11.64) ng/L比(7.58±2.30) ng/L,P＜0.01]表达明显增高.结论 伴随着脓毒症病情的发展,大鼠出现明显的免疫抑制;在大鼠脓毒症的发生发展中,Treg细胞介导的免疫抑制及Th17细胞介导免疫激活反应同时存在;脓毒症细胞因子微环境变化可能是导致Treg细胞/Th17细胞失衡的原因之一.     

Both CD45RA+ and CD45RO+ human CD4+ T cells drive direct xenogeneic T‐cell responses against porcine aortic endothelial cells

Kim CH, Oh K, Kim D‐E, Lee SB, Yang JH, Lee G, Cho J, Lee D‐S. Both CD45RA⁺ and CD45RO⁺ human CD4⁺ T cells drive direct xenogeneic T‐cell responses against porcine aortic endothelial cells. Xenotransplantation 2010; 17: 224–232. © 2010 John Wiley & Sons A/S. Abstract: Background: Xenogeneic cellular immune responses are mediated by either direct or indirect pathways depending on the participation of donor or host antigen presenting cells, respectively. The contribution of direct response of human T cells, especially memory T cells, to porcine antigen presenting cells is currently unknown. Here, we sought to determine whether human peripheral blood memory/activated phenotype T cells are directly responsive to porcine endothelial cells. Methods: Porcine aortic endothelial cells (PAECs) were prepared from Yorkshire or miniature pigs. Highly purified human T cells, including naïve and memory/activated phenotype cells, were incubated with PAECs with or without the addition of exogenous cytokines. T‐cell proliferation and T‐cell receptor (TCR) Vβ usage in response to PAECs were analyzed. Results: Both CD8⁺ and CD4⁺ T cells responded directly to PAECs and exhibited exclusive responsiveness to SLA class I and class II molecules, respectively. Naïve and memory/activated phenotype CD4⁺ T cells responded against PAECs, whereas only naïve phenotype CD8⁺ T cells contributed to such a response. In addition, both populations of xenogeneic human CD4⁺ T cells exhibited similar and diverse Vβ usage. Conclusion: Due to the considerable contribution of human CD45RO⁺CD4⁺ T cells to the xenoreactivity against PAECs, effective control of xenogeneic memory/activated T‐cell responses would significantly affect long‐term survival of transplanted grafts.     

Alloreactive natural killer cells promote haploidentical hematopoietic stem cell transplantation by expansion of recipient‐derived CD4+CD25+ regulatory T cells

Alloreactive NK cells (Allo‐NKs) have been shown to exert advantageous effects on the outcomes of haploidentical hematopoietic stem cell transplantation (Haplo‐HSCT) for cancer treatment. However, the mechanisms of action of Allo‐NKs remain unclear. We established a novel Haplo‐HSCT conditioning regimen composed of Allo‐NKs and a low dose of immunosuppressive drugs (Allo‐NKs + Chemo) to investigate alternative mechanisms besides direct cytotoxicity. The inhibitory effects of different cell subsets on the donor–recipient mixed lymphocyte reactions (MLRs) were evaluated after Haplo‐HSCT. The quantities and functions of CD4⁺CD25⁺ regulatory T cells (Tregs) and dendritic cells (DCs) in the spleen and the thymus were examined. Our results showed that the Allo‐NKs + Chemo regimen induced systemic tolerance, and that CD4⁺CD25⁺ Tregs played a significant role in inducing and maintaining systemic tolerance after Haplo‐HSCT. Alloreactive NK cells promoted the expansion of recipient‐derived CD4⁺CD25⁺CD127^? Tregs in the thymus and the spleen which could be amplified in vitro by the immature donor‐derived DC subset isolated from the thymus of Allo‐NKs + Chemo‐treated mice. Our findings suggested that Allo‐NKs are capable of inducing systemic tolerance after Haplo‐HSCT by assembling donor‐derived immature DCs to expand recipient‐derived Treg cells in the thymus.     

大黄素对大鼠肝移植后CD4~+CD25~+调节性T细胞的影响

目的研究大黄素对大鼠肝移植后CD4+CD25+调节性T细胞的比例以及对其免疫抑制功能的影响。方法双袖套法建立大鼠原位肝移植模型,以大黄素和环孢素A(CsA)分别在术后腹腔给药,并以给予PBS作为模型对照组,观察不同药物移植后大鼠存活时间的影响,以及对移植术后大鼠外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(Tregulatory cells,Treg)亚群的变化以及免疫功能的影响。结果大黄素能显著延长大鼠原位肝移植的术后成活时间,大黄素组大鼠的平均存活时间(17.4±2.5)d与肝移植模型对照组(8.8±1.9)d相比差异具有统计学意义;大鼠肝移植后大黄素给药可显著上调受体大鼠外周血以及肝内CD4+CD25+Treg的比例,并显著增强CD4+CD25+Treg抑制效应性T细胞的增殖能力(P0.05)。结论大黄素能够延长大鼠原位肝移植的术后成活时间,并可能通过上调外周血以及肝内CD4+CD25+Treg的数量及免疫抑制功能来实现移植后免疫排斥反应的抑制。     

肝癌、肝硬化组织中CD3、CD57、CD20细胞数量与临床病理表现及预后的关系

目的探讨CD3、CD57、CD20细胞在原发性肝细胞癌(HCC)、癌旁、肝硬化及正常肝组织中的数量及意义.方法HCC 60例,单纯性肝硬化62例,正常肝组织23例,以免疫组化SP法进行CD3、CD57、CD20染色,对阳性细胞数进行定量分析并与临床资料进行相关探讨.结果(1)各组CD3+细胞平均数从高到低为癌旁组织、癌组织、肝硬化组织、正常肝组织(P＜0.05);各组CD57+细胞平均数从高到低为癌组织、癌旁组织、正常肝组织、肝硬化组织(P ＜0.05);各组CD20+细胞平均数从高到低为癌组织、癌旁组织、肝硬化组织、正常肝组织(P ＜0.01).(2)HCC中CD3+细胞、CD57+细胞、CD20+细胞与组织学分级均无明显关系.(3)HCC中CD57+细胞和CD20+细胞随着临床分期的发展有下降的趋势(P ＜0.05);HCC中CD3+细胞平均数与临床TNM分期无关.(4)HCC中15月内有转移组的CD57+、CD3+细胞数均少于无转移组(P＜0.01).HCC患者15月内有无转移与HCC和癌旁组织中的B细胞分布均无关.结论临床上,随着HCC患者的病情恶化,CD3+、CD57+、CD20+细胞逐渐减少.CD3+、CD57+、CD20+细胞可成为反映机体抗肿瘤特异性细胞免疫状态和生物学行为及判断患者预后的重要指标.